"SK-MEL-31 Cell:人恶性黑色素瘤细胞系
细胞形态:上皮细胞样
细胞生长:贴壁
细胞背景资料:详见相关文献介绍
P30OHK细胞系相关产品:Rat-2细胞、H-4-II-E细胞、SK-MEL-5细胞
MDA-MB157细胞系相关产品:hUC-MSC细胞、CZ-1细胞、SUM-102细胞
NB9细胞系相关产品:WM451细胞、A-9细胞、MPC11细胞
STC-1细胞系相关产品:Tu-686细胞、P3-NS1/1Ag 4.1细胞、NIH/3T3细胞
细胞物种来源:人源或鼠源等其它物种来源
SK-MEL-31 Cell:人恶性黑色素瘤细胞系
细胞消化过程总结:其实绝大部分细胞消化的时候是只要用胰酶润洗一遍即可,吸去胰酶后,残留的那些无法计算体积的附着在细胞表面的微量胰酶在37度一般不到2min足够消化细胞(绝大部分1min不到)。对于这些细胞原则上不要用胰酶孵育细胞,连续这样传代,对细胞伤害很大。简单的程序是PBS润洗吸去,胰酶润洗吸去,然后37度消化。2,什么算是消化好了呢?不是细胞全部成间隔分布很离散的单个圆形才算消化好了,一般你肉眼观察贴壁细胞层,只要能移动了,多半呈沙壮移动,其实已经可以了,很多人喜欢把细胞消化或者吹打成完全分离细胞,这是没有必要的。一般能移动了,说明细胞与培养基质材料的附着已经消失了,细胞之间的附着也已经消失了,细胞已经独立分布了(虽然没有呈现很广的离散分布)。这个时候应该停止消化,不要等到看到镜下所有细胞都分离得非常好,间隙很大,才停止。细胞就是完全成单个细胞悬液,之后在贴壁的过程中仍然会聚集,这个是贴壁培养的细胞,尤其是肿瘤细胞的一个特性,无论死活的细胞都是如此,你可以尝试,准备100%的单个细胞悬液,贴壁后观察细胞,仍然是几个几个细胞聚集在一起。一些悬浮培养细胞也是如此,容易聚集,不要去尝试过几个小时就拿出来吹打成单细胞悬液(不要笑,这个是初养悬浮细胞的人常犯的错误,以为悬浮培养就是一个一个分开)。细胞只要能从基质上脱离下来,这个时候即使是成片的(比如Calu-3细胞),吹打不超过20次后(一般10次即可),成小规模聚集(10个细胞左右),是正常的,不要试图再去延长消化时间,或者像有的同学那样吹打1h,等待单细胞悬液出现。比较难消化的细胞(润洗方法5min还不能消化),比如HCT15, LS411和KM12,这样的细胞一般需要用少量胰酶孵育,但也不需要很多,一般100mm dish,一次最多加入500ul,就足够了,一般我加300ul。即使这样难消化的细胞,一般不超过5min,即可见细胞成片移动,就应该停止消化。一些正常细胞也会有难消化的时候,比如tsDC细胞,但也只要用少量胰酶孵育,3min左右即可看到成片沙状移动。
细胞产品包装:复苏形式:T25培养瓶(一瓶)或冻存形式:1ml冻存管(两支)
细胞传代方法:1:4-1:6传代,2-3天换液1次。
细胞常规培养传代流程(请严格遵照无菌操作):1)吸出原培养瓶中的培养基,PBS缓冲液润洗细胞两次,加2-3ml 0.25%胰酶进行消化细胞(注意把握消化时间,通常控制在1-2min);2)镜下观察消化情况,在细胞边缘缩小,贴壁松动时(不建议消化到细胞漂浮)去掉胰酶,加6-8ml完全培养基,轻轻吹打细胞层,尽量把细胞层吹落,吹散;3)取部分细胞悬液转移到新的培养皿/瓶中,添加适当的完全培养基,把细胞悬液打匀,于培养箱中培养;4)注意培养基PH值变化情况,定期换液(每周2-3次),待细胞密度达到80%以后重复1项操作或者冻存;特别注意:(如使用公共实验室或者初次接触细胞培养,建议添加双抗培养)1)收到细胞后请尽快更换为含15%血清的新鲜培养基,如因特殊情况需要继续使用原瓶,请在原瓶培养基中额外添加10%的血清,(原瓶培养基的继续使用时间最长不宜超过72小时);2)贴壁细胞收到当天切忌立刻消化,请将细胞换液后放置培养箱孵育到第二天再做消化传代,请优先选择直径6cm的培养皿进行传代培养;3)如签收时出现培养瓶壁破裂,漏液等情况请及时做好照片记录并联系实验室。
细胞来源说明:细胞主要来源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少数国外著名大学建系
COLO 320 DM细胞系相关产品:HT 1197.T细胞、WPMY1细胞、SK-MEL-2-LUC细胞
Y-79细胞系相关产品:MBT2细胞、DITNC1细胞、CX-1细胞
CHG5细胞系相关产品:BE2-M17细胞、OCI-Ly1细胞、UCLA-SO-M20细胞
