"NGP Cell:人神经母细胞系
细胞形态:上皮细胞样
细胞生长:贴壁
细胞背景资料:详见相关文献介绍
U-87 MG细胞系相关产品:LAC细胞、L-6TG细胞、ST 486细胞
HCC-1569细胞系相关产品:WSUDLCL2细胞、AN3 CA细胞、Hs606T细胞
WIL2S细胞系相关产品:TGW细胞、HOC细胞、SF-539细胞
H-292细胞系相关产品:WEHI164细胞、PC3M细胞、NCI-H-128细胞
细胞物种来源:人源或鼠源等其它物种来源
NGP Cell:人神经母细胞系
细胞消化过程总结:其实绝大部分细胞消化的时候是只要用胰酶润洗一遍即可,吸去胰酶后,残留的那些无法计算体积的附着在细胞表面的微量胰酶在37度一般不到2min足够消化细胞(绝大部分1min不到)。对于这些细胞原则上不要用胰酶孵育细胞,连续这样传代,对细胞伤害很大。简单的程序是PBS润洗吸去,胰酶润洗吸去,然后37度消化。2,什么算是消化好了呢?不是细胞全部成间隔分布很离散的单个圆形才算消化好了,一般你肉眼观察贴壁细胞层,只要能移动了,多半呈沙壮移动,其实已经可以了,很多人喜欢把细胞消化或者吹打成完全分离细胞,这是没有必要的。一般能移动了,说明细胞与培养基质材料的附着已经消失了,细胞之间的附着也已经消失了,细胞已经独立分布了(虽然没有呈现很广的离散分布)。这个时候应该停止消化,不要等到看到镜下所有细胞都分离得非常好,间隙很大,才停止。细胞就是完全成单个细胞悬液,之后在贴壁的过程中仍然会聚集,这个是贴壁培养的细胞,尤其是肿瘤细胞的一个特性,无论死活的细胞都是如此,你可以尝试,准备100%的单个细胞悬液,贴壁后观察细胞,仍然是几个几个细胞聚集在一起。一些悬浮培养细胞也是如此,容易聚集,不要去尝试过几个小时就拿出来吹打成单细胞悬液(不要笑,这个是初养悬浮细胞的人常犯的错误,以为悬浮培养就是一个一个分开)。细胞只要能从基质上脱离下来,这个时候即使是成片的(比如Calu-3细胞),吹打不超过20次后(一般10次即可),成小规模聚集(10个细胞左右),是正常的,不要试图再去延长消化时间,或者像有的同学那样吹打1h,等待单细胞悬液出现。比较难消化的细胞(润洗方法5min还不能消化),比如HCT15, LS411和KM12,这样的细胞一般需要用少量胰酶孵育,但也不需要很多,一般100mm dish,一次最多加入500ul,就足够了,一般我加300ul。即使这样难消化的细胞,一般不超过5min,即可见细胞成片移动,就应该停止消化。一些正常细胞也会有难消化的时候,比如tsDC细胞,但也只要用少量胰酶孵育,3min左右即可看到成片沙状移动。
细胞产品包装:复苏形式:T25培养瓶(一瓶)或冻存形式:1ml冻存管(两支)
细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。
细胞培养实验中常见问题总结:1)一般客户拿到细胞后,应该注意什么?客户收到细胞后先不开盖,放在培养箱静置若干小时后(看细胞密度而定)在倒置显微镜下观察细胞生长情况,并对细胞进行不同倍数拍照(建议受收细胞后观察培养基的颜色和是否有漏液情况,显微镜下拍细胞100X,200X各一张),排除细胞本身污染的情况;收到细胞未开封,出现污染状况我们负责免费发送一株细胞。收到细胞时如无异常情况,请在显微镜下观察细胞密度,如为贴壁细胞,未超过80%汇合度时,将培养瓶中培养液吸出,留下10ml培养液继续培养;超过80%汇合度时,请按细胞培养条件传代培养。如为悬浮细胞,吸出培养液、1000转/分钟离心2分钟,吸出上清,管底细胞用新鲜培养基悬浮细胞后移回培养瓶。细胞消化液建议使用PBS配制,慎用Hanks液配制;2)快递细胞多久能到,是寄冻存的细胞还是复苏好的细胞?我们采用快递发货,一般外地2--3天,寄细胞前请确认当地温度,如果气温低于4度的,则采用邮寄冻存细胞;3)可否使用与原先培养条件不同之培养基?不能。每一细胞株均有其特定使用且已适应之细胞培养基,若骤然使用和原先提供之培养条件不同之培养基,细胞大都无法立即适应,造成细胞无法存活;4)可否使用与原先培养条件不同之血清种类?不能。血清是细胞培养上一个极为重要的营养来源,所以血清的种类和品质对于细胞的生长会产生极大的影响。来自不同物种的血清,在一些物质或分子的量或内容物上都有所不同,血清使用错误常会造成细胞无法存活。
细胞来源说明:细胞主要来源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少数国外著名大学建系
