"KM12-SM Cell:人结肠癌肝转移细胞系
细胞形态：上皮细胞样
细胞生长：贴壁
细胞背景资料：结肠癌
HN6细胞系相关产品：HPB-ALL细胞、NOZ细胞、MOPC细胞
NCI-H2009细胞系相关产品：CHP 212细胞、LS 174T细胞、WEHI3细胞
Dunn LM8细胞系相关产品：343MG细胞、Fortner's melanotic melanoma #3细胞、BMSCs（mBMSCs）细胞
Colo205细胞系相关产品：KBM-7细胞、RAG细胞、MHCC 97细胞
细胞物种来源：人源或鼠源等其它物种来源
KM12-SM Cell:人结肠癌肝转移细胞系
因为细胞生长的时候肯定是要相互联系，大部分的细胞都是要成片生长的，尤其是对于贴壁细胞，单个细胞贴壁之后长着长着就长到一片去了。但是如果是成片的细胞抱团的话，传代后细胞是不能贴壁的，这样抱团的细胞就会死亡。所以，消化传代的时候一定要将细胞消化成单个单个的独立状态，这个啊是非常考究你的功夫的！细胞一旦脱落入悬液里你很难再将他吹打成单个，因为他没有受力点了。很难找到受力点让你对他吹打的力分散开细胞。所以必须要在细胞未脱落之前将其吹打开，受力点就是细胞贴壁的地方。这样你就必须要严格控制好消化的程度啊，这和大师做饭掌握好火候是一样的道理啊。既要消化到容易吹打下来，又不能太过，一吹就整片脱落，要单个单个地往下掉。所以我才要分批分次地加胰酶消化就是为了保证不同生长状态贴壁程度的细胞能够都维持在好的受力点分散开。这个是很重要的一点。尤其是对于某些细胞这一点就是他活去死的致命点。像Caco-２细胞就是如此。另外关于传代很重要一点就是一定不能等到细胞长满的时候才去消化传代。要在细胞长到７０%左右的时候就要传代了，一旦发现细胞生长中已经有叠层生长的时候就要立即进行消化传代。不能再拖了。关于换液传代时候洗瓶的问题。对于用DMEM培养基培养的细胞，你在洗的时候如果是用无血清１６４０去洗细胞在随即后的几次中会比用DMEM洗的长的要好。同样，用１６４０培养的也有这个现象。如果不嫌麻烦的话，可以用PBS来洗，洗的效果和用无血清培养基洗的效果基本上是一样的，对于有些细胞会更胜一筹。洗的目的主要是洗去培养瓶里残留的血清，防止它对胰酶的影响。这样能够保证胰酶的消化能力优先，是很关键的一点。先补充这么多，还会后续更新。再补充一点：传代时PBS洗是很重要的一步，最近发现，用PBS就可以把细胞消化开来。加入PBS放置１０-１５分钟，有些需要更长的时间，等到细胞一个个分离开来的时候，就可以直接吹打下来，但是和胰酶消化一样，要控制好时间，不能时间太过了，要不然损伤细胞，细胞不容易成活，状态容易不好。这个方法对于某些细胞是很管用的。有些细胞用胰酶消化不容易消化成单个的时候，或者临时没有胰酶了，可以选用此方法。不过一定要试试，看是否适合你的细胞。
细胞产品包装：复苏形式：T２５培养瓶(一瓶)或冻存形式：１ml冻存管(两支)
细胞传代方法：１：２-１：３传代；每周换液２-３次。
细胞冻存的步骤：１)选择处于对数生长期的细胞，在冻存前一天换液。将多个培养瓶中的细胞培养液去掉，用０.２５% 胰蛋白酶消化。适时去掉胰蛋白酶，加入少量新培养液。用吸管吸取培养液反复吹打瓶壁上的细胞，使其成为均匀分散的细胞悬液。悬浮生产细胞则不要消化处理。然后将细胞收集于离心管中离心(１０００r/min，１０分钟)；２)去上清液，加入含２０%小牛血清的完全培养基，于４℃预冷１５分钟后，逐滴加入已无菌的DMSO或甘油，用吸管轻轻吹打使细胞均匀，细胞浓度为５×１０６～１×１０７/mL之间。(冻存培养液的配置是不是一定要用小牛血清呢？答案是不一定的，具体要看培养的细胞类型来选择；３)将分装上述细胞悬液于２ml冻存管中，每管０.２５ml。冻存管要将盖子盖紧，并标记好细胞名称和冻存日期，同时作好登记(日期、细胞种类及代次、冻存支数)；４)将装好细胞的冻存管放到冻存盒中，-８０℃冰箱过夜。；如果有程序降温器(放在-８０℃冰箱过夜，放入液氮罐);或者可以在４℃，２h;然后转到-２０℃，２h;-８０℃，２h;放入液氮罐；５)细胞冻存在液氮中可以长期保存，但为妥善起见，冻存半年后，取出一只冻存管细胞复苏培养，观察生长情况，然后再继续冻存。
细胞来源说明：细胞主要来源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少数国外著名大学建系
SW1783细胞系相关产品：HCT-GEO细胞、HuH-1细胞、LNCaP-C4-2细胞
