"HLF-a Cell:人肺细胞系
细胞形态：上皮细胞样
细胞生长：贴壁
细胞背景资料：详见相关文献介绍
Jeko1细胞系相关产品：Mel-RM细胞、MMVECs细胞、ChaGo-K1细胞
GM00215A细胞系相关产品：HOSEpiC细胞、H2122细胞、GM02219D细胞
SKMES1细胞系相关产品：MG63细胞、NU-GC-4细胞、SW-982细胞
NCI-H711细胞系相关产品：P3/X63/Ag8细胞、BEL-7405细胞、EoL-1-cell细胞
细胞物种来源：人源或鼠源等其它物种来源
HLF-a Cell:人肺细胞系
细胞培养过程中相关问题总结：悬浮性细胞应如何继代处理？一般仅需持续加入新鲜培养基于原培养角瓶中，稀释细胞浓度即可，若培养液太多时，可将培养角瓶口端稍微抬高，直到无法容纳为止。分瓶时取出一部份含细胞之培养液至另一新的培养角瓶，加入新鲜培养基稀释至适当浓度，重复前述步骤即可。欲将一般动物细胞离心下来，其离心速率应为多少转速？欲回收动物细胞，其离心速率一般为３００xg(约１,０００rpm)，５-１０分钟，过高之转速，将造成细胞死亡；细胞之接种密度为何？依照细胞株基本数据上之接种密度或稀释分盘之比例接种即可。细胞数太少或稀释的太多亦是造成细胞无法生长之一重要原因；细胞冷冻培养基之成份为何？动物细胞冷冻保存时最常使用的冷冻培养基是含５-１０%DMSO(dimethyl sulfoxide)和９０-９５%原来细胞生长用之新鲜培养基均匀混合之。注意：由于DMSO稀释时会放出大量热能，故不可将DMSO直接加入细胞液中，必须使用前先行配制完成；DMSO之等级和无菌过滤之方式为何？冷冻保存使用之DMSO等级，必须为Tissue culture grade之DMSO，其本身即为无菌状况，次开瓶后应立即少量分装于无菌试管中，保存于４°C，避免反复冷冻解冻造成DMSO之裂解而释出有害物质，并可减少污染之机会。若要过滤DMSO，则须使用耐DMSO之Nylon材质滤膜；冷冻保存细胞之方法？冷冻保存方法一：冷冻管置于４°C ３０~６０分钟→ (-２０°C ３０分钟)→-８０°C １６~１８小时(或隔夜)→液氮槽vaporphase长期储存。冷冻保存方法二：冷冻管置于已设定程序之可程序降温机中每分钟降１-３°C至–８０°C以下，再放入液氮槽vapor phase长期储存。-２０°C不可超过１小时，以防止冰晶过大，造成细胞大量死亡，亦可跳过此步骤直接放入-８０°C冰箱中，惟存活率稍微降低一些；细胞欲冷冻保存时，细胞冷冻管内应有多少细胞浓度？冷冻管内细胞数目一般为１x１０(６)cells/ml vial，融合瘤细胞则以５x１０(６)cells/ml vial为宜；应如何避免细胞污染？细胞污染的种类可分成细菌、酵母菌、霉菌、病毒和霉浆菌。主要的污染原因为无菌操作技术不当、操作室环境不佳、污染之血清和污染之细胞等。严格之无菌操作技术、清洁的环境、与品质良好之细胞来源和培养基配制是减低污染之方法；如果细胞发生微生物污染时，应如何处理？直接灭菌后丢弃之。
细胞产品包装：复苏形式：T２５培养瓶(一瓶)或冻存形式：１ml冻存管(两支)
细胞传代方法：１：２-１：４传代；每周换液２次。
细胞常规培养传代流程(请严格遵照无菌操作)：１)吸出原培养瓶中的培养基，PBS缓冲液润洗细胞两次，加２-３ml ０.２５%胰酶进行消化细胞(注意把握消化时间，通常控制在１-２min)；２)镜下观察消化情况，在细胞边缘缩小，贴壁松动时(不建议消化到细胞漂浮)去掉胰酶，加６-８ml完全培养基，轻轻吹打细胞层，尽量把细胞层吹落，吹散；３)取部分细胞悬液转移到新的培养皿/瓶中，添加适当的完全培养基，把细胞悬液打匀，于培养箱中培养；４)注意培养基PH值变化情况，定期换液(每周２-３次)，待细胞密度达到８０%以后重复１项操作或者冻存；特别注意：(如使用公共实验室或者初次接触细胞培养，建议添加双抗培养)１)收到细胞后请尽快更换为含１５%血清的新鲜培养基，如因特殊情况需要继续使用原瓶，请在原瓶培养基中额外添加１０%的血清，(原瓶培养基的继续使用时间最长不宜超过７２小时)；２)贴壁细胞收到当天切忌立刻消化，请将细胞换液后放置培养箱孵育到第二天再做消化传代，请优先选择直径６cm的培养皿进行传代培养；３)如签收时出现培养瓶壁破裂，漏液等情况请及时做好照片记录并联系实验室。
细胞来源说明：细胞主要来源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少数国外著名大学建系
HCT-FET细胞系相关产品：KYSE 50细胞、H3255细胞、HCT-8细胞
