"Detroit 562 Cell:人咽头癌胸水转移细胞系
细胞形态：上皮细胞样
细胞生长：贴壁
细胞背景资料：器官：咽头 疾病：癌 取材转移灶：胸水
HuTu-80细胞系相关产品：Alpha Mouse Liver 12细胞、3T3-L1 ad细胞、Vero from pool #76细胞
D341 Med细胞系相关产品：A172细胞、ZR-75-30细胞、Doubling time: ~50 hours (ATCC).细胞
LCLC103H细胞系相关产品：CHO-S细胞、OAC-P4C细胞、MDA-MB-134细胞
Kit225-K6细胞系相关产品：NCI-H358细胞、Okayama University Medical School-27细胞、HeLa.S3细胞
细胞物种来源：人源或鼠源等其它物种来源
Detroit 562 Cell:人咽头癌胸水转移细胞系
细胞传代时消化的问题：可以这样说，对于需要消化传代的细胞，每一次的消化都是对这个细胞存活与否，状态好与不好最至关重要的考验。很多同学都遇到过这个问题，自己养的细胞开始的几代长的还挺好的，可是穿过几代之后就发现自己的细胞，状态越来越差劲了。对于这个问题，可以非常肯定地说，你的消化环节出问题了。你每一次的消化都让细胞受到较大损伤了。所以，越长越差。在消化的过程中，你加入胰酶后，所有细胞都在被胰酶消化着，但是我们忽视了一个问题就是，细胞的生长状态是不一样的，每一个细胞的贴壁情况也是不一样的，有的贴壁牢固，有的贴壁没有那么牢固的，所以，让所有的细胞消化同样的时间对细胞是不公平的，他们受到了差别待遇当然会有脾气啊。我后来对消化的方法进行了改良。争取做到因材施教呵呵。我称之为“四步消化法”。（以难消化细胞为例）；具体操作：１)首先不加胰酶，倒掉旧培养基加入少量新培养基洗１-２遍，（这是前奏，即为步，目的是将漂浮着的死细胞之类尽量洗掉。２)然后再加入少量新培养基直接吹打一遍，这一遍是把贴壁不牢固的细胞吹打下来。再用培养基洗一遍，两次所得悬液混合传入新瓶。即为第二步（你可以将这些传入新瓶培养，以与后面胰酶消化过的细胞对比观察看谁长的更好一点就知道该细胞对胰酶的敏感度了。）３)吸干净瓶内剩余液体，加入０.３ml左右的胰酶润洗一遍，吸掉弃之，再加入１ml左右的胰酶消化。消化的同时置于显微镜下观察，待细胞与细胞之间间隙明显的时候立即吸掉胰酶与干净子弹头里备用，加入新培养基开始吹打，吹打２-３遍后吸取悬液于试管或新瓶暂存。用２ml左右新培养基洗一遍与前面的混合。（你也可以传入新瓶培养，以与后面及前面的做对比。）这是第三步。４)然后把前面刚吸出来的胰酶重新加进去瓶里继续消化剩余的贴壁牢固的细胞。当然你也可以用新的胰酶，如果你们那比较富裕的话，呵呵。继续镜下观察，待剩余细胞间隙明显，细胞独立开来的时候，吸掉胰酶，加入新培养基吹打。悬液传入新瓶培养（根据实际情况你自己把握）。这是第四步。其实还可以有第五步，对于特别难消化的细胞和对胰酶特别敏感的细胞的话，你可以继续加第五步甚至第六步。为了细胞更好的状态，更漂亮的样子，没办法，你必须分多批多次消化，这样才能限度地将胰酶对细胞的损伤降到最低，保证细胞的状态能够。当然了，如果细胞是属于那种很容易消化的细胞，像RAW２６４.７，仅仅第二步就搞定了。就没必要第三步第四步了。这个是需要你在实验中能够自己用心去体会的。建议你接受一个新细胞时把各步消化的细胞分别培养起来做比较，去摸索好细胞对胰酶的要求。便于你后续实验的开展。将细胞消化分成这几步，除了是为了避免胰酶对细胞的损伤之外，还有一个更重要的作用就是，可以程度地把细胞吹打成单个单个的状态，不成片不连体。
细胞产品包装：复苏形式：T２５培养瓶(一瓶)或冻存形式：１ml冻存管(两支)
细胞传代方法：１：２-１：４传代，２-３天换液１次。
如何进行细胞复苏：１)从液氮容器中取出冻存管，直接浸入３７℃温水中，并不时摇动令其尽快融化；２)从３７℃水浴中取出冻存管，打开盖子，用吸管吸出细胞悬液，加到离心管并滴加１０倍以上培养液，混匀；３)离心，１０００rpm，５min；４)弃去上清液，加入含１０%小牛血清培养液重悬细胞，计数，调整细胞密度，接种培养瓶，３７℃培养箱静置培养；５)次日更换一次培养液，继续培养。【温馨提醒】１)从增殖期到形成致密的单层细胞以前的培养细胞都可以用于冻存，但为对数生长期细胞。在冻存前一天换一次培养液；２)将冻存管放入液氮容器或从中取出时，要做好防护工作(戴棉手套)，以免冻伤；３)冻存和复苏用新配制的培养液。细胞复苏的时候，有些初次实验员将冻存管从液氮中取出后，放在室温下，经常发生冻存管爆炸，该怎么避免出现这种情况吗？其中在拧紧冻存管的时候是否有哪些细节要注意的？一般常用的方法是取出冻存管后在超净工作台中用酒精棉球擦试管口，再稍拧松盖子，再放３７度水浴锅中摇溶，在将细胞转移到装有３７度预热过的培养基的试管中，迅速离心，再用培养基洗一遍。
