"LS180 Cell:人结肠腺癌细胞系
细胞形态:上皮细胞样
细胞生长:贴壁
细胞背景资料:详见相关文献介绍
WM115F细胞系相关产品:WIL2S细胞、KPL-1细胞、LLC PK1细胞
C2C12细胞系相关产品:OC 316细胞、COLO-HSR细胞、RPE D407细胞
Capan1细胞系相关产品:SK-RC-20细胞、UWB1-289细胞、HRMC细胞
JKT-1细胞系相关产品:HEYA8细胞、NCI-SNU-449细胞、HCC0366细胞
细胞物种来源:人源或鼠源等其它物种来源
LS180 Cell:人结肠腺癌细胞系
细胞消化过程总结:其实绝大部分细胞消化的时候是只要用胰酶润洗一遍即可,吸去胰酶后,残留的那些无法计算体积的附着在细胞表面的微量胰酶在37度一般不到2min足够消化细胞(绝大部分1min不到)。对于这些细胞原则上不要用胰酶孵育细胞,连续这样传代,对细胞伤害很大。简单的程序是PBS润洗吸去,胰酶润洗吸去,然后37度消化。2,什么算是消化好了呢?不是细胞全部成间隔分布很离散的单个圆形才算消化好了,一般你肉眼观察贴壁细胞层,只要能移动了,多半呈沙壮移动,其实已经可以了,很多人喜欢把细胞消化或者吹打成完全分离细胞,这是没有必要的。一般能移动了,说明细胞与培养基质材料的附着已经消失了,细胞之间的附着也已经消失了,细胞已经独立分布了(虽然没有呈现很广的离散分布)。这个时候应该停止消化,不要等到看到镜下所有细胞都分离得非常好,间隙很大,才停止。细胞就是完全成单个细胞悬液,之后在贴壁的过程中仍然会聚集,这个是贴壁培养的细胞,尤其是肿瘤细胞的一个特性,无论死活的细胞都是如此,你可以尝试,准备100%的单个细胞悬液,贴壁后观察细胞,仍然是几个几个细胞聚集在一起。一些悬浮培养细胞也是如此,容易聚集,不要去尝试过几个小时就拿出来吹打成单细胞悬液(不要笑,这个是初养悬浮细胞的人常犯的错误,以为悬浮培养就是一个一个分开)。细胞只要能从基质上脱离下来,这个时候即使是成片的(比如Calu-3细胞),吹打不超过20次后(一般10次即可),成小规模聚集(10个细胞左右),是正常的,不要试图再去延长消化时间,或者像有的同学那样吹打1h,等待单细胞悬液出现。比较难消化的细胞(润洗方法5min还不能消化),比如HCT15, LS411和KM12,这样的细胞一般需要用少量胰酶孵育,但也不需要很多,一般100mm dish,一次最多加入500ul,就足够了,一般我加300ul。即使这样难消化的细胞,一般不超过5min,即可见细胞成片移动,就应该停止消化。一些正常细胞也会有难消化的时候,比如tsDC细胞,但也只要用少量胰酶孵育,3min左右即可看到成片沙状移动。
细胞产品包装:复苏形式:T25培养瓶(一瓶)或冻存形式:1ml冻存管(两支)
细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。
细胞常规培养传代流程(请严格遵照无菌操作):1)吸出原培养瓶中的培养基,PBS缓冲液润洗细胞两次,加2-3ml 0.25%胰酶进行消化细胞(注意把握消化时间,通常控制在1-2min);2)镜下观察消化情况,在细胞边缘缩小,贴壁松动时(不建议消化到细胞漂浮)去掉胰酶,加6-8ml完全培养基,轻轻吹打细胞层,尽量把细胞层吹落,吹散;3)取部分细胞悬液转移到新的培养皿/瓶中,添加适当的完全培养基,把细胞悬液打匀,于培养箱中培养;4)注意培养基PH值变化情况,定期换液(每周2-3次),待细胞密度达到80%以后重复1项操作或者冻存;特别注意:(如使用公共实验室或者初次接触细胞培养,建议添加双抗培养)1)收到细胞后请尽快更换为含15%血清的新鲜培养基,如因特殊情况需要继续使用原瓶,请在原瓶培养基中额外添加10%的血清,(原瓶培养基的继续使用时间最长不宜超过72小时);2)贴壁细胞收到当天切忌立刻消化,请将细胞换液后放置培养箱孵育到第二天再做消化传代,请优先选择直径6cm的培养皿进行传代培养;3)如签收时出现培养瓶壁破裂,漏液等情况请及时做好照片记录并联系实验室。
细胞来源说明:细胞主要来源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少数国外著名大学建系
HOC细胞系相关产品:H-2073细胞、293S细胞、H1648细胞
HCC1569细胞系相关产品:MC57细胞、UPCI-SCC-154细胞、SU86-86细胞
