"MC3T3-E1 Subclone 14 Cell:小鼠颅顶前骨细胞系
细胞形态：上皮细胞样
细胞生长：贴壁
细胞背景资料：该细胞是从克隆的但是表型各异的MC３T３-E１细胞系中分离出一系列亚克隆。从含抗坏血酸培养基生长的成骨细胞中选择高或低成骨细胞分化、矿化的亚克隆。 MC３T３亚克隆４（ATCC CRL-２５９３）和MC３T３亚克隆１４（ATCC CRL-２５９４）在抗坏血酸和３到４mM无机盐中生长表现出高水平的成骨细胞分化。 它们１０天后形成一个矿化良好的细胞外基质（ECM）。MC３T３亚克隆２４（ATCC CRL-２５９４）和MC３T３亚克隆３０（ATCC CRL-２５９６）在抗坏血酸中生长表现出很差的成骨细胞分化
H2172细胞系相关产品：alphaTC clone 6细胞、Med 341细胞、MKN74细胞
HSC-6细胞系相关产品：PC3M-2B4细胞、OVCAR.8细胞、Ca Ski细胞
OVCAR-420细胞系相关产品：LICR-HN-6细胞、MDA435细胞、SNU-216细胞
Rh30细胞系相关产品：HT 115细胞、Ramos.G6.C10细胞、JM-Jurkat细胞
细胞物种来源：人源或鼠源等其它物种来源
MC3T3-E1 Subclone 14 Cell:小鼠颅顶前骨细胞系
因为细胞生长的时候肯定是要相互联系，大部分的细胞都是要成片生长的，尤其是对于贴壁细胞，单个细胞贴壁之后长着长着就长到一片去了。但是如果是成片的细胞抱团的话，传代后细胞是不能贴壁的，这样抱团的细胞就会死亡。所以，消化传代的时候一定要将细胞消化成单个单个的独立状态，这个啊是非常考究你的功夫的！细胞一旦脱落入悬液里你很难再将他吹打成单个，因为他没有受力点了。很难找到受力点让你对他吹打的力分散开细胞。所以必须要在细胞未脱落之前将其吹打开，受力点就是细胞贴壁的地方。这样你就必须要严格控制好消化的程度啊，这和大师做饭掌握好火候是一样的道理啊。既要消化到容易吹打下来，又不能太过，一吹就整片脱落，要单个单个地往下掉。所以我才要分批分次地加胰酶消化就是为了保证不同生长状态贴壁程度的细胞能够都维持在好的受力点分散开。这个是很重要的一点。尤其是对于某些细胞这一点就是他活去死的致命点。像Caco-２细胞就是如此。另外关于传代很重要一点就是一定不能等到细胞长满的时候才去消化传代。要在细胞长到７０%左右的时候就要传代了，一旦发现细胞生长中已经有叠层生长的时候就要立即进行消化传代。不能再拖了。关于换液传代时候洗瓶的问题。对于用DMEM培养基培养的细胞，你在洗的时候如果是用无血清１６４０去洗细胞在随即后的几次中会比用DMEM洗的长的要好。同样，用１６４０培养的也有这个现象。如果不嫌麻烦的话，可以用PBS来洗，洗的效果和用无血清培养基洗的效果基本上是一样的，对于有些细胞会更胜一筹。洗的目的主要是洗去培养瓶里残留的血清，防止它对胰酶的影响。这样能够保证胰酶的消化能力优先，是很关键的一点。先补充这么多，还会后续更新。再补充一点：传代时PBS洗是很重要的一步，最近发现，用PBS就可以把细胞消化开来。加入PBS放置１０-１５分钟，有些需要更长的时间，等到细胞一个个分离开来的时候，就可以直接吹打下来，但是和胰酶消化一样，要控制好时间，不能时间太过了，要不然损伤细胞，细胞不容易成活，状态容易不好。这个方法对于某些细胞是很管用的。有些细胞用胰酶消化不容易消化成单个的时候，或者临时没有胰酶了，可以选用此方法。不过一定要试试，看是否适合你的细胞。
细胞产品包装：复苏形式：T２５培养瓶(一瓶)或冻存形式：１ml冻存管(两支)
细胞传代方法：１：２-１：３传代；每周换液２-３次。
