"L-02 Cell:人肝细胞系
细胞形态:上皮细胞样
细胞生长:贴壁
细胞背景资料:详见相关文献介绍
HCCC-9810细胞系相关产品:ES2细胞、CAL-148细胞、MDA-MB-231细胞
NTHY-ORI3.1细胞系相关产品:hEEC细胞、Mv1Lu细胞、HMy2.CIR细胞
NCI H157细胞系相关产品:Hs-606-T细胞、HPAF/CD18细胞、KGN细胞
Hs839.T细胞系相关产品:SCC154细胞、VMM39细胞、Becker细胞
细胞物种来源:人源或鼠源等其它物种来源
L-02 Cell:人肝细胞系
细胞消化过程总结:其实绝大部分细胞消化的时候是只要用胰酶润洗一遍即可,吸去胰酶后,残留的那些无法计算体积的附着在细胞表面的微量胰酶在37度一般不到2min足够消化细胞(绝大部分1min不到)。对于这些细胞原则上不要用胰酶孵育细胞,连续这样传代,对细胞伤害很大。简单的程序是PBS润洗吸去,胰酶润洗吸去,然后37度消化。2,什么算是消化好了呢?不是细胞全部成间隔分布很离散的单个圆形才算消化好了,一般你肉眼观察贴壁细胞层,只要能移动了,多半呈沙壮移动,其实已经可以了,很多人喜欢把细胞消化或者吹打成完全分离细胞,这是没有必要的。一般能移动了,说明细胞与培养基质材料的附着已经消失了,细胞之间的附着也已经消失了,细胞已经独立分布了(虽然没有呈现很广的离散分布)。这个时候应该停止消化,不要等到看到镜下所有细胞都分离得非常好,间隙很大,才停止。细胞就是完全成单个细胞悬液,之后在贴壁的过程中仍然会聚集,这个是贴壁培养的细胞,尤其是肿瘤细胞的一个特性,无论死活的细胞都是如此,你可以尝试,准备100%的单个细胞悬液,贴壁后观察细胞,仍然是几个几个细胞聚集在一起。一些悬浮培养细胞也是如此,容易聚集,不要去尝试过几个小时就拿出来吹打成单细胞悬液(不要笑,这个是初养悬浮细胞的人常犯的错误,以为悬浮培养就是一个一个分开)。细胞只要能从基质上脱离下来,这个时候即使是成片的(比如Calu-3细胞),吹打不超过20次后(一般10次即可),成小规模聚集(10个细胞左右),是正常的,不要试图再去延长消化时间,或者像有的同学那样吹打1h,等待单细胞悬液出现。比较难消化的细胞(润洗方法5min还不能消化),比如HCT15, LS411和KM12,这样的细胞一般需要用少量胰酶孵育,但也不需要很多,一般100mm dish,一次最多加入500ul,就足够了,一般我加300ul。即使这样难消化的细胞,一般不超过5min,即可见细胞成片移动,就应该停止消化。一些正常细胞也会有难消化的时候,比如tsDC细胞,但也只要用少量胰酶孵育,3min左右即可看到成片沙状移动。
细胞产品包装:复苏形式:T25培养瓶(一瓶)或冻存形式:1ml冻存管(两支)
细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。
造成实验室细胞污染常见情况总结:细胞培养中最常见污染的是细菌、真菌和支原体污染。细胞一旦污染,大多数较难处理。那么,哪些情况我们不注意的话就会造成细胞污染呢?我们根据常见细胞培养实验分析总结下。【违规操作】1)为节省时间,有人已经用超净台四个多小时,不开紫外灭菌30min,酒精擦拭后直接开始试验;2)器材或者溶液很久没用,未检测是否污染而直接使用;离心管多次使用,枪头为了方便交叉使用;3)超净台不点酒精灯;点了酒精灯放在右上角,而你在左下角做试验;4)不带手套,徒手操作;5)细胞培养间配备枪式移液器、手术器械、离心机、冰箱等专用仪器设备以及专用的实验服和拖鞋,未定期消毒。专用物品被带出传代细胞使用。