"hCMEC/D3 Cell:永生化人脑微血管内皮细胞系
细胞形态：上皮细胞样
细胞生长：贴壁
细胞背景资料：脑微血管；内皮细胞
MUM2B细胞系相关产品：EL4细胞、H-187细胞、KP-N-RT-BM-1细胞
OCI-Ly19细胞系相关产品：T84细胞、K-1735细胞、TNC-1B12B4细胞
VB细胞系相关产品：NCI-H526细胞、H-2452细胞、CCC-HEH-2细胞
NUGC2细胞系相关产品：SuDHL 1细胞、GM05887A细胞、P3/X63/Ag8.653细胞
细胞物种来源：人源或鼠源等其它物种来源
hCMEC/D3 Cell:永生化人脑微血管内皮细胞系
因为细胞生长的时候肯定是要相互联系，大部分的细胞都是要成片生长的，尤其是对于贴壁细胞，单个细胞贴壁之后长着长着就长到一片去了。但是如果是成片的细胞抱团的话，传代后细胞是不能贴壁的，这样抱团的细胞就会死亡。所以，消化传代的时候一定要将细胞消化成单个单个的独立状态，这个啊是非常考究你的功夫的！细胞一旦脱落入悬液里你很难再将他吹打成单个，因为他没有受力点了。很难找到受力点让你对他吹打的力分散开细胞。所以必须要在细胞未脱落之前将其吹打开，受力点就是细胞贴壁的地方。这样你就必须要严格控制好消化的程度啊，这和大师做饭掌握好火候是一样的道理啊。既要消化到容易吹打下来，又不能太过，一吹就整片脱落，要单个单个地往下掉。所以我才要分批分次地加胰酶消化就是为了保证不同生长状态贴壁程度的细胞能够都维持在好的受力点分散开。这个是很重要的一点。尤其是对于某些细胞这一点就是他活去死的致命点。像Caco-２细胞就是如此。另外关于传代很重要一点就是一定不能等到细胞长满的时候才去消化传代。要在细胞长到７０%左右的时候就要传代了，一旦发现细胞生长中已经有叠层生长的时候就要立即进行消化传代。不能再拖了。关于换液传代时候洗瓶的问题。对于用DMEM培养基培养的细胞，你在洗的时候如果是用无血清１６４０去洗细胞在随即后的几次中会比用DMEM洗的长的要好。同样，用１６４０培养的也有这个现象。如果不嫌麻烦的话，可以用PBS来洗，洗的效果和用无血清培养基洗的效果基本上是一样的，对于有些细胞会更胜一筹。洗的目的主要是洗去培养瓶里残留的血清，防止它对胰酶的影响。这样能够保证胰酶的消化能力优先，是很关键的一点。先补充这么多，还会后续更新。再补充一点：传代时PBS洗是很重要的一步，最近发现，用PBS就可以把细胞消化开来。加入PBS放置１０-１５分钟，有些需要更长的时间，等到细胞一个个分离开来的时候，就可以直接吹打下来，但是和胰酶消化一样，要控制好时间，不能时间太过了，要不然损伤细胞，细胞不容易成活，状态容易不好。这个方法对于某些细胞是很管用的。有些细胞用胰酶消化不容易消化成单个的时候，或者临时没有胰酶了，可以选用此方法。不过一定要试试，看是否适合你的细胞。
细胞产品包装：复苏形式：T２５培养瓶(一瓶)或冻存形式：１ml冻存管(两支)
细胞传代方法：１：２-１：３传代；每周换液２-３次。
造成实验室细胞污染常见情况总结：细胞培养中最常见污染的是细菌、真菌和支原体污染。细胞一旦污染，大多数较难处理。那么，哪些情况我们不注意的话就会造成细胞污染呢？我们根据常见细胞培养实验分析总结下。【违规操作】１)为节省时间，有人已经用超净台四个多小时，不开紫外灭菌３０min,酒精擦拭后直接开始试验；２)器材或者溶液很久没用，未检测是否污染而直接使用；离心管多次使用，枪头为了方便交叉使用；３)超净台不点酒精灯；点了酒精灯放在右上角，而你在左下角做试验；４)不带手套，徒手操作；５)细胞培养间配备枪式移液器、手术器械、离心机、冰箱等专用仪器设备以及专用的实验服和拖鞋，未定期消毒。