"A-498 Cell:人肾癌细胞系
细胞形态：上皮细胞样
细胞生长：贴壁
细胞背景资料：详见相关文献介绍
SNU-407细胞系相关产品：HCC-44细胞、SK UT 1细胞、TE-1细胞
NTera2/D1细胞系相关产品：PK13细胞、LOUNH91细胞、HEK293A细胞
SW-1573细胞系相关产品：MDBK (NBL-1)细胞、IM 9细胞、NR 8383细胞
MT4细胞系相关产品：B6Tert-1细胞、XWLC-05细胞、MRC-5细胞
细胞物种来源：人源或鼠源等其它物种来源
A-498 Cell:人肾癌细胞系
细胞的冻存：目前，细胞冻存最常用的技术是液氮冷冻保存法，主要采用加适量保护剂的缓慢冷冻法冻存细胞。主要操作步骤为：(１)选择处于对数生长期的细胞，在冻存前一天换液。将多个培养瓶中的细胞培养液去掉，用０.２５%胰蛋白酶消化。适时去掉胰蛋白酶，加入少量新培养液。用吸管吸取培养液反复吹打瓶壁上的细胞，使其成为均匀分散的细胞悬液。悬浮生产细胞则不要消化处理。然后将细胞收集于离心管中离心(１０００r/min，１０分钟)。(２)去上清液，加入含２０%小牛血清的完全培养基，于４℃预冷１５分钟后，逐滴加入已无菌的DMSO或甘油，用吸管轻轻吹打使细胞均匀，细胞浓度为３×１０(６)～１×１０(７)/mL之间。(３)将上述细胞分装于安瓿或专用冷冻塑料管中，安瓿装１～１.５mL在火焰喷灯上封口，封口处要完全封闭，圆滑无勾。冷冻管要将盖子盖紧，并标记好细胞名称和冻存日期，同时作好登记(日期、细胞种类及代次、冻存支数)。(４)将装好细胞的安瓿或冻存管装入沙布袋内;置于液氮容器颈口处存放过夜，次日转入液氮中。采用控制降温速度的方法也可采用下列步骤：先将安瓿置入４℃冰箱中２～３小时，再移至冰箱冷冻室内３～４小时，再吊入液氮容器颈气态部分存放２小时，最后沉入液氮中。细胞冻存在液氮中可以长期保存，但为妥善起见，冻存半年后，取出一只安瓿细胞复苏培养，观察生长情况，然后再继续冻存。
细胞产品包装：复苏形式：T２５培养瓶(一瓶)或冻存形式：１ml冻存管(两支)
细胞传代方法：１：２-１：３传代；每周换液２-３次。
培养细胞真的不难，最关键几点：１)所有的东西使用，如果你用的血清、培养皿、培养基、胰酶什么的都是进口的，真的很难相信你会把细胞养坏；２)动作要快，胰酶消化，换液什么，细胞暴露在空气中的时间越少越好。另外，要掌握好胰酶消化时间，所谓的细胞状态差，很多时候是传代的原因；３)有时间的话，需要细胞计数，传相应数目的细胞到培养皿中，可以大致清楚细胞的生长曲线，不会临时要处理，手足无措；４)要做什么心里要非常清楚，合理安排时间，传代细胞的实验穿插进行，可以节省很多时间，也不会耽误别人的实验；５)个人的实验器具自己收一套，不要和别人混用，最近换了什么新的东西稍微记一下，试剂一旦怀疑污染，马上丢；６)传代细胞不能进去太多人，避免相互干扰。每天对待细胞比孝敬爹妈还用心，那真是捧在手里怕碎了，含在嘴里怕化了，看在眼里怕丢了，培养细胞时有哪些经验教训可以分享呢?１)严格无菌操作，多喷喷酒精，要是对灭菌的东西不放心，自己包自己送自己烘干；２)不要和别人共用试剂耗材，自己准备一套；３)有可能的话在拿到新细胞的时候做好支原体衣原体检测；４)水浴锅很脏，生化培养箱要是得手动加湿的话盘里的水也会很脏，勤换(灭菌水加进去)；５)晚上离开的时候给传代细胞照紫外，超净台是用完就开；６)是同一时间就你一个人在用传代细胞在养细胞。
细胞来源说明：细胞主要来源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少数国外著名大学建系
BSC-40细胞系相关产品：MC/9细胞、WiDrTC细胞、ANA1细胞
Malme-3 M细胞系相关产品：KNS-62细胞、NS1-Ag 4/1细胞、SRS-82细胞
RGM1细胞系相关产品：C1R细胞、HT-29细胞、SKMel-28细胞
10T1/2细胞系相关产品：BGC-823细胞、MT2细胞、NTERA2细胞
HO1-N1细胞系相关产品：SU-DHL-8细胞、Dakiki细胞、YH-13细胞
细胞生长特性：贴壁或悬浮，详见细胞说明书部分
A-498 Cell:人肾癌细胞系