细胞培养实验中常见问题总结：１)一般客户拿到细胞后，应该注意什么？客户收到细胞后先不开盖，放在培养箱静置若干小时后(看细胞密度而定)在倒置显微镜下观察细胞生长情况，并对细胞进行不同倍数拍照(建议受收细胞后观察培养基的颜色和是否有漏液情况，显微镜下拍细胞１００X，２００X各一张)，排除细胞本身污染的情况；收到细胞未开封，出现污染状况我们负责免费发送一株细胞。收到细胞时如无异常情况，请在显微镜下观察细胞密度，如为贴壁细胞，未超过８０%汇合度时，将培养瓶中培养液吸出，留下１０ml培养液继续培养；超过８０%汇合度时，请按细胞培养条件传代培养。如为悬浮细胞，吸出培养液、１０００转/分钟离心２分钟，吸出上清，管底细胞用新鲜培养基悬浮细胞后移回培养瓶。细胞消化液建议使用PBS配制，慎用Hanks液配制；２)快递细胞多久能到，是寄冻存的细胞还是复苏好的细胞？我们采用快递发货，一般外地２--３天，寄细胞前请确认当地温度，如果气温低于４度的，则采用邮寄冻存细胞；３)可否使用与原先培养条件不同之培养基？不能。每一细胞株均有其特定使用且已适应之细胞培养基，若骤然使用和原先提供之培养条件不同之培养基，细胞大都无法立即适应，造成细胞无法存活；４)可否使用与原先培养条件不同之血清种类？不能。血清是细胞培养上一个极为重要的营养来源，所以血清的种类和品质对于细胞的生长会产生极大的影响。来自不同物种的血清，在一些物质或分子的量或内容物上都有所不同，血清使用错误常会造成细胞无法存活。
细胞来源说明：细胞主要来源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少数国外著名大学建系
Centre Antoine Lacassagne-33细胞系相关产品：Det. 562细胞、MV522细胞、MAC1细胞
H-2198细胞系相关产品：KMS-11细胞、NCCIT细胞、JJN-3细胞
SMMC-7721细胞系相关产品：CCD841CoN细胞、NCIH1651细胞、L Wnt-3A细胞
GM03569细胞系相关产品：UCLA NPA-87-1细胞、NCIH3255细胞、BV2细胞
Vero from pool #76细胞系相关产品：TM-3细胞、DoTc2 4510细胞、HCE-2 [50.B1]细胞
细胞生长特性：贴壁
MC3T3-E1 Subclone 14 Cell:小鼠颅顶前骨细胞系
细胞复苏后贴壁细胞较少的问题分析：总结１：复苏过程没有问题，是否是从液氮拿出直接放入温水，还有培养箱，二氧化碳浓度，培养基、PH值等环节。要么加高浓度FBS １５-２０%，看看能否帮助贴壁，当然也需要考虑血清问题，还有确信拿来的细胞没问题。总结２：首先应该怀疑冻存，实际上复苏出问题的可能非常小，因为操作简单，而且死板。１、你冻存的时候是不是消化的时间过长，这是一般人所注意不到的，即使书上也不讲这个问题，太长的消化时间会让细胞复苏时失去贴壁能力，表现为先贴后死，原因是在你复苏的时候细胞已进入凋亡程序，不可逆转的死亡。２、你的冻存液好不好，是什么，甘油还是DMSO，质量非常重要，否则也会死亡。３、你的冻存液的量加的是不是太多，ATCC推荐是不超过７%，大于５%，太多也不好。４、你在冻存的时候是不是把DMSO混均匀，这个有一些影响，但不算太大。５、你的冻存是否按部就班，就是所温度梯度是不是把握严格，很多人容易忘却这个事情，因为这个东西流程长。６、如果你细胞污染，你是否能很快看到，我比我的导师能早一天看到污染。从这个角度讲建议去除离心这步。７、你的细胞在冻存前是否过密。还有，不赞成孵箱污染这个概念的，所有在一个孵箱里的细胞都污染一个细菌的话，这个细菌是源于孵箱的，但这不代表孵箱污染，因为孵箱无论你如何处理都有大量的细菌，问题在操作。每次污染的原因都要尽可能的找，以后就不犯同样的问题，这个很重要，不能靠猜，否则你就有可能细胞养绝最后换课题，这个见得太多了，别不当会事。
