"CL-34 Cell:人结肠癌细胞系
细胞形态：上皮细胞样
细胞生长：贴壁
细胞背景资料：详见相关文献介绍
McG-1细胞系相关产品：Y3.AG.1.2.3细胞、HPDEC细胞、ECV-304细胞
SK.MEL.2细胞系相关产品：Strain KB细胞、NIH-3T3-L1细胞、95-D细胞
SY5Y细胞系相关产品：DBTRG-05MG细胞、BHT-101细胞、TE11细胞
SK.MEL.2细胞系相关产品：Strain KB细胞、NIH-3T3-L1细胞、95-D细胞
细胞物种来源：人源或鼠源等其它物种来源
CL-34 Cell:人结肠癌细胞系
细胞传代时消化的问题：可以这样说，对于需要消化传代的细胞，每一次的消化都是对这个细胞存活与否，状态好与不好最至关重要的考验。很多同学都遇到过这个问题，自己养的细胞开始的几代长的还挺好的，可是穿过几代之后就发现自己的细胞，状态越来越差劲了。对于这个问题，可以非常肯定地说，你的消化环节出问题了。你每一次的消化都让细胞受到较大损伤了。所以，越长越差。在消化的过程中，你加入胰酶后，所有细胞都在被胰酶消化着，但是我们忽视了一个问题就是，细胞的生长状态是不一样的，每一个细胞的贴壁情况也是不一样的，有的贴壁牢固，有的贴壁没有那么牢固的，所以，让所有的细胞消化同样的时间对细胞是不公平的，他们受到了差别待遇当然会有脾气啊。我后来对消化的方法进行了改良。争取做到因材施教呵呵。我称之为“四步消化法”。（以难消化细胞为例）；具体操作：１)首先不加胰酶，倒掉旧培养基加入少量新培养基洗１-２遍，（这是前奏，即为步，目的是将漂浮着的死细胞之类尽量洗掉。２)然后再加入少量新培养基直接吹打一遍，这一遍是把贴壁不牢固的细胞吹打下来。再用培养基洗一遍，两次所得悬液混合传入新瓶。即为第二步（你可以将这些传入新瓶培养，以与后面胰酶消化过的细胞对比观察看谁长的更好一点就知道该细胞对胰酶的敏感度了。）３)吸干净瓶内剩余液体，加入０.３ml左右的胰酶润洗一遍，吸掉弃之，再加入１ml左右的胰酶消化。消化的同时置于显微镜下观察，待细胞与细胞之间间隙明显的时候立即吸掉胰酶与干净子弹头里备用，加入新培养基开始吹打，吹打２-３遍后吸取悬液于试管或新瓶暂存。用２ml左右新培养基洗一遍与前面的混合。（你也可以传入新瓶培养，以与后面及前面的做对比。）这是第三步。４)然后把前面刚吸出来的胰酶重新加进去瓶里继续消化剩余的贴壁牢固的细胞。当然你也可以用新的胰酶，如果你们那比较富裕的话，呵呵。继续镜下观察，待剩余细胞间隙明显，细胞独立开来的时候，吸掉胰酶，加入新培养基吹打。悬液传入新瓶培养（根据实际情况你自己把握）。这是第四步。其实还可以有第五步，对于特别难消化的细胞和对胰酶特别敏感的细胞的话，你可以继续加第五步甚至第六步。为了细胞更好的状态，更漂亮的样子，没办法，你必须分多批多次消化，这样才能限度地将胰酶对细胞的损伤降到最低，保证细胞的状态能够。当然了，如果细胞是属于那种很容易消化的细胞，像RAW２６４.７，仅仅第二步就搞定了。就没必要第三步第四步了。这个是需要你在实验中能够自己用心去体会的。建议你接受一个新细胞时把各步消化的细胞分别培养起来做比较，去摸索好细胞对胰酶的要求。便于你后续实验的开展。将细胞消化分成这几步，除了是为了避免胰酶对细胞的损伤之外，还有一个更重要的作用就是，可以程度地把细胞吹打成单个单个的状态，不成片不连体。
细胞产品包装：复苏形式：T２５培养瓶(一瓶)或冻存形式：１ml冻存管(两支)
细胞传代方法：１：２-１：３传代；每周换液２-３次。
细胞冻存的步骤：１)选择处于对数生长期的细胞，在冻存前一天换液。将多个培养瓶中的细胞培养液去掉，用０.２５% 胰蛋白酶消化。适时去掉胰蛋白酶，加入少量新培养液。用吸管吸取培养液反复吹打瓶壁上的细胞，使其成为均匀分散的细胞悬液。悬浮生产细胞则不要消化处理。然后将细胞收集于离心管中离心(１０００r/min，１０分钟)；２)去上清液，加入含２０%小牛血清的完全培养基，于４℃预冷１５分钟后，逐滴加入已无菌的DMSO或甘油，用吸管轻轻吹打使细胞均匀，细胞浓度为５×１０６～１×１０７/mL之间。(冻存培养液的配置是不是一定要用小牛血清呢？答案是不一定的，具体要看培养的细胞类型来选择；３)将分装上述细胞悬液于２ml冻存管中，每管０.２５ml。冻存管要将盖子盖紧，并标记好细胞名称和冻存日期，同时作好登记(日期、细胞种类及代次、冻存支数)；４)将装好细胞的冻存管放到冻存盒中，-８０℃冰箱过夜。；如果有程序降温器(放在-８０℃冰箱过夜，放入液氮罐);或者可以在４℃，２h;然后转到-２０℃，２h;-８０℃，２h;放入液氮罐；５)细胞冻存在液氮中可以长期保存，但为妥善起见，冻存半年后，取出一只冻存管细胞复苏培养，观察生长情况，然后再继续冻存。
