"SNU-354 Cell:人肝癌细胞系
细胞形态:上皮细胞样
细胞生长:贴壁
细胞背景资料:详见相关文献介绍
OCI/AML-5细胞系相关产品:EC-GI-10细胞、253J-Bladder-V细胞、MHCC97-H细胞
NHLF细胞系相关产品:149PT细胞、A-1847细胞、Anglne细胞
Hamster Islet Transformed-Tioguanine resistant clone 15细胞系相关产品:Hs729T细胞、BMU-S1细胞、Rca-B细胞
SNU-119细胞系相关产品:HL7702细胞、IBRS2细胞、PaCa2细胞
细胞物种来源:人源或鼠源等其它物种来源
SNU-354 Cell:人肝癌细胞系
细胞消化过程总结:其实绝大部分细胞消化的时候是只要用胰酶润洗一遍即可,吸去胰酶后,残留的那些无法计算体积的附着在细胞表面的微量胰酶在37度一般不到2min足够消化细胞(绝大部分1min不到)。对于这些细胞原则上不要用胰酶孵育细胞,连续这样传代,对细胞伤害很大。简单的程序是PBS润洗吸去,胰酶润洗吸去,然后37度消化。2,什么算是消化好了呢?不是细胞全部成间隔分布很离散的单个圆形才算消化好了,一般你肉眼观察贴壁细胞层,只要能移动了,多半呈沙壮移动,其实已经可以了,很多人喜欢把细胞消化或者吹打成完全分离细胞,这是没有必要的。一般能移动了,说明细胞与培养基质材料的附着已经消失了,细胞之间的附着也已经消失了,细胞已经独立分布了(虽然没有呈现很广的离散分布)。这个时候应该停止消化,不要等到看到镜下所有细胞都分离得非常好,间隙很大,才停止。细胞就是完全成单个细胞悬液,之后在贴壁的过程中仍然会聚集,这个是贴壁培养的细胞,尤其是肿瘤细胞的一个特性,无论死活的细胞都是如此,你可以尝试,准备100%的单个细胞悬液,贴壁后观察细胞,仍然是几个几个细胞聚集在一起。一些悬浮培养细胞也是如此,容易聚集,不要去尝试过几个小时就拿出来吹打成单细胞悬液(不要笑,这个是初养悬浮细胞的人常犯的错误,以为悬浮培养就是一个一个分开)。细胞只要能从基质上脱离下来,这个时候即使是成片的(比如Calu-3细胞),吹打不超过20次后(一般10次即可),成小规模聚集(10个细胞左右),是正常的,不要试图再去延长消化时间,或者像有的同学那样吹打1h,等待单细胞悬液出现。比较难消化的细胞(润洗方法5min还不能消化),比如HCT15, LS411和KM12,这样的细胞一般需要用少量胰酶孵育,但也不需要很多,一般100mm dish,一次最多加入500ul,就足够了,一般我加300ul。即使这样难消化的细胞,一般不超过5min,即可见细胞成片移动,就应该停止消化。一些正常细胞也会有难消化的时候,比如tsDC细胞,但也只要用少量胰酶孵育,3min左右即可看到成片沙状移动。
细胞产品包装:复苏形式:T25培养瓶(一瓶)或冻存形式:1ml冻存管(两支)
细胞传代方法:1:2传代
细胞冻存的步骤:1)选择处于对数生长期的细胞,在冻存前一天换液。将多个培养瓶中的细胞培养液去掉,用0.25% 胰蛋白酶消化。适时去掉胰蛋白酶,加入少量新培养液。用吸管吸取培养液反复吹打瓶壁上的细胞,使其成为均匀分散的细胞悬液。悬浮生产细胞则不要消化处理。然后将细胞收集于离心管中离心(1000r/min,10分钟);2)去上清液,加入含20%小牛血清的完全培养基,于4℃预冷15分钟后,逐滴加入已无菌的DMSO或甘油,用吸管轻轻吹打使细胞均匀,细胞浓度为5×106~1×107/mL之间。(冻存培养液的配置是不是一定要用小牛血清呢?答案是不一定的,具体要看培养的细胞类型来选择;3)将分装上述细胞悬液于2ml冻存管中,每管0.25ml。冻存管要将盖子盖紧,并标记好细胞名称和冻存日期,同时作好登记(日期、细胞种类及代次、冻存支数);4)将装好细胞的冻存管放到冻存盒中,-80℃冰箱过夜。;如果有程序降温器(放在-80℃冰箱过夜,放入液氮罐);或者可以在4℃,2h;然后转到-20℃,2h;-80℃,2h;放入液氮罐;5)细胞冻存在液氮中可以长期保存,但为妥善起见,冻存半年后,取出一只冻存管细胞复苏培养,观察生长情况,然后再继续冻存。
细胞来源说明:细胞主要来源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少数国外著名大学建系
LTEP-sm细胞系相关产品:NCI-H146细胞、293/EBNA细胞、HFL-I细胞
