"KMB-17 Cell:人二倍体细胞系
细胞形态：上皮细胞样
细胞生长：贴壁
细胞背景资料：详见相关文献介绍
SUD6细胞系相关产品：NCI-H1623细胞、RCS细胞、Walker-256-TC细胞
P3.653细胞系相关产品：Ect1/E6E7细胞、Stanford University-Diffuse Histiocytic Lymphoma-2细胞、H446细胞
TNC-1B12B4细胞系相关产品：Pa18C细胞、G-402细胞、U373MG细胞
RH35细胞系相关产品：Hs606T细胞、SK-N-BE(2)C细胞、HCE-T细胞
细胞物种来源：人源或鼠源等其它物种来源
KMB-17 Cell:人二倍体细胞系
细胞培养过程中相关问题总结：悬浮性细胞应如何继代处理？一般仅需持续加入新鲜培养基于原培养角瓶中，稀释细胞浓度即可，若培养液太多时，可将培养角瓶口端稍微抬高，直到无法容纳为止。分瓶时取出一部份含细胞之培养液至另一新的培养角瓶，加入新鲜培养基稀释至适当浓度，重复前述步骤即可。欲将一般动物细胞离心下来，其离心速率应为多少转速？欲回收动物细胞，其离心速率一般为３００xg(约１,０００rpm)，５-１０分钟，过高之转速，将造成细胞死亡；细胞之接种密度为何？依照细胞株基本数据上之接种密度或稀释分盘之比例接种即可。细胞数太少或稀释的太多亦是造成细胞无法生长之一重要原因；细胞冷冻培养基之成份为何？动物细胞冷冻保存时最常使用的冷冻培养基是含５-１０%DMSO(dimethyl sulfoxide)和９０-９５%原来细胞生长用之新鲜培养基均匀混合之。注意：由于DMSO稀释时会放出大量热能，故不可将DMSO直接加入细胞液中，必须使用前先行配制完成；DMSO之等级和无菌过滤之方式为何？冷冻保存使用之DMSO等级，必须为Tissue culture grade之DMSO，其本身即为无菌状况，次开瓶后应立即少量分装于无菌试管中，保存于４°C，避免反复冷冻解冻造成DMSO之裂解而释出有害物质，并可减少污染之机会。若要过滤DMSO，则须使用耐DMSO之Nylon材质滤膜；冷冻保存细胞之方法？冷冻保存方法一：冷冻管置于４°C ３０~６０分钟→ (-２０°C ３０分钟)→-８０°C １６~１８小时(或隔夜)→液氮槽vaporphase长期储存。冷冻保存方法二：冷冻管置于已设定程序之可程序降温机中每分钟降１-３°C至–８０°C以下，再放入液氮槽vapor phase长期储存。-２０°C不可超过１小时，以防止冰晶过大，造成细胞大量死亡，亦可跳过此步骤直接放入-８０°C冰箱中，惟存活率稍微降低一些；细胞欲冷冻保存时，细胞冷冻管内应有多少细胞浓度？冷冻管内细胞数目一般为１x１０(６)cells/ml vial，融合瘤细胞则以５x１０(６)cells/ml vial为宜；应如何避免细胞污染？细胞污染的种类可分成细菌、酵母菌、霉菌、病毒和霉浆菌。主要的污染原因为无菌操作技术不当、操作室环境不佳、污染之血清和污染之细胞等。严格之无菌操作技术、清洁的环境、与品质良好之细胞来源和培养基配制是减低污染之方法；如果细胞发生微生物污染时，应如何处理？直接灭菌后丢弃之。
细胞产品包装：复苏形式：T２５培养瓶(一瓶)或冻存形式：１ml冻存管(两支)
细胞传代方法：１：２传代
细胞常规培养传代流程(请严格遵照无菌操作)：１)吸出原培养瓶中的培养基，PBS缓冲液润洗细胞两次，加２-３ml ０.２５%胰酶进行消化细胞(注意把握消化时间，通常控制在１-２min)；２)镜下观察消化情况，在细胞边缘缩小，贴壁松动时(不建议消化到细胞漂浮)去掉胰酶，加６-８ml完全培养基，轻轻吹打细胞层，尽量把细胞层吹落，吹散；３)取部分细胞悬液转移到新的培养皿/瓶中，添加适当的完全培养基，把细胞悬液打匀，于培养箱中培养；４)注意培养基PH值变化情况，定期换液(每周２-３次)，待细胞密度达到８０%以后重复１项操作或者冻存；特别注意：(如使用公共实验室或者初次接触细胞培养，建议添加双抗培养)１)收到细胞后请尽快更换为含１５%血清的新鲜培养基，如因特殊情况需要继续使用原瓶，请在原瓶培养基中额外添加１０%的血清，(原瓶培养基的继续使用时间最长不宜超过７２小时)；２)贴壁细胞收到当天切忌立刻消化，请将细胞换液后放置培养箱孵育到第二天再做消化传代，请优先选择直径６cm的培养皿进行传代培养；３)如签收时出现培养瓶壁破裂，漏液等情况请及时做好照片记录并联系实验室。
细胞来源说明：细胞主要来源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少数国外著名大学建系