细胞来源说明：细胞主要来源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少数国外著名大学建系
Normal Rat Kidney-49F细胞系相关产品：A-172MG细胞、Tu177细胞、HCC-1419细胞
GDM-1细胞系相关产品：MCF7-GFP细胞、B16 melanoma F10细胞、UWB1289细胞
KYSE-520细胞系相关产品：Bx-PC3细胞、S180细胞、H35细胞
SK-N-DZ细胞系相关产品：A-1847细胞、EC109细胞、BEL 7405细胞
BAEC细胞系相关产品：C28/I2细胞、H295细胞、LK2细胞
细胞生长特性：贴壁生长
Detroit 562 Cell:人咽头癌胸水转移细胞系
细胞培养无菌操作步骤和注意事项：１.打开无菌工作台及净化室的紫外灯，消毒半小时以上。２.进入净化室前先关闭紫外灯，打开超净台风机，等待３０min以上，以排尽臭氧。３.穿好隔离衣，戴好口罩，帽子。４.风淋２分钟。５.０.１%水泡手，擦干。６.点燃酒精灯;超净台内应避免放入过多的物品;使用的吸管，滴管，试管，培养瓶等均事先灭菌。７.打开各类瓶盖前先过火，以固定灰尘;打开的瓶口、试管口过火焰，镊子使用前应经火焰烧灼。８.水平式风机的超净台，应使瓶口斜置，应尽量避免瓶口敞开直立。９.同一根吸管或滴管不应连续用于几个不同的细胞系；吸取培养基的吸管应离开培养瓶或试管口０.５cm，避免伸入培养瓶口或试管口；以防止细胞系的互相混杂污染。１０.漏在培养瓶上或台上的液体，立即用酒精棉球擦净。１１.操作完毕后恢复工作台面。
细胞形态特性：上皮细胞
NCI-H1373细胞系相关产品：HLMVEC细胞、Colon 38细胞、RIN Cl-5F细胞
LU165细胞系相关产品：WIL2-S细胞、hMSC-BM细胞、HCT 116细胞
SW626细胞系相关产品：XWLC-05细胞、VMRC-LCD细胞、HCV29细胞
T/G HA VSMC细胞系相关产品：10T1/2细胞、AsPC-1细胞、HARAB细胞
H-295R细胞系相关产品：SNU-182细胞、HCMEC细胞、UCH1细胞
GDM-1细胞系相关产品：MCF7-GFP细胞、B16 melanoma F10细胞、UWB1289细胞
DiFi细胞系相关产品：SUDHL10细胞、MLM细胞、8305C细胞
Detroit 562 Cell:人咽头癌胸水转移细胞系
P3X63 AG 8.653细胞系相关产品：C33细胞、P-2003细胞、PANC-10-05细胞
OE21细胞系相关产品：NCI-H508细胞、ECV304细胞、H64细胞
HBVP细胞系相关产品：NCIH1793细胞、Panc-8_13细胞、Reuber H35细胞
BI-Mel细胞系相关产品：KHYG-1细胞、SkChA1细胞、SW.620细胞
RK 13细胞系相关产品：NCIH2405细胞、HNE3细胞、SNU601细胞
HT 1080.T细胞系相关产品：SK-Hep1细胞、HANK细胞、HFL细胞
ROS 17/2.8细胞系相关产品：HLFa细胞、293 Ad5细胞、UMNSAH-DF 1细胞
V79-4细胞系相关产品：LAN5细胞、Tissue Culture-1细胞、HPAFII细胞
RWPE2细胞系相关产品：Stanford University-Diffuse Histiocytic Lymphoma-8细胞、DMS 153细胞、SCLC21H细胞
RWPE2细胞系相关产品：Stanford University-Diffuse Histiocytic Lymphoma-8细胞、DMS 153细胞、SCLC21H细胞
COLO-320-HSR细胞系相关产品：OVCA 433细胞、TERT-RPE1细胞、RPTEC/TERT1细胞
SHEE细胞系相关产品：COLO320/DM细胞、SBC5细胞、Jurkat (clone E6-1)细胞
AHH-1细胞系相关产品：Be Wo细胞、3T6-Swiss albino细胞、WEHI231细胞
H2195细胞系相关产品：NCI-SNU-449细胞、COLO679细胞、NCI H716细胞
