"hTERT-HME1 Cell:人黑色素瘤细胞系
细胞形态:上皮细胞样
细胞生长:贴壁
细胞背景资料:详见相关文献介绍
LS-180细胞系相关产品:COLO678细胞、ABC1细胞、K1735细胞
MXI细胞系相关产品:Earles's cells细胞、HET-1A细胞、HepG2-luc细胞
P3J细胞系相关产品:SW48细胞、P3-x63-Ag8 653细胞、CHOK1细胞
OUMS23细胞系相关产品:LA795细胞、WEHI-164细胞、Panc 03.27细胞
细胞物种来源:人源或鼠源等其它物种来源
hTERT-HME1 Cell:人黑色素瘤细胞系
如何把细胞养的形态更好更漂亮。1.不同的细胞,喜欢的环境是不一样的。这个不仅仅是说培养基的不同,还有就是细胞生长的空间密度问题。有一些细胞是数量多一点比较好生长,生长状态也比较好。这种一般是属于生长速度慢的细胞。譬如内皮细胞。而有一些是细胞是数量少一点细胞状态会生长的比较好,譬如巨噬细胞和某些肿瘤细胞。尤其是巨噬细胞,生长速度非常得快,贴壁速度很快,所以传代时就应该留很少量的细胞,这样细胞状态会比较好。并且巨噬细胞比较喜欢扎堆生长,而堆与堆之间是有空间的。如果长成相连在一起的一满片的时候,细胞形态基本上就会差了,老化的会比较多,对后期实验结果是不好的。所以在养细胞的时候应该摸索该细胞喜欢的生长空间密度问题。2.对于有些人总是会遇到养的细胞形态怎么都不好的问题。这个其实是有一个方法可以改善的。对于贴壁细胞,如果细胞形态不好,(或者细胞形态不清晰,表面似有异物等)可以在传代的时候进行如下操作:首先,倒掉旧的培养基,加入3ml新的培养基(有无血清的都可)洗涤一次,用滴管吸走,然后再加入3ml的培养基,进行预吹打,控制吹打力度,轻轻地大概沿着瓶底过一遍,然后吸走。这时侯再开始正式的消化、吹打。(巨噬细胞我们只吹打,不消化的);其次,把吹打下来的细胞悬液加入到新的培养瓶内,培养瓶事先加入培养基,放入培养箱内培养,按时间点观察细胞贴壁情况。10分钟观察一次,20分钟,30分钟观察一次。选择一个时间点,已经有部分细胞贴壁的情况下,重新置于洁净台,底面朝上迅速倒出其中的培养基,加入3ml新培养基再轻轻洗一次。然后加入完全培养基培养。后续观察细胞生长情况以及形态。我称之为“二传”。呵呵。如果一次效果还不理想,可重复多次。直到找到细胞完美形态。其中要注意,结合细胞喜欢的生长情况。喜欢多一点数量长得好的细胞你就等贴壁细胞比较多点的时候再传。反之亦然。3.关于培养瓶内加入培养基的量的问题。这个是要靠自己去摸索你所养的细胞的。并不是小的玻璃方瓶12ml,大方瓶14ml的。有些细胞反而是培养基少一点相反细胞形态会长得比较好。(可能也是竞争很大,有优胜劣汰吧。呵呵。)对于生长速度快的细胞,易生长的细胞加少一点培养基细胞形态会更好。但是要注意换液掌握。4.关于选择培养瓶的问题。个人发现生长速度快的细胞在玻璃瓶内生长的状态会比一次性相对好一些。而对于同一种细胞,在其生长旺盛快速的时期在玻璃瓶内的生长状态也比内好。这可能是因为比玻璃瓶更容易贴壁。生长速度快的细胞在这种相对“更安逸”的环境里反而长得状态不如玻璃瓶好。所以对于生长速度慢的细胞如果想要更漂亮的细胞状态,比玻璃瓶会好,对于生长速度慢的细胞,玻璃瓶则会更好。同样,对于同一种细胞,在其生长速度慢的时候,会好一点,比如刚刚复苏的时候,或者原代培养的时候。而在其生长旺盛的时候,玻璃瓶则相对会好一点。
细胞产品包装:复苏形式:T25培养瓶(一瓶)或冻存形式:1ml冻存管(两支)
细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。
细胞冻存的步骤:1)选择处于对数生长期的细胞,在冻存前一天换液。将多个培养瓶中的细胞培养液去掉,用0.25% 胰蛋白酶消化。适时去掉胰蛋白酶,加入少量新培养液。用吸管吸取培养液反复吹打瓶壁上的细胞,使其成为均匀分散的细胞悬液。悬浮生产细胞则不要消化处理。然后将细胞收集于离心管中离心(1000r/min,10分钟);2)去上清液,加入含20%小牛血清的完全培养基,于4℃预冷15分钟后,逐滴加入已无菌的DMSO或甘油,用吸管轻轻吹打使细胞均匀,细胞浓度为5×106~1×107/mL之间。(冻存培养液的配置是不是一定要用小牛血清呢?答案是不一定的,具体要看培养的细胞类型来选择;3)将分装上述细胞悬液于2ml冻存管中,每管0.25ml。冻存管要将盖子盖紧,并标记好细胞名称和冻存日期,同时作好登记(日期、细胞种类及代次、冻存支数);4)将装好细胞的冻存管放到冻存盒中,-80℃冰箱过夜。;如果有程序降温器(放在-80℃冰箱过夜,放入液氮罐);或者可以在4℃,2h;然后转到-20℃,2h;-80℃,2h;放入液氮罐;5)细胞冻存在液氮中可以长期保存,但为妥善起见,冻存半年后,取出一只冻存管细胞复苏培养,观察生长情况,然后再继续冻存。