专用物品被带出传代细胞使用。培养细胞过程中使用的所有实验用具，如移液管、一次性枪头、一次性塑料离心管、冻存管等未按要求灭菌使用(通常需１２１°C高压灭菌２０分钟后３７％烤干备用)。超净台和桌面，东西太多太乱：超净台不是储物箱，什么培养皿、各种规格的板子、枪头就不要堆在超净台！这样就会有许多紫外线顾不到的卫生死角。传代细胞其他的桌面，切忌东西堆积如山，不要将酒精棉球、标签纸、牛皮纸买来后全部堆在传代细胞！一不小心“飘”进你的细胞培养板里，细胞就会养的不好，啥时候死了都不知道！【培养箱太久没清洁】细胞污染了，并非直接扔了培养皿就不管了，首先你还得看看这个恒温培养箱里其他培养皿或孔板里的细胞是否污染，如果有而且好几个板子都有类似的污染块，那很可能是培养箱中的水或者空气污染了，得给培养箱做个大扫除，重新酒精消毒，照紫外；孵箱里的水，水没了要记得加，还得记得十天半个月的就用酒精擦擦托盘。【传代细胞人多口杂，难管理】在传代细胞这种卫生要求高，人多了，不确定因素多了，难以保证试验在无菌条件下操作。出入试验室，实验服当风衣穿，不扣纽扣，不戴，就容易造成细胞污染；超净台做实验时，喜欢说话聊着做试验，要是还不带口罩，里面就有很多细菌等着去攻击你的细胞呢！
细胞来源说明：细胞主要来源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少数国外著名大学建系
RA细胞系相关产品：T47D细胞、NCIH2291细胞、MV522细胞
KYSE-70细胞系相关产品：HEK/293细胞、NCI-H82细胞、Nthy-ori 3.1细胞
3D4/21细胞系相关产品：32D CL3细胞、MNNG/HOS Cl #5细胞、TFH细胞
MIMVEC细胞系相关产品：A2780细胞、CCLP1细胞、SW-780细胞
alpha-TC1.6细胞系相关产品：Line 522细胞、MV 4;11细胞、Leydig细胞
细胞生长特性：贴壁
hCMEC/D3 Cell:永生化人脑微血管内皮细胞系
贴壁细胞的消化方法介绍：１、胰酶。这是用得最多的。一般浓度在０.２５-０.５%。作用时间根据细胞种类、作用温度等因素而变化很大，从几分钟到几十分钟不等。０.２５%的胰酶作用于单层贴壁的细胞，在３７度条件下，一般消化１-５分钟就足够了。终止是用血清。主要作用于细胞间。配制时不能用含、镁的平衡液，否则影响活性。保存于-２０度。２、胶原酶。这种方法比较少，一般是用原代培养时，从组织消化下细胞。这种方法作用温和，对细胞损伤较小，但是，价格也较贵。中止同样是用血清。３、EDTA。用得也是非常多。一般浓度在０.０２%左右。作用于细胞与间质，对细胞间也有一定作用。注意，它能显著影响pH值，而且在弱碱性条件下才易溶。因此，配制时应调节好酸碱度。它不能被终和。因此，消化下来的细胞要洗一遍。４、商品化的无酶消化液。个人的使用经常觉得对细胞的损伤比较大，但是分离成单细胞悬液的能力确实比较强。５、物理法。直接吹打或用细胞刮子将细胞刮下来。６、冷冻法。此方法仅能用于细胞传代时。无法使组织上的细胞脱落下来。本方法的原理，我想是因细胞冷冻后收缩，从而从培养瓶上脱落下来。优点是：对细胞损伤小，不需要中止或洗细胞，方便，不需要另外配制消化液。特别适用那些贴壁不是特别紧，又特别娇气的细胞。不足是细胞常成小片脱落。此种方法曾用于因用其它方法传代导致大量细胞死亡操作的间充质干细胞、DC细胞的培养，效果非常满意。具体过程是：１、用较多的４度的PBS 洗涤一遍细胞(以６孔板为例，加１.５ml/孔)，２、再加０.５毫升４度的PBS，静置操作台上，很快细胞就小片脱落，３、轻轻吹打，细胞即完全脱落，４、按一定比例传代。
