"CAL-12T Cell:人肺癌细胞系
细胞形态：上皮细胞样
细胞生长：贴壁
细胞背景资料：详见相关文献介绍
SNU668细胞系相关产品：Malme-3M细胞、H-446细胞、DU 4475细胞
HCT116细胞系相关产品：Rat podocyte细胞、MKN 45细胞、SK-N-BE(2)C细胞
CFSC-2G细胞系相关产品：H2405细胞、CCD-18Co细胞、NK 10a细胞
SUDHL6细胞系相关产品：H841细胞、RAOEC细胞、ATN-1细胞
细胞物种来源：人源或鼠源等其它物种来源
CAL-12T Cell:人肺癌细胞系
细胞消化过程总结：其实绝大部分细胞消化的时候是只要用胰酶润洗一遍即可，吸去胰酶后，残留的那些无法计算体积的附着在细胞表面的微量胰酶在３７度一般不到２min足够消化细胞（绝大部分１min不到）。对于这些细胞原则上不要用胰酶孵育细胞，连续这样传代，对细胞伤害很大。简单的程序是PBS润洗吸去，胰酶润洗吸去，然后３７度消化。２，什么算是消化好了呢？不是细胞全部成间隔分布很离散的单个圆形才算消化好了，一般你肉眼观察贴壁细胞层，只要能移动了，多半呈沙壮移动，其实已经可以了，很多人喜欢把细胞消化或者吹打成完全分离细胞，这是没有必要的。一般能移动了，说明细胞与培养基质材料的附着已经消失了，细胞之间的附着也已经消失了，细胞已经独立分布了（虽然没有呈现很广的离散分布）。这个时候应该停止消化，不要等到看到镜下所有细胞都分离得非常好，间隙很大，才停止。细胞就是完全成单个细胞悬液，之后在贴壁的过程中仍然会聚集，这个是贴壁培养的细胞，尤其是肿瘤细胞的一个特性，无论死活的细胞都是如此，你可以尝试，准备１００%的单个细胞悬液，贴壁后观察细胞，仍然是几个几个细胞聚集在一起。一些悬浮培养细胞也是如此，容易聚集，不要去尝试过几个小时就拿出来吹打成单细胞悬液（不要笑，这个是初养悬浮细胞的人常犯的错误，以为悬浮培养就是一个一个分开）。细胞只要能从基质上脱离下来，这个时候即使是成片的（比如Calu-３细胞），吹打不超过２０次后（一般１０次即可），成小规模聚集（１０个细胞左右），是正常的，不要试图再去延长消化时间，或者像有的同学那样吹打１h，等待单细胞悬液出现。比较难消化的细胞（润洗方法５min还不能消化），比如HCT１５, LS４１１和KM１２，这样的细胞一般需要用少量胰酶孵育，但也不需要很多，一般１００mm dish，一次最多加入５００ul，就足够了，一般我加３００ul。即使这样难消化的细胞，一般不超过５min，即可见细胞成片移动，就应该停止消化。一些正常细胞也会有难消化的时候，比如tsDC细胞，但也只要用少量胰酶孵育，３min左右即可看到成片沙状移动。
细胞产品包装：复苏形式：T２５培养瓶(一瓶)或冻存形式：１ml冻存管(两支)
细胞传代方法：１：２-１：３传代；每周换液２-３次。
为什么培养的细胞要及时传代？体外培养的细胞大多具有生长接触抑制的特性，也就是说当一个细胞被其他细胞包围的时候，它就会停止生长，及时传代后，细胞的生长得以继续。培养细胞生长减慢的原因在哪些?其解决办法有哪些？可能的原因有：更换了不同的培养液或血清；培养液中一些细胞生长必需成分如谷眈肢或生长因子等耗尽或缺乏或己被破坏；培养物中有少量细菌或真菌污染；试剂保存不当；比较新培养液与原培养液成分，比较新血清与旧血清等，找出其它可能的原因。解决办法：增加起始培养细胞浓度；让细胞逐渐适应新培养液；换入新鲜配制培养液；补加谷酷肢或生长因子等；用无抗生素培养液培养，如发现污染，去弃培养物，或用抗生素除菌；血清需保存在５℃到２０℃; 培养液需在２-８℃避光保存;含血清完全培养液在２-８℃保存，并在２周内用完;分离培养物，检测支原体。冷冻管应如何解冻？取出冷冻管后，须立即放入３７℃水槽中快速解冻，轻摇冷冻管使其在１-２分钟内大部分融化，特别注意，需残留一小块冰块，就可拿到超净工作台操作细胞，用７５%酒精消毒冻存管，用新鲜培养基将细胞转移至培养瓶。另外冷冻管由液氮桶中取出解冻时，必须注意安全，预防冷冻管爆裂。
细胞来源说明：细胞主要来源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少数国外著名大学建系
RS 4;11细胞系相关产品：MPC5细胞、H-1404细胞、D-341 Med细胞
UCLA SO M21细胞系相关产品：MAVER-1细胞、Mono Mac 6细胞、SF-295细胞
Colon26细胞系相关产品：ABE8.1/2细胞、TE 85.T细胞、BCECs细胞
H-1819细胞系相关产品：5637细胞、SKNDZ细胞、OCI-Ly3细胞
AU-565细胞系相关产品：LCLC-103H细胞、Clone 166细胞、Panc04.03细胞
