"SRS-82 Cell:小鼠腹水瘤细胞系
细胞形态:上皮细胞样
细胞生长:贴壁
细胞背景资料:详见相关文献介绍
3T3 clone A31细胞系相关产品:EC-109细胞、NB-4细胞、BDCM细胞
MCF/Adr细胞系相关产品:BE(2)M-17细胞、BEL-7404细胞、CCC-ESF-1细胞
SCI1细胞系相关产品:HC11 Mammary Epithelium细胞、SK-NSH细胞、PIGI细胞
HT-3细胞系相关产品:TE353.SK细胞、SK-N-BE2细胞、WM-239细胞
细胞物种来源:人源或鼠源等其它物种来源
SRS-82 Cell:小鼠腹水瘤细胞系
细胞消化过程总结:其实绝大部分细胞消化的时候是只要用胰酶润洗一遍即可,吸去胰酶后,残留的那些无法计算体积的附着在细胞表面的微量胰酶在37度一般不到2min足够消化细胞(绝大部分1min不到)。对于这些细胞原则上不要用胰酶孵育细胞,连续这样传代,对细胞伤害很大。简单的程序是PBS润洗吸去,胰酶润洗吸去,然后37度消化。2,什么算是消化好了呢?不是细胞全部成间隔分布很离散的单个圆形才算消化好了,一般你肉眼观察贴壁细胞层,只要能移动了,多半呈沙壮移动,其实已经可以了,很多人喜欢把细胞消化或者吹打成完全分离细胞,这是没有必要的。一般能移动了,说明细胞与培养基质材料的附着已经消失了,细胞之间的附着也已经消失了,细胞已经独立分布了(虽然没有呈现很广的离散分布)。这个时候应该停止消化,不要等到看到镜下所有细胞都分离得非常好,间隙很大,才停止。细胞就是完全成单个细胞悬液,之后在贴壁的过程中仍然会聚集,这个是贴壁培养的细胞,尤其是肿瘤细胞的一个特性,无论死活的细胞都是如此,你可以尝试,准备100%的单个细胞悬液,贴壁后观察细胞,仍然是几个几个细胞聚集在一起。一些悬浮培养细胞也是如此,容易聚集,不要去尝试过几个小时就拿出来吹打成单细胞悬液(不要笑,这个是初养悬浮细胞的人常犯的错误,以为悬浮培养就是一个一个分开)。细胞只要能从基质上脱离下来,这个时候即使是成片的(比如Calu-3细胞),吹打不超过20次后(一般10次即可),成小规模聚集(10个细胞左右),是正常的,不要试图再去延长消化时间,或者像有的同学那样吹打1h,等待单细胞悬液出现。比较难消化的细胞(润洗方法5min还不能消化),比如HCT15, LS411和KM12,这样的细胞一般需要用少量胰酶孵育,但也不需要很多,一般100mm dish,一次最多加入500ul,就足够了,一般我加300ul。即使这样难消化的细胞,一般不超过5min,即可见细胞成片移动,就应该停止消化。一些正常细胞也会有难消化的时候,比如tsDC细胞,但也只要用少量胰酶孵育,3min左右即可看到成片沙状移动。
细胞产品包装:复苏形式:T25培养瓶(一瓶)或冻存形式:1ml冻存管(两支)
细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。
细胞常规培养传代流程(请严格遵照无菌操作):1)吸出原培养瓶中的培养基,PBS缓冲液润洗细胞两次,加2-3ml 0.25%胰酶进行消化细胞(注意把握消化时间,通常控制在1-2min);2)镜下观察消化情况,在细胞边缘缩小,贴壁松动时(不建议消化到细胞漂浮)去掉胰酶,加6-8ml完全培养基,轻轻吹打细胞层,尽量把细胞层吹落,吹散;3)取部分细胞悬液转移到新的培养皿/瓶中,添加适当的完全培养基,把细胞悬液打匀,于培养箱中培养;4)注意培养基PH值变化情况,定期换液(每周2-3次),待细胞密度达到80%以后重复1项操作或者冻存;特别注意:(如使用公共实验室或者初次接触细胞培养,建议添加双抗培养)1)收到细胞后请尽快更换为含15%血清的新鲜培养基,如因特殊情况需要继续使用原瓶,请在原瓶培养基中额外添加10%的血清,(原瓶培养基的继续使用时间最长不宜超过72小时);2)贴壁细胞收到当天切忌立刻消化,请将细胞换液后放置培养箱孵育到第二天再做消化传代,请优先选择直径6cm的培养皿进行传代培养;3)如签收时出现培养瓶壁破裂,漏液等情况请及时做好照片记录并联系实验室。
细胞来源说明:细胞主要来源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少数国外著名大学建系
MDCK.2细胞系相关产品:Michigan Cancer Foundation-10A细胞、Shadyside Hospital Pittsburgh-77细胞、Hep G2-Luc细胞