CMT 93细胞系相关产品:FaDu细胞、Hs445细胞、P3/NS-1细胞
CCD18细胞系相关产品:T-98G细胞、IM9细胞、NCI-H2110细胞
3T3细胞系相关产品:Me-Wo细胞、WERIRb1细胞、Line 207细胞
细胞生长特性:贴壁或悬浮,详见细胞说明书部分
LS180 Cell:人结肠腺癌细胞系
贴壁细胞消化传代时通常采用两种方法:一、加入胰酶等细胞脱落后,再加培养基中止胰酶作用,离心传代;二、加入胰酶后,镜下观察待细胞始脱落时,弃胰酶,加培养液分瓶。但前者太麻烦,而后者有可能对细胞施加胰酶选择,因为总是贴壁不牢的细胞先脱落,对肿瘤细胞来说,这部分细胞有可能是恶性程度较高的细胞亚群。一种简单的消化传代方法。加入PBS洗去血清或加入胰酶先中和血清的作用(30s),弃之,再加入适量胰酶作用10s-40s(根据细胞消化的难易程度),弃之,这样依赖残余的胰酶就可将细胞消化单细胞。对于较难消化的细胞,可以用2%利多卡因消化5-8分钟,然后再弃去,加培养基吹打也可以,对细胞的影响不大。不用PBS也不用Hanks洗,只要把旧培养液吸的干净一点,直接加酶消化应该不会有什么问题。弃培养液后,用0.04%的EDTA冲洗一次,再用1/4v的0.04%的EDTA室温孵育5min,弃取大部分EDTA,加入与剩余EDTA等量的胰酶(预热)总体积1/10v。消化到有细胞脱落。不过有人说EDTA对细胞不好,有证据吗?培养的BASMC:倒掉旧培养液加入少量胰酶冲一下,倒掉再加入0.125-0.25%胰酶约6-10滴或1ml(25ml bottle)消化再加入适量新培养基中和,并分瓶这种方法简单、省事;效果很好并且不损失细胞!
细胞形态特性:详见细胞说明书
EL4细胞系相关产品:MDCK.2细胞、SK-MEL3细胞、SV40-HCEC细胞
RPMI2650细胞系相关产品:H747细胞、HEC-1-A细胞、HS688AT细胞
NCIH650细胞系相关产品:K7M2 wt细胞、T 24细胞、MDA-361细胞
Kasumi-6细胞系相关产品:WEHI-3B细胞、HS578细胞、OVCA 420细胞
NSC-34细胞系相关产品:CMK细胞、FRhK-4细胞、SKRC 39细胞
Hs739T细胞系相关产品:OCI-Ly 7细胞、B-cell with DC Morphology细胞、H-2171细胞
University of Michigan-Urothelial Carcinoma-14细胞系相关产品:Fortner's melanotic melanoma #3细胞、3T3-442A细胞、HCCC9810细胞
LS180 Cell:人结肠腺癌细胞系
D10.G4.1细胞系相关产品:CHP-126细胞、QGY-7703细胞、MDA-MB157细胞
SuperTube细胞系相关产品:H1930细胞、TGW-I-nu细胞、LM6细胞
B16F1细胞系相关产品:870细胞、IPLB-Sf21细胞、BALB/3T3 cl. A31细胞
SF17细胞系相关产品:HCC2157细胞、OCI-Ly3细胞、SK-N-BE-2细胞
293 HEK细胞系相关产品:FAO-1细胞、Huh 7.5细胞、Sp 2/0-Ag 14细胞
HCM细胞系相关产品:HEK-AD293细胞、AG 9细胞、WIL2-S细胞
V79细胞系相关产品:MDCKII-WT细胞、SW-948细胞、Tokyo Medical and Dental university 8细胞
MC3T3-L1细胞系相关产品:C-Li-7细胞、BV2细胞、MES-SA-Dx5细胞
WM-239细胞系相关产品:C8D1A细胞、Kit 225-K6细胞、2PK3细胞
WM-239细胞系相关产品:C8D1A细胞、Kit 225-K6细胞、2PK3细胞
OVMANA细胞系相关产品:SK-MEL-5细胞、LIXC-002细胞、PA317细胞
NTERA-2/D1细胞系相关产品:RM-1细胞、H-520细胞、MAVER-1细胞
SRA 01/04细胞系相关产品:HN4细胞、CEM-0细胞、MC38细胞
Mac-1细胞系相关产品:U87细胞、SNU761细胞、3396细胞
SCaBER细胞系相关产品:QGY7703细胞、RGC6细胞、L 428细胞
OCI-AML-4细胞系相关产品:SK-N-DZ细胞、MC9细胞、SW 837细胞
IOSE-29细胞系相关产品:LTEP-a-2细胞、SNU-C2B细胞、MAntle cell VERona-1细胞