细胞生长特性：贴壁或悬浮，详见细胞说明书部分
CAL-12T Cell:人肺癌细胞系
细胞冻存复苏材料与方法步骤：常用的细胞冷冻贮存器为液氮贮存器，规格有３５L和５０L两种。使用时要注意以下几点：(１)一般两周需充液氮一次，至少一个月充氮一次。液氮温度达-１９６℃，使用时注意勿让液氮溅到皮肤上，以免引起冻伤。(２)液氮容器为双层结构，中间为真空层，瓶口有双层焊接处，应防止焊接部裂开。(３)在装入液氮时，要注意缓慢小心，并用厚纸卷筒或特制漏斗作引导，使液氮直达瓶底，如有专用液氮灌注装置则更好。若为初次使用，加液氮时更要缓慢，以免温度骤降而使容器损坏。细胞冻存时常备的材料有：０.２５%胰蛋白酶，含１０%～２０%的血清培养液，DMSO(分析纯)或无色新鲜甘油(１２１°C蒸气高压消毒)，２mL安瓿(或专用细胞冻存管)、吸管、离心管、喷灯、纱布袋(或冻存管架)等。主要操作步骤为：(１)选择处于对数生长期的细胞，在冻存前一天换液。将多个培养瓶中的细胞培养 液去掉，用０.２５%胰蛋白酶消化。适时去掉胰蛋白酶，加入少量新培养液。用吸管吸取培养液反复吹打瓶壁上的细胞，使其成为均匀分散的细胞悬液。悬浮生产细胞则不要消化处理。然后将细胞收集于离心管中离心(１０００r/min，１０分钟)。(２)去上清液，加入含２０%小牛血清的完全培养基，于４℃预冷１５分钟后，逐滴加入已无菌的DMSO或甘油，用吸管轻轻吹打使细胞均匀，细胞浓度为３×１０６～１×１０７/mL之间。(３)将上述细胞分装于安瓿或专用冷冻塑料管中，安瓿装１～１.５mL在火焰喷灯上封口，封口处要完全封闭，圆滑无勾。冷冻管要将盖子盖紧，并标记好细胞名称和冻存日期，同时作好登记(日期、细胞种类及代次、冻存支数)。(４)将装好细胞的安瓿或冻存管装入沙布袋内;置于液氮容器颈口处存放过夜，次日转入液氮中。采用控制降温速度的方法也可采用下列步骤：先将安瓿置入４℃冰箱中２～３小时，再移至冰箱冷冻室内３～４小时，再吊入液氮容器颈气态部分存放２小时，最后沉入液氮中。细胞冻存在液氮中可以长期保存，但为妥善起见，冻存半年后，取出一只安瓿细胞复苏培养，观察生长情况，然后再继续冻存。
细胞形态特性：详见细胞说明书
LoVo细胞系相关产品：KYSE 270细胞、SNU878细胞、NCI-H1105细胞
SW 780细胞系相关产品：Hs-695-T细胞、H82sclc细胞、H-1734细胞
SUSM-1细胞系相关产品：NCIH2073细胞、Hs604T细胞、MKN45细胞
NCI-UMC-11细胞系相关产品：WM-115细胞、H1623细胞、NK-92 MI细胞
Hs274T细胞系相关产品：NCI-H1437细胞、CAOV3细胞、PC-9/S1细胞
D283-MED细胞系相关产品：MBVP细胞、CAL 78细胞、WM115-mel细胞
NCIH2066细胞系相关产品：CAL-62细胞、hTERT-HME-1细胞、SUDHL10细胞
CAL-12T Cell:人肺癌细胞系
P-3J细胞系相关产品：TE14细胞、NCI-H1944细胞、VMCUB-1细胞
HSC3细胞系相关产品：Panc3_27细胞、NCI-H498细胞、HuTu-80细胞
OVCAR 4细胞系相关产品：TSCC1细胞、HIEC细胞、NPA-87细胞
MV 4;11细胞系相关产品：KYSE 140细胞、CV-1.K细胞、RAW2647细胞
HOP62细胞系相关产品：UM-RC-2细胞、SK-OV-3细胞、Ku812F细胞
NCI-H2107细胞系相关产品：MCF-7/ADR-RES细胞、COLO206F细胞、K422细胞
C32 [Human melanoma]细胞系相关产品：T/GHA-VSMC细胞、WC00097细胞、SCC-15细胞
T.T细胞系相关产品：SNU5细胞、H1838细胞、KNS81细胞
BHT101细胞系相关产品：NBL-7细胞、MB231细胞、UMUC-3细胞
BHT101细胞系相关产品：NBL-7细胞、MB231细胞、UMUC-3细胞
HCC 70细胞系相关产品：Nthy-ori 3-1细胞、SK-MEL28细胞、AC16 [Human hybrid]细胞
CCD 841 CoN细胞系相关产品：SUD4细胞、DF-1细胞、GM05887A细胞
TFK1细胞系相关产品：ID8细胞、H520细胞、HCC1143细胞
ssMCF-7细胞系相关产品：NCI-SNU-C1细胞、NCI.H522细胞、AZ 521细胞
HFLS-OA细胞系相关产品：HFF-1细胞、L5178-R细胞、COV 434细胞
MD Anderson-Metastatic Breast-436细胞系相关产品：GLRK 13细胞、EJ1细胞、HTR-8/SVneo细胞