End1/E6E7细胞系相关产品:Vero E6细胞、HECCL-1细胞、H1869细胞
SKNO1细胞系相关产品:MDA-MB-175VII细胞、HCC-1937细胞、CT26细胞
细胞生长特性:贴壁生长
SK-MEL-31 Cell:人恶性黑色素瘤细胞系
贴壁细胞消化传代时通常采用两种方法:一、加入胰酶等细胞脱落后,再加培养基中止胰酶作用,离心传代;二、加入胰酶后,镜下观察待细胞始脱落时,弃胰酶,加培养液分瓶。但前者太麻烦,而后者有可能对细胞施加胰酶选择,因为总是贴壁不牢的细胞先脱落,对肿瘤细胞来说,这部分细胞有可能是恶性程度较高的细胞亚群。一种简单的消化传代方法。加入PBS洗去血清或加入胰酶先中和血清的作用(30s),弃之,再加入适量胰酶作用10s-40s(根据细胞消化的难易程度),弃之,这样依赖残余的胰酶就可将细胞消化单细胞。对于较难消化的细胞,可以用2%利多卡因消化5-8分钟,然后再弃去,加培养基吹打也可以,对细胞的影响不大。不用PBS也不用Hanks洗,只要把旧培养液吸的干净一点,直接加酶消化应该不会有什么问题。弃培养液后,用0.04%的EDTA冲洗一次,再用1/4v的0.04%的EDTA室温孵育5min,弃取大部分EDTA,加入与剩余EDTA等量的胰酶(预热)总体积1/10v。消化到有细胞脱落。不过有人说EDTA对细胞不好,有证据吗?培养的BASMC:倒掉旧培养液加入少量胰酶冲一下,倒掉再加入0.125-0.25%胰酶约6-10滴或1ml(25ml bottle)消化再加入适量新培养基中和,并分瓶这种方法简单、省事;效果很好并且不损失细胞!
细胞形态特性:上皮细胞
Primary Liver Carcinoma/Poliomyelitis Research Foundation/5细胞系相关产品:GM04671细胞、RKOE6细胞、CW2细胞
McCoy B细胞系相关产品:SNU16细胞、NCIH1373细胞、BEL-7405细胞
MeT-5A细胞系相关产品:A-549细胞、SK-ES1细胞、PANC 327细胞
NIHOVCAR3细胞系相关产品:FL62891细胞、H2052细胞、MC-116细胞
NCI-H1299细胞系相关产品:COR-L23细胞、Madison 109细胞、C643细胞
Jurkat-E6细胞系相关产品:Baby Hamster Kidney-21细胞、WM-451Lu细胞、NIH 3T6细胞
Hs-281-T细胞系相关产品:NPC-TW01细胞、OVCA432_Bast细胞、HT 1080细胞
SK-MEL-31 Cell:人恶性黑色素瘤细胞系
Mel526细胞系相关产品:LC-MS细胞、KCL-22细胞、KRC/Y细胞
MJ细胞系相关产品:RN细胞、NCI-SNU-119细胞、Jurkat-FHCRC细胞
Hs 343.T细胞系相关产品:TN5B14细胞、HKC细胞、V79-1细胞
Y3Ag1.2.3细胞系相关产品:SKLMS1细胞、SNU16细胞、MDA MB 361细胞
HEK293-H细胞系相关产品:SKNMC细胞、OCI AML4细胞、U87MG细胞
PJ34细胞系相关产品:P3HRI细胞、SNU-878细胞、HOP 62细胞
MuM-2B细胞系相关产品:MNNG细胞、KYSE 70细胞、CL34细胞
MHCC97-L细胞系相关产品:SKCO1细胞、SACC83细胞、NCI-H2126细胞
Baby Hamster Kidney 21细胞系相关产品:H2087细胞、DHBE细胞、H520细胞
Baby Hamster Kidney 21细胞系相关产品:H2087细胞、DHBE细胞、H520细胞
B16 melanoma F10细胞系相关产品:NCIH69细胞、OKT3细胞、EFO-27细胞
DMS79细胞系相关产品:RBL-1细胞、SK MES 1细胞、BGC-823细胞
H596细胞系相关产品:GA-10(Clone 4)细胞、CCD 19Lu细胞、Dakiki细胞
H22细胞系相关产品:KYSE 70细胞、Y3Ag1.2.3细胞、Glioma 261细胞
WM115细胞系相关产品:NE1细胞、SN12PM6细胞、Jurkat FHCRC细胞
Murine Carcinoma-38细胞系相关产品:SNU-739细胞、95-D细胞、87MG细胞
Douglas Foster-1细胞系相关产品:NCI-H2227细胞、APRE-19细胞、NIH:OVCAR-3细胞
TF-1细胞系相关产品:Chang liver细胞、Alexander cells细胞、hTERT RPE1细胞