TE-4细胞系相关产品：GOS-3细胞、Hs 675.T细胞、SNT-8细胞
NHRF细胞系相关产品：D-341 Med细胞、MB 157细胞、IOSE 29细胞
NCI-H498细胞系相关产品：RPE1-hTERT细胞、B16 subline B78细胞、22Rv-1细胞
Ontario Cancer Institute-Acute Myeloid Leukemia-5细胞系相关产品：H-676B细胞、Centre Antoine Lacassagne-148细胞、RIN-m 14B细胞
细胞生长特性：贴壁生长
HLF-a Cell:人肺细胞系
贴壁细胞消化传代时通常采用两种方法：一、加入胰酶等细胞脱落后，再加培养基中止胰酶作用，离心传代；二、加入胰酶后，镜下观察待细胞始脱落时，弃胰酶，加培养液分瓶。但前者太麻烦，而后者有可能对细胞施加胰酶选择，因为总是贴壁不牢的细胞先脱落，对肿瘤细胞来说，这部分细胞有可能是恶性程度较高的细胞亚群。一种简单的消化传代方法。加入PBS洗去血清或加入胰酶先中和血清的作用(３０s)，弃之，再加入适量胰酶作用１０s-４０s(根据细胞消化的难易程度)，弃之，这样依赖残余的胰酶就可将细胞消化单细胞。对于较难消化的细胞，可以用２%利多卡因消化５-８分钟，然后再弃去，加培养基吹打也可以，对细胞的影响不大。不用PBS也不用Hanks洗，只要把旧培养液吸的干净一点，直接加酶消化应该不会有什么问题。弃培养液后，用０.０４%的EDTA冲洗一次，再用１/４v的０.０４%的EDTA室温孵育５min，弃取大部分EDTA，加入与剩余EDTA等量的胰酶(预热)总体积１/１０v。消化到有细胞脱落。不过有人说EDTA对细胞不好，有证据吗？培养的BASMC：倒掉旧培养液加入少量胰酶冲一下，倒掉再加入０.１２５-０.２５%胰酶约６-１０滴或１ml(２５ml bottle)消化再加入适量新培养基中和，并分瓶这种方法简单、省事；效果很好并且不损失细胞！
细胞形态特性：成纤维细胞
CATH-a细胞系相关产品：M210B4细胞、HCFB（HCF）细胞、Hs-688A-T细胞
NBL-7细胞系相关产品：KU 812F细胞、M14细胞、Highly Aggressively Proliferating Immortalized细胞
Mono-Mac-1细胞系相关产品：ssMCF7细胞、ATC241细胞、Normal Rat Kidney细胞
MDAMB231细胞系相关产品：MUTZ-1细胞、PANC-08-13细胞、H128细胞
SK MEL-28细胞系相关产品：Mv 1 Lu细胞、SK-ChA1细胞、RGCs细胞
SW-948细胞系相关产品：SW 1573细胞、CL-34细胞、SKG-3a细胞
SNU-475细胞系相关产品：SuDHL 10细胞、TF-1a细胞、SuDHL 10细胞
HLF-a Cell:人肺细胞系
253J-Bladder-V细胞系相关产品：LA 4细胞、KMST-6细胞、PAI细胞
A72细胞系相关产品：JROECL19细胞、P3/NS1/1-Ag4.1细胞、PF382细胞
UWB1.289+BRCA1细胞系相关产品：Capan 1细胞、MDA-MB-435细胞、SUM149细胞
Hs 832(C).T细胞系相关产品：H-2085细胞、NW38细胞、HCC-202细胞
AN3细胞系相关产品：Kasumi 1细胞、alpha TC1 clone 6细胞、MNNG/HOS Cl #5细胞
A-10细胞系相关产品：Co-115细胞、CF-PAC1细胞、SJ-RH30细胞
CD 18细胞系相关产品：KU1919细胞、Earle's L cells细胞、HR-8348细胞
ZR75-1细胞系相关产品：MSB-1细胞、SF126细胞、Large Cell Lung Cancer-103H细胞
OVCAR3细胞系相关产品：BLO-11细胞、SNB.19细胞、NCI-H711细胞
OVCAR3细胞系相关产品：BLO-11细胞、SNB.19细胞、NCI-H711细胞
SK-ES1细胞系相关产品：HS-5细胞、PSN1细胞、PFSK1细胞
SK-RC 52细胞系相关产品：BLO11细胞、McCoy细胞、Vertebral Cancer of the Prostate细胞
H2228细胞系相关产品：Ocular Choroidal Melanoma-1细胞、N87细胞、210RCY3-Ag1.2.3细胞
SW-1271细胞系相关产品：HeLa/S3细胞、HEK293T/17细胞、DLD 1细胞
IEC-18细胞系相关产品：McA-RH7777细胞、CTV1细胞、Kit 225细胞
