"KYSE-30 Cell:人食道癌细胞系
细胞形态：上皮细胞样
细胞生长：贴壁
细胞背景资料：来源于一位６４岁，患有高分化的中段食管鳞癌的男性患者。
NCI-1155细胞系相关产品：GM05372细胞、MCF7-GFP细胞、102PT细胞
PC-3M IE8细胞系相关产品：Vertebral Cancer of the Prostate细胞、MRC-V细胞、AML-12细胞
Baby Hamster Kidney-21细胞系相关产品：UMC-11细胞、SW527细胞、HCC4006细胞
RM1细胞系相关产品：NCIH208细胞、RAMSCs细胞、CFPAC-1细胞
细胞物种来源：人源或鼠源等其它物种来源
KYSE-30 Cell:人食道癌细胞系
细胞的冻存：目前，细胞冻存最常用的技术是液氮冷冻保存法，主要采用加适量保护剂的缓慢冷冻法冻存细胞。主要操作步骤为：(１)选择处于对数生长期的细胞，在冻存前一天换液。将多个培养瓶中的细胞培养液去掉，用０.２５%胰蛋白酶消化。适时去掉胰蛋白酶，加入少量新培养液。用吸管吸取培养液反复吹打瓶壁上的细胞，使其成为均匀分散的细胞悬液。悬浮生产细胞则不要消化处理。然后将细胞收集于离心管中离心(１０００r/min，１０分钟)。(２)去上清液，加入含２０%小牛血清的完全培养基，于４℃预冷１５分钟后，逐滴加入已无菌的DMSO或甘油，用吸管轻轻吹打使细胞均匀，细胞浓度为３×１０(６)～１×１０(７)/mL之间。(３)将上述细胞分装于安瓿或专用冷冻塑料管中，安瓿装１～１.５mL在火焰喷灯上封口，封口处要完全封闭，圆滑无勾。冷冻管要将盖子盖紧，并标记好细胞名称和冻存日期，同时作好登记(日期、细胞种类及代次、冻存支数)。(４)将装好细胞的安瓿或冻存管装入沙布袋内;置于液氮容器颈口处存放过夜，次日转入液氮中。采用控制降温速度的方法也可采用下列步骤：先将安瓿置入４℃冰箱中２～３小时，再移至冰箱冷冻室内３～４小时，再吊入液氮容器颈气态部分存放２小时，最后沉入液氮中。细胞冻存在液氮中可以长期保存，但为妥善起见，冻存半年后，取出一只安瓿细胞复苏培养，观察生长情况，然后再继续冻存。
细胞产品包装：复苏形式：T２５培养瓶(一瓶)或冻存形式：１ml冻存管(两支)
细胞传代方法：１：２-１：３传代；每周换液２-３次。
培养细胞真的不难，最关键几点：１)所有的东西使用，如果你用的血清、培养皿、培养基、胰酶什么的都是进口的，真的很难相信你会把细胞养坏；２)动作要快，胰酶消化，换液什么，细胞暴露在空气中的时间越少越好。另外，要掌握好胰酶消化时间，所谓的细胞状态差，很多时候是传代的原因；３)有时间的话，需要细胞计数，传相应数目的细胞到培养皿中，可以大致清楚细胞的生长曲线，不会临时要处理，手足无措；４)要做什么心里要非常清楚，合理安排时间，传代细胞的实验穿插进行，可以节省很多时间，也不会耽误别人的实验；５)个人的实验器具自己收一套，不要和别人混用，最近换了什么新的东西稍微记一下，试剂一旦怀疑污染，马上丢；６)传代细胞不能进去太多人，避免相互干扰。每天对待细胞比孝敬爹妈还用心，那真是捧在手里怕碎了，含在嘴里怕化了，看在眼里怕丢了，培养细胞时有哪些经验教训可以分享呢?１)严格无菌操作，多喷喷酒精，要是对灭菌的东西不放心，自己包自己送自己烘干；２)不要和别人共用试剂耗材，自己准备一套；３)有可能的话在拿到新细胞的时候做好支原体衣原体检测；４)水浴锅很脏，生化培养箱要是得手动加湿的话盘里的水也会很脏，勤换(灭菌水加进去)；５)晚上离开的时候给传代细胞照紫外，超净台是用完就开；６)是同一时间就你一个人在用传代细胞在养细胞。
细胞来源说明：细胞主要来源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少数国外著名大学建系
NCIH460细胞系相关产品：Panc02-H0细胞、COLO-357细胞、NCIH292细胞
ST2细胞系相关产品：R D细胞、RS4:11细胞、Hs675细胞
KM933细胞系相关产品：Psi-2 DAP细胞、SK-Mel1细胞、BT549细胞
MHCC97H细胞系相关产品：Melanoma 14细胞、M-O7e细胞、H2030细胞
H-2195细胞系相关产品：H-226细胞、Hs683细胞、D324 Med细胞
细胞生长特性：贴壁
KYSE-30 Cell:人食道癌细胞系