Z-138细胞系相关产品:H838细胞、LNCaP-FGC细胞、D283 Med细胞
CL11细胞系相关产品:HuH6细胞、P3-X63.Ag8.653细胞、HL7702细胞
CCD-1095Sk细胞系相关产品:SCC 9细胞、hFOB 1.19细胞、HCO细胞
RH30SJ细胞系相关产品:End1/E6E7细胞、TCC-SUP细胞、HT22细胞
Stanford University-Diffuse Histiocytic Lymphoma-16细胞系相关产品:EFM19细胞、DHL-2细胞、U937细胞
SNU520细胞系相关产品:H2170细胞、Stanford University-Diffuse Histiocytic Lymphoma-6细胞、MPASMC细胞
HBL100细胞系相关产品:PLB985细胞、Mel RM细胞、SU-DHL-10细胞
Hs675细胞系相关产品:H-1755细胞、Calf Pulmonary Artery 47细胞、Panc 1细胞
NKM1细胞系相关产品:ECC 10细胞、RD-2细胞、766T细胞
T-24细胞系相关产品:SK-ML2细胞、Walker 256细胞、BL-6细胞
PL-11细胞系相关产品:PA1细胞、RINm-5F细胞、B 95.8细胞
BGC823细胞系相关产品:KM12SM细胞、Hep G2/C3A细胞、MLMA细胞
LOU-NH91细胞系相关产品:CAL-33细胞、MDA-MB-468细胞、RINm-5F细胞
H220细胞系相关产品:H-676细胞、L cells细胞、EL 4细胞
D-283细胞系相关产品:NP69细胞、NCIH2023细胞、Vero-E6细胞
H4-IIE-C3细胞系相关产品:CAL 27细胞、Human Embryonic Kidney 293细胞、Walker-Ca.256细胞
MN-9D细胞系相关产品:Mono Mac6细胞、BT549细胞、H-2405细胞
Vero-76细胞系相关产品:Jurkat Clone E6-1细胞、KMS26细胞、NCIH1694细胞
HC11 Mammary Epithelium细胞系相关产品:F98细胞、H-1734细胞、4T1.2细胞
H1650_CO细胞系相关产品:SNGM细胞、SW948细胞、H295R细胞
GTL 16细胞系相关产品:FO [Mouse myeloma]细胞、UPCISCC154细胞、MDAMB436细胞
B16-BL6细胞系相关产品:C6661细胞、COLO 357细胞、HLEC-B3细胞
Human Microvascular Endothelial Cell line-1细胞系相关产品:Transformed C3H Mouse Kidney-1细胞、201T细胞、Hs695T细胞
HEK 293细胞系相关产品:WM266细胞、PaTu8988s细胞、LN382细胞
C3H/10T1/2 CL8细胞系相关产品:MT4细胞、NUGC3细胞、MCF.10A细胞
SK-MEL-31 Cell:人恶性黑色素瘤细胞系
J774细胞系相关产品:LuCL4细胞、SKM1细胞、H-2066细胞
Calu 6细胞系相关产品:LAN6细胞、H220细胞、K299细胞
TFH细胞系相关产品:RAW 264.7细胞、NU-GC-2细胞、OCILY-10细胞
Helacyton gartleri细胞系相关产品:HCGC细胞、VP229细胞、RBL.2H3细胞
P30 OHK细胞系相关产品:Ly1细胞、M-1细胞、SK-MEL-31细胞
IB-RS-2细胞系相关产品:CNE细胞、RIMEC细胞、MDA-MB-435-S细胞
BT 325细胞系相关产品:BCaP-37细胞、KNS-62细胞、DU-4475细胞
Kit-225细胞系相关产品:PLC8024细胞、ST486细胞、NCIH209细胞
HT-22细胞系相关产品:HCC 70细胞、Lewis lung carcinoma line 1细胞、Walker 256细胞
EU-3细胞系相关产品:PANC0203细胞、Vero 76细胞、DHL-5细胞
HeLa S3细胞系相关产品:NCI-H82细胞、H676B细胞、Mink细胞
Hs 819.T细胞系相关产品:MPVECs细胞、alpha TC1.6细胞、IPLB-Sf21AE细胞
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