"NUGC-2 Cell:人低分化胃癌腺癌细胞系
细胞形态:上皮细胞样
细胞生长:贴壁
细胞背景资料:详见相关文献介绍
JVM2细胞系相关产品:YES-2细胞、MES-SA/Dx-5细胞、SKHEP1细胞
C42细胞系相关产品:LUDLU-1细胞、1E8-H细胞、PLA 802细胞
MV4II细胞系相关产品:Asian Medical Center-Head and Neck cancer-8细胞、KYSE520细胞、HFLS-RA细胞
SUM 52PE细胞系相关产品:OKa-C-1细胞、HT 1376细胞、NCI-H2198细胞
细胞物种来源:人源或鼠源等其它物种来源
NUGC-2 Cell:人低分化胃癌腺癌细胞系
细胞消化过程总结:其实绝大部分细胞消化的时候是只要用胰酶润洗一遍即可,吸去胰酶后,残留的那些无法计算体积的附着在细胞表面的微量胰酶在37度一般不到2min足够消化细胞(绝大部分1min不到)。对于这些细胞原则上不要用胰酶孵育细胞,连续这样传代,对细胞伤害很大。简单的程序是PBS润洗吸去,胰酶润洗吸去,然后37度消化。2,什么算是消化好了呢?不是细胞全部成间隔分布很离散的单个圆形才算消化好了,一般你肉眼观察贴壁细胞层,只要能移动了,多半呈沙壮移动,其实已经可以了,很多人喜欢把细胞消化或者吹打成完全分离细胞,这是没有必要的。一般能移动了,说明细胞与培养基质材料的附着已经消失了,细胞之间的附着也已经消失了,细胞已经独立分布了(虽然没有呈现很广的离散分布)。这个时候应该停止消化,不要等到看到镜下所有细胞都分离得非常好,间隙很大,才停止。细胞就是完全成单个细胞悬液,之后在贴壁的过程中仍然会聚集,这个是贴壁培养的细胞,尤其是肿瘤细胞的一个特性,无论死活的细胞都是如此,你可以尝试,准备100%的单个细胞悬液,贴壁后观察细胞,仍然是几个几个细胞聚集在一起。一些悬浮培养细胞也是如此,容易聚集,不要去尝试过几个小时就拿出来吹打成单细胞悬液(不要笑,这个是初养悬浮细胞的人常犯的错误,以为悬浮培养就是一个一个分开)。细胞只要能从基质上脱离下来,这个时候即使是成片的(比如Calu-3细胞),吹打不超过20次后(一般10次即可),成小规模聚集(10个细胞左右),是正常的,不要试图再去延长消化时间,或者像有的同学那样吹打1h,等待单细胞悬液出现。比较难消化的细胞(润洗方法5min还不能消化),比如HCT15, LS411和KM12,这样的细胞一般需要用少量胰酶孵育,但也不需要很多,一般100mm dish,一次最多加入500ul,就足够了,一般我加300ul。即使这样难消化的细胞,一般不超过5min,即可见细胞成片移动,就应该停止消化。一些正常细胞也会有难消化的时候,比如tsDC细胞,但也只要用少量胰酶孵育,3min左右即可看到成片沙状移动。
细胞产品包装:复苏形式:T25培养瓶(一瓶)或冻存形式:1ml冻存管(两支)
细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。
常见细胞培养中一些问题总结:1)培养基中血清的比例多少合适?血清是细胞培养上一个极为重要的营养来源,所以血清的含量多少会对细胞的生长会产生极大的影响。血清的含量一般为5%-15%,不要低于5%或高过20%,因为含量过低会导致细胞营养不足,过高则会破坏渗透压平衡。一般建议血清含量为10%,可以适量加减;2)何时须更换培养基?视细胞生长密度而定,或遵照细胞株基本数据上的更换时间,按时更换培养基即可。还可以参照指示剂的颜色变化进行更换;3)购买的复苏细胞,为何会有脱落?因为运输的过程中不可避免的会有震荡,收到后可以离心收集;4)购买的细胞冷冻管经解冻后,为何会发生细胞数目太少之情形?研究人员在冷冻细胞之培养时出现细胞数目太少,大都是因为离心过程操作上的失误,造成细胞的物理性损伤,以及细胞流失。建议细胞解冻后不要立刻离心,应待细胞生长隔夜后再更换培养基即可;5)购买的细胞死亡或细胞存活率不佳可能原因?研究人员在细胞培养时出现存活率不佳,常见原因可归纳为:培养基使用错误或培养基品质不佳。血清使用错误或血清的品质不佳。解冻过程错误。冷冻细胞解冻后,加以洗涤细胞和离心。悬浮细胞误认为死细胞。培养温度使用错误。细胞置于–80°C太久;6)收到的冷冻管瓶身破裂,瓶盖有裂纹,或瓶盖脱落之原因?冷冻管瓶盖裂纹,或瓶身破裂,可能是因为操作者夹取冷冻管时用力不当,造成冷冻管裂损,建议使用止血钳小心夹取。另冷冻管瓶盖松动或松脱,乃因热胀冷缩之物理现象,冷冻管有可能因此而造成细胞污染,故冷冻管于放入和取出液氮桶时,均应立刻将冷冻管再一次扭紧。
细胞来源说明:细胞主要来源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少数国外著名大学建系
