"RKO-E6 Cell:人结肠癌转基因细胞系
细胞形态:上皮细胞样
细胞生长:贴壁
细胞背景资料:详见相关文献介绍
AtT-20细胞系相关产品:H-1436细胞、HConEpic细胞、A-253细胞
Oka-C1细胞系相关产品:H-719细胞、NCI-H322细胞、HHFK细胞
HL-60 clone15细胞系相关产品:MLOY4细胞、Tn-5B1-4细胞、NIH-OVCAR-3细胞
NCIH1385细胞系相关产品:P 815细胞、NCI H345细胞、Kobe university Oral Squamous Cell culture-2细胞
细胞物种来源:人源或鼠源等其它物种来源
RKO-E6 Cell:人结肠癌转基因细胞系
细胞的冻存:目前,细胞冻存最常用的技术是液氮冷冻保存法,主要采用加适量保护剂的缓慢冷冻法冻存细胞。主要操作步骤为:(1)选择处于对数生长期的细胞,在冻存前一天换液。将多个培养瓶中的细胞培养液去掉,用0.25%胰蛋白酶消化。适时去掉胰蛋白酶,加入少量新培养液。用吸管吸取培养液反复吹打瓶壁上的细胞,使其成为均匀分散的细胞悬液。悬浮生产细胞则不要消化处理。然后将细胞收集于离心管中离心(1000r/min,10分钟)。(2)去上清液,加入含20%小牛血清的完全培养基,于4℃预冷15分钟后,逐滴加入已无菌的DMSO或甘油,用吸管轻轻吹打使细胞均匀,细胞浓度为3×10(6)~1×10(7)/mL之间。(3)将上述细胞分装于安瓿或专用冷冻塑料管中,安瓿装1~1.5mL在火焰喷灯上封口,封口处要完全封闭,圆滑无勾。冷冻管要将盖子盖紧,并标记好细胞名称和冻存日期,同时作好登记(日期、细胞种类及代次、冻存支数)。(4)将装好细胞的安瓿或冻存管装入沙布袋内;置于液氮容器颈口处存放过夜,次日转入液氮中。采用控制降温速度的方法也可采用下列步骤:先将安瓿置入4℃冰箱中2~3小时,再移至冰箱冷冻室内3~4小时,再吊入液氮容器颈气态部分存放2小时,最后沉入液氮中。细胞冻存在液氮中可以长期保存,但为妥善起见,冻存半年后,取出一只安瓿细胞复苏培养,观察生长情况,然后再继续冻存。
细胞产品包装:复苏形式:T25培养瓶(一瓶)或冻存形式:1ml冻存管(两支)
细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。
造成实验室细胞污染常见情况总结:细胞培养中最常见污染的是细菌、真菌和支原体污染。细胞一旦污染,大多数较难处理。那么,哪些情况我们不注意的话就会造成细胞污染呢?我们根据常见细胞培养实验分析总结下。【违规操作】1)为节省时间,有人已经用超净台四个多小时,不开紫外灭菌30min,酒精擦拭后直接开始试验;2)器材或者溶液很久没用,未检测是否污染而直接使用;离心管多次使用,枪头为了方便交叉使用;3)超净台不点酒精灯;点了酒精灯放在右上角,而你在左下角做试验;4)不带手套,徒手操作;5)细胞培养间配备枪式移液器、手术器械、离心机、冰箱等专用仪器设备以及专用的实验服和拖鞋,未定期消毒。专用物品被带出传代细胞使用。培养细胞过程中使用的所有实验用具,如移液管、一次性枪头、一次性塑料离心管、冻存管等未按要求灭菌使用(通常需121°C高压灭菌20分钟后37%烤干备用)。超净台和桌面,东西太多太乱:超净台不是储物箱,什么培养皿、各种规格的板子、枪头就不要堆在超净台!这样就会有许多紫外线顾不到的卫生死角。传代细胞其他的桌面,切忌东西堆积如山,不要将酒精棉球、标签纸、牛皮纸买来后全部堆在传代细胞!一不小心“飘”进你的细胞培养板里,细胞就会养的不好,啥时候死了都不知道!【培养箱太久没清洁】细胞污染了,并非直接扔了培养皿就不管了,首先你还得看看这个恒温培养箱里其他培养皿或孔板里的细胞是否污染,如果有而且好几个板子都有类似的污染块,那很可能是培养箱中的水或者空气污染了,得给培养箱做个大扫除,重新酒精消毒,照紫外;孵箱里的水,水没了要记得加,还得记得十天半个月的就用酒精擦擦托盘。【传代细胞人多口杂,难管理】在传代细胞这种卫生要求高,人多了,不确定因素多了,难以保证试验在无菌条件下操作。出入试验室,实验服当风衣穿,不扣纽扣,不戴,就容易造成细胞污染;超净台做实验时,喜欢说话聊着做试验,要是还不带口罩,里面就有很多细菌等着去攻击你的细胞呢!