SKNAS细胞系相关产品:SNK-6细胞、Super Tube细胞、NIH:OVCAR4细胞
Detroit562细胞系相关产品:NALM-6细胞、OE-33细胞、UCD-MLA-144细胞
NCIH441细胞系相关产品:ASH-3细胞、HA细胞、A-204细胞
NKM1细胞系相关产品:ECC 10细胞、RD-2细胞、766T细胞
细胞生长特性:贴壁生长
SNU-354 Cell:人肝癌细胞系
细胞传代培养实验:体外培养的原代细胞或细胞株要在体外持续地培养就必须传代,以便获得稳定的细胞株或得到大量的同种细胞,并维持细胞种的延续。培养的细胞形成单层汇合以后,由于密度过大生存空间不足而引起营养枯竭,将培养的细胞分散,从容器中取出,以1:2或1:3以上的比率转移到另外的容器中进行培养,即为传代培养;细胞“一代”指从细胞接种到分离再培养的一段期间,与细胞世代或倍增不同。在一代中,细胞培增3~6次。细胞传代后,一般经过三个阶段:游离期、指数增生期和停止期。常用细胞分裂指数表示细胞增殖的旺盛程度,即细胞群的分裂相数/100个细胞。一般细胞分裂指数介于0.2%~0.5%,肿瘤细胞可达3~5%;细胞接种2~3天分裂增殖旺盛,是活力时期,称指数增生期(对数生长期),适宜进行各种试验。实验步骤:1.将长成的培养细胞从二氧化碳培养箱中取出,在超净工作台中倒掉瓶内的培养液,加入少许消化液。(以液面盖住细胞为宜),静置5~10分钟。2.在倒置镜下观察被消化的细胞,如果细胞变圆,相互之间不再连接成片,这时应立即在超净台中将消化液倒掉,加入3~5ml新鲜培养液,吹打,制成细胞悬液。3.将细胞悬液吸出2ml左右,加到另一个培养瓶中并向每个瓶中分别加3ml左右培养液,盖好瓶塞,送回二氧化碳培养箱中,继续进行培养。一般情况,传代后的细胞在2小时左右就能附着在培养瓶壁上,2~4天就可在瓶内形成单层,需要再次进行传代。
细胞形态特性:上皮细胞样
Chinese Hamster Lung细胞系相关产品:H-1568细胞、PNT1-a细胞、COLO-320-DM细胞
293 EBNA细胞系相关产品:Calu 3细胞、SUM159细胞、B 95-8细胞
mIMCD3细胞系相关产品:BC-023细胞、CEM C7细胞、CNE-1细胞
HCT-8细胞系相关产品:NCI-H-295细胞、CNE1细胞、SK.MEL.28细胞
CHAGOK1细胞系相关产品:Caov-3细胞、NCIH1417细胞、H322T细胞
HEK293A细胞系相关产品:NK62a细胞、Panc 4.03细胞、L-540细胞
MDA-MB231细胞系相关产品:SF-126细胞、NCI-H1184细胞、TW-039细胞
SNU-354 Cell:人肝癌细胞系
OK细胞系相关产品:Y3-Ag123细胞、C-8161细胞、KU 812细胞
HKBML细胞系相关产品:HL-1细胞、8226细胞、SW 962细胞
NS1细胞系相关产品:H-889细胞、OVCAR-5细胞、AN3细胞
HCC-78细胞系相关产品:H358细胞、RPMC细胞、L-Wnt-3A细胞
FU-97细胞系相关产品:NCl-H157细胞、MAD109细胞、Hs819T细胞
HepG2-luc细胞系相关产品:SKNO1细胞、TE 671细胞、NRK clone 49F细胞
H8细胞系相关产品:SNU-354细胞、HCC-78细胞、Jurkat Clone E6-1细胞
SW 48细胞系相关产品:HCe-8693细胞、MFHL-2细胞、Detroit-562细胞
TC7细胞系相关产品:KMBC细胞、LC2/Ad细胞、A-72细胞
TC7细胞系相关产品:KMBC细胞、LC2/Ad细胞、A-72细胞
OVCAR5细胞系相关产品:SK-NSH细胞、C3H10T1/2 clone8细胞、H524细胞
MDAMB436细胞系相关产品:SW-1990细胞、UMR-106细胞、SJRH-30细胞
PC-12细胞系相关产品:SW-13细胞、P3X63NS1细胞、KM933细胞
SUP T1细胞系相关产品:BT-325细胞、MT-2细胞、SKNF1细胞
Rat 2细胞系相关产品:AR4IP细胞、TEV-1细胞、253J B-V细胞
SW-1417细胞系相关产品:Jurkat FHCRC细胞、NCI-H889细胞、JURKAT E-6.1细胞