NCIH2141细胞系相关产品:Large Cell Lung Cancer-103H细胞、BJAB-1细胞、MESSA-DX5细胞
BC-025细胞系相关产品:Ramos G6.C10细胞、Human Microglia Clone 3细胞、NCI-H748细胞
LS411N细胞系相关产品:H-510细胞、GM2219C细胞、MC-CAR细胞
NALM-6-M1细胞系相关产品:HCC-15细胞、KRCY细胞、LAD 2细胞
OVCAR 8细胞系相关产品:CCRF-CEM/S细胞、Ball 1细胞、JIMT细胞
细胞生长特性:贴壁或悬浮,详见细胞说明书部分
NUGC-2 Cell:人低分化胃癌腺癌细胞系
正确的细胞复苏需知事项:细胞冻存好了,接下来要注意什么问题呢?没错,就是记得到时间了,拿出来复苏。那么,细胞复苏的过程中又有哪些该注意的事项呢?细胞活力和形态检查的作用何在?活力检查——千万不要使用不健康的细胞,可能有污染(真菌、支原体等),如果发现有污染毫不犹豫的丢弃!形态检查——检查细胞的固有形态和生长行为。冻存细胞:补充新的培养液——在您开始冻存细胞的前一天补充新的培养液。在细胞长至70%单层时收获细胞,计数活细胞数,用冻存液调整细胞密度~5 x106 Cell s/ml (根据不同的细胞类型调整);冻存液——用冻存液洗细胞并用冻存液重悬细胞,有不同类型的冻存液,根据细胞类型选择最合适的冻存液(常用的冻存液成分有):5-10% DMSO——注意确保DMSO不含有其他的毒性物质;5-15%甘油;如果细胞在无血清培养基内生长,应在50%条件培养基内(细胞在无血清培养基内生长24小时)内冻存和复苏。在冻存管上标记好细胞类型,日期,冻存人等信息,并保证每冻存管不超过1.5ml。放入液氮罐之前记录冻存管的数量和位置。以最快的速度转移冻存管知液氮罐内,因此,此步骤使用干冰,或者把冻存管浸入装有液氮的小盒内。此外还要注意,在冻存管上没有足够的空间记录细胞的详细信息,做好记录是非常非常重要的!还有一个最重要的,一定要在异地的液氮罐内保存同样的一份细胞,以免其中的一个液氮罐出现问题!细胞正确的复苏方式和正确的冻存方式同样重要,熟记以下要点:当从液氮罐内取出细胞时,有可能会出现冻存管破裂的情况,使用保护面罩和防护服十分必要;其实,细胞复苏只是一个简单的实验,不过这其中却不可避免有一些需要注意的细节,不然,也不一定会尽如人意。例如说,人身健康方面:一定要记得做好防冻工作,戴上护目镜;尽量降低DMSO对细胞的损伤等等。
细胞形态特性:详见细胞说明书
CCD 966 SK细胞系相关产品:A2780 CP70细胞、149PT细胞、BE2-C细胞
WEHI-3B细胞系相关产品:Okayama University Medical School-23细胞、H1385细胞、GA-10-Clone-4细胞
PA317细胞系相关产品:R 2 C细胞、Panc04.03细胞、H3396细胞
GB1细胞系相关产品:COLO 680N细胞、HL1细胞、rUCMSCs细胞
bEnd.3[BEND3]细胞系相关产品:H1819细胞、FL83B细胞、BC3 H1细胞
MDAMB-231细胞系相关产品:KTCTL140细胞、SUM 149PT细胞、PC3-M细胞
LADMAC细胞系相关产品:TO175T细胞、MRC 5细胞、FHCRC subclone 11细胞
NUGC-2 Cell:人低分化胃癌腺癌细胞系
Adeno 293细胞系相关产品:COLO-824细胞、Hep-G2/C3A细胞、HCAEC细胞
SKMEL24细胞系相关产品:32D clone 3细胞、UMNSAH/DF-1细胞、RGC6细胞
BV2细胞系相关产品:KYSE 520细胞、HCC-2108细胞、SKG3A细胞
Porcine Kidney-13细胞系相关产品:H-1048细胞、P3HRI细胞、HPAF II细胞
Colon26细胞系相关产品:ABE8.1/2细胞、TE 85.T细胞、BCECs细胞
EU-2细胞系相关产品:TE-11细胞、Roswell Park Memorial Institute 7951细胞、NCI-H1404细胞
CCK-81细胞系相关产品:H6c7细胞、MA-c细胞、Mouse Colon 38细胞
LNCaP FGC细胞系相关产品:H446细胞、SMC-1细胞、H1092细胞
Panc-08.13细胞系相关产品:C4-I细胞、Normal Rat, August 3, 1983细胞、MCF 7细胞
H1882细胞系相关产品:HONE1细胞、L cell细胞、LY细胞
LA4细胞系相关产品:293/EBNA-1细胞、NS1细胞、T HEECs细胞
HCC-1438细胞系相关产品:LN229细胞、PA I细胞、BpRcl细胞
H-660细胞系相关产品:P3X63细胞、WM266mel细胞、Y3-Ag123细胞