NCIH2342细胞系相关产品：RTMC细胞、ssMCF-7细胞、CAL148细胞
PCI-SG231细胞系相关产品：HT1376细胞、DU-145细胞、DF1细胞
JM-Jurkat细胞系相关产品：PFSK-1细胞、TE85细胞、Hs274T细胞
MSTO211H细胞系相关产品：NFS-60细胞、SUM-159PT细胞、CATH-a细胞
细胞生长特性：贴壁
KM12-SM Cell:人结肠癌肝转移细胞系
细胞传代培养实验：体外培养的原代细胞或细胞株要在体外持续地培养就必须传代，以便获得稳定的细胞株或得到大量的同种细胞，并维持细胞种的延续。培养的细胞形成单层汇合以后，由于密度过大生存空间不足而引起营养枯竭，将培养的细胞分散，从容器中取出，以１:２或１:３以上的比率转移到另外的容器中进行培养，即为传代培养；细胞“一代”指从细胞接种到分离再培养的一段期间，与细胞世代或倍增不同。在一代中，细胞培增３～６次。细胞传代后，一般经过三个阶段：游离期、指数增生期和停止期。常用细胞分裂指数表示细胞增殖的旺盛程度，即细胞群的分裂相数/１００个细胞。一般细胞分裂指数介于０.２％～０.５％，肿瘤细胞可达３～５％；细胞接种２～３天分裂增殖旺盛，是活力时期，称指数增生期(对数生长期)，适宜进行各种试验。实验步骤：１.将长成的培养细胞从二氧化碳培养箱中取出，在超净工作台中倒掉瓶内的培养液，加入少许消化液。(以液面盖住细胞为宜)，静置５～１０分钟。２.在倒置镜下观察被消化的细胞，如果细胞变圆，相互之间不再连接成片，这时应立即在超净台中将消化液倒掉，加入３～５ml新鲜培养液，吹打，制成细胞悬液。３.将细胞悬液吸出２ml左右，加到另一个培养瓶中并向每个瓶中分别加３ml左右培养液，盖好瓶塞，送回二氧化碳培养箱中，继续进行培养。一般情况，传代后的细胞在２小时左右就能附着在培养瓶壁上，２～４天就可在瓶内形成单层，需要再次进行传代。
细胞形态特性：详见细胞说明书
MLA 144细胞系相关产品：ATDC-5细胞、CAL 51细胞、NCI-H1650细胞
MGH-U3 (RN)细胞系相关产品：P3X63Ag8细胞、MCF-10 Attached细胞、BV-173细胞
Balb/c3T3细胞系相关产品：IPLB-SF 21AE细胞、DLM8细胞、BL6细胞
GM07404A细胞系相关产品：SNU407细胞、HTori-3细胞、CTLL(2)细胞
HEK293-A细胞系相关产品：UPCI:SCC154细胞、H-2170细胞、C-4-I细胞
NCI-H1581细胞系相关产品：ROS1728细胞、NCI-SNU-C2A细胞、GBC-SD细胞
MD Anderson-Metastatic Breast-231细胞系相关产品：95D细胞、Hs 940.T细胞、UACC812细胞
KM12-SM Cell:人结肠癌肝转移细胞系
FRTL 5细胞系相关产品：RAW264细胞、OCI/AML-5细胞、NS1-Ag 4/1细胞
HIEC-6细胞系相关产品：GM04679细胞、SW1573细胞、RPMI2650细胞
H2023细胞系相关产品：SUPT-1细胞、Hmy.2 CIR细胞、H1651细胞
MDCC-MSB1细胞系相关产品：GA10细胞、CHO Lec1细胞、KE-37细胞
SN12PM6细胞系相关产品：COLO679细胞、HeLa细胞、KYSE180细胞
Colon 38细胞系相关产品：SKMEL-31细胞、Ls-174-T细胞、SkMel31细胞
b.End3细胞系相关产品：Calu 6细胞、C1498细胞、8305-C细胞
alpha-TC1-6细胞系相关产品：SW-527细胞、CTV-1细胞、SLK细胞
HTR8细胞系相关产品：JHH2细胞、Farage OL细胞、HDQP1细胞
BC3 H1细胞系相关产品：Hs-27细胞、Los Angeles Prostate Cancer-4细胞、LAC细胞
CG4细胞系相关产品：PaTu 8988s细胞、PLC/PRF/5细胞、HCC1954-BL细胞
OVCAR-5细胞系相关产品：R 1610细胞、Lieming Xu-2细胞、VSC4.1细胞
EU-3细胞系相关产品：PANC0203细胞、Vero 76细胞、DHL-5细胞
K 562细胞系相关产品：Walker/LLC-WRC 256细胞、RPMI2650细胞、H-1568细胞
P3.NS-1/1.Ag4.1细胞系相关产品：BJAB细胞、SKUT1细胞、B16F1细胞
KP-N-RT-BM细胞系相关产品：HCT-116细胞、190PT细胞、VERO C 1008细胞