细胞来源说明:细胞主要来源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少数国外著名大学建系
ST486细胞系相关产品:GalK1细胞、BNCL-2细胞、CHP100细胞
Jurkat77细胞系相关产品:HCEC细胞、P3.times.63 Ag8.653细胞、H766T细胞
TSU-Pr1细胞系相关产品:H1568细胞、COLO-829细胞、R.K.13细胞
GM15452细胞系相关产品:Hs 343.T细胞、Human Hepatocyte Line 5细胞、COLO 320细胞
MAVER-1细胞系相关产品:AML-193细胞、NCI-H2170细胞、SNU-520细胞
细胞生长特性:贴壁或悬浮,详见细胞说明书部分
hTERT-HME1 Cell:人黑色素瘤细胞系
细胞传代培养实验:体外培养的原代细胞或细胞株要在体外持续地培养就必须传代,以便获得稳定的细胞株或得到大量的同种细胞,并维持细胞种的延续。培养的细胞形成单层汇合以后,由于密度过大生存空间不足而引起营养枯竭,将培养的细胞分散,从容器中取出,以1:2或1:3以上的比率转移到另外的容器中进行培养,即为传代培养;细胞“一代”指从细胞接种到分离再培养的一段期间,与细胞世代或倍增不同。在一代中,细胞培增3~6次。细胞传代后,一般经过三个阶段:游离期、指数增生期和停止期。常用细胞分裂指数表示细胞增殖的旺盛程度,即细胞群的分裂相数/100个细胞。一般细胞分裂指数介于0.2%~0.5%,肿瘤细胞可达3~5%;细胞接种2~3天分裂增殖旺盛,是活力时期,称指数增生期(对数生长期),适宜进行各种试验。实验步骤:1.将长成的培养细胞从二氧化碳培养箱中取出,在超净工作台中倒掉瓶内的培养液,加入少许消化液。(以液面盖住细胞为宜),静置5~10分钟。2.在倒置镜下观察被消化的细胞,如果细胞变圆,相互之间不再连接成片,这时应立即在超净台中将消化液倒掉,加入3~5ml新鲜培养液,吹打,制成细胞悬液。3.将细胞悬液吸出2ml左右,加到另一个培养瓶中并向每个瓶中分别加3ml左右培养液,盖好瓶塞,送回二氧化碳培养箱中,继续进行培养。一般情况,传代后的细胞在2小时左右就能附着在培养瓶壁上,2~4天就可在瓶内形成单层,需要再次进行传代。
细胞形态特性:详见细胞说明书
UCH-1细胞系相关产品:RCC10RGB细胞、LA-N-5细胞、H1944细胞
MBT2细胞系相关产品:PC-9/GR细胞、M-14细胞、MHCC97H细胞
NCTC929细胞系相关产品:OAW-42细胞、GM07404细胞、SK-N-BE(1)n细胞
MDA-MB 231细胞系相关产品:HCT 116细胞、UM-UC-1细胞、HCC1806细胞
LSECs细胞系相关产品:NCI-H295细胞、QGY7701细胞、DHL10细胞
OCI-Ly 7细胞系相关产品:H220细胞、253J-BV细胞、Tsup-1细胞
KYSE 410细胞系相关产品:ZR7530细胞、Dysplastic Oral Keratinocyte细胞、786.O细胞
hTERT-HME1 Cell:人黑色素瘤细胞系
CCRF/CEM/0细胞系相关产品:H9c2(2-1)细胞、HCC-1419细胞、H661细胞
ECC-1细胞系相关产品:3T3 Swiss Albino细胞、Neuro2a细胞、H2126细胞
QGY-7703细胞系相关产品:FLC7细胞、PFSK1细胞、MDCK2细胞
UMC11细胞系相关产品:U-373-MG细胞、KRC/Y细胞、NTERA-2 cl.D1细胞
A549ATCC细胞系相关产品:H-1435细胞、SJCRH30细胞、RGB细胞
HMC-1细胞系相关产品:ML-2细胞、NCI-H711细胞、H35 Reuber细胞
Tu686细胞系相关产品:UCLA-RO 81细胞、SUM102细胞、RPMI8402细胞
NKM-1细胞系相关产品:ZYM-SVEC01细胞、SCL-1细胞、Roswell Park Memorial Institute 1788细胞
NCIH1975细胞系相关产品:SW 480细胞、Tb 1 Lu细胞、ME-1 [Human leukemia]细胞
MOVAS细胞系相关产品:SUM159PT细胞、KHYG细胞、M-O7e细胞
ETCC007细胞系相关产品:VP303细胞、Panc 08.13细胞、RCS细胞
BL2141细胞系相关产品:CAL148细胞、MOVAS-1细胞、PL 45细胞