细胞复苏相关注意事项：１.取细胞的过程中注意带好防冻手套，护目镜。此项尤为重要，细胞冻存管可能漏入液氮，解冻时冻存管中的气温急剧上升，可导致爆炸。２.冻存液的问题：冻存液的配置已是常识，在这里不作详述，但二甲基亚砜(DMSO )对细胞不是完全无毒副作用，在常温下，二甲基亚砜对细胞的毒副作较大，因此，必须在１-２min内使冻存液完全融化。如果复苏温度太慢，会造成细胞的损伤，二甲基亚砜(DMSO)选择进口产品。３.离心前须加入少量培养液。细胞解冻后二甲基亚砜浓度较高，注意加入少量培养液可稀释其浓度，以减少对细胞的损伤。４.离心问题：目前主要有两种见解。一种是解冻后的细胞悬液直接吹打均匀后分装到培养瓶中进行培养，第二天换液。因为离心的目的是两个，去除DMSO，去除死细胞，这个是标准流程，但对一般人来说，把握不好离心转速和时间，转的不够活细胞沉底的少，细胞就全被扔掉了，转过了活细胞会受压过大，死亡。此外在操作过程中容易污染，所以不推荐。另一种说法为细胞悬液中含有二甲基亚砜(DMSO)，DMSO对细胞有一定的毒副作用，所以须将离心后的液体前倒净，且一定倒干净。我在试验中按照常规的离心分装的方法进行复苏，结果无异常。５.细胞贴壁少的问题：教科书中说明冻存细胞解冻时１ml细胞液要加１０ml-１５ml培养液，而在我的试验中的经验总结为培养基越少细胞越容易贴附。６.复苏细胞分装的问题：试验中我的经验总结为复苏１管细胞一般可分装到１-２只培养瓶中，分装过多，细胞浓度过低，不利于细胞的贴壁。７.加培养基的量放入问题：这个量的多少的把握主要涉及到的问题DMSO的浓度，从如果你加培养基的太少，那么DMSO的浓度就会比较大，就会影响细胞生长，从以前的资料来看，DMSO的浓度在小于０.５%的时候对一般细胞没有什么影响，还有一个说法是１%。所以如果你的冻存液的浓度是１０%DMSO的话那么加１０ml以上的培养基就恰好稀释到了无害浓度。
细胞形态特性：详见细胞说明书
ACC-2细胞系相关产品：NCIH226细胞、U373 MG细胞、Pt K1 (NBL-3)细胞
HCC-44细胞系相关产品：NU-GC-2细胞、BLO11细胞、TH1细胞
H322T细胞系相关产品：H676B细胞、MV-522细胞、U138MG细胞
Colon26细胞系相关产品：ABE8.1/2细胞、TE 85.T细胞、BCECs细胞
H-345细胞系相关产品：V79细胞、X63.Ag8.653细胞、MDA-PCa-2b细胞
UCH1细胞系相关产品：HBZY1细胞、H-650细胞、P3J HR1-K细胞
LLC1细胞系相关产品：JHH-7细胞、MDA-MB435细胞、JROECL33细胞
A-498 Cell:人肾癌细胞系
RCK-8细胞系相关产品：University of Arizona Cell Culture-893细胞、WC00079细胞、RPMI 7666细胞
Mouse podocyte细胞系相关产品：PANC 813细胞、MEC-1细胞、L5178Y-R细胞
U373-MG细胞系相关产品：Human Melanoma Cell Bowes细胞、HCC1954细胞、Me-Wo细胞
KBM-7细胞系相关产品：KY-50细胞、GS-9L细胞、SK-N-MC细胞
KMY1022细胞系相关产品：OCILY-19细胞、CT26.CL25细胞、HCC0095细胞
Strain KB细胞系相关产品：6-T CEM细胞、RPMI 8226细胞、H-1792细胞
UCH1细胞系相关产品：HBZY1细胞、H-650细胞、P3J HR1-K细胞
H-1819细胞系相关产品：5637细胞、SKNDZ细胞、OCI-Ly3细胞
OCI/AML-4细胞系相关产品：IGR.OV1细胞、PTK 2细胞、COLO 16细胞
MOLT 16细胞系相关产品：R.K.13细胞、HANK1细胞、NS20-Y细胞
MDA2B细胞系相关产品：WC00079细胞、LC1/Sq细胞、NCTC clone 1469细胞
THLE2细胞系相关产品：7860细胞、SCC90细胞、SNK-6细胞
CHG5细胞系相关产品：BE2-M17细胞、OCI-Ly1细胞、UCLA-SO-M20细胞
MM-1S细胞系相关产品：C12细胞、Human Embryonic Skin细胞、G 292 Clone A 141B1细胞
GM03320D细胞系相关产品：TK.10细胞、HLEB3细胞、RH35细胞
HCC94细胞系相关产品：HCC-2218细胞、AN-3细胞、H2227细胞
P3J HR-1细胞系相关产品：GM02219C细胞、NCI.H23细胞、MDA-MB-231-luc细胞
NCI-H508细胞系相关产品：293-H细胞、NCI660细胞、JVM3细胞