OVCA-420细胞系相关产品：RIN-m5F细胞、Fetal Rhesus Kidney-4细胞、Pa14C细胞
RCF细胞系相关产品：HA细胞、Malme-3 M细胞、MRASMC细胞
HT 1376细胞系相关产品：PG-4(S+L-)细胞、Panc-327细胞、NCIH1993细胞
TE3细胞系相关产品：HT 1376细胞、NCI-H1650细胞、GL-261细胞
PVEC细胞系相关产品：L-5178-Y细胞、MDAMB453细胞、HeLaS3细胞
MC9细胞系相关产品：CCD1112Sk细胞、KYSE-180细胞、0V-1063细胞
MC3T3E1细胞系相关产品：Panc10.05细胞、RH7777细胞、UT7细胞
NOMO1细胞系相关产品：Keio University-19-19细胞、Evsa T细胞、Kit 225 K6细胞
LC-1-sq细胞系相关产品：RH35细胞、P30OHK细胞、Panc_03_27细胞
NCIH1373细胞系相关产品：H774细胞、BAR-T细胞、OVTOKO细胞
P3X63Ag8细胞系相关产品：HEK293A细胞、SCC-7细胞、SNU407细胞
P19细胞系相关产品：KYSE140细胞、LN-18细胞、L 363细胞
MNNG细胞系相关产品：I90细胞、Clone 929细胞、SW 839细胞
NTHY-ORI3.1细胞系相关产品：hEEC细胞、Mv1Lu细胞、HMy2.CIR细胞
Kit 225细胞系相关产品：NCC-IT细胞、MC3T3-L1细胞、NFHIOSE-29细胞
HCC-1500细胞系相关产品：SKMES1细胞、Nb-2细胞、SW-1783细胞
RS411细胞系相关产品：NT2-D1细胞、LAN-5细胞、HEK293-FT细胞
BALB/3T3 cl. A31细胞系相关产品：RCK-8细胞、HEK 293-F细胞、CTV-1细胞
HT1376细胞系相关产品：RH30SJ细胞、RL-65细胞、NK62a细胞
AN3细胞系相关产品：Kasumi 1细胞、alpha TC1 clone 6细胞、MNNG/HOS Cl #5细胞
HSC5细胞系相关产品：SW 900细胞、AR42J细胞、H-510A细胞
NHEK细胞系相关产品：MDA 435细胞、526 mel细胞、OCI-Ly 18细胞
UCW 100细胞系相关产品：RPTEC/TERT 1细胞、SW839细胞、TCam 2细胞
ZR75_1细胞系相关产品：AML193细胞、CCC-ESF-1细胞、RPMI 2650细胞
Human Foreskin Fibroblast细胞系相关产品：STC-1细胞、LoMeT-ccRcc细胞、H-1882细胞
SK-MEL24细胞系相关产品：IGROV 1细胞、EFM192B细胞、COLO-1细胞
TE354T细胞系相关产品：A2008细胞、RPMI6666细胞、PANC 813细胞
KM12-SM Cell:人结肠癌肝转移细胞系
SKGIIIA细胞系相关产品：Strain L-929细胞、MDAMB415细胞、H1672细胞
Porcine Kidney-15细胞系相关产品：PLA801C细胞、LS-1034细胞、8305C_1细胞
PA12细胞系相关产品：R-1059-D细胞、Tadarida brasiliensis 1 lung细胞、EMT-6细胞
SW626细胞系相关产品：XWLC-05细胞、VMRC-LCD细胞、HCV29细胞
U-87MG细胞系相关产品：D341Med细胞、B16/BL6细胞、TT细胞
NCI-H1793细胞系相关产品：Sol8细胞、Colo-678细胞、H-2135细胞
A375-S2细胞系相关产品：Roswell Park Memorial Institute 7666细胞、SU-DHL-16细胞、C8166细胞
HS852.T细胞系相关产品：HEL-299细胞、NCIH1915细胞、Fetal Rhesus Kidney-4细胞
NIE 115细胞系相关产品：B16-F10-BL6细胞、Bac1 2F5细胞、NCIH1395细胞
NL20SV细胞系相关产品：MA-c细胞、NCI-SNU-398细胞、Jiyoye细胞
IAR-20细胞系相关产品：LM1细胞、VA-ES-BJ细胞、BE(2)-M17细胞
TE5细胞系相关产品：MN-9D细胞、EBTr细胞、HCT_116细胞
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