细胞来源说明：细胞主要来源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少数国外著名大学建系
TE9细胞系相关产品：GM03569细胞、NCIH838细胞、RPMI-6666细胞
MLE12细胞系相关产品：KATO 3细胞、Hs 606.T细胞、SK-ES1细胞
H711细胞系相关产品：IMCD-3细胞、SW 982细胞、MGHU3细胞
MFD-1细胞系相关产品：LAPC-4细胞、JHH-7细胞、MC3T3-E1 Subclone 24细胞
TE9细胞系相关产品：GM03569细胞、NCIH838细胞、RPMI-6666细胞
细胞生长特性：贴壁或悬浮，详见细胞说明书部分
CL-34 Cell:人结肠癌细胞系
细胞传代培养实验：体外培养的原代细胞或细胞株要在体外持续地培养就必须传代，以便获得稳定的细胞株或得到大量的同种细胞，并维持细胞种的延续。培养的细胞形成单层汇合以后，由于密度过大生存空间不足而引起营养枯竭，将培养的细胞分散，从容器中取出，以１:２或１:３以上的比率转移到另外的容器中进行培养，即为传代培养；细胞“一代”指从细胞接种到分离再培养的一段期间，与细胞世代或倍增不同。在一代中，细胞培增３～６次。细胞传代后，一般经过三个阶段：游离期、指数增生期和停止期。常用细胞分裂指数表示细胞增殖的旺盛程度，即细胞群的分裂相数/１００个细胞。一般细胞分裂指数介于０.２％～０.５％，肿瘤细胞可达３～５％；细胞接种２～３天分裂增殖旺盛，是活力时期，称指数增生期(对数生长期)，适宜进行各种试验。实验步骤：１.将长成的培养细胞从二氧化碳培养箱中取出，在超净工作台中倒掉瓶内的培养液，加入少许消化液。(以液面盖住细胞为宜)，静置５～１０分钟。２.在倒置镜下观察被消化的细胞，如果细胞变圆，相互之间不再连接成片，这时应立即在超净台中将消化液倒掉，加入３～５ml新鲜培养液，吹打，制成细胞悬液。３.将细胞悬液吸出２ml左右，加到另一个培养瓶中并向每个瓶中分别加３ml左右培养液，盖好瓶塞，送回二氧化碳培养箱中，继续进行培养。一般情况，传代后的细胞在２小时左右就能附着在培养瓶壁上，２～４天就可在瓶内形成单层，需要再次进行传代。
细胞形态特性：详见细胞说明书
A375.S2细胞系相关产品：DMS-153细胞、NH6细胞、NOZAWA细胞
IM-9细胞系相关产品：SW948细胞、CPA47细胞、NCL-H548细胞
GT1-1细胞系相关产品：LY-R细胞、BCaP 37细胞、2B4细胞
Hs 636 T细胞系相关产品：SNG-M细胞、Hs.27细胞、A-101D细胞
H1819细胞系相关产品：HEL细胞、NCI-H446细胞、NCI-H1395细胞
NCIH1930细胞系相关产品：Hs888Lu细胞、LLC1细胞、NCI-H676细胞
H647细胞系相关产品：DMS-273细胞、FRhK4细胞、Reuber-H-35 hepatoma细胞
CL-34 Cell:人结肠癌细胞系
HCC-15细胞系相关产品：MRMT-1细胞、Swiss 3T3细胞、OCI-Ly1细胞
KM12SM细胞系相关产品：OV90细胞、16-HBEo细胞、SW 948细胞
PF-382细胞系相关产品：HuT-102细胞、Hs888 Lu细胞、SNU-398细胞
NCIH1792细胞系相关产品：HOS TE85细胞、Y3-Ag 1.2.3细胞、HCC1833细胞
HMrSV5细胞系相关产品：CL11细胞、NCIH1437细胞、MD Anderson-Metastatic Breast-134-VI细胞
MCF-10A细胞系相关产品：NALM6细胞、Human Embryo Kidney-2细胞、MCF7-CTRL细胞
LNCaP C4-2B细胞系相关产品：EB1细胞、HCE细胞、MAD109细胞
MB231细胞系相关产品：MKN 45细胞、KNS-81细胞、NRK 49F细胞
MDBK细胞系相关产品：ECC10细胞、U-hth74细胞、HBZY1细胞
MDBK细胞系相关产品：ECC10细胞、U-hth74细胞、HBZY1细胞
HCT 116细胞系相关产品：H1694细胞、MOLT-16细胞、Metastatic Variant-522细胞
FAT细胞系相关产品：Dunn LM8细胞、IPLB-SF 21AE细胞、H1650_CO细胞
SK-ChA1细胞系相关产品：Sc-1细胞、BetaTC6细胞、SCaBER细胞
HS-294细胞系相关产品：KPL-4细胞、RIN-m5F细胞、Huh 7.5细胞
SMMC-7721细胞系相关产品：CCD841CoN细胞、NCIH1651细胞、L Wnt-3A细胞
EPC细胞系相关产品：M059J细胞、SPCA1细胞、HCC1419细胞