培养细胞过程中使用的所有实验用具,如移液管、一次性枪头、一次性塑料离心管、冻存管等未按要求灭菌使用(通常需121°C高压灭菌20分钟后37%烤干备用)。超净台和桌面,东西太多太乱:超净台不是储物箱,什么培养皿、各种规格的板子、枪头就不要堆在超净台!这样就会有许多紫外线顾不到的卫生死角。传代细胞其他的桌面,切忌东西堆积如山,不要将酒精棉球、标签纸、牛皮纸买来后全部堆在传代细胞!一不小心“飘”进你的细胞培养板里,细胞就会养的不好,啥时候死了都不知道!【培养箱太久没清洁】细胞污染了,并非直接扔了培养皿就不管了,首先你还得看看这个恒温培养箱里其他培养皿或孔板里的细胞是否污染,如果有而且好几个板子都有类似的污染块,那很可能是培养箱中的水或者空气污染了,得给培养箱做个大扫除,重新酒精消毒,照紫外;孵箱里的水,水没了要记得加,还得记得十天半个月的就用酒精擦擦托盘。【传代细胞人多口杂,难管理】在传代细胞这种卫生要求高,人多了,不确定因素多了,难以保证试验在无菌条件下操作。出入试验室,实验服当风衣穿,不扣纽扣,不戴,就容易造成细胞污染;超净台做实验时,喜欢说话聊着做试验,要是还不带口罩,里面就有很多细菌等着去攻击你的细胞呢!
细胞来源说明:细胞主要来源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少数国外著名大学建系
LNCaP clone FGC细胞系相关产品:Centre Antoine Lacassagne-51细胞、H2330细胞、JKT-1细胞
NG-108-15细胞系相关产品:TC-1 [Mouse lung]细胞、CL11细胞、BNL CL.2细胞
B104 [Rat neuroblastoma]细胞系相关产品:C57/B6-L细胞、HHL5细胞、C166细胞
Vero 76细胞系相关产品:SK-N-BE(1)细胞、HM细胞、PG-4 S+L-细胞
Jurkat-77细胞系相关产品:Human fetal lung fibroblast 1细胞、CP-70细胞、686LN-M4e细胞
细胞生长特性:贴壁或悬浮,详见细胞说明书部分
L-02 Cell:人肝细胞系
贴壁细胞的消化方法介绍:1、胰酶。这是用得最多的。一般浓度在0.25-0.5%。作用时间根据细胞种类、作用温度等因素而变化很大,从几分钟到几十分钟不等。0.25%的胰酶作用于单层贴壁的细胞,在37度条件下,一般消化1-5分钟就足够了。终止是用血清。主要作用于细胞间。配制时不能用含、镁的平衡液,否则影响活性。保存于-20度。2、胶原酶。这种方法比较少,一般是用原代培养时,从组织消化下细胞。这种方法作用温和,对细胞损伤较小,但是,价格也较贵。中止同样是用血清。3、EDTA。用得也是非常多。一般浓度在0.02%左右。作用于细胞与间质,对细胞间也有一定作用。注意,它能显著影响pH值,而且在弱碱性条件下才易溶。因此,配制时应调节好酸碱度。它不能被终和。因此,消化下来的细胞要洗一遍。4、商品化的无酶消化液。个人的使用经常觉得对细胞的损伤比较大,但是分离成单细胞悬液的能力确实比较强。5、物理法。直接吹打或用细胞刮子将细胞刮下来。6、冷冻法。此方法仅能用于细胞传代时。无法使组织上的细胞脱落下来。本方法的原理,我想是因细胞冷冻后收缩,从而从培养瓶上脱落下来。优点是:对细胞损伤小,不需要中止或洗细胞,方便,不需要另外配制消化液。特别适用那些贴壁不是特别紧,又特别娇气的细胞。不足是细胞常成小片脱落。此种方法曾用于因用其它方法传代导致大量细胞死亡操作的间充质干细胞、DC细胞的培养,效果非常满意。具体过程是:1、用较多的4度的PBS 洗涤一遍细胞(以6孔板为例,加1.5ml/孔),2、再加0.5毫升4度的PBS,静置操作台上,很快细胞就小片脱落,3、轻轻吹打,细胞即完全脱落,4、按一定比例传代。