IGROV 1细胞系相关产品：HDF-a细胞、NCI-Hut 125细胞、OLN-93细胞
3T3F442A细胞系相关产品：Microbiological Associates-104细胞、JB-6 Cl 30细胞、NWA细胞
PSN1细胞系相关产品：SVEC4-10细胞、TOV21G细胞、DiFi细胞
Hep-G2/C3A细胞系相关产品：alpha TC1-6细胞、BJA-B-1细胞、aTC1-6细胞
SW-620细胞系相关产品：COR-L51细胞、CHO/dhFr-细胞、SW1088细胞
细胞生长特性：贴壁生长
KMB-17 Cell:人二倍体细胞系
贴壁细胞消化传代时通常采用两种方法：一、加入胰酶等细胞脱落后，再加培养基中止胰酶作用，离心传代；二、加入胰酶后，镜下观察待细胞始脱落时，弃胰酶，加培养液分瓶。但前者太麻烦，而后者有可能对细胞施加胰酶选择，因为总是贴壁不牢的细胞先脱落，对肿瘤细胞来说，这部分细胞有可能是恶性程度较高的细胞亚群。一种简单的消化传代方法。加入PBS洗去血清或加入胰酶先中和血清的作用(３０s)，弃之，再加入适量胰酶作用１０s-４０s(根据细胞消化的难易程度)，弃之，这样依赖残余的胰酶就可将细胞消化单细胞。对于较难消化的细胞，可以用２%利多卡因消化５-８分钟，然后再弃去，加培养基吹打也可以，对细胞的影响不大。不用PBS也不用Hanks洗，只要把旧培养液吸的干净一点，直接加酶消化应该不会有什么问题。弃培养液后，用０.０４%的EDTA冲洗一次，再用１/４v的０.０４%的EDTA室温孵育５min，弃取大部分EDTA，加入与剩余EDTA等量的胰酶(预热)总体积１/１０v。消化到有细胞脱落。不过有人说EDTA对细胞不好，有证据吗？培养的BASMC：倒掉旧培养液加入少量胰酶冲一下，倒掉再加入０.１２５-０.２５%胰酶约６-１０滴或１ml(２５ml bottle)消化再加入适量新培养基中和，并分瓶这种方法简单、省事；效果很好并且不损失细胞！
细胞形态特性：详见细胞说明书
CHL-IU细胞系相关产品：KU-812-F细胞、SK-BR3细胞、QGY-7703细胞
HL60细胞系相关产品：MT-3 [Human leukocytes]细胞、Farage细胞、MDA MB 436细胞
MOLT-3细胞系相关产品：HKBML细胞、NE1-E6E7细胞、BEL-7402细胞
A 172细胞系相关产品：A427细胞、BEAS2B细胞、Tissue Culture-1细胞
IPLB-Sf21细胞系相关产品：OV-2008细胞、HNTEC细胞、KYSE-510细胞
P3/X63-Ag8细胞系相关产品：MHCC 97细胞、MOVAS细胞、HCC-366细胞
NCI-H1694细胞系相关产品：H1048细胞、OKAC1细胞、NCI-H441细胞
KMB-17 Cell:人二倍体细胞系
GC-1细胞系相关产品：Normal Rat Kidney-52E细胞、Hs 695T细胞、GM05372E细胞
MDA MB 453细胞系相关产品：M-G63细胞、T47D:A细胞、C32-mel细胞
Hs840_T细胞系相关产品：LIXC002细胞、578T细胞、EoL-1 cell细胞
H-1299细胞系相关产品：T98G细胞、P116细胞、MFE 296细胞
ES2细胞系相关产品：OCI AML5细胞、ChaGo-K1细胞、32D/cl3细胞
WEHI 164细胞系相关产品：HFLS-OA细胞、H-250细胞、Neuro-2a细胞
HCC4006细胞系相关产品：KAT-5细胞、HCC-94细胞、H-1184细胞
HFLS-OA细胞系相关产品：HFF-1细胞、L5178-R细胞、COV 434细胞
BTI-TN5B1-4细胞系相关产品：HASMC细胞、NTera 2/cl.D1细胞、Human Pancreatic Duct Epithelial细胞
BTI-TN5B1-4细胞系相关产品：HASMC细胞、NTera 2/cl.D1细胞、Human Pancreatic Duct Epithelial细胞
Hepatoma-22细胞系相关产品：NCI.H522细胞、Colo320细胞、B-104细胞
SW1783细胞系相关产品：HCT-GEO细胞、HuH-1细胞、LNCaP-C4-2细胞
PaTu-8988s细胞系相关产品：8305-C细胞、EBC-1/original细胞、SCC154细胞
SHG 44细胞系相关产品：HD-LM-2细胞、Hs840T细胞、RT4-D6P2T细胞
