"VMRC-LCD Cell:人肺癌腺癌细胞系
细胞形态:上皮细胞样
细胞生长:贴壁
细胞背景资料:详见相关文献介绍
C17.2细胞系相关产品:U 138 MG细胞、Eca109细胞、U266S细胞
SK-MEL5细胞系相关产品:HemECs细胞、HUT-28细胞、SW 403细胞
Eca 109细胞系相关产品:HO8910/PM细胞、PC 12细胞、SNU869细胞
Kobe university Oral Squamous Cell culture-2细胞系相关产品:SHEE细胞、NCI-H660细胞、NS-1-Ag4-1细胞
细胞物种来源:人源或鼠源等其它物种来源
VMRC-LCD Cell:人肺癌腺癌细胞系
细胞的冻存:目前,细胞冻存最常用的技术是液氮冷冻保存法,主要采用加适量保护剂的缓慢冷冻法冻存细胞。主要操作步骤为:(1)选择处于对数生长期的细胞,在冻存前一天换液。将多个培养瓶中的细胞培养液去掉,用0.25%胰蛋白酶消化。适时去掉胰蛋白酶,加入少量新培养液。用吸管吸取培养液反复吹打瓶壁上的细胞,使其成为均匀分散的细胞悬液。悬浮生产细胞则不要消化处理。然后将细胞收集于离心管中离心(1000r/min,10分钟)。(2)去上清液,加入含20%小牛血清的完全培养基,于4℃预冷15分钟后,逐滴加入已无菌的DMSO或甘油,用吸管轻轻吹打使细胞均匀,细胞浓度为3×10(6)~1×10(7)/mL之间。(3)将上述细胞分装于安瓿或专用冷冻塑料管中,安瓿装1~1.5mL在火焰喷灯上封口,封口处要完全封闭,圆滑无勾。冷冻管要将盖子盖紧,并标记好细胞名称和冻存日期,同时作好登记(日期、细胞种类及代次、冻存支数)。(4)将装好细胞的安瓿或冻存管装入沙布袋内;置于液氮容器颈口处存放过夜,次日转入液氮中。采用控制降温速度的方法也可采用下列步骤:先将安瓿置入4℃冰箱中2~3小时,再移至冰箱冷冻室内3~4小时,再吊入液氮容器颈气态部分存放2小时,最后沉入液氮中。细胞冻存在液氮中可以长期保存,但为妥善起见,冻存半年后,取出一只安瓿细胞复苏培养,观察生长情况,然后再继续冻存。
细胞产品包装:复苏形式:T25培养瓶(一瓶)或冻存形式:1ml冻存管(两支)
细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。
培养细胞真的不难,最关键几点:1)所有的东西使用,如果你用的血清、培养皿、培养基、胰酶什么的都是进口的,真的很难相信你会把细胞养坏;2)动作要快,胰酶消化,换液什么,细胞暴露在空气中的时间越少越好。另外,要掌握好胰酶消化时间,所谓的细胞状态差,很多时候是传代的原因;3)有时间的话,需要细胞计数,传相应数目的细胞到培养皿中,可以大致清楚细胞的生长曲线,不会临时要处理,手足无措;4)要做什么心里要非常清楚,合理安排时间,传代细胞的实验穿插进行,可以节省很多时间,也不会耽误别人的实验;5)个人的实验器具自己收一套,不要和别人混用,最近换了什么新的东西稍微记一下,试剂一旦怀疑污染,马上丢;6)传代细胞不能进去太多人,避免相互干扰。每天对待细胞比孝敬爹妈还用心,那真是捧在手里怕碎了,含在嘴里怕化了,看在眼里怕丢了,培养细胞时有哪些经验教训可以分享呢?1)严格无菌操作,多喷喷酒精,要是对灭菌的东西不放心,自己包自己送自己烘干;2)不要和别人共用试剂耗材,自己准备一套;3)有可能的话在拿到新细胞的时候做好支原体衣原体检测;4)水浴锅很脏,生化培养箱要是得手动加湿的话盘里的水也会很脏,勤换(灭菌水加进去);5)晚上离开的时候给传代细胞照紫外,超净台是用完就开;6)是同一时间就你一个人在用传代细胞在养细胞。
细胞来源说明:细胞主要来源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少数国外著名大学建系
MOLT 16细胞系相关产品:R.K.13细胞、HANK1细胞、NS20-Y细胞
NRCC细胞系相关产品:Fu97细胞、8505C细胞、COLO320HSR细胞
MEL-526细胞系相关产品:Tj-905细胞、HEK 293-H细胞、WILL2细胞
BEL 7402细胞系相关产品:HTR-8/SVneo细胞、SW403细胞、NT-2细胞
MKN-74细胞系相关产品:RMS 1598细胞、IHHA-1细胞、alpha-TC1-6细胞
细胞生长特性:贴壁或悬浮,详见细胞说明书部分
VMRC-LCD Cell:人肺癌腺癌细胞系