细胞形态特性：详见细胞说明书
JROECL19细胞系相关产品：LC1/Sq细胞、U118细胞、BT483细胞
REC 1细胞系相关产品：HCC-4006细胞、U266B1细胞、HOS (TE85, Clone F5)细胞
OCI-LY-10细胞系相关产品：Tb1Lu细胞、OAW 42细胞、Tn-5细胞
NTera 2/cl.D1细胞系相关产品：H-1155细胞、OVCAR432细胞、ssMCF-7细胞
MES-23.5细胞系相关产品：P3J.HR1K细胞、TMD-8细胞、RT4细胞
MDA435细胞系相关产品：NUGC-3细胞、MFE280细胞、JEG3细胞
H345细胞系相关产品：NPC-TW039细胞、UMR106细胞、P3-X63-Ag8细胞
hCMEC/D3 Cell:永生化人脑微血管内皮细胞系
TEC细胞系相关产品：BNL.CL2细胞、SK Mel 2细胞、LM3细胞
MLA 144细胞系相关产品：ATDC-5细胞、CAL 51细胞、NCI-H1650细胞
WIL2 Secreting细胞系相关产品：H-441细胞、SNU-1细胞、Human fetal lung fibroblast 1细胞
PLA-802细胞系相关产品：BC-025细胞、H1930细胞、SK-ChA1细胞
PSN1细胞系相关产品：SVEC4-10细胞、TOV21G细胞、DiFi细胞
Plaepi 34细胞系相关产品：MDA PCa 2b细胞、NBL_S细胞、CA922细胞
PL12细胞系相关产品：16HBE140细胞、PA-TU-8988S细胞、HIBEpiC细胞
KNS81细胞系相关产品：3T3-J2细胞、LS-513细胞、LUDLU 1细胞
BALB 3T3 clone A31细胞系相关产品：MG-63细胞、PL45细胞、TM-3细胞
BALB 3T3 clone A31细胞系相关产品：MG-63细胞、PL45细胞、TM-3细胞
HFLS细胞系相关产品：MPC11细胞、HCC-9204细胞、HEM细胞
SW1271细胞系相关产品：BT325细胞、P3X63 AG8-653细胞、3T3L1细胞
JB-6 Cl 30细胞系相关产品：U-343 MG细胞、EC-109细胞、V79细胞
Bac12F5细胞系相关产品：RERF-LCMS细胞、WEHI 164细胞、H-28细胞
IOSE 29细胞系相关产品：293-EBNA1细胞、F442A细胞、Hx147细胞
Hs 852.T细胞系相关产品：IR 983F细胞、HS852.T细胞、NTC-200细胞
MDA-MB468细胞系相关产品：MDA MB 453细胞、A375S2细胞、U-343MG细胞
TKB-1细胞系相关产品：Human Embryo Lung-1细胞、AMC-HN-8细胞、KYSE270细胞
PLC8024细胞系相关产品：LS-174T细胞、KYSE30细胞、Panc3_27细胞
Malme-3 M细胞系相关产品：KNS-62细胞、NS1-Ag 4/1细胞、SRS-82细胞
LTEPsm细胞系相关产品：NCI-H596细胞、ONS76细胞、LC-1/sq细胞
Jurkat 77细胞系相关产品：QBI-293A细胞、M.D. Anderson-Prostate Cancer-2b细胞、Kupffer细胞
Centre Antoine Lacassagne-85-1细胞系相关产品：CHP-212细胞、Caco2BBe细胞、MDA330细胞
