"BRL-3A Cell:大鼠正常肝细胞系
细胞形态:上皮细胞样
细胞生长:贴壁
细胞背景资料:详见相关文献介绍
BT 325细胞系相关产品:BCaP-37细胞、KNS-62细胞、DU-4475细胞
TCC-SUP细胞系相关产品:NTERA-2/D1细胞、COLO824细胞、SK-RC-20细胞
CHP-212细胞系相关产品:RGM-1细胞、NCl-H157细胞、P3-X63-Ag8-6-5-3细胞
H-2330细胞系相关产品:Soleus clone 8细胞、RL-952细胞、HEK293FT细胞
细胞物种来源:人源或鼠源等其它物种来源
BRL-3A Cell:大鼠正常肝细胞系
细胞消化过程总结:其实绝大部分细胞消化的时候是只要用胰酶润洗一遍即可,吸去胰酶后,残留的那些无法计算体积的附着在细胞表面的微量胰酶在37度一般不到2min足够消化细胞(绝大部分1min不到)。对于这些细胞原则上不要用胰酶孵育细胞,连续这样传代,对细胞伤害很大。简单的程序是PBS润洗吸去,胰酶润洗吸去,然后37度消化。2,什么算是消化好了呢?不是细胞全部成间隔分布很离散的单个圆形才算消化好了,一般你肉眼观察贴壁细胞层,只要能移动了,多半呈沙壮移动,其实已经可以了,很多人喜欢把细胞消化或者吹打成完全分离细胞,这是没有必要的。一般能移动了,说明细胞与培养基质材料的附着已经消失了,细胞之间的附着也已经消失了,细胞已经独立分布了(虽然没有呈现很广的离散分布)。这个时候应该停止消化,不要等到看到镜下所有细胞都分离得非常好,间隙很大,才停止。细胞就是完全成单个细胞悬液,之后在贴壁的过程中仍然会聚集,这个是贴壁培养的细胞,尤其是肿瘤细胞的一个特性,无论死活的细胞都是如此,你可以尝试,准备100%的单个细胞悬液,贴壁后观察细胞,仍然是几个几个细胞聚集在一起。一些悬浮培养细胞也是如此,容易聚集,不要去尝试过几个小时就拿出来吹打成单细胞悬液(不要笑,这个是初养悬浮细胞的人常犯的错误,以为悬浮培养就是一个一个分开)。细胞只要能从基质上脱离下来,这个时候即使是成片的(比如Calu-3细胞),吹打不超过20次后(一般10次即可),成小规模聚集(10个细胞左右),是正常的,不要试图再去延长消化时间,或者像有的同学那样吹打1h,等待单细胞悬液出现。比较难消化的细胞(润洗方法5min还不能消化),比如HCT15, LS411和KM12,这样的细胞一般需要用少量胰酶孵育,但也不需要很多,一般100mm dish,一次最多加入500ul,就足够了,一般我加300ul。即使这样难消化的细胞,一般不超过5min,即可见细胞成片移动,就应该停止消化。一些正常细胞也会有难消化的时候,比如tsDC细胞,但也只要用少量胰酶孵育,3min左右即可看到成片沙状移动。
细胞产品包装:复苏形式:T25培养瓶(一瓶)或冻存形式:1ml冻存管(两支)
细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。
细胞冻存的步骤:1)选择处于对数生长期的细胞,在冻存前一天换液。将多个培养瓶中的细胞培养液去掉,用0.25% 胰蛋白酶消化。适时去掉胰蛋白酶,加入少量新培养液。用吸管吸取培养液反复吹打瓶壁上的细胞,使其成为均匀分散的细胞悬液。悬浮生产细胞则不要消化处理。然后将细胞收集于离心管中离心(1000r/min,10分钟);2)去上清液,加入含20%小牛血清的完全培养基,于4℃预冷15分钟后,逐滴加入已无菌的DMSO或甘油,用吸管轻轻吹打使细胞均匀,细胞浓度为5×106~1×107/mL之间。(冻存培养液的配置是不是一定要用小牛血清呢?答案是不一定的,具体要看培养的细胞类型来选择;3)将分装上述细胞悬液于2ml冻存管中,每管0.25ml。冻存管要将盖子盖紧,并标记好细胞名称和冻存日期,同时作好登记(日期、细胞种类及代次、冻存支数);4)将装好细胞的冻存管放到冻存盒中,-80℃冰箱过夜。;如果有程序降温器(放在-80℃冰箱过夜,放入液氮罐);或者可以在4℃,2h;然后转到-20℃,2h;-80℃,2h;放入液氮罐;5)细胞冻存在液氮中可以长期保存,但为妥善起见,冻存半年后,取出一只冻存管细胞复苏培养,观察生长情况,然后再继续冻存。
细胞来源说明:细胞主要来源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少数国外著名大学建系
HRPEpiC细胞系相关产品:HDQ-P1细胞、RSC-364细胞、QBI-HEK 293A细胞