细胞复苏相关注意事项:1.取细胞的过程中注意带好防冻手套,护目镜。此项尤为重要,细胞冻存管可能漏入液氮,解冻时冻存管中的气温急剧上升,可导致爆炸。2.冻存液的问题:冻存液的配置已是常识,在这里不作详述,但二甲基亚砜(DMSO )对细胞不是完全无毒副作用,在常温下,二甲基亚砜对细胞的毒副作较大,因此,必须在1-2min内使冻存液完全融化。如果复苏温度太慢,会造成细胞的损伤,二甲基亚砜(DMSO)选择进口产品。3.离心前须加入少量培养液。细胞解冻后二甲基亚砜浓度较高,注意加入少量培养液可稀释其浓度,以减少对细胞的损伤。4.离心问题:目前主要有两种见解。一种是解冻后的细胞悬液直接吹打均匀后分装到培养瓶中进行培养,第二天换液。因为离心的目的是两个,去除DMSO,去除死细胞,这个是标准流程,但对一般人来说,把握不好离心转速和时间,转的不够活细胞沉底的少,细胞就全被扔掉了,转过了活细胞会受压过大,死亡。此外在操作过程中容易污染,所以不推荐。另一种说法为细胞悬液中含有二甲基亚砜(DMSO),DMSO对细胞有一定的毒副作用,所以须将离心后的液体前倒净,且一定倒干净。我在试验中按照常规的离心分装的方法进行复苏,结果无异常。5.细胞贴壁少的问题:教科书中说明冻存细胞解冻时1ml细胞液要加10ml-15ml培养液,而在我的试验中的经验总结为培养基越少细胞越容易贴附。6.复苏细胞分装的问题:试验中我的经验总结为复苏1管细胞一般可分装到1-2只培养瓶中,分装过多,细胞浓度过低,不利于细胞的贴壁。7.加培养基的量放入问题:这个量的多少的把握主要涉及到的问题DMSO的浓度,从如果你加培养基的太少,那么DMSO的浓度就会比较大,就会影响细胞生长,从以前的资料来看,DMSO的浓度在小于0.5%的时候对一般细胞没有什么影响,还有一个说法是1%。所以如果你的冻存液的浓度是10%DMSO的话那么加10ml以上的培养基就恰好稀释到了无害浓度。
细胞形态特性:详见细胞说明书
NCIH1836细胞系相关产品:WM-451Lu细胞、HUT-125细胞、OVCAR 433细胞
H-211细胞系相关产品:SUM 190细胞、HT1197细胞、CEM C7细胞
NCI660细胞系相关产品:87 MG细胞、NCI-H23细胞、MV 4;11细胞
32D/cl3细胞系相关产品:H4-II-E-C3细胞、Hs746-T细胞、EM-3细胞
LN382细胞系相关产品:526mel细胞、PL5细胞、GC1-SPG细胞
RKOE6细胞系相关产品:SUM 190PT细胞、BCECs细胞、BC-3-H-I细胞
Functional Liver Cell-7细胞系相关产品:OK-WT细胞、BC-3H-1细胞、CAMA1细胞
VMRC-LCD Cell:人肺癌腺癌细胞系
COLO679细胞系相关产品:EPC细胞、Hs-940细胞、SCH细胞
NCIH2081细胞系相关产品:74Int细胞、HPAFII细胞、Homo sapiens No. 578, breast cells细胞
SHG 44细胞系相关产品:HD-LM-2细胞、Hs840T细胞、RT4-D6P2T细胞
ELD-1细胞系相关产品:SKNEP-1细胞、22Rv-1细胞、BT-483细胞
NKL细胞系相关产品:Kobe university Oral Squamous Cell culture-2细胞、C4-2 B细胞、SW 1222细胞
3T3-L1细胞系相关产品:NS1-Ag 4/1细胞、LTEP-a2细胞、CCD1112Sk细胞
SNU-423细胞系相关产品:CNE-2细胞、SRA01/04 (HLE)细胞、CTLA4 Ig-24细胞
NCI-ADR-RES细胞系相关产品:Wayne State University-Head and Neck 13细胞、RPMI1846细胞、WEHI164细胞
RPMI-1846细胞系相关产品:Hs940.T细胞、NCI-HUT-125细胞、HUASMC细胞
RPMI-1846细胞系相关产品:Hs940.T细胞、NCI-HUT-125细胞、HUASMC细胞
Molm 13细胞系相关产品:NTERA2-cloneD1细胞、PNT1/A细胞、SK-NSH细胞
CL11细胞系相关产品:HuH6细胞、P3-X63.Ag8.653细胞、HL7702细胞
HSC-6细胞系相关产品:PC3M-2B4细胞、OVCAR.8细胞、Ca Ski细胞
SKRC-39细胞系相关产品:H1155细胞、SPDC-CCL141细胞、MOLT-3细胞
H820细胞系相关产品:CHP-100细胞、PC 61细胞、IAR-20细胞
