"NCI-H2171 Cell:人小细胞肺癌细胞系
细胞形态:上皮细胞样
细胞生长:贴壁
细胞背景资料:详见相关文献介绍
HCET细胞系相关产品:NCI H295R细胞、FM88细胞、EA.hy 926细胞
SNU16细胞系相关产品:CAL39细胞、FL 62891细胞、RIN14B细胞
BHP10-3细胞系相关产品:A375-SM细胞、MES23.5细胞、SKGT2细胞
MNNG/HOS Cl #5细胞系相关产品:Chinese Hamster Lung细胞、CHP-212细胞、Hs 895 T细胞
细胞物种来源:人源或鼠源等其它物种来源
NCI-H2171 Cell:人小细胞肺癌细胞系
细胞消化过程总结:其实绝大部分细胞消化的时候是只要用胰酶润洗一遍即可,吸去胰酶后,残留的那些无法计算体积的附着在细胞表面的微量胰酶在37度一般不到2min足够消化细胞(绝大部分1min不到)。对于这些细胞原则上不要用胰酶孵育细胞,连续这样传代,对细胞伤害很大。简单的程序是PBS润洗吸去,胰酶润洗吸去,然后37度消化。2,什么算是消化好了呢?不是细胞全部成间隔分布很离散的单个圆形才算消化好了,一般你肉眼观察贴壁细胞层,只要能移动了,多半呈沙壮移动,其实已经可以了,很多人喜欢把细胞消化或者吹打成完全分离细胞,这是没有必要的。一般能移动了,说明细胞与培养基质材料的附着已经消失了,细胞之间的附着也已经消失了,细胞已经独立分布了(虽然没有呈现很广的离散分布)。这个时候应该停止消化,不要等到看到镜下所有细胞都分离得非常好,间隙很大,才停止。细胞就是完全成单个细胞悬液,之后在贴壁的过程中仍然会聚集,这个是贴壁培养的细胞,尤其是肿瘤细胞的一个特性,无论死活的细胞都是如此,你可以尝试,准备100%的单个细胞悬液,贴壁后观察细胞,仍然是几个几个细胞聚集在一起。一些悬浮培养细胞也是如此,容易聚集,不要去尝试过几个小时就拿出来吹打成单细胞悬液(不要笑,这个是初养悬浮细胞的人常犯的错误,以为悬浮培养就是一个一个分开)。细胞只要能从基质上脱离下来,这个时候即使是成片的(比如Calu-3细胞),吹打不超过20次后(一般10次即可),成小规模聚集(10个细胞左右),是正常的,不要试图再去延长消化时间,或者像有的同学那样吹打1h,等待单细胞悬液出现。比较难消化的细胞(润洗方法5min还不能消化),比如HCT15, LS411和KM12,这样的细胞一般需要用少量胰酶孵育,但也不需要很多,一般100mm dish,一次最多加入500ul,就足够了,一般我加300ul。即使这样难消化的细胞,一般不超过5min,即可见细胞成片移动,就应该停止消化。一些正常细胞也会有难消化的时候,比如tsDC细胞,但也只要用少量胰酶孵育,3min左右即可看到成片沙状移动。
细胞产品包装:复苏形式:T25培养瓶(一瓶)或冻存形式:1ml冻存管(两支)
细胞传代方法:3-4天换液1次。
培养细胞真的不难,最关键几点:1)所有的东西使用,如果你用的血清、培养皿、培养基、胰酶什么的都是进口的,真的很难相信你会把细胞养坏;2)动作要快,胰酶消化,换液什么,细胞暴露在空气中的时间越少越好。另外,要掌握好胰酶消化时间,所谓的细胞状态差,很多时候是传代的原因;3)有时间的话,需要细胞计数,传相应数目的细胞到培养皿中,可以大致清楚细胞的生长曲线,不会临时要处理,手足无措;4)要做什么心里要非常清楚,合理安排时间,传代细胞的实验穿插进行,可以节省很多时间,也不会耽误别人的实验;5)个人的实验器具自己收一套,不要和别人混用,最近换了什么新的东西稍微记一下,试剂一旦怀疑污染,马上丢;6)传代细胞不能进去太多人,避免相互干扰。每天对待细胞比孝敬爹妈还用心,那真是捧在手里怕碎了,含在嘴里怕化了,看在眼里怕丢了,培养细胞时有哪些经验教训可以分享呢?1)严格无菌操作,多喷喷酒精,要是对灭菌的东西不放心,自己包自己送自己烘干;2)不要和别人共用试剂耗材,自己准备一套;3)有可能的话在拿到新细胞的时候做好支原体衣原体检测;4)水浴锅很脏,生化培养箱要是得手动加湿的话盘里的水也会很脏,勤换(灭菌水加进去);5)晚上离开的时候给传代细胞照紫外,超净台是用完就开;6)是同一时间就你一个人在用传代细胞在养细胞。
细胞来源说明:细胞主要来源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少数国外著名大学建系
KM12细胞系相关产品:Farage Original Line细胞、NCI-H165细胞、SW-839细胞
HT 144细胞系相关产品:CNE1-LUC细胞、UMC-11细胞、PC-9细胞
130 T细胞系相关产品:H2106细胞、3396细胞、MDAMB231细胞