Stanford University-Diffuse Histiocytic Lymphoma-5细胞系相关产品:MeWo细胞、HCC-9724细胞、H-520细胞
HCC1143细胞系相关产品:Biopsy xenograft of Pancreatic Carcinoma line-3细胞、NL-20细胞、MDCK-II细胞
VP303细胞系相关产品:Huh-7细胞、COLO 205细胞、MOLP-8细胞
P3HR1细胞系相关产品:SNU119细胞、KYSE 450细胞、Clone 166细胞
细胞生长特性:贴壁或悬浮,详见细胞说明书部分
BRL-3A Cell:大鼠正常肝细胞系
细胞传代培养实验:体外培养的原代细胞或细胞株要在体外持续地培养就必须传代,以便获得稳定的细胞株或得到大量的同种细胞,并维持细胞种的延续。培养的细胞形成单层汇合以后,由于密度过大生存空间不足而引起营养枯竭,将培养的细胞分散,从容器中取出,以1:2或1:3以上的比率转移到另外的容器中进行培养,即为传代培养;细胞“一代”指从细胞接种到分离再培养的一段期间,与细胞世代或倍增不同。在一代中,细胞培增3~6次。细胞传代后,一般经过三个阶段:游离期、指数增生期和停止期。常用细胞分裂指数表示细胞增殖的旺盛程度,即细胞群的分裂相数/100个细胞。一般细胞分裂指数介于0.2%~0.5%,肿瘤细胞可达3~5%;细胞接种2~3天分裂增殖旺盛,是活力时期,称指数增生期(对数生长期),适宜进行各种试验。实验步骤:1.将长成的培养细胞从二氧化碳培养箱中取出,在超净工作台中倒掉瓶内的培养液,加入少许消化液。(以液面盖住细胞为宜),静置5~10分钟。2.在倒置镜下观察被消化的细胞,如果细胞变圆,相互之间不再连接成片,这时应立即在超净台中将消化液倒掉,加入3~5ml新鲜培养液,吹打,制成细胞悬液。3.将细胞悬液吸出2ml左右,加到另一个培养瓶中并向每个瓶中分别加3ml左右培养液,盖好瓶塞,送回二氧化碳培养箱中,继续进行培养。一般情况,传代后的细胞在2小时左右就能附着在培养瓶壁上,2~4天就可在瓶内形成单层,需要再次进行传代。
细胞形态特性:详见细胞说明书
HCC941122细胞系相关产品:NCI-H1963细胞、Blotchy fibroblast-11细胞、H-1793细胞
NCI-H2087细胞系相关产品:SW962细胞、2B4细胞、KYSE30细胞
WSU-DLCL(2)细胞系相关产品:MDCK细胞、V 79-4细胞、HCV 29细胞
P3 NS1 Ag4细胞系相关产品:Hs 706.T细胞、National Medical Center-Glioma 1细胞、RCC-10细胞
H220细胞系相关产品:H-676细胞、L cells细胞、EL 4细胞
293-GP细胞系相关产品:SHG 44细胞、SKES1细胞、Panc2.03细胞
SUM159细胞系相关产品:DH-82细胞、GM02132C细胞、SK-RC 42细胞
BRL-3A Cell:大鼠正常肝细胞系
NCI-H378细胞系相关产品:WRL-68细胞、RC-4B细胞、KHYG细胞
ONS-76细胞系相关产品:3D4/21细胞、SC细胞、KRC Y细胞
NCIH1155细胞系相关产品:LS 1034细胞、IEC18细胞、Opossum Kidney细胞
7404细胞系相关产品:4-1st细胞、Hs 706.T细胞、Hs 821.T细胞
SK-RC-42细胞系相关产品:LoMeT-ccRcc细胞、U87细胞、Stanford University-Diffuse Histiocytic Lymphoma-6细胞
MT2细胞系相关产品:HS-294-T细胞、BIU87细胞、DMS273细胞
Hs819T细胞系相关产品:HS-766-T细胞、U2OS细胞、INS1-E细胞
RPMI 1788细胞系相关产品:Ca Ski细胞、BIU-87/Adr细胞、GM637A细胞
MESSA/Dx5细胞系相关产品:KM12-SM细胞、HLEC-B3细胞、MEG01细胞
MESSA/Dx5细胞系相关产品:KM12-SM细胞、HLEC-B3细胞、MEG01细胞
FOX-NY细胞系相关产品:A-875细胞、C8161细胞、MLO-Y4细胞
P3 88 D1细胞系相关产品:UM-UC-14细胞、SF-539 BT细胞、MES13细胞
3T6细胞系相关产品:L cells细胞、alpha TC1-6细胞、OV 1063细胞
G 401细胞系相关产品:PC-9细胞、HO8910细胞、HEB细胞
SF-126细胞系相关产品:HGSMC细胞、OCIAML2细胞、Lu-99A细胞