RFL 6细胞系相关产品:BT 325细胞、HEC1-A细胞、SUM52细胞
SU-DH-L5细胞系相关产品:PC 61细胞、RetroPack PT67细胞、EBTr细胞
HLEC-SRA 01/04细胞系相关产品:Hs675细胞、Asian Medical Center-Head and Neck cancer-8细胞、Hs940.T细胞
OV 2008细胞系相关产品:FOXNY细胞、HFF-1细胞、NCI-H78细胞
H-820细胞系相关产品:PC-3M IE8细胞、HNE-2细胞、Onda 11细胞
H-820细胞系相关产品:PC-3M IE8细胞、HNE-2细胞、Onda 11细胞
SK_N_BE2C细胞系相关产品:MSTO-211 H细胞、NCI-H865细胞、NCIH2126细胞
MDCKII细胞系相关产品:NCI-H774细胞、EoL-1-cell细胞、HCE细胞
Nb 2细胞系相关产品:3T3F442A细胞、A-549细胞、G401细胞
ZR-75-30细胞系相关产品:EBC-1/original细胞、SiHa细胞、EAC-E2G8细胞
HMO6细胞系相关产品:NG 108-15细胞、CNE2Z细胞、H-378细胞
LC-2 ad细胞系相关产品:C17.2细胞、IMR-32细胞、SMA 560细胞
IMR90细胞系相关产品:Natural Killer-92细胞、Line 522细胞、COLO684细胞
HEP-3B2细胞系相关产品:CNE-2Z细胞、OCLY8细胞、KMM-1细胞
Doubling time: ~50 hours (ATCC).细胞系相关产品:OV1/P细胞、HFL细胞、RBSMC细胞
H-2107细胞系相关产品:rUCMSCs细胞、HDQP1细胞、H-1688细胞
ST 486细胞系相关产品:HCEC-B4G12细胞、KLN 205细胞、BMF细胞
NCIH1155细胞系相关产品:LS 1034细胞、IEC18细胞、Opossum Kidney细胞
HeLa 229细胞系相关产品:NTERA-2cl.D1细胞、LS 180细胞、FRTL5细胞
AN-3细胞系相关产品:U373MG细胞、COLO 320细胞、HCM细胞
U251MG细胞系相关产品:3AO细胞、Cattle chondrocytes细胞、MCF10A细胞
VMRC-LCD细胞系相关产品:M059K细胞、NBL-S细胞、NCI-H1522细胞
H-1648细胞系相关产品:OVCAR-3细胞、MLMEC细胞、CPA47细胞
NK62a细胞系相关产品:OV-1063细胞、ZYM-SVEC01细胞、PG-LH7细胞
NK62a细胞系相关产品:OV-1063细胞、ZYM-SVEC01细胞、PG-LH7细胞
SW-1417细胞系相关产品:Jurkat FHCRC细胞、NCI-H889细胞、JURKAT E-6.1细胞
V79-GalK1细胞系相关产品:GM05372E细胞、NCIH322细胞、NCIH2196细胞
SNU-354 Cell:人肝癌细胞系
EST50细胞系相关产品:CCD-1095Sk细胞、GLRK 13细胞、SKES1细胞
MDAPC2B细胞系相关产品:M07e细胞、H2106细胞、SF539细胞
mRTEC细胞系相关产品:MOLM-14细胞、MES13细胞、LL2细胞
KMY1022细胞系相关产品:OCILY-19细胞、CT26.CL25细胞、HCC0095细胞
SNU-869细胞系相关产品:P 3 HR 1细胞、Uhth-74细胞、T-98细胞
OCLY8细胞系相关产品:PF-382细胞、Hs940T细胞、U251MG细胞
M21细胞系相关产品:NCIH1385细胞、RKO细胞、SKCO 1细胞
RBL.2H3细胞系相关产品:BT20细胞、HCC 70细胞、GM346细胞
OVCAR 432细胞系相关产品:ME16C细胞、Sarcoma OSteogenic-2细胞、HEI193细胞
D407细胞系相关产品:NIH:OVCAR-3细胞、IB-RS-2细胞、Panc5.04细胞
X63-AG 8.653细胞系相关产品:LAN-5细胞、OVCAR433细胞、H-157细胞
Earles's cells细胞系相关产品:BC3 H1细胞、FL83B细胞、HLEC-B3细胞
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