Stanford University-Diffuse Histiocytic Lymphoma-2细胞系相关产品：Hep-3B细胞、KM12 SM细胞、HEK293E细胞
KRC/Y细胞系相关产品：VMM5细胞、GT1-1细胞、P31/FUJ细胞
SRA01/04细胞系相关产品：SUM-149PT细胞、MAEC细胞、Colo-201细胞
HTSMC细胞系相关产品：LIM-1215细胞、Ej138细胞、HTori-3细胞
Fukuoka University-Malignant mixed Mullerian Tumor-1细胞系相关产品：Hs600T细胞、NCI-SNU-182细胞、NRK clone 52E细胞
HPAF-2细胞系相关产品：L Wnt-3A细胞、NCI-H2107细胞、HMC3细胞
Experimental Mammary Tumour-6细胞系相关产品：TE 354.T细胞、bEND.3细胞、QGY7703细胞
Hs 822.T细胞系相关产品：SK-N-MC细胞、CV 1细胞、GCT0404细胞
LNCaP C4-2细胞系相关产品：SW480E细胞、DI TNC-1细胞、NK92细胞
HT55细胞系相关产品：SUM 159PT细胞、UM-UC-14细胞、ML-2细胞
NCI-SNU-423细胞系相关产品：CNE2细胞、JKT-1细胞、PMVEC细胞
HEK293-H细胞系相关产品：SKNMC细胞、OCI AML4细胞、U87MG细胞
Hamster Islet Transformed-Tioguanine resistant clone 15细胞系相关产品：Hs729T细胞、BMU-S1细胞、Rca-B细胞
Kit225/K6细胞系相关产品：J111细胞、GM00215细胞、OCI-AML4细胞
HK2细胞系相关产品：OCI-Ly 10细胞、2E8细胞、H-4-II-E细胞
HCC70细胞系相关产品：NCIH1819细胞、KHYG-1细胞、MCF-10 Attached细胞
HEC-251细胞系相关产品：GM17346细胞、SV40-MES13细胞、MDA-MB361细胞
LAN5细胞系相关产品：SW 1463细胞、293GP细胞、H295细胞
HN4细胞系相关产品：LA4细胞、MDA361细胞、H-1618细胞
EOC-20细胞系相关产品：SU-DHL-10细胞、KYSE-30细胞、MTC-TT细胞
ECC 12细胞系相关产品：GC-2细胞、J774细胞、3T3 J2细胞
Lu-65细胞系相关产品：LO2细胞、NCIH661细胞、MDAMB175细胞
SW260细胞系相关产品：OVCAR-10细胞、PLMVEC细胞、PG-4(S+L-)细胞
NU-GC-4细胞系相关产品：TK-1细胞、Ramos G6.C10细胞、BERH-2细胞
HCS-2/8细胞系相关产品：293 c18细胞、PVEC细胞、GM03570细胞
A-498 Cell:人肾癌细胞系
MDA-157细胞系相关产品：SJ-RH30细胞、HES [Human embryonic skin fibroblast]细胞、NCIH820细胞
RCC10 RGB细胞系相关产品：HCC1187细胞、HEC-1B细胞、Rat Skin 1细胞
DHL-6细胞系相关产品：MLMA细胞、H719细胞、A549/DDP细胞
Mc Ardle 7777细胞系相关产品：PLC-PRF-5细胞、MBMEC细胞、SUDHL-6细胞
Hs 766T细胞系相关产品：HRVEC细胞、MDA MB 436细胞、WM-266-4细胞
K-562细胞系相关产品：GFP-Olig2细胞、Colo205细胞、H3255细胞
alpha-TC1.6细胞系相关产品：Line 522细胞、MV 4;11细胞、Leydig细胞
OUMS-27细胞系相关产品：KYSE270细胞、H774细胞、B-cell Acute Lymphoblastic Leukemia-1细胞
HTR-8/SV neo细胞系相关产品：BDCM细胞、RMa-bm细胞、NCI-H747细胞
Panc2_03细胞系相关产品：H-1836细胞、D 407细胞、UCLA SO M21细胞
Centre Antoine Lacassagne-148细胞系相关产品：ARO-81细胞、A2058细胞、AdHek细胞
LUDLU-1细胞系相关产品：HOP62细胞、HL-1细胞、BN-CL2细胞
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