NTERA-2cl.D1细胞系相关产品:DHBE细胞、MDA PCa 2b细胞、KCL22S细胞
M-07e细胞系相关产品:KP-2细胞、TGW-nu-1细胞、NCI-H2108细胞
RC-4B/C细胞系相关产品:SW-948细胞、BA/F3细胞、SK Mel28细胞
SUM149-PT细胞系相关产品:MHCC-LM3细胞、Vero E-6细胞、NOMO-1细胞
BRL-3A细胞系相关产品:Calu-6细胞、Hi5细胞、KM.12细胞
NCI-H520细胞系相关产品:Hs888T细胞、DC2.4细胞、HIEC-6细胞
H-735细胞系相关产品:P30/Ohkubo细胞、LS 1034细胞、IPAM-WT细胞
HCC 94细胞系相关产品:624mel细胞、SK-MEL 28细胞、hTERT RPE-1细胞
MGH-UI细胞系相关产品:ASH3细胞、Bovine Turbinate细胞、SK-MEL3细胞
HFTF细胞系相关产品:HeLa细胞、AX-Mel细胞、NCIH1048细胞
U-87MG ATCC细胞系相关产品:BJ [Human fibroblast]细胞、SW 1222细胞、HT-1376细胞
LA795细胞系相关产品:Vero from pool #76细胞、HLF-a细胞、OVCAR-5细胞
SKG-3a细胞系相关产品:TALL1细胞、NIT-1细胞、Hs 604.T细胞
NW38细胞系相关产品:H1648细胞、MDA MB 361细胞、NTERA2-D1细胞
UPCI:SCC90细胞系相关产品:Jurkat (clone E6-1)细胞、NCIH1155细胞、GM00637B细胞
LA-795细胞系相关产品:NR 8383细胞、HTori 3细胞、DHL6细胞
LA4细胞系相关产品:293/EBNA-1细胞、NS1细胞、T HEECs细胞
SP2-0-Ag14细胞系相关产品:KNS-81细胞、Toledo细胞、MHH-CALL2细胞
MDA MB 231细胞系相关产品:L5178Y-R细胞、MX1细胞、E.G7-OVA细胞
T98-G细胞系相关产品:H-28细胞、D341 Med细胞、OV1/P细胞
JB-6细胞系相关产品:H322细胞、NCIH740细胞、COLO 824细胞
QGY7703细胞系相关产品:Jurkat77细胞、PK-15细胞、SuDHL 5细胞
SMA 560细胞系相关产品:HPAF-II细胞、H2444细胞、I90细胞
HMSC细胞系相关产品:A2780CP细胞、SNU-387细胞、KU.812细胞
NCI-SNU-475细胞系相关产品:PANC-02-03细胞、Madison细胞、BHP-10细胞
DF-1细胞系相关产品:H1184细胞、UPCI:SCC090细胞、NCIH727细胞
Sun Yat-sen university Ophtalmic center-Retinoblastoma 50细胞系相关产品:Hs822T细胞、SNU-449细胞、U266 B1细胞
HCC0827细胞系相关产品:RPMI-8402细胞、3 LL细胞、IBRS-2细胞
BRL-3A Cell:大鼠正常肝细胞系
MSTO-211H细胞系相关产品:H-748细胞、Bx-PC3细胞、ECGI10细胞
H-865细胞系相关产品:Huh-7.5细胞、A20细胞、SKES-1细胞
DHL-8细胞系相关产品:NS-1细胞、CAL-51细胞、PTK 2细胞
H-747细胞系相关产品:HPC-Y5细胞、H727细胞、VMRC-LCD细胞
H2030细胞系相关产品:Molm14细胞、CALU1细胞、L 1210细胞
3D4/21细胞系相关产品:32D CL3细胞、MNNG/HOS Cl #5细胞、TFH细胞
OCI/AML-5细胞系相关产品:EC-GI-10细胞、253J-Bladder-V细胞、MHCC97-H细胞
A-673细胞系相关产品:NCI-H2085细胞、Biopsy xenograft of Pancreatic Carcinoma line-3细胞、KG-1a细胞
HEY A8细胞系相关产品:ME-180细胞、H-2198细胞、CMK细胞
MES13细胞系相关产品:FTC-133细胞、COLO201细胞、A-2780细胞
Neukoplast细胞系相关产品:HKF细胞、Laboratory of Allergic Diseases 2细胞、TOV21G细胞
LM(TK-)细胞系相关产品:HCC0015细胞、Caov-4细胞、OV1/P细胞
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