U343MG细胞系相关产品：JM-Jurkat细胞、RPMI 1788细胞、U87-MG细胞
Centre Antoine Lacassagne-39细胞系相关产品：Mv 1 Lu (NBL-7)细胞、High 5细胞、CD 18细胞
VK2 (E6/E7)细胞系相关产品：COLO-320细胞、GM0637细胞、CNE1-LUC细胞
WRL68细胞系相关产品：D-283细胞、H-2107细胞、LC-2/ad细胞
M619细胞系相关产品：H498细胞、PC-10细胞、UM-RC-2细胞
Eca 109细胞系相关产品：HO8910/PM细胞、PC 12细胞、SNU869细胞
NCI-H322细胞系相关产品：CEM-T4细胞、MCA205细胞、BT 20细胞
NCI-H322细胞系相关产品：CEM-T4细胞、MCA205细胞、BT 20细胞
VMM5A细胞系相关产品：CX-1细胞、Fox/NY细胞、7860细胞
GM02132细胞系相关产品：SNU-620细胞、VMM5A细胞、A549ATCC细胞
HS 445T细胞系相关产品：MDA.MB.435细胞、PK15细胞、L-cells细胞
H-1819细胞系相关产品：5637细胞、SKNDZ细胞、OCI-Ly3细胞
NCTC 929细胞系相关产品：Panc02.03细胞、HPMEC细胞、S3 HeLa细胞
P3X63 Ag8细胞系相关产品：H-2291细胞、FCCH1024细胞、SU-DHL6细胞
HIT.T15细胞系相关产品：M3 Clone M-3细胞、H7721细胞、Capan 1细胞
NTera2/D1细胞系相关产品：PK13细胞、LOUNH91细胞、HEK293A细胞
Hs-611-T细胞系相关产品：HCC-202细胞、H-1618细胞、Sol8细胞
SCL-II细胞系相关产品：C41细胞、LL/2(LLc1)细胞、CCFSTTG1细胞
KHYG-1细胞系相关产品：Y3细胞、GM00346细胞、BALB 3T3 clone A31细胞
ECC-1细胞系相关产品：3T3 Swiss Albino细胞、Neuro2a细胞、H2126细胞
H69/P细胞系相关产品：Mo 59J细胞、SNU-1040细胞、HFT-8810细胞
HCC-9724细胞系相关产品：LN299细胞、L-6 myoblast细胞、697细胞
GM05372E细胞系相关产品：SNU423细胞、NBL-7细胞、L5178YR细胞
LS 174 T细胞系相关产品：WILL2细胞、HepG2-luc细胞、MPP89细胞
QBC939细胞系相关产品：HRA-19细胞、TE9细胞、C518细胞
Panc10.05细胞系相关产品：MUGCHOR1细胞、MLE-12细胞、Japanese Tissue Culture-28细胞
Panc10.05细胞系相关产品：MUGCHOR1细胞、MLE-12细胞、Japanese Tissue Culture-28细胞
OCI-Ly01细胞系相关产品：Hs 578Bst细胞、COLO 699细胞、E6-1细胞
HEK-293F细胞系相关产品：Jurkat E6细胞、FTC-133细胞、COLO 320DM细胞
KMB-17 Cell:人二倍体细胞系
SU86.86细胞系相关产品：NT2D1细胞、BIC细胞、H-1435细胞
BE2C细胞系相关产品：H.Ep.-2细胞、DLD1细胞、LA4细胞
HT55细胞系相关产品：SUM 159PT细胞、UM-UC-14细胞、ML-2细胞
SMA 560细胞系相关产品：HPAF-II细胞、H2444细胞、I90细胞
M-1 myeloid leukemia细胞系相关产品：NCI H69细胞、H69/P细胞、RAT2细胞
NK-92MI细胞系相关产品：SLMT1细胞、SUPB-15细胞、NCI-SNU-407细胞
TOV-21G细胞系相关产品：H22-H8D8细胞、H865细胞、SNU-251细胞
H 9细胞系相关产品：Tadarida brasiliensis 1 lung细胞、BE(2)C细胞、P3/NS1/1-Ag4.1细胞
M21细胞系相关产品：NCIH1385细胞、RKO细胞、SKCO 1细胞
Hs746T细胞系相关产品：CEMC1细胞、TE-6细胞、U-87细胞
MDAMB175细胞系相关产品：FCCH1018细胞、Reuber H-35细胞、H292细胞
CP-70细胞系相关产品：MHCC97-H细胞、M-14细胞、NPA'87细胞
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