SC1细胞系相关产品：H-1105细胞、3AO细胞、RH30SJ细胞
HCC-202细胞系相关产品：RT4细胞、NB1-RGB细胞、ND7/23细胞
ME1细胞系相关产品：TE9细胞、Tb 1 Lu (NBL-12)细胞、NCI-H2228细胞
SK-RC 42细胞系相关产品：SW 13细胞、Hs 870.T细胞、USMC细胞
G422细胞系相关产品：SKGT2细胞、B16F1细胞、H-2170细胞
AML-EOL-1细胞系相关产品：HSAS1细胞、FAK+/+细胞、NCI-H2009细胞
RGC-5细胞系相关产品：B16F0细胞、Human Epidermoid carcinoma #2细胞、A 72细胞
MNNG-HOS细胞系相关产品：OCI-LY-3细胞、GB1细胞、TMD-8细胞
OE21细胞系相关产品：NCI-H508细胞、ECV304细胞、H64细胞
Madin Darby Bovine Kidney细胞系相关产品：LU65细胞、JB6 [Mouse]细胞、H1623细胞
A2008细胞系相关产品：OsACL细胞、AU-Mel细胞、H-35 Reuber细胞
NCI-H711细胞系相关产品：P3/X63/Ag8细胞、BEL-7405细胞、EoL-1-cell细胞
Capan 1细胞系相关产品：CAOV3细胞、BHP 10-3细胞、NCI-SNU-5细胞
H1437细胞系相关产品：C918细胞、THP1细胞、HGC27细胞
MHCC 97-L细胞系相关产品：CT-26 WT细胞、U-2OS细胞、Colon38细胞
Duck embryo细胞系相关产品：ECC12细胞、SCLC21H细胞、Sp 2817细胞
HTR8细胞系相关产品：JHH2细胞、Farage OL细胞、HDQP1细胞
IPLB-Sf21AE细胞系相关产品：NCI-H378细胞、NCI-SNU-520细胞、hFOB细胞
BetaTC6细胞系相关产品：NIH-OVCAR-3细胞、Hs895.T细胞、A-172细胞
GM00637F细胞系相关产品：TMD-8细胞、H766T细胞、X63-Ag8细胞
Hs 578.T细胞系相关产品：OUMS-23细胞、CT26WT细胞、UMUC-14细胞
Embryonic Bovine Tracheal cells细胞系相关产品：NCM460细胞、HNE2细胞、DMS 153细胞
HT-1080细胞系相关产品：AMJ2C8细胞、Capan-2细胞、U266细胞
PC-3M-2B4细胞系相关产品：GBC-SD细胞、HUT125细胞、Jurkat77细胞
Anip973细胞系相关产品：WI-38细胞、COLO-320-DM细胞、MDCKII细胞
NCI-H211细胞系相关产品：H22细胞、JG细胞、P3 (Jiyoye)细胞
ECV-304细胞系相关产品：National Medical Center-Glioma 1细胞、F56 [Human neoplasm]细胞、SDBMSC细胞
KYSE140细胞系相关产品：H1573细胞、BJ1细胞、H1299细胞
HLF-a Cell:人肺细胞系
BEL/FU细胞系相关产品：KOSC-2 cl3-43细胞、HBL1细胞、RT-BM细胞
BT325细胞系相关产品：QGY细胞、J82细胞、HuH7细胞
TE14细胞系相关产品：C3H/10T1/2 clone 8细胞、OVCAR10细胞、7404细胞
Colo-678细胞系相关产品：SupB15WT细胞、Hela-mock细胞、Biopsy xenograft of Pancreatic Carcinoma line-3细胞
P3J-HR-1细胞系相关产品：HFF1细胞、HIEC6细胞、MCF7-GFP细胞
T-24细胞系相关产品：SK-ML2细胞、Walker 256细胞、BL-6细胞
Mc Coy细胞系相关产品：FHs74 Int细胞、526细胞、KASUMI1细胞
HNTEC细胞系相关产品：MES-SA细胞、NRK clone 52E细胞、MCM细胞
COLO680N细胞系相关产品：CCC-HSF-1细胞、SNU182细胞、LS411N细胞
Jurkat, Clone E6-1细胞系相关产品：H2452细胞、HEYA8细胞、MC3T3E1细胞
MDA-MB-157细胞系相关产品：A 172细胞、KGN细胞、LOUNH91细胞
COV-434细胞系相关产品：HT-1376细胞、SW 1222细胞、EC-9706细胞
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