细胞来源说明:细胞主要来源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少数国外著名大学建系
HCC2185细胞系相关产品:BEL-7402细胞、CCD-33Co细胞、B16/F0细胞
OVCA433_Bast细胞系相关产品:AE 1201细胞、Bat lung细胞、T1-73细胞
SCL-II细胞系相关产品:C41细胞、LL/2(LLc1)细胞、CCFSTTG1细胞
Hs895.T细胞系相关产品:BMU-S1细胞、D10细胞、H1395细胞
MC-CAR细胞系相关产品:NSH细胞、SKLU1细胞、BE2M17细胞
细胞生长特性:贴壁或悬浮,详见细胞说明书部分
RKO-E6 Cell:人结肠癌转基因细胞系
贴壁细胞的消化方法介绍:1、胰酶。这是用得最多的。一般浓度在0.25-0.5%。作用时间根据细胞种类、作用温度等因素而变化很大,从几分钟到几十分钟不等。0.25%的胰酶作用于单层贴壁的细胞,在37度条件下,一般消化1-5分钟就足够了。终止是用血清。主要作用于细胞间。配制时不能用含、镁的平衡液,否则影响活性。保存于-20度。2、胶原酶。这种方法比较少,一般是用原代培养时,从组织消化下细胞。这种方法作用温和,对细胞损伤较小,但是,价格也较贵。中止同样是用血清。3、EDTA。用得也是非常多。一般浓度在0.02%左右。作用于细胞与间质,对细胞间也有一定作用。注意,它能显著影响pH值,而且在弱碱性条件下才易溶。因此,配制时应调节好酸碱度。它不能被终和。因此,消化下来的细胞要洗一遍。4、商品化的无酶消化液。个人的使用经常觉得对细胞的损伤比较大,但是分离成单细胞悬液的能力确实比较强。5、物理法。直接吹打或用细胞刮子将细胞刮下来。6、冷冻法。此方法仅能用于细胞传代时。无法使组织上的细胞脱落下来。本方法的原理,我想是因细胞冷冻后收缩,从而从培养瓶上脱落下来。优点是:对细胞损伤小,不需要中止或洗细胞,方便,不需要另外配制消化液。特别适用那些贴壁不是特别紧,又特别娇气的细胞。不足是细胞常成小片脱落。此种方法曾用于因用其它方法传代导致大量细胞死亡操作的间充质干细胞、DC细胞的培养,效果非常满意。具体过程是:1、用较多的4度的PBS 洗涤一遍细胞(以6孔板为例,加1.5ml/孔),2、再加0.5毫升4度的PBS,静置操作台上,很快细胞就小片脱落,3、轻轻吹打,细胞即完全脱落,4、按一定比例传代。
细胞形态特性:详见细胞说明书
NCI-H460细胞系相关产品:SK Mel28细胞、NCI-H1793细胞、SW 480细胞
L6细胞系相关产品:SKCO 1细胞、DU4475细胞、Michigan Cancer Foundation-12F细胞
OCI-Ly 19细胞系相关产品:SK-HEP-1细胞、UCLA RO-81-A-1细胞、J 82细胞
Tu177细胞系相关产品:CMT64细胞、Mhh-Call 2细胞、HPDE细胞
H-1734细胞系相关产品:JM-1细胞、3T3NIH细胞、HBL-100细胞
RPMI7951细胞系相关产品:SK-N-BE(2)-C细胞、HT144细胞、TGW-nu细胞
Namalwa细胞系相关产品:A 253细胞、CV-1 in Origin Simian-7细胞、Mc Ardle 7777细胞
RKO-E6 Cell:人结肠癌转基因细胞系
CWR22Rv1细胞系相关产品:NCI-H2110细胞、Det 562细胞、HME-1细胞
DV90细胞系相关产品:SRA01/04 (HLE)细胞、RenCa细胞、373 MG细胞
MD Anderson-Metastatic Breast-415细胞系相关产品:GM17219细胞、UACC-812细胞、D-324 Med细胞
NCIH716细胞系相关产品:GM03573A细胞、3D4/21细胞、AMJ2C8细胞
LC2/Ad细胞系相关产品:RCM1细胞、McG-1细胞、Hep II细胞
Colo-678细胞系相关产品:SupB15WT细胞、Hela-mock细胞、Biopsy xenograft of Pancreatic Carcinoma line-3细胞
Metastatic Variant-522细胞系相关产品:NCI-H2291细胞、GH 3细胞、Granta 519细胞
EC-GI细胞系相关产品:MV-3细胞、PK13细胞、293-GP细胞
QSG7701细胞系相关产品:SKUT-1细胞、CCRF-SB细胞、PGBE1细胞
QSG7701细胞系相关产品:SKUT-1细胞、CCRF-SB细胞、PGBE1细胞
MNNGHOS细胞系相关产品:BIC1细胞、V 79细胞、H28细胞
Hs-729-T细胞系相关产品:RPMI8226细胞、OCILY-10细胞、MM96L细胞
