"U2OS Cell:人骨肉瘤细胞系
细胞形态：上皮细胞样
细胞生长：贴壁
细胞背景资料：骨肉瘤；女性
mIMCD-3细胞系相关产品：NIH:OVCAR4细胞、BJA-B细胞、H1882细胞
NTera-2D1细胞系相关产品：HuH7细胞、NALM-6-M1细胞、TKB1细胞
Mouse INsulinoma 6细胞系相关产品：U251MG细胞、H1436细胞、WI38细胞
Baby Hamster Kidney from litter No. 21细胞系相关产品：PCI-4B细胞、KATO III细胞、GFP-Olig2细胞
细胞物种来源：人源或鼠源等其它物种来源
U2OS Cell:人骨肉瘤细胞系
细胞传代时消化的问题：可以这样说，对于需要消化传代的细胞，每一次的消化都是对这个细胞存活与否，状态好与不好最至关重要的考验。很多同学都遇到过这个问题，自己养的细胞开始的几代长的还挺好的，可是穿过几代之后就发现自己的细胞，状态越来越差劲了。对于这个问题，可以非常肯定地说，你的消化环节出问题了。你每一次的消化都让细胞受到较大损伤了。所以，越长越差。在消化的过程中，你加入胰酶后，所有细胞都在被胰酶消化着，但是我们忽视了一个问题就是，细胞的生长状态是不一样的，每一个细胞的贴壁情况也是不一样的，有的贴壁牢固，有的贴壁没有那么牢固的，所以，让所有的细胞消化同样的时间对细胞是不公平的，他们受到了差别待遇当然会有脾气啊。我后来对消化的方法进行了改良。争取做到因材施教呵呵。我称之为“四步消化法”。（以难消化细胞为例）；具体操作：１)首先不加胰酶，倒掉旧培养基加入少量新培养基洗１-２遍，（这是前奏，即为步，目的是将漂浮着的死细胞之类尽量洗掉。２)然后再加入少量新培养基直接吹打一遍，这一遍是把贴壁不牢固的细胞吹打下来。再用培养基洗一遍，两次所得悬液混合传入新瓶。即为第二步（你可以将这些传入新瓶培养，以与后面胰酶消化过的细胞对比观察看谁长的更好一点就知道该细胞对胰酶的敏感度了。）３)吸干净瓶内剩余液体，加入０.３ml左右的胰酶润洗一遍，吸掉弃之，再加入１ml左右的胰酶消化。消化的同时置于显微镜下观察，待细胞与细胞之间间隙明显的时候立即吸掉胰酶与干净子弹头里备用，加入新培养基开始吹打，吹打２-３遍后吸取悬液于试管或新瓶暂存。用２ml左右新培养基洗一遍与前面的混合。（你也可以传入新瓶培养，以与后面及前面的做对比。）这是第三步。４)然后把前面刚吸出来的胰酶重新加进去瓶里继续消化剩余的贴壁牢固的细胞。当然你也可以用新的胰酶，如果你们那比较富裕的话，呵呵。继续镜下观察，待剩余细胞间隙明显，细胞独立开来的时候，吸掉胰酶，加入新培养基吹打。悬液传入新瓶培养（根据实际情况你自己把握）。这是第四步。其实还可以有第五步，对于特别难消化的细胞和对胰酶特别敏感的细胞的话，你可以继续加第五步甚至第六步。为了细胞更好的状态，更漂亮的样子，没办法，你必须分多批多次消化，这样才能限度地将胰酶对细胞的损伤降到最低，保证细胞的状态能够。当然了，如果细胞是属于那种很容易消化的细胞，像RAW２６４.７，仅仅第二步就搞定了。就没必要第三步第四步了。这个是需要你在实验中能够自己用心去体会的。建议你接受一个新细胞时把各步消化的细胞分别培养起来做比较，去摸索好细胞对胰酶的要求。便于你后续实验的开展。将细胞消化分成这几步，除了是为了避免胰酶对细胞的损伤之外，还有一个更重要的作用就是，可以程度地把细胞吹打成单个单个的状态，不成片不连体。
细胞产品包装：复苏形式：T２５培养瓶(一瓶)或冻存形式：１ml冻存管(两支)
细胞传代方法：１：２-１：３传代；每周换液２-３次。