细胞形态特性:详见细胞说明书
MG-HU-3细胞系相关产品:TE-32细胞、CCD-1112sk细胞、LTEPa2细胞
SKMEL24细胞系相关产品:32D clone 3细胞、UMNSAH/DF-1细胞、RGC6细胞
B/C3T3细胞系相关产品:NCI-H1672细胞、HMC细胞、HNE3细胞
MRASMC细胞系相关产品:Tohoku Hospital Pediatrics-1细胞、EC9706细胞、CCD-18Co细胞
MOLT 3细胞系相关产品:BC-009细胞、OAW-42细胞、LA-4 [Mouse lung adenoma]细胞
Hep3B细胞系相关产品:P3J-HR-1细胞、OCI-AML3细胞、IPI-2I细胞
CCD-18Co细胞系相关产品:TW 01细胞、NCI-157细胞、A2780 CP70细胞
L-02 Cell:人肝细胞系
GA-10 (Clone 4)细胞系相关产品:JM细胞、CEM细胞、KMY1022细胞
KY180细胞系相关产品:SW1353细胞、SW 1088细胞、RKO-E6细胞
NCI-H841细胞系相关产品:BNL.1ME A.7R.1细胞、NOZAWA细胞、Colo16细胞
D283细胞系相关产品:SKMEL3细胞、Intestinal Epithelioid Cell line No. 18细胞、Det 562细胞
Gejiu Lung Carcinoma-82细胞系相关产品:NCI-H1395细胞、87 MG细胞、OCILY-3细胞
Namalva细胞系相关产品:Nakata-1细胞、FF-WT-BJ细胞、Tca-83细胞
M059K细胞系相关产品:NMCG1细胞、C-Lu65细胞、M07e细胞
C166细胞系相关产品:MD Anderson-Metastatic Breast-175-VIII细胞、NCI-SNU-601细胞、NCI-H847细胞
TE 85 ClF-5细胞系相关产品:IGROV细胞、Neuro 2a细胞、NCI-SNU-886细胞
TE 85 ClF-5细胞系相关产品:IGROV细胞、Neuro 2a细胞、NCI-SNU-886细胞
NS1-Ag 4/1细胞系相关产品:Meat Animal Research Center-145细胞、AMO-1细胞、ESC细胞
rUCMSCs细胞系相关产品:HEK.EBNA细胞、SB细胞、ME16C细胞
OCI-AML2细胞系相关产品:COLO320DM细胞、Panc02.03细胞、HNE1细胞
OACP4 C细胞系相关产品:H1581细胞、LLCPK1细胞、MOLT4细胞
mousepodocyte细胞系相关产品:HH [Human lymphoma]细胞、Menschliche Und Tierische Zellkulture-3细胞、MCA-38细胞
OVISE细胞系相关产品:HCC1954BL细胞、H2087细胞、HM细胞
NIH:OVCAR3细胞系相关产品:NRK 52E细胞、Epstein-Barr-2细胞、SR细胞
AMJ2C8细胞系相关产品:Capan 2细胞、BE2C细胞、X63-Ag 8.6.5.3细胞
SCC7细胞系相关产品:Douglas Foster-1细胞、ASH3细胞、Balb/3T3-4-Cl31细胞
IHC-ST1细胞系相关产品:Be-Wo细胞、H-3255细胞、HPC-Y5细胞
SK UT 1细胞系相关产品:SNU216细胞、HD11细胞、MN60细胞
SW-48细胞系相关产品:COLO 16细胞、H-2030细胞、B16 F1细胞
BEP2D细胞系相关产品:HuT102细胞、HFL-I细胞、LS-1034细胞