NCI-H1915细胞系相关产品:NCIADRRES细胞、NCI-H2195细胞、SK-N-BE-2c细胞
B104 [Rat neuroblastoma]细胞系相关产品:C57/B6-L细胞、HHL5细胞、C166细胞
GC1-SPG细胞系相关产品:SaOS-2细胞、SUM149-PT细胞、H-1048细胞
Panc5.04细胞系相关产品:Hs281T细胞、H2342细胞、TOV21细胞
MDA-MB-330细胞系相关产品:U-226AR1细胞、SNU-216细胞、HLE B-3细胞
SUM-149PT细胞系相关产品:AU 565细胞、LIM 1215细胞、HEYA8细胞
HREC细胞系相关产品:H-1672细胞、J.E6-1细胞、PLC-PRF-5细胞
NCIH1651细胞系相关产品:KG-1细胞、HuT 78细胞、NCIH1792细胞
P3HR-1细胞系相关产品:CA-OV-3细胞、REC 1细胞、KMS11细胞
Ku812细胞系相关产品:VK-2/E6E7细胞、HTh 74细胞、EFM192细胞
Ly7细胞系相关产品:CBRH-7919细胞、H-748细胞、MD Anderson-Metastatic Breast-453细胞
NCIH810细胞系相关产品:NCI-H2126细胞、NFHIOSE-29细胞、LS513细胞
H1975细胞系相关产品:GM0637细胞、Spodoptera frugiperda clone 9细胞、Human Epidermoid carcinoma #2细胞
HOC1细胞系相关产品:LIXC-002细胞、H1092细胞、OVCA420细胞
SW 403细胞系相关产品:NBL_S细胞、4T1-LUC细胞、A375细胞
NCI-H102细胞系相关产品:KHYG1细胞、B/C3T3细胞、WIL2 S细胞
SUM 190细胞系相关产品:SV-HUC-1细胞、SH-SY5Y Parental细胞、HPAF-II/CD18细胞
MCF 10A细胞系相关产品:OCI-Ly01细胞、HBdSMC细胞、University of Michigan-Renal Carcinoma-2细胞
OVTOKO细胞系相关产品:RL-65细胞、Tn 5B1-4细胞、ketr 3细胞
Medical Research Council cell strain-5细胞系相关产品:SupT1细胞、G 292 Clone A 141B1细胞、IR983F细胞
MB49细胞系相关产品:HOC细胞、SF-763细胞、Mhh-Call 2细胞
Ishikawa细胞系相关产品:C166细胞、CCD19Lu细胞、SUM-102PT细胞
Ca761细胞系相关产品:NCIH2170细胞、ST细胞、PTK 1细胞
MDA415细胞系相关产品:H2135细胞、A 375细胞、HPDLF细胞
U373MG细胞系相关产品:TE85细胞、C127细胞、CHP126细胞
NKT细胞系相关产品:MASMC细胞、Tca8113细胞、SKMEL5细胞
LS180 Cell:人结肠腺癌细胞系
MSTO-211 H细胞系相关产品:H-1666细胞、L5178Y-R细胞、Intestinal Porcine Epithelial Cell line-J2细胞
T-T细胞系相关产品:CWR22-Rv1细胞、32D clone3细胞、SBC-5细胞
NPA'87细胞系相关产品:Lewis-Lung细胞、HBZY1细胞、87 MG细胞
BE2-C细胞系相关产品:HCT/FU细胞、U-2-OS细胞、NCI-841细胞
H-1404细胞系相关产品:RPMI.8226细胞、CCC-HSF-1细胞、HTR-8细胞
SK_N_FI细胞系相关产品:UMUC1细胞、SUDHL4细胞、HMC-1细胞
NCIH2196细胞系相关产品:HCT/Taxo1细胞、CAOV4细胞、RKO_AS45细胞
DHL-8细胞系相关产品:NS-1细胞、CAL-51细胞、PTK 2细胞
Hs852T细胞系相关产品:UCLA NPA871细胞、NCI-H1573细胞、KTA-7细胞
BCP1细胞系相关产品:M4e细胞、SK-CO-1细胞、IOSE29细胞
Leydig细胞系相关产品:CTSC-3细胞、BPH-1细胞、MC3T3-L1细胞
MHH-CALL2细胞系相关产品:D-283MED细胞、NTERA2细胞、SG231细胞
"