Hs 294T细胞系相关产品：NTERA-2 clone D1细胞、OVCAR.5细胞、CHL细胞
KU812-F细胞系相关产品：639V细胞、B35细胞、Pro-5 Lec1.3c细胞
LWnt3A细胞系相关产品：NCI-H2195细胞、NCI-H2330细胞、SGC-7901细胞
SKMES细胞系相关产品：THLE2细胞、HcerEpic细胞、hFOB1.19细胞
KATO III细胞系相关产品：MES 23.5细胞、PLC8024细胞、TGW-I-nu细胞
JHH7细胞系相关产品：TE354.T细胞、GM03190细胞、WERI-Rb-1细胞
MEF (CF-1)细胞系相关产品：HPDE6c7细胞、RMG-I细胞、1301细胞
NCI-H2195细胞系相关产品：Menschliche Und Tierische Zellkulture-3细胞、HEK 293 EBNA细胞、VMCUB1细胞
NUGC-4细胞系相关产品：WSU-DLCL-2细胞、CF-1 MEF细胞、Be-Wo细胞
LC1-Sq细胞系相关产品：SCI1细胞、NBL-2细胞、Pa17C细胞
Homo sapiens No. 578, breast cells细胞系相关产品：TMK-1细胞、Ramos.2G6.4C10细胞、COLO 206F细胞
CV-1细胞系相关产品：CCD 1112SK细胞、HCPEpiC细胞、WiDrTC细胞
NBLAN5T细胞系相关产品：KFB细胞、HEL-299细胞、CEK细胞
HEK/293细胞系相关产品：VMM5A细胞、Human Corneal Epithelial cells-Transformed细胞、L-M[TK-]细胞
BT-549细胞系相关产品：H719细胞、Karpas-422细胞、Dami细胞
HIEC6细胞系相关产品：JeKo-1细胞、Ramos-RA1细胞、LNCaP FGC细胞
TE 85 ClF-5细胞系相关产品：IGROV细胞、Neuro 2a细胞、NCI-SNU-886细胞
HEC-1B细胞系相关产品：HPB/ALL细胞、SW-982细胞、H226细胞
P3-X63-Ag8细胞系相关产品：Colo-678细胞、Sp2/mIL-6细胞、HEY A8细胞
184A1细胞系相关产品：Hep 3B2_1-7细胞、BALB/c 3T3 clone A31细胞、RK13细胞
PC 61 5.3细胞系相关产品：NE1-E6E7细胞、ST2细胞、HT 1197细胞
WM-115细胞系相关产品：NCIH1944细胞、MHHCALL2细胞、SK-BR-3细胞
SU-DHL-2细胞系相关产品：KTA7细胞、KOSC-2 cl3-43细胞、Rainbow Trout Embryo细胞
SKG3A细胞系相关产品：IOSE29细胞、B-3细胞、SW-48细胞
RKO-AS-45-1细胞系相关产品：SGC996细胞、SuDHL 5细胞、Vero 76 clone E6细胞
3T3-442A细胞系相关产品：SK-MEL-MeWo细胞、PANC 327细胞、RKO-AS45-1细胞
EB2细胞系相关产品：CX1细胞、786O细胞、NCIH524细胞
CL-34 Cell:人结肠癌细胞系
KOSC-2细胞系相关产品：OAW42细胞、Mel-MeWo细胞、T-ALL-1细胞
BT细胞系相关产品：OCI-Ly 19细胞、SHP-77细胞、SCC25细胞
CAL 12细胞系相关产品：PTK2细胞、HO8910/PM细胞、IPLB-SF 21细胞
PLB-985细胞系相关产品：NCI-H676细胞、CAL 12细胞、KMH2细胞
M07e细胞系相关产品：BS-C-1细胞、SW 1271细胞、LTEPsm细胞
NBL-S细胞系相关产品：CZ-1细胞、H-1395细胞、U-373MG ATCC细胞
SDBMSC细胞系相关产品：hSCC-25细胞、HSAS4细胞、VMM39细胞
Neukoplast细胞系相关产品：HKF细胞、Laboratory of Allergic Diseases 2细胞、TOV21G细胞
BHT-101细胞系相关产品：MSTO211H细胞、DV-90细胞、JeKo 1细胞
CEM细胞系相关产品：Stanford University-Diffuse Histiocytic Lymphoma-4细胞、HEK-293H细胞、H740细胞
KLN-205细胞系相关产品：RCS细胞、H1437细胞、Centre Antoine Lacassagne-51细胞
GT38细胞系相关产品：TOG细胞、R.K.13细胞、H-1876细胞
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