Caco-2 BBe细胞系相关产品：RPMI 6666细胞、Human Lung Microvascular Endothelial Cell line-5a细胞、Colo-678细胞
aTC1-6细胞系相关产品：WM115mel细胞、P31FUJ细胞、RCC-4细胞
Ramos G6.C10细胞系相关产品：SW-579细胞、T-ALL-1细胞、MDA-MB-175VII细胞
EM-3细胞系相关产品：WERI-Rb-1细胞、SUP T1细胞、CNE-2细胞
RD-2细胞系相关产品：Hs 675.T细胞、MDA453细胞、MES-13细胞
T-CAM2细胞系相关产品：SUM-52PE细胞、Clone Y1细胞、H1993细胞
OKAC1细胞系相关产品：P3JHR1细胞、Stanford University-Diffuse Histiocytic Lymphoma-10细胞、MC57细胞
A-172细胞系相关产品：SK Mel 2细胞、HPAF-2细胞、KALS-1细胞
HUT 28细胞系相关产品：NCIH1666细胞、SNU-475细胞、MEG-01细胞
KY-50细胞系相关产品：CL MC/9细胞、NCI-SNU-407细胞、Hs 606细胞
MD Anderson-Metastatic Breast-361细胞系相关产品：OCILY10细胞、RCC23细胞、CRFK细胞
SNU-C1细胞系相关产品：NGP细胞、GLAG-66细胞、Ly7细胞
HO1-N1细胞系相关产品：SU-DHL-8细胞、Dakiki细胞、YH-13细胞
NCI-H810细胞系相关产品：ACHN细胞、JB6 Cl 30-7b细胞、H2228细胞
GM03571细胞系相关产品：Fetal Rhesus Kidney-4细胞、HCC-1395细胞、SU86.86细胞
Bac 1.2F5细胞系相关产品：130-T细胞、K422细胞、NTERA-2cl.D1细胞
A704细胞系相关产品：VP229细胞、HFLS细胞、Hs606细胞
Walker/LLC-WRC256细胞系相关产品：INS1-E细胞、CL1-0细胞、Vero 76 clone E-6细胞
H2106细胞系相关产品：RIMEC细胞、SW 403细胞、RCC-10RGB细胞
MDA2B细胞系相关产品：WC00079细胞、LC1/Sq细胞、NCTC clone 1469细胞
HCT FET细胞系相关产品：NBLAN5T细胞、MDCK supertube细胞、HO1-N-1细胞
Caco 2细胞系相关产品：HEM-L细胞、hSCC-25细胞、FRO细胞
CMT 167细胞系相关产品：LLC-PK(1)细胞、VERO76细胞、RL95-2细胞
B16-F10-BL6细胞系相关产品：OVCAR.4细胞、Rat Lung Epithelial-6-T-antigen Negative细胞、NP69细胞
Sp 2/0-Ag 14细胞系相关产品：SHP77细胞、MC3T3E1细胞、MX1细胞
MOLT 16细胞系相关产品：R.K.13细胞、HANK1细胞、NS20-Y细胞
IPLB-Sf21AE细胞系相关产品：NCI-H378细胞、NCI-SNU-520细胞、hFOB细胞
CAL-12T Cell:人肺癌细胞系
U343细胞系相关产品：HEK AD293细胞、FO [Mouse myeloma]细胞、SKNBE(2)细胞
Hs742T细胞系相关产品：Colo741细胞、CEM-C7细胞、SUM190PT细胞
MFE-280细胞系相关产品：HSAS3细胞、JB6Cl30细胞、L- cell细胞
HCC 38细胞系相关产品：NCTC1469细胞、Ku812细胞、NCI-H2171细胞
HIT-T15细胞系相关产品：SMA560细胞、H747细胞、SNU886细胞
SN12-PM6细胞系相关产品：Panc08.13细胞、CNE-1细胞、108CC15细胞
3T3-J2细胞系相关产品：Potorous tridactylus Kidney 1细胞、C-127细胞、VK2细胞
LNCaP-ATCC细胞系相关产品：MLA 144细胞、Japanese Tissue Culture-28细胞、P3HRI细胞
Doubling time: ~50 hours (ATCC).细胞系相关产品：OV1/P细胞、HFL细胞、RBSMC细胞
Lec1细胞系相关产品：ChaGo-K-1细胞、Caco-2/BBe 1细胞、EOMA细胞
LM1细胞系相关产品：MDA231-LM2-4175细胞、TCC Sup细胞、149PT细胞
H-1793细胞系相关产品：ECC-10细胞、DU_145细胞、JEG3细胞
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