细胞培养实验中常见问题总结：１)一般客户拿到细胞后，应该注意什么？客户收到细胞后先不开盖，放在培养箱静置若干小时后(看细胞密度而定)在倒置显微镜下观察细胞生长情况，并对细胞进行不同倍数拍照(建议受收细胞后观察培养基的颜色和是否有漏液情况，显微镜下拍细胞１００X，２００X各一张)，排除细胞本身污染的情况；收到细胞未开封，出现污染状况我们负责免费发送一株细胞。收到细胞时如无异常情况，请在显微镜下观察细胞密度，如为贴壁细胞，未超过８０%汇合度时，将培养瓶中培养液吸出，留下１０ml培养液继续培养；超过８０%汇合度时，请按细胞培养条件传代培养。如为悬浮细胞，吸出培养液、１０００转/分钟离心２分钟，吸出上清，管底细胞用新鲜培养基悬浮细胞后移回培养瓶。细胞消化液建议使用PBS配制，慎用Hanks液配制；２)快递细胞多久能到，是寄冻存的细胞还是复苏好的细胞？我们采用快递发货，一般外地２--３天，寄细胞前请确认当地温度，如果气温低于４度的，则采用邮寄冻存细胞；３)可否使用与原先培养条件不同之培养基？不能。每一细胞株均有其特定使用且已适应之细胞培养基，若骤然使用和原先提供之培养条件不同之培养基，细胞大都无法立即适应，造成细胞无法存活；４)可否使用与原先培养条件不同之血清种类？不能。血清是细胞培养上一个极为重要的营养来源，所以血清的种类和品质对于细胞的生长会产生极大的影响。来自不同物种的血清，在一些物质或分子的量或内容物上都有所不同，血清使用错误常会造成细胞无法存活。
细胞来源说明：细胞主要来源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少数国外著名大学建系
CEL细胞系相关产品：FCCH1024细胞、U266S细胞、H-2342细胞
PVEC细胞系相关产品：L-5178-Y细胞、MDAMB453细胞、HeLaS3细胞
H-2081细胞系相关产品：PK 15细胞、NuTu-19细胞、HCC-1569细胞
HO8910PM细胞系相关产品：TGBC-11-TKB细胞、SK.MEL.5细胞、NCI-H220细胞
N1S1细胞系相关产品：NTera2 cl.D1细胞、373MG细胞、RCF细胞
细胞生长特性：贴壁
U2OS Cell:人骨肉瘤细胞系
细胞复苏后贴壁细胞较少的问题分析：总结１：复苏过程没有问题，是否是从液氮拿出直接放入温水，还有培养箱，二氧化碳浓度，培养基、PH值等环节。要么加高浓度FBS １５-２０%，看看能否帮助贴壁，当然也需要考虑血清问题，还有确信拿来的细胞没问题。总结２：首先应该怀疑冻存，实际上复苏出问题的可能非常小，因为操作简单，而且死板。１、你冻存的时候是不是消化的时间过长，这是一般人所注意不到的，即使书上也不讲这个问题，太长的消化时间会让细胞复苏时失去贴壁能力，表现为先贴后死，原因是在你复苏的时候细胞已进入凋亡程序，不可逆转的死亡。２、你的冻存液好不好，是什么，甘油还是DMSO，质量非常重要，否则也会死亡。３、你的冻存液的量加的是不是太多，ATCC推荐是不超过７%，大于５%，太多也不好。４、你在冻存的时候是不是把DMSO混均匀，这个有一些影响，但不算太大。５、你的冻存是否按部就班，就是所温度梯度是不是把握严格，很多人容易忘却这个事情，因为这个东西流程长。６、如果你细胞污染，你是否能很快看到，我比我的导师能早一天看到污染。从这个角度讲建议去除离心这步。７、你的细胞在冻存前是否过密。还有，不赞成孵箱污染这个概念的，所有在一个孵箱里的细胞都污染一个细菌的话，这个细菌是源于孵箱的，但这不代表孵箱污染，因为孵箱无论你如何处理都有大量的细菌，问题在操作。每次污染的原因都要尽可能的找，以后就不犯同样的问题，这个很重要，不能靠猜，否则你就有可能细胞养绝最后换课题，这个见得太多了，别不当会事。