CCD 966 SK细胞系相关产品：A2780 CP70细胞、149PT细胞、BE2-C细胞
Reuber H-35细胞系相关产品：STO细胞、Hs940-T细胞、PL 5细胞
LC-2 ad细胞系相关产品：C17.2细胞、IMR-32细胞、SMA 560细胞
A-673细胞系相关产品：NCI-H2085细胞、Biopsy xenograft of Pancreatic Carcinoma line-3细胞、KG-1a细胞
P3/NS1/1-Ag4.1细胞系相关产品：H2444细胞、IR 983F细胞、LC1细胞
N-Tera-2细胞系相关产品：RBL-2H3细胞、IEC 18细胞、PC-3M IE8细胞
MB39细胞系相关产品：Mc Ardle 7777细胞、JROECL 19细胞、NIH-3T3-L1细胞
IM 9细胞系相关产品：3T3 J2细胞、16HBEo-细胞、PANC 203细胞
IPEC1细胞系相关产品：SKNBE2C细胞、hFOB细胞、Mel526细胞
HVSMC细胞系相关产品：OCI-AML5细胞、1.1B4细胞、BLO 11细胞
QGY7703细胞系相关产品：Jurkat77细胞、PK-15细胞、SuDHL 5细胞
Me-Wo细胞系相关产品：CEM细胞、HO1-N-1细胞、SW837细胞
N9细胞系相关产品：KB细胞、KU-812-F细胞、HT144mel细胞
B16-F10细胞系相关产品：Sp2/mIL-6细胞、HEK293-A细胞、EU-4细胞
NCI-A549细胞系相关产品：M14-MEL细胞、AdHek细胞、U266 Bl细胞
COS-7细胞系相关产品：U-87MG细胞、HS-695T细胞、TE-9细胞
IGROV细胞系相关产品：HCT8细胞、NFHIOSE-80细胞、PA-1细胞
Lu-99A细胞系相关产品：P3X63 Ag8细胞、HPAF II细胞、CHO K1细胞
HKC细胞系相关产品：SW-982细胞、PL9细胞、BL1339细胞
143BTK-细胞系相关产品：H9细胞、NCIH1770细胞、HCEC细胞
HPASMC细胞系相关产品：SW780细胞、Hs-600-T细胞、PAMC82细胞
COLO 205细胞系相关产品：H4-II-E细胞、SUM 102PT细胞、COLO_320DM细胞
IHC-ST1细胞系相关产品：Be-Wo细胞、H-3255细胞、HPC-Y5细胞
NUGC3细胞系相关产品：VMRC-RCZ细胞、SU-DHL6细胞、16-HBEo细胞
CAMA细胞系相关产品：CAL 51细胞、TSU-Pr1细胞、H929细胞
PL 5细胞系相关产品：U 266细胞、HT144-mel细胞、D10.G4.1细胞
OCI-Ly 18细胞系相关产品：8305C细胞、F81细胞、P-3J细胞
SK.MEL.28细胞系相关产品：H-1770细胞、U-251细胞、Z138细胞
CaES-17细胞系相关产品：MDA453细胞、MNNGHOS细胞、H211细胞
Detroit 562 Cell:人咽头癌胸水转移细胞系
UCLA-SO-14细胞系相关产品：NCI-H650细胞、HDSMC细胞、H-711细胞
801-D细胞系相关产品：IPEC1细胞、Panc02细胞、PANC0813细胞
C127细胞系相关产品：M 1细胞、PTK 1细胞、TE6细胞
JROECL 19细胞系相关产品：BI-Mel细胞、KRC Y细胞、HBSMC细胞
SUM 52PE细胞系相关产品：OKa-C-1细胞、HT 1376细胞、NCI-H2198细胞
ASH3细胞系相关产品：University of Michigan-Renal Carcinoma-2细胞、MM1细胞、NCTC-929细胞
BpRc1细胞系相关产品：hTERT-HME1细胞、H1048细胞、IM-9细胞
B958细胞系相关产品：J774A.1细胞、C4-2 Bone metastatic细胞、NCI-H2195细胞
CHL/IU细胞系相关产品：NCI-747细胞、DoTc2细胞、MOLP8细胞
Hs343T细胞系相关产品：Colon 26细胞、HPDLF细胞、FAO-1细胞
PLB985细胞系相关产品：Pro-5WgaRI3C细胞、P30-OHKUBO细胞、Panc-05.04细胞
COLO201细胞系相关产品：Duke University 4475细胞、HIC细胞、NS-I/1细胞
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