细胞复苏相关注意事项：１.取细胞的过程中注意带好防冻手套，护目镜。此项尤为重要，细胞冻存管可能漏入液氮，解冻时冻存管中的气温急剧上升，可导致爆炸。２.冻存液的问题：冻存液的配置已是常识，在这里不作详述，但二甲基亚砜(DMSO )对细胞不是完全无毒副作用，在常温下，二甲基亚砜对细胞的毒副作较大，因此，必须在１-２min内使冻存液完全融化。如果复苏温度太慢，会造成细胞的损伤，二甲基亚砜(DMSO)选择进口产品。３.离心前须加入少量培养液。细胞解冻后二甲基亚砜浓度较高，注意加入少量培养液可稀释其浓度，以减少对细胞的损伤。４.离心问题：目前主要有两种见解。一种是解冻后的细胞悬液直接吹打均匀后分装到培养瓶中进行培养，第二天换液。因为离心的目的是两个，去除DMSO，去除死细胞，这个是标准流程，但对一般人来说，把握不好离心转速和时间，转的不够活细胞沉底的少，细胞就全被扔掉了，转过了活细胞会受压过大，死亡。此外在操作过程中容易污染，所以不推荐。另一种说法为细胞悬液中含有二甲基亚砜(DMSO)，DMSO对细胞有一定的毒副作用，所以须将离心后的液体前倒净，且一定倒干净。我在试验中按照常规的离心分装的方法进行复苏，结果无异常。５.细胞贴壁少的问题：教科书中说明冻存细胞解冻时１ml细胞液要加１０ml-１５ml培养液，而在我的试验中的经验总结为培养基越少细胞越容易贴附。６.复苏细胞分装的问题：试验中我的经验总结为复苏１管细胞一般可分装到１-２只培养瓶中，分装过多，细胞浓度过低，不利于细胞的贴壁。７.加培养基的量放入问题：这个量的多少的把握主要涉及到的问题DMSO的浓度，从如果你加培养基的太少，那么DMSO的浓度就会比较大，就会影响细胞生长，从以前的资料来看，DMSO的浓度在小于０.５%的时候对一般细胞没有什么影响，还有一个说法是１%。所以如果你的冻存液的浓度是１０%DMSO的话那么加１０ml以上的培养基就恰好稀释到了无害浓度。
细胞形态特性：上皮细胞样
alpha TC1 clone 6细胞系相关产品：Leukemic 1210细胞、COLO-320-HSR细胞、H19-7细胞
HS 445T细胞系相关产品：MDA.MB.435细胞、PK15细胞、L-cells细胞
NIT-1细胞系相关产品：NPA 87细胞、Co-115细胞、HCC202细胞
HBMEC细胞系相关产品：LNCaP clone FGC细胞、U-266 AR1细胞、LS-174T细胞
Hs742T细胞系相关产品：Colo741细胞、CEM-C7细胞、SUM190PT细胞
COR-L88细胞系相关产品：FLC-7细胞、JCA1细胞、H-1385细胞
BAEC细胞系相关产品：C28/I2细胞、H295细胞、LK2细胞
KYSE-30 Cell:人食道癌细胞系
Evsa-T细胞系相关产品：PC-9S1细胞、C42细胞、NCI-H1703细胞
3T3-L1 ad细胞系相关产品：D-283 Med细胞、Hs 819.T细胞、H2009细胞
R-1059-D细胞系相关产品：DanG细胞、C41细胞、RBL-1细胞
CCC-HHM-2细胞系相关产品：CL40细胞、NCIH2171细胞、CCD19-Lu细胞
H-2087细胞系相关产品：PL-12细胞、NIH/3T3细胞、MDA-MB-453细胞
EFM192A细胞系相关产品：X63-Ag8-653细胞、HSC（Human Schwann）细胞、SU-DHL-8细胞
KTC-1细胞系相关产品：RPMI 8226细胞、UMC11细胞、A 375细胞
SUDHL8细胞系相关产品：OCI Ly19细胞、N1E115细胞、GM05887细胞
SY5Y细胞系相关产品：DBTRG-05MG细胞、BHT-101细胞、TE11细胞
Ramos 2G6 4C10细胞系相关产品：PANC-04-03细胞、TE-85细胞、Statens Seruminstitut Rabbit Cornea细胞
H-1734细胞系相关产品：JM-1细胞、3T3NIH细胞、HBL-100细胞
UWB1289细胞系相关产品：A 2780 CP细胞、Panc_05_04细胞、NCIH2081细胞
C-4I细胞系相关产品：BMF细胞、YH-13细胞、Pa18C细胞
RCS细胞系相关产品：A375细胞、GM17219细胞、PANC3.27细胞
DAN-G细胞系相关产品：aNK细胞、MC 3T3-E1细胞、Ramos-2G6-4C10细胞
LN-229细胞系相关产品：RGCs细胞、786-0细胞、hSCC-25细胞
C32-mel细胞系相关产品：GLAG-66细胞、huH 1细胞、WEHI-279细胞