SGC-7901/DDP细胞系相关产品:CCD-841CoTr细胞、DHL5细胞、LLCPK1细胞
VMM-5A细胞系相关产品:CC-LP-I细胞、AtT20细胞、PL-9细胞
SNU-407细胞系相关产品:HCC-44细胞、SK UT 1细胞、TE-1细胞
L5178Y细胞系相关产品:Transformed Human Liver Epithelial-3细胞、J774.A1细胞、PL-5细胞
HEK-A细胞系相关产品:LTPA细胞、VAESBJ细胞、NCIH747细胞
SDBMSC细胞系相关产品:hSCC-25细胞、HSAS4细胞、VMM39细胞
J774A.1细胞系相关产品:32D:cl3细胞、UCLA-SO-14细胞、U-138-MG细胞
VMRC-LCD细胞系相关产品:M059K细胞、NBL-S细胞、NCI-H1522细胞
Pro-Lec1.3C细胞系相关产品:3T3 clone A31细胞、UACC 812细胞、NCI-H1770细胞
H650细胞系相关产品:K1细胞、SK HEP 01细胞、RLE-6TN细胞
CTLL(2)细胞系相关产品:KU-19-19细胞、SLMT-1细胞、MC9细胞
HEL92.1.7细胞系相关产品:MLMEC细胞、MDA157细胞、GM05372细胞
SCL2细胞系相关产品:MD Anderson-Metastatic Breast-415细胞、4175细胞、TFK-1细胞
SNU398细胞系相关产品:G 401细胞、SKUT-1细胞、SK-N-BE(2)-C细胞
HEC-1B细胞系相关产品:HPB/ALL细胞、SW-982细胞、H226细胞
PC615.3细胞系相关产品:HCC827细胞、LIM1215细胞、BEL7402细胞
YES-2细胞系相关产品:NCI-H889细胞、OCI-LY-18细胞、BNL 1MEA.7R.1细胞
AC29细胞系相关产品:HEC-1-B细胞、H8细胞、GM3190细胞
SUM-102细胞系相关产品:H-1651细胞、NRK 49F细胞、SKN-AS细胞
NCIH841细胞系相关产品:C33-A细胞、HARAB细胞、NCI-SNU-761细胞
Jurkat FHCRC细胞系相关产品:SCC-1395细胞、KMY1022细胞、SNK6细胞
P-36细胞系相关产品:HCT_116细胞、Chinese Hamster Ovary细胞、VM-CUB-1细胞
526-mel细胞系相关产品:MMAc-Serum Free细胞、LLC-MK2细胞、JROECL 19细胞
SUP-T1细胞系相关产品:N-2a细胞、A-431细胞、SN12C细胞
Tn5 B1-4细胞系相关产品:CORL51细胞、UCLA-RO 81细胞、B-3细胞
B6Tert-1细胞系相关产品:CEM-0细胞、EL4细胞、SNT8细胞
H341细胞系相关产品:MTEC1细胞、Radiation Effects Research Foundation-Lung Cancer-MS细胞、MDAMB435细胞
751-NA-15细胞系相关产品:SMA-560细胞、SW 480细胞、KYSE 70细胞
GM04671细胞系相关产品:HONE-1细胞、Karpas-299细胞、H735细胞
RDES细胞系相关产品:RC-4B/C细胞、CD 18细胞、BT 549细胞
HFL-I细胞系相关产品:Tregs细胞、HT1376细胞、H-295细胞
RKO-E6 Cell:人结肠癌转基因细胞系
H22细胞系相关产品:KYSE 70细胞、Y3Ag1.2.3细胞、Glioma 261细胞
Ku812细胞系相关产品:VK-2/E6E7细胞、HTh 74细胞、EFM192细胞
RAW264.7细胞系相关产品:SK MEL 5细胞、U-266细胞、Panc02-H0细胞
RetroPack PT67细胞系相关产品:MAD109细胞、CAL78细胞、T84细胞
HT144mel细胞系相关产品:MDAMB435细胞、HPAF细胞、CHL1细胞
HT clone H9细胞系相关产品:AsPC-1细胞、KU-19-19细胞、NCI-H2081细胞
MSB-1细胞系相关产品:WEHI3细胞、MC57细胞、NBL-5细胞
EU-4细胞系相关产品:FUOV1细胞、ZYM-DIEC02细胞、HEK-293F细胞
Kit 225-K6细胞系相关产品:3T3-F442A细胞、PIEC细胞、SK-MEL-3细胞
BEL 7402细胞系相关产品:HTR-8/SVneo细胞、SW403细胞、NT-2细胞
MDAMB361细胞系相关产品:HuH-6细胞、SW1783细胞、HT1080细胞
MGc80-3细胞系相关产品:Hep 3B细胞、IOSE-29细胞、Vero-E6细胞
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