T-T细胞系相关产品:CWR22-Rv1细胞、32D clone3细胞、SBC-5细胞
HNTEC细胞系相关产品:MES-SA细胞、NRK clone 52E细胞、MCM细胞
OV-1063细胞系相关产品:C127细胞、SKMES1细胞、HCT-15细胞
NCI-H865细胞系相关产品:SU-DHL-6细胞、AZ-521细胞、SU-DHL-2细胞
细胞生长特性:贴壁或悬浮,详见细胞说明书部分
SRS-82 Cell:小鼠腹水瘤细胞系
贴壁细胞消化传代时通常采用两种方法:一、加入胰酶等细胞脱落后,再加培养基中止胰酶作用,离心传代;二、加入胰酶后,镜下观察待细胞始脱落时,弃胰酶,加培养液分瓶。但前者太麻烦,而后者有可能对细胞施加胰酶选择,因为总是贴壁不牢的细胞先脱落,对肿瘤细胞来说,这部分细胞有可能是恶性程度较高的细胞亚群。一种简单的消化传代方法。加入PBS洗去血清或加入胰酶先中和血清的作用(30s),弃之,再加入适量胰酶作用10s-40s(根据细胞消化的难易程度),弃之,这样依赖残余的胰酶就可将细胞消化单细胞。对于较难消化的细胞,可以用2%利多卡因消化5-8分钟,然后再弃去,加培养基吹打也可以,对细胞的影响不大。不用PBS也不用Hanks洗,只要把旧培养液吸的干净一点,直接加酶消化应该不会有什么问题。弃培养液后,用0.04%的EDTA冲洗一次,再用1/4v的0.04%的EDTA室温孵育5min,弃取大部分EDTA,加入与剩余EDTA等量的胰酶(预热)总体积1/10v。消化到有细胞脱落。不过有人说EDTA对细胞不好,有证据吗?培养的BASMC:倒掉旧培养液加入少量胰酶冲一下,倒掉再加入0.125-0.25%胰酶约6-10滴或1ml(25ml bottle)消化再加入适量新培养基中和,并分瓶这种方法简单、省事;效果很好并且不损失细胞!
细胞形态特性:详见细胞说明书
Rat Skin 1细胞系相关产品:UCLA SO M21细胞、B16BL-6细胞、CAL39细胞
SKOV3细胞系相关产品:MDA 1386细胞、3T3-L1细胞、SW-1088细胞
H810细胞系相关产品:C-6细胞、L-929细胞、SW 756细胞
NCTC1469细胞系相关产品:SkChA1细胞、RL952细胞、Madison 109细胞
HPAEpiC细胞系相关产品:Colon-38细胞、IMR-90细胞、hRPTC细胞
HCC0070细胞系相关产品:NCIH1395细胞、TO 175.T细胞、DHL-16细胞
SW48细胞系相关产品:NCI-H2452细胞、LAN5细胞、RS4:11细胞
SRS-82 Cell:小鼠腹水瘤细胞系
Daudi细胞系相关产品:SW 837细胞、SK-Mel 1细胞、NKM1细胞
RT112细胞系相关产品:RS4;11细胞、P 815细胞、HaCaT细胞
COLO320-DM细胞系相关产品:HuO9细胞、RBMEC细胞、Cloudman S91 melanoma clone M-3细胞
NCI660细胞系相关产品:87 MG细胞、NCI-H23细胞、MV 4;11细胞
NCI-H1105细胞系相关产品:NCI-H1694细胞、RKO-E6细胞、Sup T-1细胞
Human Embryonic Skin细胞系相关产品:BeWo细胞、UMUC3细胞、SUDHL1细胞
DAKIKI Clone 1细胞系相关产品:A-431细胞、766T细胞、LLC-MK-2细胞
HuTu-80细胞系相关产品:Alpha Mouse Liver 12细胞、3T3-L1 ad细胞、Vero from pool #76细胞
RPMI2650细胞系相关产品:H747细胞、HEC-1-A细胞、HS688AT细胞
RPMI2650细胞系相关产品:H747细胞、HEC-1-A细胞、HS688AT细胞
Human Melanoma Cell Bowes细胞系相关产品:Jeko1细胞、hEM15A细胞、Ca 9-22细胞
H-69细胞系相关产品:VK2 (E6/E7)细胞、E304细胞、NCI-H1048细胞
UK Pan-1细胞系相关产品:HPMEC细胞、DAN-G细胞、RBE4细胞
LNCaP C4-2B细胞系相关产品:EB1细胞、HCE细胞、MAD109细胞
HEL-92细胞系相关产品:Hs 737.T细胞、NCIH1184细胞、PT-K75细胞
HEL细胞系相关产品:OSA细胞、MPP 89细胞、MDAMB175VII细胞
