"HCC1359 Cell:人肺癌主轴巨细胞系
细胞形态:上皮细胞样
细胞生长:贴壁
细胞背景资料:详见相关文献介绍
hTERT-HPNE细胞系相关产品:OVCAR-8/ADR细胞、LUDLU1细胞、Lewis lung carcinoma细胞
IOSE-Van细胞系相关产品:VM Cub 1细胞、Potorous tridactylus Kidney 1细胞、HMO6细胞
MDA-MB-435-S细胞系相关产品:Kit225-K6细胞、NTERA2D1细胞、Hs 737.T细胞
R1800[RA]细胞系相关产品:EFM-192A细胞、NCI H716细胞、NCI-SNU-398细胞
细胞物种来源:人源或鼠源等其它物种来源
HCC1359 Cell:人肺癌主轴巨细胞系
细胞传代时消化的问题:可以这样说,对于需要消化传代的细胞,每一次的消化都是对这个细胞存活与否,状态好与不好最至关重要的考验。很多同学都遇到过这个问题,自己养的细胞开始的几代长的还挺好的,可是穿过几代之后就发现自己的细胞,状态越来越差劲了。对于这个问题,可以非常肯定地说,你的消化环节出问题了。你每一次的消化都让细胞受到较大损伤了。所以,越长越差。在消化的过程中,你加入胰酶后,所有细胞都在被胰酶消化着,但是我们忽视了一个问题就是,细胞的生长状态是不一样的,每一个细胞的贴壁情况也是不一样的,有的贴壁牢固,有的贴壁没有那么牢固的,所以,让所有的细胞消化同样的时间对细胞是不公平的,他们受到了差别待遇当然会有脾气啊。我后来对消化的方法进行了改良。争取做到因材施教呵呵。我称之为“四步消化法”。(以难消化细胞为例);具体操作:1)首先不加胰酶,倒掉旧培养基加入少量新培养基洗1-2遍,(这是前奏,即为步,目的是将漂浮着的死细胞之类尽量洗掉。2)然后再加入少量新培养基直接吹打一遍,这一遍是把贴壁不牢固的细胞吹打下来。再用培养基洗一遍,两次所得悬液混合传入新瓶。即为第二步(你可以将这些传入新瓶培养,以与后面胰酶消化过的细胞对比观察看谁长的更好一点就知道该细胞对胰酶的敏感度了。)3)吸干净瓶内剩余液体,加入0.3ml左右的胰酶润洗一遍,吸掉弃之,再加入1ml左右的胰酶消化。消化的同时置于显微镜下观察,待细胞与细胞之间间隙明显的时候立即吸掉胰酶与干净子弹头里备用,加入新培养基开始吹打,吹打2-3遍后吸取悬液于试管或新瓶暂存。用2ml左右新培养基洗一遍与前面的混合。(你也可以传入新瓶培养,以与后面及前面的做对比。)这是第三步。4)然后把前面刚吸出来的胰酶重新加进去瓶里继续消化剩余的贴壁牢固的细胞。当然你也可以用新的胰酶,如果你们那比较富裕的话,呵呵。继续镜下观察,待剩余细胞间隙明显,细胞独立开来的时候,吸掉胰酶,加入新培养基吹打。悬液传入新瓶培养(根据实际情况你自己把握)。这是第四步。其实还可以有第五步,对于特别难消化的细胞和对胰酶特别敏感的细胞的话,你可以继续加第五步甚至第六步。为了细胞更好的状态,更漂亮的样子,没办法,你必须分多批多次消化,这样才能限度地将胰酶对细胞的损伤降到最低,保证细胞的状态能够。当然了,如果细胞是属于那种很容易消化的细胞,像RAW264.7,仅仅第二步就搞定了。就没必要第三步第四步了。这个是需要你在实验中能够自己用心去体会的。建议你接受一个新细胞时把各步消化的细胞分别培养起来做比较,去摸索好细胞对胰酶的要求。便于你后续实验的开展。将细胞消化分成这几步,除了是为了避免胰酶对细胞的损伤之外,还有一个更重要的作用就是,可以程度地把细胞吹打成单个单个的状态,不成片不连体。
细胞产品包装:复苏形式:T25培养瓶(一瓶)或冻存形式:1ml冻存管(两支)
细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。
如何进行细胞复苏:1)从液氮容器中取出冻存管,直接浸入37℃温水中,并不时摇动令其尽快融化;2)从37℃水浴中取出冻存管,打开盖子,用吸管吸出细胞悬液,加到离心管并滴加10倍以上培养液,混匀;3)离心,1000rpm,5min;4)弃去上清液,加入含10%小牛血清培养液重悬细胞,计数,调整细胞密度,接种培养瓶,37℃培养箱静置培养;5)次日更换一次培养液,继续培养。【温馨提醒】1)从增殖期到形成致密的单层细胞以前的培养细胞都可以用于冻存,但为对数生长期细胞。在冻存前一天换一次培养液;2)将冻存管放入液氮容器或从中取出时,要做好防护工作(戴棉手套),以免冻伤;3)冻存和复苏用新配制的培养液。细胞复苏的时候,有些初次实验员将冻存管从液氮中取出后,放在室温下,经常发生冻存管爆炸,该怎么避免出现这种情况吗?其中在拧紧冻存管的时候是否有哪些细节要注意的?一般常用的方法是取出冻存管后在超净工作台中用酒精棉球擦试管口,再稍拧松盖子,再放37度水浴锅中摇溶,在将细胞转移到装有37度预热过的培养基的试管中,迅速离心,再用培养基洗一遍。