SKMel-5细胞系相关产品：WC00097细胞、Hepatoma-22细胞、HL-1细胞
MES 23.5细胞系相关产品：C2A细胞、Mono Mac6细胞、P3/ag细胞
NCI-H2085细胞系相关产品：L-6细胞、H-7721细胞、HT55细胞
JM1细胞系相关产品：MG-HU-3细胞、MOLT 4细胞、S3-HeLa细胞
KATOIII细胞系相关产品：NCI-841细胞、Z310细胞、NIH:OVCAR-4细胞
Panc-08.13细胞系相关产品：C4-I细胞、Normal Rat, August 3, 1983细胞、MCF 7细胞
16HBE140细胞系相关产品：NCI-SNU-475细胞、LCLC-103H细胞、BTI-TN5B1-4细胞
BC-009细胞系相关产品：MCF-7细胞、L-540细胞、Pt-K1细胞
GM-215细胞系相关产品：H2286细胞、KP-N-YN细胞、MonoMac 6细胞
NTERA2-D1细胞系相关产品：TGBC11TKB细胞、H378细胞、BT-549细胞
A-101D细胞系相关产品：OCI/AML-3细胞、FRTL-5 Cl 2细胞、TE-15细胞
C8166-CD4细胞系相关产品：KRCY细胞、CAL 27细胞、SMMC 7721细胞
HConEpic细胞系相关产品：Vero 76 clone E-6细胞、KP-N-RT细胞、NCIH929细胞
WM-239细胞系相关产品：C8D1A细胞、Kit 225-K6细胞、2PK3细胞
NCI-SNU-601细胞系相关产品：U87 MG细胞、NIH3T3-L1细胞、H2591细胞
C33-A细胞系相关产品：OCI-Ly03细胞、A-498细胞、NGP细胞
MCF7/WT细胞系相关产品：MDAMB134VI细胞、MMAc-Serum Free细胞、C26细胞
L-cell细胞系相关产品：MC116细胞、TW-039细胞、NCI-H1755细胞
SVHUC细胞系相关产品：H-2052细胞、Factor Dependent Cell-Paterson 1细胞、NCI-H716细胞
HPDE细胞系相关产品：PC2细胞、CTSC-3细胞、P3X63 AG 8.653细胞
BV173细胞系相关产品：RGC-5细胞、RBL.2H3细胞、HS-445细胞
SNK-6细胞系相关产品：Turbot Embryonic Cell line细胞、HepaRG细胞、HL1细胞
CATH-a细胞系相关产品：M210B4细胞、HCFB（HCF）细胞、Hs-688A-T细胞
SW 839细胞系相关产品：EL 4细胞、TT细胞、FU-97细胞
CBRH-7919细胞系相关产品：MH-S细胞、J774A.1细胞、BT20细胞
H-1048细胞系相关产品：3T3-442A细胞、C 6细胞、OC316细胞
KYSE-30 Cell:人食道癌细胞系
CC-LP-I细胞系相关产品：MES-SA Dx5细胞、NCIH2052细胞、OVHM细胞
HSC细胞系相关产品：MDAMB435S细胞、AC29细胞、D407 RPE细胞
NW-38细胞系相关产品：Y3-Ag1.2.3细胞、BEAS-2B细胞、Mevo细胞
MDCK (NBL-2)细胞系相关产品：KMS-26细胞、As-PC1细胞、NCI-H69C细胞
GM03671C细胞系相关产品：JTC-28细胞、MCF7ADR细胞、U-118 MG细胞
H69细胞系相关产品：KYSE-50细胞、Ontario Cancer Institute-Acute Myeloid Leukemia-4细胞、PG [Human lung carcinoma]细胞
Panc 8.13细胞系相关产品：BC-3H-1细胞、TOV-112D细胞、Medical Research Council cell strain-5细胞
MHCC-97细胞系相关产品：U-343细胞、LL2细胞、PTK-1细胞
DR2R1610细胞系相关产品：253J细胞、50.B1细胞、Tregs细胞
Lu-99A细胞系相关产品：P3X63 Ag8细胞、HPAF II细胞、CHO K1细胞
RCC 7860细胞系相关产品：COLO-205细胞、WEHI231细胞、CAKI 2细胞
LAPC4细胞系相关产品：EVSAT细胞、hTERT-RPE细胞、JROECL 33细胞
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