MDA-MB453细胞系相关产品:CCD966SK细胞、NCI-H1734细胞、NCIH2135细胞
MDA-MB-361细胞系相关产品:LICR-LON-HN6细胞、FU-MMT-1细胞、Walker256-TC细胞
ME16C细胞系相关产品:NCI-H250细胞、Hs-611-T细胞、3T3J2细胞
P3/NS1/Ag4-1细胞系相关产品:2008细胞、AA-Mel细胞、SMMC-7721细胞
U266细胞系相关产品:MV-4-11细胞、H1993细胞、AZ-521细胞
细胞生长特性:贴壁或悬浮,详见细胞说明书部分
NGP Cell:人神经母细胞系
细胞复苏后贴壁细胞较少的问题分析:总结1:复苏过程没有问题,是否是从液氮拿出直接放入温水,还有培养箱,二氧化碳浓度,培养基、PH值等环节。要么加高浓度FBS 15-20%,看看能否帮助贴壁,当然也需要考虑血清问题,还有确信拿来的细胞没问题。总结2:首先应该怀疑冻存,实际上复苏出问题的可能非常小,因为操作简单,而且死板。1、你冻存的时候是不是消化的时间过长,这是一般人所注意不到的,即使书上也不讲这个问题,太长的消化时间会让细胞复苏时失去贴壁能力,表现为先贴后死,原因是在你复苏的时候细胞已进入凋亡程序,不可逆转的死亡。2、你的冻存液好不好,是什么,甘油还是DMSO,质量非常重要,否则也会死亡。3、你的冻存液的量加的是不是太多,ATCC推荐是不超过7%,大于5%,太多也不好。4、你在冻存的时候是不是把DMSO混均匀,这个有一些影响,但不算太大。5、你的冻存是否按部就班,就是所温度梯度是不是把握严格,很多人容易忘却这个事情,因为这个东西流程长。6、如果你细胞污染,你是否能很快看到,我比我的导师能早一天看到污染。从这个角度讲建议去除离心这步。7、你的细胞在冻存前是否过密。还有,不赞成孵箱污染这个概念的,所有在一个孵箱里的细胞都污染一个细菌的话,这个细菌是源于孵箱的,但这不代表孵箱污染,因为孵箱无论你如何处理都有大量的细菌,问题在操作。每次污染的原因都要尽可能的找,以后就不犯同样的问题,这个很重要,不能靠猜,否则你就有可能细胞养绝最后换课题,这个见得太多了,别不当会事。
细胞形态特性:详见细胞说明书
GTL-16细胞系相关产品:H35 Reuber细胞、SNG-M细胞、Colo205细胞
A 72细胞系相关产品:AC29细胞、SW-579细胞、UPCISCC154细胞
WEHI231细胞系相关产品:LICR-HN6细胞、McA-RH 7777细胞、VMRC-RCZ细胞
BE(2)-M17细胞系相关产品:H-774细胞、A2780细胞、beta-TC6细胞
ZR-75-30细胞系相关产品:EBC-1/original细胞、SiHa细胞、EAC-E2G8细胞
Vero 76细胞系相关产品:SK-N-BE(1)细胞、HM细胞、PG-4 S+L-细胞
Hs-940细胞系相关产品:UCLA RO-81-A-1细胞、SK-Hep1细胞、751-NA-15细胞
NGP Cell:人神经母细胞系
PLC/PRF5细胞系相关产品:KYSE 510细胞、SUPB15细胞、LC1sq细胞
NCTC929细胞系相关产品:OAW-42细胞、GM07404细胞、SK-N-BE(1)n细胞
EoL-1细胞系相关产品:MEG-01细胞、U-138-MG细胞、C-Li-7细胞
MAC1细胞系相关产品:MuM-2B细胞、HCC-1428细胞、SACC-LM细胞
NTERA-2cl.D1细胞系相关产品:DHBE细胞、MDA PCa 2b细胞、KCL22S细胞
H1092细胞系相关产品:MM134细胞、C166细胞、MCF/Adr细胞
COS7细胞系相关产品:BALB/3T3 cl. A31细胞、HR1K细胞、Vx2细胞
Ca761细胞系相关产品:NCIH2170细胞、ST细胞、PTK 1细胞
NCI-SNU-C2B细胞系相关产品:X63-Ag8细胞、SUM 52细胞、GL261细胞
NCI-SNU-C2B细胞系相关产品:X63-Ag8细胞、SUM 52细胞、GL261细胞
HCT116细胞系相关产品:Rat podocyte细胞、MKN 45细胞、SK-N-BE(2)C细胞
Ontario Cancer Institute-Acute Myeloid Leukemia-3细胞系相关产品:SNU-869细胞、SK-Col-1细胞、D341细胞
NCIH520细胞系相关产品:SUDHL-16细胞、A 172细胞、DC2.4细胞
SKNO-1细胞系相关产品:HEC-151细胞、IEC-18细胞、C32 [Human melanoma]细胞