细胞来源说明:细胞主要来源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少数国外著名大学建系
ROS 17/28细胞系相关产品:A-427细胞、BpRcl细胞、Ly19细胞
SKNEP-1细胞系相关产品:HuLEC-5a细胞、KM-12细胞、786-O细胞
OCI-LY-18细胞系相关产品:ROS17/2.8细胞、MCA38细胞、HCC-9724细胞
H1915细胞系相关产品:MNNG/HOS细胞、AD293细胞、SCC 25细胞
LAN1细胞系相关产品:HCE细胞、SKG-IIIa细胞、Mac-1细胞
细胞生长特性:贴壁或悬浮,详见细胞说明书部分
HCC1359 Cell:人肺癌主轴巨细胞系
细胞培养无菌操作步骤和注意事项:1.打开无菌工作台及净化室的紫外灯,消毒半小时以上。2.进入净化室前先关闭紫外灯,打开超净台风机,等待30min以上,以排尽臭氧。3.穿好隔离衣,戴好口罩,帽子。4.风淋2分钟。5.0.1%水泡手,擦干。6.点燃酒精灯;超净台内应避免放入过多的物品;使用的吸管,滴管,试管,培养瓶等均事先灭菌。7.打开各类瓶盖前先过火,以固定灰尘;打开的瓶口、试管口过火焰,镊子使用前应经火焰烧灼。8.水平式风机的超净台,应使瓶口斜置,应尽量避免瓶口敞开直立。9.同一根吸管或滴管不应连续用于几个不同的细胞系;吸取培养基的吸管应离开培养瓶或试管口0.5cm,避免伸入培养瓶口或试管口;以防止细胞系的互相混杂污染。10.漏在培养瓶上或台上的液体,立即用酒精棉球擦净。11.操作完毕后恢复工作台面。
细胞形态特性:详见细胞说明书
HuPT3细胞系相关产品:LU165细胞、624-mel细胞、COLO-738细胞
Ketr3细胞系相关产品:HRA19细胞、VE细胞、RPMI7666细胞
RBSMC细胞系相关产品:LNCaP-C4-2细胞、MDA MB231细胞、HFT 8810细胞
Caco-2/ATCC细胞系相关产品:NCI-H1944细胞、R D细胞、SUD4细胞
MIA-Pa-Ca-2细胞系相关产品:451-LU细胞、JEG-3细胞、Panc 08.13细胞
OVCAR-432细胞系相关产品:SK-N-BE细胞、SKMEL24细胞、Human Embryonic Kidney 293细胞
SW 48细胞系相关产品:HCe-8693细胞、MFHL-2细胞、Detroit-562细胞
HCC1359 Cell:人肺癌主轴巨细胞系
MDA-MB-435细胞系相关产品:NCI-H28细胞、3T3 L1细胞、HEK 293FT细胞
HCC0015细胞系相关产品:COV434细胞、IBMF-7细胞、IMCD-3细胞
TCCPAN2细胞系相关产品:HLEC细胞、QGP-1细胞、OP9细胞
NWA细胞系相关产品:NCI H2106细胞、OCI AML3细胞、Natural Killer-92细胞
HT-3细胞系相关产品:TE353.SK细胞、SK-N-BE2细胞、WM-239细胞
SK-MEL-2细胞系相关产品:SNU638细胞、Mouse Bladder Tumor line-2细胞、CCD 841 CoN细胞
Oregon J-111细胞系相关产品:RGC6细胞、hTERT-HME1细胞、ARIP细胞
Mink细胞系相关产品:ROS 17/28细胞、SUIT2细胞、Human Microglia Clone 3细胞
NCI H716细胞系相关产品:OCI-Ly10细胞、NW-38细胞、SW 1990细胞
KOSC-2 cl3-43细胞系相关产品:Calu6细胞、MDCC-MSB1细胞、MD Anderson-Metastatic Breast-175-VIII细胞
HFT8810细胞系相关产品:MV 3细胞、Bac12F5细胞、CCD1095Sk细胞
NCI-H1819细胞系相关产品:NCIH2110细胞、KYSE 510细胞、CNE1细胞
SNU-869细胞系相关产品:P 3 HR 1细胞、Uhth-74细胞、T-98细胞
NCIH2009细胞系相关产品:FD-LSC-1细胞、CCD1095Sk细胞、CT26.WT细胞
SK-N-BE-2c细胞系相关产品:H-1915细胞、Human Foreskin Fibroblast细胞、ABC-1细胞
RSC 96细胞系相关产品:Ej138细胞、SKMEL-31细胞、IEC 18细胞