2PK3细胞系相关产品:NIH 3T6细胞、Lewis-Lung细胞、NTERA2D1细胞
TE-1细胞系相关产品:OC316细胞、Sf-21细胞、HCC-1395细胞
细胞生长特性:悬浮生长
NCI-H2171 Cell:人小细胞肺癌细胞系
细胞复苏相关注意事项:1.取细胞的过程中注意带好防冻手套,护目镜。此项尤为重要,细胞冻存管可能漏入液氮,解冻时冻存管中的气温急剧上升,可导致爆炸。2.冻存液的问题:冻存液的配置已是常识,在这里不作详述,但二甲基亚砜(DMSO )对细胞不是完全无毒副作用,在常温下,二甲基亚砜对细胞的毒副作较大,因此,必须在1-2min内使冻存液完全融化。如果复苏温度太慢,会造成细胞的损伤,二甲基亚砜(DMSO)选择进口产品。3.离心前须加入少量培养液。细胞解冻后二甲基亚砜浓度较高,注意加入少量培养液可稀释其浓度,以减少对细胞的损伤。4.离心问题:目前主要有两种见解。一种是解冻后的细胞悬液直接吹打均匀后分装到培养瓶中进行培养,第二天换液。因为离心的目的是两个,去除DMSO,去除死细胞,这个是标准流程,但对一般人来说,把握不好离心转速和时间,转的不够活细胞沉底的少,细胞就全被扔掉了,转过了活细胞会受压过大,死亡。此外在操作过程中容易污染,所以不推荐。另一种说法为细胞悬液中含有二甲基亚砜(DMSO),DMSO对细胞有一定的毒副作用,所以须将离心后的液体前倒净,且一定倒干净。我在试验中按照常规的离心分装的方法进行复苏,结果无异常。5.细胞贴壁少的问题:教科书中说明冻存细胞解冻时1ml细胞液要加10ml-15ml培养液,而在我的试验中的经验总结为培养基越少细胞越容易贴附。6.复苏细胞分装的问题:试验中我的经验总结为复苏1管细胞一般可分装到1-2只培养瓶中,分装过多,细胞浓度过低,不利于细胞的贴壁。7.加培养基的量放入问题:这个量的多少的把握主要涉及到的问题DMSO的浓度,从如果你加培养基的太少,那么DMSO的浓度就会比较大,就会影响细胞生长,从以前的资料来看,DMSO的浓度在小于0.5%的时候对一般细胞没有什么影响,还有一个说法是1%。所以如果你的冻存液的浓度是10%DMSO的话那么加10ml以上的培养基就恰好稀释到了无害浓度。
细胞形态特性:聚团悬浮
NCTC 929细胞系相关产品:Panc02.03细胞、HPMEC细胞、S3 HeLa细胞
LA-N-5细胞系相关产品:Merwin Plasma Cell tumor-11细胞、NIH:OVCAR-8细胞、LAD-2细胞
OACP4C细胞系相关产品:B-cell Acute Lymphoblastic Leukemia-1细胞、EOC 20细胞、NB-4细胞
GM05887细胞系相关产品:RBL.2H3细胞、H-209细胞、ZR75_1细胞
BNL CL2细胞系相关产品:BT 20细胞、MDA2B细胞、Hs-600-T细胞
PC-3M-2B4细胞系相关产品:GBC-SD细胞、HUT125细胞、Jurkat77细胞
Huh-7.5.1细胞系相关产品:L-cells细胞、NPA87细胞、SMA-560细胞
NCI-H2171 Cell:人小细胞肺癌细胞系
UCLA-SO-M20细胞系相关产品:HCC-2935细胞、Henrietta Lacks cells细胞、BC-3H-1细胞
Leghorn Male Hepatoma cell line细胞系相关产品:2V6.11细胞、P-19细胞、COR-L 105细胞
SJ-Rh 30细胞系相关产品:LLC PK1细胞、H716细胞、RKN细胞
KM.12细胞系相关产品:HFLS细胞、GM02131细胞、SK HEP 01细胞
BALL1细胞系相关产品:Wien 133细胞、HEH2细胞、UCLA-SO-M21细胞
Monomac-1细胞系相关产品:H2228细胞、Panc 10.05细胞、SUM190细胞
DR2R 1610细胞系相关产品:GNM细胞、DLD 1细胞、Panc2_03细胞
7860细胞系相关产品:HPAF II细胞、IMR90细胞、RS411细胞
NIH/3T3细胞系相关产品:MDAPC2B细胞、MDA-MB 468细胞、MX-1细胞
NIH/3T3细胞系相关产品:MDAPC2B细胞、MDA-MB 468细胞、MX-1细胞
OVCAR 432细胞系相关产品:ME16C细胞、Sarcoma OSteogenic-2细胞、HEI193细胞
CEL细胞系相关产品:FCCH1024细胞、U266S细胞、H-2342细胞
T-98G细胞系相关产品:COLO 320DM细胞、TC7细胞、MV-522细胞
Hs895T细胞系相关产品:Roswell Park Memorial Institute 7951细胞、SK-N-AS细胞、MOLP2细胞