细胞形态特性：成纤维细胞样
NCIH2029细胞系相关产品：16-HBE细胞、CFPAC1细胞、Transformed Human Liver Epithelial-3细胞
143BTK-细胞系相关产品：H9细胞、NCIH1770细胞、HCEC细胞
Med 341细胞系相关产品：373MG细胞、HG2855细胞、U-87 MG细胞
SJRH 30细胞系相关产品：NCI-H498细胞、GA-10(Clone 4)细胞、HVSMC细胞
H-2126细胞系相关产品：A253细胞、VCaP细胞、Be Wo细胞
JROECL 33细胞系相关产品：HOCF细胞、BHK细胞、C3H10T1/2CL8细胞
IPLB-Sf21AE细胞系相关产品：NCI-H378细胞、NCI-SNU-520细胞、hFOB细胞
MC3T3-E1 Subclone 14 Cell:小鼠颅顶前骨细胞系
MC-3T3细胞系相关产品：CESS细胞、A-172MG细胞、RFL 6细胞
KYSE 410细胞系相关产品：ZR7530细胞、Dysplastic Oral Keratinocyte细胞、786.O细胞
Daudi细胞系相关产品：SW 837细胞、SK-Mel 1细胞、NKM1细胞
H2342细胞系相关产品：HGE细胞、3AA细胞、MC 3T3-E1细胞
JM-1细胞系相关产品：RPMI No. 1846细胞、Clone Y-1细胞、H7721细胞
COC1/CDDP细胞系相关产品：UCLA RO-81A-1细胞、IFRS1细胞、DHL-6细胞
GCT细胞系相关产品：BRL-3A细胞、M1细胞、EFM-192B细胞
VSC4.1细胞系相关产品：UCH-1细胞、KE-37细胞、118 MG细胞
HIT T15细胞系相关产品：SuDHL 8细胞、DH82细胞、TCMK-1细胞
HIT T15细胞系相关产品：SuDHL 8细胞、DH82细胞、TCMK-1细胞
hTERT-HME1细胞系相关产品：A-673细胞、COLO 320 HSR细胞、NL-20细胞
H-1793细胞系相关产品：ECC-10细胞、Swiss 3T6细胞、SCC-25细胞
RetroPack PT67细胞系相关产品：MAD109细胞、CAL78细胞、T84细胞
NIH-3T3细胞系相关产品：TM-4细胞、CAL-85-1细胞、HA1800细胞
U14细胞系相关产品：IFRS1细胞、DR2R 1610细胞、H-1838细胞
Caco-2/BBe 1细胞系相关产品：SW620细胞、RA-FLSs细胞、SK HEP-1细胞
MV-4-11细胞系相关产品：OCILY-3细胞、SPC-A1细胞、UACC-893细胞
LICCF细胞系相关产品：Emory University-3细胞、DB细胞、EJ1细胞
H2330细胞系相关产品：MeT-5A细胞、OEC19细胞、hTERTHME1细胞
MRC-9细胞系相关产品：NCIH1155细胞、Hep-3B细胞、SNU-C2A细胞
OUMS-23细胞系相关产品：210RCY3-Ag1.2.3细胞、SF 763细胞、COLO206F细胞
Me Wo细胞系相关产品：MDAMB453细胞、SUM 159PT细胞、SW 1417细胞
H2066细胞系相关产品：H889细胞、T-84细胞、PLA802细胞
KYSE450细胞系相关产品：NALM 6细胞、HEK293FT细胞、KMBC细胞
3T3(A31)细胞系相关产品：MKN-1细胞、H-548细胞、PL-11细胞