3T3F442A细胞系相关产品:Microbiological Associates-104细胞、JB-6 Cl 30细胞、NWA细胞
NCI-Hut 125细胞系相关产品:R1800[RA]细胞、NMCG-1细胞、Strain V细胞
COS-1细胞系相关产品:OACP4C细胞、H-2172细胞、CL-34细胞
MV4:11细胞系相关产品:P30OHK细胞、K1细胞、BXPC3细胞
D-341细胞系相关产品:NHA细胞、COLO684细胞、BE2-M17细胞
SACCLM细胞系相关产品:HEK 293细胞、HCT/Taxo1细胞、Det. 562细胞
RPMI8226/S细胞系相关产品:HFL-1细胞、SMA-560细胞、BEL7404细胞
MC/9细胞系相关产品:A7r5细胞、H-1355细胞、CMEC/D3细胞
HT clone H9细胞系相关产品:AsPC-1细胞、KU-19-19细胞、NCI-H2081细胞
WM 239A细胞系相关产品:WEHI 164 TC细胞、NCI-H1672细胞、JHH-2细胞
GM05887细胞系相关产品:RBL.2H3细胞、H-209细胞、ZR75_1细胞
L-M(TK-)细胞系相关产品:GB-1细胞、BALB/3T3细胞、KMM1细胞
Douglas Foster-1细胞系相关产品:NCI-H2227细胞、APRE-19细胞、NIH:OVCAR-3细胞
578T细胞系相关产品:ME1细胞、MES 23.5细胞、HT 29细胞
SC细胞系相关产品:DU145细胞、HT 115细胞、H87细胞
mIMCD3细胞系相关产品:BC-023细胞、CEM C7细胞、CNE-1细胞
TE354.T细胞系相关产品:S.B.细胞、HCC44细胞、RS1细胞
MX1细胞系相关产品:BXPC3细胞、ASH-3细胞、Lu-65细胞
ECC 12细胞系相关产品:GC-2细胞、J774细胞、3T3 J2细胞
CCD-841-CoN细胞系相关产品:DOK细胞、SK MEL 28细胞、LK 2细胞
H-1930细胞系相关产品:PaCa2细胞、HS-294-T细胞、253J-BV细胞
MHCC 97-L细胞系相关产品:CT-26 WT细胞、U-2OS细胞、Colon38细胞
OV-1063细胞系相关产品:C127细胞、SKMES1细胞、HCT-15细胞
NCI-H510细胞系相关产品:NCI-H1755细胞、BE(2)M17细胞、BI-Mel细胞
no-11细胞系相关产品:MiaPaca.2细胞、KMB-17细胞、HRIF细胞
HEC151细胞系相关产品:Monomac-1细胞、LN-382细胞、253J细胞
H322细胞系相关产品:P3-x63-Ag8 653细胞、Jiyoye细胞、293F细胞
SUSM1细胞系相关产品:SW 527细胞、KNS-42细胞、Eca109细胞
J 82细胞系相关产品:RK-13细胞、MNNG-HOS (TE 85, clone F-5)细胞、REC细胞
JCA1细胞系相关产品:NCI-Hut 125细胞、Sp2/O细胞、H-64细胞
BEAS-2B细胞系相关产品:PA-1细胞、143TK-细胞、HCC0078细胞
hTERT-HME1 Cell:人黑色素瘤细胞系
SCC 9细胞系相关产品:MLE-12细胞、SK-MEL-24细胞、GM03671C细胞
P3X63Ag8653细胞系相关产品:A704细胞、CHO cell clone K1细胞、HEC-1B细胞
SW579细胞系相关产品:Human ErythroLeukemia细胞、HS766T细胞、Ej138细胞
LTEP-s细胞系相关产品:IEC6细胞、CCRF-CEM/S细胞、TR 146细胞
KNS62细胞系相关产品:LLC-MK-2细胞、AML12细胞、SKNEP-1细胞
D283-MED细胞系相关产品:MBVP细胞、CAL 78细胞、WM115-mel细胞
TB-1 Lu细胞系相关产品:Jurkat细胞、b.End3细胞、D341MD细胞
WML2细胞系相关产品:UMR-106细胞、BCP1细胞、K7M2细胞
CT26-clone 25细胞系相关产品:MRCV细胞、Hce8693细胞、SF 539细胞
Y-1细胞系相关产品:Ontario Cancer Institute-Acute Myeloid Leukemia-2细胞、Panc4.03细胞、HEC251细胞
SW13细胞系相关产品:NCIH1436细胞、WERI-Rb1细胞、hTERT-HME-1细胞
WERI Rb-1细胞系相关产品:LY细胞、PaCa2细胞、NIH:OVCAR-5细胞
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