细胞形态特性：详见细胞说明书
MOLT-3细胞系相关产品：HKBML细胞、NE1-E6E7细胞、BEL-7402细胞
LA-N-6细胞系相关产品：NCIH1781细胞、HLEC-SRA 01/04细胞、KLN 205细胞
HOS (TE85, Clone F5)细胞系相关产品：JurkatE6-1细胞、HGE细胞、OCI-Ly03细胞
HMEC-1细胞系相关产品：LICCF细胞、5637细胞、APRE-19细胞
NCIH748细胞系相关产品：A375S2细胞、Central Adrenergic TH-expressing a细胞、SUDHL-10细胞
GBC-SD细胞系相关产品：Alexander细胞、Hx-147细胞、PL5细胞
LM6细胞系相关产品：NFS 60细胞、NCI-H735细胞、P30-OHKUBO细胞
U2OS Cell:人骨肉瘤细胞系
D 407细胞系相关产品：HCT 15细胞、293 HEK细胞、ECC12细胞
Vero E-6细胞系相关产品：OCI-AML4细胞、T84细胞、Walker/LLC-WRC 256细胞
HuTu 80细胞系相关产品：BT483细胞、MPC-83细胞、Nakata-1细胞
HT细胞系相关产品：WM35细胞、MIHA细胞、SNU1细胞
L6565细胞系相关产品：GM00637F细胞、MB157细胞、DU145细胞
FRO81-2细胞系相关产品：RIN-m细胞、SW1088细胞、NCI-H196细胞
Jurkat, Clone E6-1细胞系相关产品：H2452细胞、HEYA8细胞、MC3T3E1细胞
DU 145细胞系相关产品：Fetal Human Lens-124细胞、McA-RH 8994细胞、U118-MG细胞
PANC.1细胞系相关产品：HEK293T/17细胞、Kupffer细胞、SCC 9细胞
Spodoptera frugiperda clone 9细胞系相关产品：IPLB-Sf21细胞、VP 267细胞、KBM5细胞
D-324 Med细胞系相关产品：NCI-SNU-182细胞、HCT-116细胞、H2066细胞
NBL-2细胞系相关产品：NPC-039细胞、Farage Original Line细胞、EFM192B细胞
LLC1细胞系相关产品：JHH-7细胞、MDA-MB435细胞、JROECL33细胞
UMNSAH/DF-1细胞系相关产品：NCM-460细胞、NCIH1666细胞、H-1993细胞
SN12CPM6细胞系相关产品：SV40-HCEC细胞、COLO 320HSR细胞、Hs-274-T细胞
UO31细胞系相关产品：MHH-CALL-2细胞、MV-4:11细胞、293 HEK细胞
C38细胞系相关产品：SUDHL1细胞、NCI-H441-4细胞、RBL 2H3细胞
KYSE 410细胞系相关产品：ZR7530细胞、Dysplastic Oral Keratinocyte细胞、786.O细胞
SK-MEL-28细胞系相关产品：HSF细胞、AQ-Mel细胞、4-1st细胞
IMCD3细胞系相关产品：P560细胞、MKN-1细胞、NCI-H2052细胞
LCD细胞系相关产品：NCI-SNU-520细胞、ISHI细胞、GM12878细胞
GM04671细胞系相关产品：HONE-1细胞、Karpas-299细胞、H735细胞
B16F1细胞系相关产品：870细胞、IPLB-Sf21细胞、BALB/3T3 cl. A31细胞