LS174T细胞系相关产品：Rat Lung-65细胞、Ra #1细胞、P3/X63/Ag8细胞
VMM39细胞系相关产品：A498细胞、SK-ML2细胞、KCL22细胞
P36细胞系相关产品：MGSMC细胞、NCIH2227细胞、NHDF细胞
RBVEC细胞系相关产品：OCI AML2细胞、HDLM2细胞、HBZY 1细胞
H-1793细胞系相关产品：ECC-10细胞、Swiss 3T6细胞、SCC-25细胞
WM 239A细胞系相关产品：WEHI 164 TC细胞、NCI-H1672细胞、JHH-2细胞
CHP212细胞系相关产品：CTV1细胞、T-98细胞、Farage Original Line细胞
NCIH1385细胞系相关产品：P 815细胞、NCI H345细胞、Kobe university Oral Squamous Cell culture-2细胞
MLE12细胞系相关产品：KATO 3细胞、Hs 606.T细胞、SK-ES1细胞
Kobe university Oral Squamous Cell culture-2细胞系相关产品：SHEE细胞、NCI-H660细胞、NS-1-Ag4-1细胞
OCI-Ly 3细胞系相关产品：32Dc3细胞、LA 4细胞、SR-786细胞
H-524细胞系相关产品：SRA01/04细胞、FC33细胞、Rat Glomerular Endothelial细胞
OCI-AML-3细胞系相关产品：HS-294T细胞、MHCC-97细胞、UMUC3细胞
ND7/23细胞系相关产品：BA/F3细胞、LN229细胞、P3X63 Ag8细胞
NCIH522细胞系相关产品：Pa16C细胞、CAL 120细胞、OVCAR433细胞
COLO 205细胞系相关产品：H4-II-E细胞、SUM 102PT细胞、COLO_320DM细胞
KMH2细胞系相关产品：SKNBE(2)细胞、ARIP细胞、PG-4 (S+L-)细胞
AMC-HN8细胞系相关产品：Hs746T细胞、LTEP-a-2细胞、PC3M细胞
MC3T3-E1 Subclone 14 Cell:小鼠颅顶前骨细胞系
Colon38细胞系相关产品：H125细胞、RC13细胞、JF305细胞
TMK1细胞系相关产品：HMEC细胞、NCIH1819细胞、RSC-96细胞
Strain L-929细胞系相关产品：LED-WiDr细胞、H1915细胞、MT-4细胞
HEK 293-F细胞系相关产品：TR 146细胞、Chang liver细胞、RPMI No. 1846细胞
ZR-75-30细胞系相关产品：EBC-1/original细胞、SiHa细胞、EAC-E2G8细胞
HCC-1171细胞系相关产品：MCF-10A细胞、LNCaP.FGC细胞、FDC-P1细胞
EU-4细胞系相关产品：FUOV1细胞、ZYM-DIEC02细胞、HEK-293F细胞
AR41P细胞系相关产品：SW527细胞、P3/X63/Ag8.653细胞、EC-GI-10细胞
SUM52PE细胞系相关产品：AtT-20细胞、451Lu细胞、JM1细胞
NCI-H2107细胞系相关产品：MCF-7/ADR-RES细胞、COLO206F细胞、K422细胞
PATU-S细胞系相关产品：SHZ-88细胞、NCI-460细胞、SW620细胞
MV4;11细胞系相关产品：Transformed Human Liver Epithelial-2细胞、CEM.C1细胞、L 428细胞
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