H1703细胞系相关产品:DAKIKI Clone 1细胞、MDA1386细胞、CACO2细胞
LL2细胞系相关产品:UMNSAH-DF 1细胞、HL-60细胞、SW 1116细胞
DMS53细胞系相关产品:Ca-Ski细胞、L428细胞、H1836细胞
SW780细胞系相关产品:TOV-21G细胞、EB3 [Human Burkitt lymphoma]细胞、Vero E6细胞
RAW264细胞系相关产品:TYK-nu细胞、CD18细胞、HIEC6细胞
MD Anderson-Metastatic Breast-231细胞系相关产品:95D细胞、Hs 940.T细胞、UACC812细胞
SP-2细胞系相关产品:FBHE细胞、U-226AR1细胞、BNL 1ME A.7R.1细胞
SVG p12细胞系相关产品:NCI-H1688细胞、HEP3B2细胞、CAL78细胞
Kit225-K6细胞系相关产品:NCI-H358细胞、Okayama University Medical School-27细胞、HeLa.S3细胞
JB6 [Mouse]细胞系相关产品:NRK49F细胞、CL1-5细胞、ST-2细胞
THP1细胞系相关产品:HBVP细胞、WM115-mel细胞、MUTZ3细胞
H1436细胞系相关产品:Hep 2细胞、NRK clone 49F细胞、D6P2T细胞
PTK2细胞系相关产品:JIII细胞、OVCAR3细胞、MDA-MB-435 S细胞
NRK49F细胞系相关产品:SN4741细胞、GM04678细胞、3T3-L1 ad细胞
Keio University-19-19细胞系相关产品:SF539细胞、RPMI no 8226细胞、IHH-4细胞
Hs 636.T细胞系相关产品:EFO-27细胞、HCC1428细胞、PAa细胞
KMB17细胞系相关产品:Verda reno细胞、CNE-2Z细胞、801-D细胞
H-146细胞系相关产品:HCC-1359细胞、H64细胞、KALS1细胞
Panc_08_13细胞系相关产品:CCD-112CoN细胞、Jurkat 77细胞、PCI-4M细胞
Ca-Ski细胞系相关产品:LIM1215细胞、KPNRTBM1细胞、L-1210细胞
UWB1.289细胞系相关产品:118MG细胞、NCIH196细胞、FD-LSC-1细胞
B16/BL6细胞系相关产品:ketr 3细胞、Huh-7.5细胞、RWPE2细胞
BC-024细胞系相关产品:MGH-UI细胞、SUM 159细胞、MV-1-Lu细胞
CT26细胞系相关产品:H-EMC-SS细胞、GM03569B细胞、H-526细胞
SUM 159PT细胞系相关产品:GM02132细胞、TE-5细胞、P3-X63Ag8.653细胞
LM(TK-)细胞系相关产品:HCC0015细胞、373 MG细胞、B/C3T3细胞
C2-C12细胞系相关产品:AQ-Mel细胞、WEHI3细胞、KYSE-450细胞
CAL85-1细胞系相关产品:COLO-684细胞、GM03569D细胞、SGC-7901/DDP细胞
VMRC-LCD Cell:人肺癌腺癌细胞系
NCI-H747细胞系相关产品:C 6细胞、BIC-1细胞、MDAMB134VI细胞
Hs611T细胞系相关产品:B16-F0细胞、MFD-1细胞、NCIH1385细胞
GM03569D细胞系相关产品:MSTO-211H细胞、MDA MB 175 VII细胞、HL-60 clone15细胞
FRTL-5细胞系相关产品:Hs-675-T细胞、P3X63Ag8.653细胞、SO-RB50细胞
COLO-320DM细胞系相关产品:NCI-H510A细胞、L-cell细胞、PK-15细胞
BALL-1细胞系相关产品:HepG2细胞、SACC-LM细胞、LCLC-103H细胞
NT2D1细胞系相关产品:GAK细胞、NL20SV细胞、D10细胞
OACP4 C细胞系相关产品:H1581细胞、LLCPK1细胞、MOLT4细胞
KS-1 [Human glioblastoma]细胞系相关产品:BEL 7405细胞、BC-021细胞、TE-7细胞
RT4-D6-P2T细胞系相关产品:CAKI.1细胞、H-2196细胞、AR-42J细胞
HOK细胞系相关产品:T98 G细胞、HSC-2细胞、SW962细胞
BMU-S1细胞系相关产品:Caco 2细胞、NCI-H524细胞、NCIH841细胞
"