LTEP-a2细胞系相关产品:S37细胞、Intestinal Porcine Epithelial Cell line-1细胞、WRL68细胞
OE-21细胞系相关产品:Colon26细胞、Jurkat E6.1细胞、H250细胞
OKa-C-1细胞系相关产品:RPMI-1788细胞、C33细胞、N-87细胞
MLE12细胞系相关产品:KATO 3细胞、Hs 606.T细胞、SK-ES1细胞
UMRC-2细胞系相关产品:RBL细胞、NCI-H740细胞、CMT-93细胞
3T3-L1 ad细胞系相关产品:D-283 Med细胞、Hs 819.T细胞、H2009细胞
H35细胞系相关产品:OV 2008细胞、6T-CEM细胞、OVCAR8细胞
V79-4细胞系相关产品:LAN5细胞、Tissue Culture-1细胞、HPAFII细胞
F98细胞系相关产品:MC-CAR细胞、YES 2细胞、YAC-1细胞
MDA-MB-330细胞系相关产品:U-226AR1细胞、SNU-216细胞、HLE B-3细胞
CCRF SB细胞系相关产品:H-1355细胞、KTCTL-140细胞、A101D细胞
SW 962细胞系相关产品:OCI-Ly07细胞、MMAc.SF细胞、SNU-119细胞
BaF3细胞系相关产品:ECV304细胞、NCIH526细胞、H-1437细胞
BNL.1ME A.7R.1细胞系相关产品:NCI-H740细胞、NCI-SNU-C1细胞、3T3-Swiss albino细胞
WM115F细胞系相关产品:WIL2S细胞、KPL-1细胞、LLC PK1细胞
Me Wo细胞系相关产品:MDAMB453细胞、SUM 159PT细胞、SW 1417细胞
HCCC9810细胞系相关产品:Hs 840.T细胞、MEL细胞、Human Lung Microvascular Endothelial Cell line-5a细胞
16-HBEo细胞系相关产品:Normal Rat Kidney-49F细胞、OSC-19细胞、NCIH1915细胞
TE353.SK细胞系相关产品:Calu-3细胞、P3/NSI/1-AG4-1细胞、BC-021细胞
SaOS-2细胞系相关产品:A2058细胞、HO8910PM细胞、LNCaP-FGC细胞
H-735细胞系相关产品:P30/Ohkubo细胞、LS 1034细胞、IPAM-WT细胞
Jurkat-77细胞系相关产品:Human fetal lung fibroblast 1细胞、CP-70细胞、686LN-M4e细胞
NCIH1666细胞系相关产品:MDCK (NBL-2)细胞、SUDHL10细胞、Murine Lung Epithelial-12细胞
P-36细胞系相关产品:HCT_116细胞、Chinese Hamster Ovary细胞、VM-CUB-1细胞
SUM 52PE细胞系相关产品:OKa-C-1细胞、HT 1376细胞、NCI-H2198细胞
Neuro-2a细胞系相关产品:HBSMC细胞、IOSE80细胞、Madin Darby Bovine Kidney细胞
CHP-100细胞系相关产品:PC9细胞、CAL-33细胞、HPDE6c7细胞
HCC1359 Cell:人肺癌主轴巨细胞系
TE11细胞系相关产品:Lung cancer-1/squamous细胞、OUMS-27细胞、U2OS细胞
SV40-MES13细胞系相关产品:KRC Y细胞、G519细胞、149 PT细胞
C518细胞系相关产品:MES-SA/Dx-5细胞、SV40 MES 13细胞、HLE-SRA-01/04细胞
SK-MEL-MeWo细胞系相关产品:SP2-0-Ag14细胞、Ly8细胞、NEC细胞
RIN-m细胞系相关产品:MOLM-13细胞、DMS 53细胞、BMU-S1细胞
L cell line细胞系相关产品:IBMF-7细胞、Hs839T细胞、SUM102PT细胞
Panc02-H0细胞系相关产品:PANC-08-13细胞、Y-1细胞、VA-ES-BJ细胞
H748细胞系相关产品:MJ细胞、H-2009细胞、CAL 27细胞
32D clone3细胞系相关产品:A9细胞、4T1-A细胞、PANC-02-03细胞
KU-812细胞系相关产品:PC14细胞、2008细胞、NKT细胞
HAC-84细胞系相关产品:Panc-3_27细胞、KNS62细胞、Hs-729-T细胞
hTERT-RPE1细胞系相关产品:Hs821T细胞、ECC 12细胞、RBL 1细胞
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