KM933细胞系相关产品：Psi-2 DAP细胞、SK-Mel1细胞、BT549细胞
PL12细胞系相关产品：16HBE140细胞、PA-TU-8988S细胞、HIBEpiC细胞
Hs675T细胞系相关产品：A2780/CP70细胞、Tu-177细胞、624 MEL细胞
M.D. Anderson-Prostate Cancer-2b细胞系相关产品：1E8-H细胞、H548细胞、Panc-03.27细胞
H82sclc细胞系相关产品：Y 1细胞、SCC-4细胞、Pro-5WgaRI3C细胞
C-33 A细胞系相关产品：ST2细胞、KRC-Y细胞、VP 229细胞
BEL/FU细胞系相关产品：KOSC-2 cl3-43细胞、HBL1细胞、RT-BM细胞
A2780S细胞系相关产品：OE-33细胞、3T3 clone A31细胞、WSU-DLCL2细胞
TKB1细胞系相关产品：Anip[973]细胞、GM05862细胞、NCI-H1694细胞
SUM 52细胞系相关产品：MDA415细胞、SU86-86细胞、SKRC-20细胞
H676细胞系相关产品：HCC38细胞、SKMES-1细胞、BC-025细胞
Human Microglia Clone 3细胞系相关产品：HCC2108细胞、SCL2细胞、32Dcl3细胞
H1930细胞系相关产品：NB.4细胞、HPBALL细胞、HuTu 80细胞
C4I细胞系相关产品：V 79-4细胞、SL-1细胞、MUM2B细胞
TE12细胞系相关产品：UMNSAH/DF#1细胞、Rat podocyte细胞、OCI-Ly 1细胞
DMS-273细胞系相关产品：Hs840_T细胞、2780细胞、201T细胞
MDA-MB-435S细胞系相关产品：Hs_578t细胞、EoL-1 cell细胞、G402细胞
D407 RPE细胞系相关产品：NCI H508细胞、SuDHL 10细胞、GM05384细胞
LL/2(LLc1)细胞系相关产品：CHL/IU细胞、MDA-MB-361细胞、SW 1463细胞
RFL 6细胞系相关产品：BT 325细胞、HEC1-A细胞、SUM52细胞
U2OS Cell:人骨肉瘤细胞系
H-28细胞系相关产品：NCIH2126细胞、NCI-H2228细胞、UACC-812细胞
TE3细胞系相关产品：HT 1376细胞、NCI-H1650细胞、GL-261细胞
HM细胞系相关产品：HCC1143细胞、P388D1细胞、SK-Mel 1细胞
EAHY-926细胞系相关产品：TCCPAN2细胞、RMS13细胞、RKOAS451细胞
HOS-MNNG细胞系相关产品：GB1细胞、HUC细胞、H187细胞
5-8F细胞系相关产品：Hs852细胞、TE1细胞、NCI-H1417细胞
MNNG-HOS (TE 85, clone F-5)细胞系相关产品：SHP-77细胞、JF305细胞、SKMEL28细胞
SW780细胞系相关产品：TOV-21G细胞、EB3 [Human Burkitt lymphoma]细胞、Vero E6细胞
Caco2BBe细胞系相关产品：Tn-5B1-4细胞、OVCAR4细胞、LS174T细胞
SNU-C1细胞系相关产品：NGP细胞、GLAG-66细胞、Ly7细胞
RAW2647细胞系相关产品：P30/OHK细胞、0V-1063细胞、SNU520细胞
H-9细胞系相关产品：NCI-H1648细胞、HEK293E细胞、MNNG/HOS Cl #5细胞
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