alpha TC1-6细胞系相关产品:Namalva细胞、H-1688细胞、NCIH2228细胞
SMMC7721细胞系相关产品:CTLA4Ig-24细胞、C-6细胞、GM07404细胞
SK.MEL.28细胞系相关产品:H-1770细胞、U-251细胞、Z138细胞
MGH-U1 (EJ)细胞系相关产品:Lewis lung carcinoma line 1细胞、HBL-100细胞、H1436细胞
16HBEo-细胞系相关产品:NCIH3255细胞、MH7A细胞、aNK细胞
BEL7404细胞系相关产品:Detroit562细胞、LNCaP FGC细胞、SACC83细胞
Tu177细胞系相关产品:CMT64细胞、Mhh-Call 2细胞、HPDE细胞
NCIH1770细胞系相关产品:J45.01细胞、293 F细胞、Kasumi 1细胞
IALM细胞系相关产品:DMS273细胞、COS7细胞、C28/I2细胞
P31 FUJ细胞系相关产品:MDA-MB453细胞、PAMC82细胞、NT2/D1细胞
IMR 32细胞系相关产品:RenCa细胞、MDA-MB-134 VI细胞、H1048细胞
Dunn LM8细胞系相关产品:343MG细胞、Fortner's melanotic melanoma #3细胞、BMSCs(mBMSCs)细胞
ARO 81-1细胞系相关产品:FHCRC-11细胞、MV-3细胞、CNE-2Z细胞
BT-483细胞系相关产品:C8161细胞、JROECL33细胞、U-87-MG细胞
TE 354.T细胞系相关产品:NFHIOSE-80细胞、EB-1细胞、RPMI 7951细胞
TALL-104细胞系相关产品:Mino细胞、LTEP-sm 1细胞、HEK-293-EBNA细胞
A-172细胞系相关产品:SK Mel 2细胞、HPAF-2细胞、KALS-1细胞
NRK clone 52E细胞系相关产品:PBL细胞、ARO81细胞、NIH:OVCAR-5细胞
F56 [Human neoplasm]细胞系相关产品:CL-11细胞、PANC-02-03细胞、TE-85 clone 5细胞
H-1155细胞系相关产品:143BTK-细胞、LN 229细胞、hADSCs细胞
Rh30细胞系相关产品:HT 115细胞、Ramos.G6.C10细胞、JM-Jurkat细胞
SW954细胞系相关产品:KNS81细胞、MIA-Pa-Ca-2细胞、HCC15细胞
Madin-Darby Canine Kidney细胞系相关产品:U-251细胞、CCC-HEL-1细胞、RERF-LC-MS细胞
MO59J细胞系相关产品:PIG3细胞、LICR-LON-HN6细胞、TE7细胞
HCC94细胞系相关产品:HCC-2218细胞、AN-3细胞、H2227细胞
SCC90细胞系相关产品:COLO.205细胞、U-373MG ATCC细胞、W256细胞
BALB 3T3 clone A31细胞系相关产品:MG-63细胞、PL45细胞、TM-3细胞
FHs74 Int细胞系相关产品:HRC-99细胞、Med 283细胞、LO2细胞
NCIH2126细胞系相关产品:GM05862细胞、H1954细胞、HS-766T细胞
NCI-H2171 Cell:人小细胞肺癌细胞系
3T3-J2细胞系相关产品:Potorous tridactylus Kidney 1细胞、C-127细胞、VK2细胞
H-2196细胞系相关产品:HTori 3细胞、PANC3.27细胞、C1R细胞
HOS (TE85)细胞系相关产品:H4-IIE-C3细胞、HT-1080细胞、PANC-08-13细胞
IM95细胞系相关产品:CORL279细胞、Nakata-1细胞、Panc_04_03细胞
HCT FET细胞系相关产品:NBLAN5T细胞、MDCK supertube细胞、HO1-N-1细胞
HSC-2细胞系相关产品:Hs-578-T细胞、EPC细胞、MPC-11细胞
KPL4细胞系相关产品:GT1-1细胞、WML2细胞、ABC1细胞
MLMEC细胞系相关产品:U-266细胞、GDM-1细胞、HuT-78细胞
HCFB(HCF)细胞系相关产品:WEHI-231细胞、MG63细胞、OVCAR 420细胞
McA-RH7777细胞系相关产品:H-1373细胞、SUM-149细胞、SMC-1细胞
HUASMC细胞系相关产品:HC11细胞、SKLU01细胞、hTERT-HME1细胞
C2A细胞系相关产品:HaCaT细胞、P 815细胞、brain-derived Endothelial cells.3细胞
"