SKMEL5细胞系相关产品:C57 Mouse Tumor 93细胞、PC-3M-1E8细胞、293-EBNA1细胞
T 98 G细胞系相关产品:FHs74Int细胞、MLA144细胞、MPC-83细胞
V79-4细胞系相关产品:LAN5细胞、Tissue Culture-1细胞、HPAFII细胞
HKC细胞系相关产品:SW-982细胞、PL9细胞、BL1339细胞
MALME.3M细胞系相关产品:P3J细胞、TALL-1 [Human adult T-ALL]细胞、SP-2细胞
SKG IIIa细胞系相关产品:HS578T细胞、NIH:OVCAR-3细胞、WEHI 3细胞
NCIH209细胞系相关产品:LA-N-5细胞、Capan 1细胞、VE细胞
Jurkat E6-1细胞系相关产品:CLL-CII细胞、Colon-26细胞、HB 611细胞
Panc813细胞系相关产品:Vero-E6细胞、HPB-ALL细胞、SuDHL 2细胞
Tu-212细胞系相关产品:SNU-475细胞、NCI-H526细胞、V79-4细胞
MFE-280细胞系相关产品:HSAS3细胞、JB6Cl30细胞、L- cell细胞
ATDC-5细胞系相关产品:KMST-6细胞、OVCAR-3细胞、MBMEC细胞
HCMEC(BL12-H)细胞系相关产品:OVCAR10细胞、NCI-H1404细胞、AMO-1细胞
NHEK细胞系相关产品:MDA 435细胞、526 mel细胞、OCI-Ly 18细胞
SG231细胞系相关产品:K7M2细胞、32Dc3细胞、MRMT-1细胞
NTera 2细胞系相关产品:N1E115细胞、NK62a细胞、NCI-H295细胞
CCD 966SK细胞系相关产品:MS 751细胞、DHL8细胞、TGBC11TKB细胞
U937细胞系相关产品:Kasumi-6细胞、Rat Lung-65细胞、SF 126细胞
HFLS-OA细胞系相关产品:HFF-1细胞、L5178-R细胞、COV 434细胞
RL95细胞系相关产品:MMVECs细胞、P30/0HK细胞、OCI/AML-2细胞
H-87细胞系相关产品:Panc813细胞、Karpas299细胞、ZR75-30细胞
BEL 7405细胞系相关产品:NCI-H128细胞、D-341细胞、IOSE80UBC细胞
HRA 19细胞系相关产品:Rat Lung Epithelial-6-T-antigen Negative细胞、NCI-H2444细胞、L02细胞
V 79-4细胞系相关产品:FHs 74 Int细胞、K 562细胞、AU-565细胞
BT 325细胞系相关产品:BCaP-37细胞、KNS-62细胞、DU-4475细胞
CMT 167细胞系相关产品:LLC-PK(1)细胞、VERO76细胞、RL95-2细胞
SUDHL-8细胞系相关产品:SK-MEL-1细胞、OCI-Ly18细胞、LS123细胞
22Rv1细胞系相关产品:MDA.MB.231细胞、GM04680细胞、UT-7细胞
G422细胞系相关产品:SKGT2细胞、B16F1细胞、H-2170细胞
NGP Cell:人神经母细胞系
OVCAR-5细胞系相关产品:R 1610细胞、Lieming Xu-2细胞、VSC4.1细胞
U-251-MG细胞系相关产品:SW-962细胞、RPTEC TERT1细胞、Hs840T细胞
RGC6细胞系相关产品:SF-295细胞、MFE 296细胞、KYSE 180细胞
GA-10-Clone-4细胞系相关产品:MGH-U3细胞、NCIH2135细胞、SKLMS-1细胞
HEK293-F细胞系相关产品:P3-X63Ag8.653细胞、SKG3A细胞、B4G12细胞
HT1197细胞系相关产品:190PT细胞、MKN1细胞、A-375细胞
H3255_DA细胞系相关产品:HCS2/8细胞、KPL-4细胞、OCI Ly3细胞
KMS18细胞系相关产品:NS20-Y细胞、UCLA NPA-87-1细胞、JHH-7细胞
SNU-739细胞系相关产品:A-498细胞、HGBEC细胞、AM-38细胞
P3/X63/Ag8细胞系相关产品:NCI-H1666细胞、HFSF细胞、CAL-62细胞
SUP-B15细胞系相关产品:NK-92.05细胞、PC-3M 2B4细胞、Hs 742.T细胞
Natural Killer-92细胞系相关产品:BrCL15细胞、Kit225 K6细胞、MN60细胞
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