OVCAR4细胞系相关产品:PL45细胞、Duke University 145细胞、H-2195细胞
SNU251细胞系相关产品:LS 513细胞、L-Wnt-3A细胞、AN3-CA细胞
NOZC-1细胞系相关产品:F442A细胞、MFE-280细胞、Hs 636.T细胞
143TK-细胞系相关产品:BE(2)C细胞、SK Hep1细胞、WRL-68细胞
OACP4 C细胞系相关产品:H1581细胞、LLCPK1细胞、MOLT4细胞
SUM 52PE细胞系相关产品:OKa-C-1细胞、HT 1376细胞、NCI-H2198细胞
SKNBE-2细胞系相关产品:Laboratory of Allergic Diseases 2细胞、IMCD3细胞、SCL I细胞
IEC6细胞系相关产品:HEK 293-EBNA细胞、COR-L23细胞、ME-180细胞
HOK细胞系相关产品:T98 G细胞、HSC-2细胞、SW962细胞
WM239A细胞系相关产品:PC-3M-IE8细胞、OVCAR420细胞、TCMK1细胞
Detroit562细胞系相关产品:NALM-6细胞、OE-33细胞、UCD-MLA-144细胞
NCIH1770细胞系相关产品:J45.01细胞、293 F细胞、Kasumi 1细胞
CALU 1细胞系相关产品:GM00637I细胞、NCI H226细胞、Hs 695.T细胞
UWB1289细胞系相关产品:A 2780 CP细胞、Panc_05_04细胞、NCIH2081细胞
BMSC/hBMSCs细胞系相关产品:NCI-SNU-398细胞、H-820细胞、251MG细胞
HMC-1细胞系相关产品:ML-2细胞、NCI-H711细胞、H35 Reuber细胞
MyLa2059细胞系相关产品:SKMEL-24细胞、PC 61 5.3细胞、NCI-H1781细胞
WISH细胞系相关产品:OLN 93细胞、OVCA433细胞、SW-1116细胞
MADISON LUNG TA-109细胞系相关产品:PK136细胞、MIA PaCa-2细胞、C666-1细胞
HPAEC细胞系相关产品:Vero细胞、FBHE细胞、SK-SH-SY5Y细胞
TGHAVSMC细胞系相关产品:HCC70细胞、Hs839.T细胞、Raji细胞
MFE-280细胞系相关产品:HSAS3细胞、JB6Cl30细胞、L- cell细胞
PIGI细胞系相关产品:GTL 16细胞、HS-683细胞、Y3细胞
alpha TC1.6细胞系相关产品:HO1N1细胞、MIN-6细胞、BC-024细胞
PNT-1A细胞系相关产品:SV40 MES 13细胞、A9 (Hamprecht)细胞、GMK,BSC-1细胞
MC 3T3-E1细胞系相关产品:SUNE1细胞、WBF344细胞、OE19细胞
Fetal Human Colon细胞系相关产品:GM04154细胞、PBMC细胞、SR786细胞
Fetal Human Colon细胞系相关产品:GM04154细胞、PBMC细胞、SR786细胞
H-1954细胞系相关产品:OV 1063细胞、ZR75_1细胞、C-Lu65细胞
NCI-H2135细胞系相关产品:DV90细胞、TGBC11T细胞、ISHI细胞
NUGC-2 Cell:人低分化胃癌腺癌细胞系
NRK 49F细胞系相关产品:MCA205细胞、YAC-1细胞、T-CAM2细胞
NCIH196细胞系相关产品:YES 2细胞、AZ521细胞、ZR75-1细胞
Metastatic Variant-522细胞系相关产品:NCI-H2291细胞、GH 3细胞、Granta 519细胞
PANC 1005细胞系相关产品:BEP2D细胞、Psi-2-DAP细胞、JVM-3细胞
C8D1A细胞系相关产品:NCIH1930细胞、HELA-GFP细胞、Dunn LM8细胞
EBTr细胞系相关产品:RWPE2细胞、SNU869细胞、TSU-Pr1细胞
Nb2细胞系相关产品:C-4I细胞、C32-mel细胞、U-251MG细胞
H295R-S1细胞系相关产品:AU565细胞、AN3-CA细胞、HEK-2细胞
Swiss3T3细胞系相关产品:3T6-Swiss albino细胞、NCI-BL6细胞、NCIH661细胞
KCL-22细胞系相关产品:Central Adrenergic TH-expressing a细胞、MKN28细胞、SaOS细胞
TE12细胞系相关产品:UMNSAH/DF#1细胞、Rat podocyte细胞、OCI-Ly 1细胞
ARH-77细胞系相关产品:RFL-6细胞、HEL-92_1_7细胞、Mc Coy细胞
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