JROECL33细胞系相关产品:LS-411N细胞、HEK AD293细胞、OCI-AML5细胞
RAW264.7细胞系相关产品:SK MEL 5细胞、U-266细胞、Panc02-H0细胞
SL-1细胞系相关产品:C22 (Clara)细胞、H-2342细胞、HBL100细胞
Kit225细胞系相关产品:SK-N-BE(2)-M17细胞、CAL-27细胞、NCIH2107细胞
NCM356细胞系相关产品:MDCK II细胞、REC1细胞、AK细胞
MRC-5细胞系相关产品:Huh7.5细胞、SW 780细胞、ST2细胞
H-EMC-SS细胞系相关产品:BSC-40细胞、HS 683T细胞、U-373 MG细胞
Capan2细胞系相关产品:H-460细胞、KMB 17细胞、DI TNC1细胞
L 1210细胞系相关产品:BHP10-3细胞、NCI-SNU-5细胞、NCI-H2073细胞
AML-12细胞系相关产品:HEL 299细胞、H1672细胞、CEF细胞
CWR-22rv1细胞系相关产品:H-929细胞、Hs 606细胞、DF-1细胞
CCD-33Co细胞系相关产品:HMC细胞、SKNEP-1细胞、SBC3细胞
HPMC细胞系相关产品:FF-WT-BJ细胞、HEL-92_1_7细胞、RFL6细胞
SNU-387细胞系相关产品:H-1395细胞、NCIH1105细胞、UMNSAH/DF#1细胞
Dunn LM8细胞系相关产品:343MG细胞、Fortner's melanotic melanoma #3细胞、BMSCs(mBMSCs)细胞
M-20细胞系相关产品:HCCC9810细胞、CAL148细胞、MUVEC细胞
H-1417细胞系相关产品:CFPAC1细胞、NCIH1581细胞、KOSC-2 cl3-43细胞
Tissue Culture-1细胞系相关产品:CA-46细胞、HCC1419细胞、WC00059细胞
KP-4细胞系相关产品:ES-2细胞、IR983F细胞、P-19细胞
CHO-ori细胞系相关产品:FL 62891细胞、X63-Ag 8.6.5.3细胞、HCASMC细胞
L-02 Cell:人肝细胞系
TE-85 clone 5细胞系相关产品:TE6细胞、MRC-5细胞、FT-293细胞
Roswell Park Memorial Institute 2650细胞系相关产品:LPC-H12细胞、NCI-H1417细胞、Duke University 145细胞
MGC-803细胞系相关产品:NMC-G1细胞、Leukemic 1210细胞、SKMEL-24细胞
U-251-MG细胞系相关产品:SW-962细胞、RPTEC TERT1细胞、Hs840T细胞
HPAC细胞系相关产品:JVM-3细胞、H2198细胞、YES2细胞
HSAEC1-KT细胞系相关产品:SW-403细胞、Duke University 4475细胞、H-1623细胞
SK-MEL-2-LUC细胞系相关产品:VE细胞、CORL105细胞、B16-F10细胞
SKRC-20细胞系相关产品:NCI-H2342细胞、JOSK-M细胞、SUM 52细胞
H520细胞系相关产品:EoL-1 cell细胞、NCIH660细胞、MLA-144细胞
CCRF-CEM C7细胞系相关产品:1301细胞、Colon 26细胞、Alexander细胞
COLO-HSR细胞系相关产品:H.Ep. #2细胞、HOC1细胞、rRTEC细胞
HS940细胞系相关产品:Panc_02_03细胞、NEC细胞、NCIH727细胞
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