CWR22R细胞系相关产品：EAhy926细胞、A72细胞、SK_N_BE2C细胞
UM-UC3细胞系相关产品：HEC1A细胞、H1299细胞、HD-LM-2细胞
MDA-157细胞系相关产品：SJ-RH30细胞、HES [Human embryonic skin fibroblast]细胞、NCIH820细胞
MEF (CF-1)细胞系相关产品：HPDE6c7细胞、RMG-I细胞、1301细胞
rHSC-99细胞系相关产品：624细胞、Onda 11细胞、Panc327细胞
TE-85 clone 5细胞系相关产品：TE6细胞、MRC-5细胞、FT-293细胞
Hs 578.T细胞系相关产品：OUMS-23细胞、CT26WT细胞、UMUC-14细胞
BMF细胞系相关产品：TK10细胞、SW 1990细胞、N9细胞
H-220细胞系相关产品：Cor L51细胞、SV-HUC-1细胞、PK 15细胞
RSC-364细胞系相关产品：NCI-H-128细胞、KMBC细胞、MES-SA细胞
OVCA-432细胞系相关产品：MRC-5细胞、NCI-H209细胞、SCC90细胞
Verda reno细胞系相关产品：Roswell Park Memorial Institute 1788细胞、H9c2(2-1)细胞、KG1A细胞
RM-1细胞系相关产品：ChaGo K-1细胞、HOP-92细胞、159PT细胞
MPC 11细胞系相关产品：KLE细胞、H1105细胞、SEG-1细胞
Hi-five细胞系相关产品：HTh-74细胞、CAL851细胞、NCIH211细胞
SU-DHL-1细胞系相关产品：DU-145细胞、H28细胞、A375-MEL细胞
Panc02-H0细胞系相关产品：PANC-08-13细胞、Y-1细胞、VA-ES-BJ细胞
KMS11细胞系相关产品：B 95-8细胞、HCA-7细胞、RBMEC细胞
C2BBe1细胞系相关产品：PC3-M细胞、GT39细胞、HPAF2细胞
OVISE细胞系相关产品：HCC1954BL细胞、H2087细胞、HM细胞
hCMEC/D3 Cell:永生化人脑微血管内皮细胞系
Emory University-2细胞系相关产品：ME 180细胞、MDA-MB-157细胞、HIT clone T15细胞
RPMI 7666细胞系相关产品：DMS 53细胞、SR-786细胞、SN12C-PM6细胞
LM8细胞系相关产品：ECV 304细胞、PK-13细胞、Centre Antoine Lacassagne-62细胞
SUDHL5细胞系相关产品：T98-G细胞、NEC-8细胞、KP 4细胞
HEK 293-EBNA细胞系相关产品：HIT clone T15细胞、NCIH211细胞、SUM-52-PE细胞
NGP细胞系相关产品：CEM-C1细胞、K299细胞、MRC-9细胞
COLO-741细胞系相关产品：HPAF2细胞、Swiss/3T3细胞、MDA-435细胞
COLO 357细胞系相关产品：MB-49细胞、PC 61-5-3细胞、AR42J细胞
LM6细胞系相关产品：NFS 60细胞、NCI-H735细胞、P30-OHKUBO细胞
MCF.10A细胞系相关产品：HEP-3B2细胞、P1-Raji细胞、F442A细胞
Hela-Ap-1细胞系相关产品：LC-2/ad细胞、HSKMC细胞、MKN1细胞
MBdSMC细胞系相关产品：NCIH810细胞、HFF-1细胞、CHO-ori细胞
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