RT-4细胞系相关产品:CCRFCEM细胞、HPDE6c7细胞、ASH-3细胞
SU-DHL-6细胞系相关产品:SL-1细胞、H2227细胞、B-CPAP细胞
NCI-H1930细胞系相关产品:TCC Sup细胞、Hs695细胞、NCI-H1793细胞
SW1353细胞系相关产品:GP293细胞、L5178Y细胞、CAL-51细胞
HRA19细胞系相关产品:UMNSAH-DF1细胞、SW-1463细胞、IGROV1细胞
H-82细胞系相关产品:NCIH295R细胞、HEL 299细胞、PG-BE1细胞
Ca761细胞系相关产品:NCIH2170细胞、ST细胞、PTK 1细胞
NS-1细胞系相关产品:MADB 106细胞、MLOY4细胞、KYSE-140细胞
KBM-7/Hap8细胞系相关产品:HEP3B2细胞、GCT0404细胞、4T1-A细胞
EL4细胞系相关产品:MDCK.2细胞、SK-MEL3细胞、SV40-HCEC细胞
AML12细胞系相关产品:MC-3T3-E1细胞、PIG3细胞、Panc-08.13细胞
NK-92细胞系相关产品:WPMY1细胞、CAL-62细胞、MDA-MB-361细胞
NCIH841细胞系相关产品:C33-A细胞、HARAB细胞、NCI-SNU-761细胞
J.E6-1细胞系相关产品:JROECL 33细胞、SU86_86细胞、18G3.cl 1细胞
NCIH2122细胞系相关产品:LN-382细胞、OVTOKO细胞、NCIH1581细胞
COLO-699细胞系相关产品:LI7细胞、CMT-64细胞、BSC-1细胞
BIU87细胞系相关产品:H2591细胞、NCI-H358细胞、HSAEC1-KT细胞
CAKI 2细胞系相关产品:RPMI-6666细胞、BNL 1MEA.7R.1细胞、CHL/IU细胞
MDCK Type II细胞系相关产品:LMH细胞、Michigan Cancer Foundation-12F细胞、HEC-1A细胞
BEAS 2B细胞系相关产品:NTERA-2细胞、MM1.S细胞、NCI-HUT-125细胞
HuLEC-5a细胞系相关产品:AG06814-M细胞、OCI-AML-5细胞、NBLAN5T细胞
HPDE细胞系相关产品:PC2细胞、CTSC-3细胞、P3X63 AG 8.653细胞
Panc327细胞系相关产品:KPL-1细胞、BEL-7402细胞、COLO-320HSR细胞
SW 1417细胞系相关产品:OB2细胞、SKMEL1细胞、U-2 OS细胞
NALM 6细胞系相关产品:MDA-1386细胞、BT-549细胞、EC-109细胞
RPMI No. 1846细胞系相关产品:NCI-H2081细胞、MDA-MB-231 #4175细胞、SK-OV-3细胞
HP615细胞系相关产品:Panc 8.13细胞、HPASMC细胞、PIG1细胞
SRS-82 Cell:小鼠腹水瘤细胞系
AX-Mel细胞系相关产品:TCMK-1细胞、OCUM-1细胞、AE 1201细胞
OCI Ly1细胞系相关产品:NCIH1437细胞、P3X63 Ag8.653细胞、SUDHL-2细胞
NCI-H1781细胞系相关产品:253JBV细胞、NHEK细胞、ESC-410细胞
CL1-5细胞系相关产品:HuH-1细胞、HEp-2细胞、SW 626细胞
Roswell Park Memorial Institute 7666细胞系相关产品:G-Olig2细胞、Centre Antoine Lacassagne-85-1细胞、Wistar Institute-38细胞
NE1-E6E7细胞系相关产品:SNU668细胞、H-1105细胞、MOLT 4细胞
JIMT1细胞系相关产品:SKMel-28细胞、CL40细胞、Calu-6细胞
NIH:OVCAR-3细胞系相关产品:Super Tube细胞、HDLM-2细胞、IMR32细胞
RK13细胞系相关产品:CCLP1细胞、AMJ2C8细胞、H-2444细胞
PC-3细胞系相关产品:Lec1细胞、C57 Mouse Tumor 93细胞、H2141细胞
NPC-TW 039细胞系相关产品:Leghorn Male Hepatoma cell line细胞、LLC PK1细胞、CAL51细胞
MDCK-II细胞系相关产品:C-Lu-65细胞、U-373-MG细胞、SKMES1细胞
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