"HLE Cell:人肝癌细胞系
细胞形态:上皮细胞样
细胞生长:贴壁
细胞背景资料:详见相关文献介绍
MNNG-HOS (Cl#5)细胞系相关产品:P31-FUJ细胞、HCGC细胞、Hi-5细胞
Michigan Cancer Foundation-10A细胞系相关产品:ST486细胞、VP303细胞、3T3-J2细胞
OV-1063细胞系相关产品:C127细胞、SKMES1细胞、HCT-15细胞
GCT0404细胞系相关产品:HS766T细胞、Roswell Park Memorial Institute 1788细胞、SL1细胞
细胞物种来源:人源或鼠源等其它物种来源
HLE Cell:人肝癌细胞系
如何把细胞养的形态更好更漂亮。1.不同的细胞,喜欢的环境是不一样的。这个不仅仅是说培养基的不同,还有就是细胞生长的空间密度问题。有一些细胞是数量多一点比较好生长,生长状态也比较好。这种一般是属于生长速度慢的细胞。譬如内皮细胞。而有一些是细胞是数量少一点细胞状态会生长的比较好,譬如巨噬细胞和某些肿瘤细胞。尤其是巨噬细胞,生长速度非常得快,贴壁速度很快,所以传代时就应该留很少量的细胞,这样细胞状态会比较好。并且巨噬细胞比较喜欢扎堆生长,而堆与堆之间是有空间的。如果长成相连在一起的一满片的时候,细胞形态基本上就会差了,老化的会比较多,对后期实验结果是不好的。所以在养细胞的时候应该摸索该细胞喜欢的生长空间密度问题。2.对于有些人总是会遇到养的细胞形态怎么都不好的问题。这个其实是有一个方法可以改善的。对于贴壁细胞,如果细胞形态不好,(或者细胞形态不清晰,表面似有异物等)可以在传代的时候进行如下操作:首先,倒掉旧的培养基,加入3ml新的培养基(有无血清的都可)洗涤一次,用滴管吸走,然后再加入3ml的培养基,进行预吹打,控制吹打力度,轻轻地大概沿着瓶底过一遍,然后吸走。这时侯再开始正式的消化、吹打。(巨噬细胞我们只吹打,不消化的);其次,把吹打下来的细胞悬液加入到新的培养瓶内,培养瓶事先加入培养基,放入培养箱内培养,按时间点观察细胞贴壁情况。10分钟观察一次,20分钟,30分钟观察一次。选择一个时间点,已经有部分细胞贴壁的情况下,重新置于洁净台,底面朝上迅速倒出其中的培养基,加入3ml新培养基再轻轻洗一次。然后加入完全培养基培养。后续观察细胞生长情况以及形态。我称之为“二传”。呵呵。如果一次效果还不理想,可重复多次。直到找到细胞完美形态。其中要注意,结合细胞喜欢的生长情况。喜欢多一点数量长得好的细胞你就等贴壁细胞比较多点的时候再传。反之亦然。3.关于培养瓶内加入培养基的量的问题。这个是要靠自己去摸索你所养的细胞的。并不是小的玻璃方瓶12ml,大方瓶14ml的。有些细胞反而是培养基少一点相反细胞形态会长得比较好。(可能也是竞争很大,有优胜劣汰吧。呵呵。)对于生长速度快的细胞,易生长的细胞加少一点培养基细胞形态会更好。但是要注意换液掌握。4.关于选择培养瓶的问题。个人发现生长速度快的细胞在玻璃瓶内生长的状态会比一次性相对好一些。而对于同一种细胞,在其生长旺盛快速的时期在玻璃瓶内的生长状态也比内好。这可能是因为比玻璃瓶更容易贴壁。生长速度快的细胞在这种相对“更安逸”的环境里反而长得状态不如玻璃瓶好。所以对于生长速度慢的细胞如果想要更漂亮的细胞状态,比玻璃瓶会好,对于生长速度慢的细胞,玻璃瓶则会更好。同样,对于同一种细胞,在其生长速度慢的时候,会好一点,比如刚刚复苏的时候,或者原代培养的时候。而在其生长旺盛的时候,玻璃瓶则相对会好一点。
细胞产品包装:复苏形式:T25培养瓶(一瓶)或冻存形式:1ml冻存管(两支)
细胞传代方法:1:2传代
造成实验室细胞污染常见情况总结:细胞培养中最常见污染的是细菌、真菌和支原体污染。细胞一旦污染,大多数较难处理。那么,哪些情况我们不注意的话就会造成细胞污染呢?我们根据常见细胞培养实验分析总结下。【违规操作】1)为节省时间,有人已经用超净台四个多小时,不开紫外灭菌30min,酒精擦拭后直接开始试验;2)器材或者溶液很久没用,未检测是否污染而直接使用;离心管多次使用,枪头为了方便交叉使用;3)超净台不点酒精灯;点了酒精灯放在右上角,而你在左下角做试验;4)不带手套,徒手操作;5)细胞培养间配备枪式移液器、手术器械、离心机、冰箱等专用仪器设备以及专用的实验服和拖鞋,未定期消毒。专用物品被带出传代细胞使用。培养细胞过程中使用的所有实验用具,如移液管、一次性枪头、一次性塑料离心管、冻存管等未按要求灭菌使用(通常需121°C高压灭菌20分钟后37%烤干备用)。超净台和桌面,东西太多太乱:超净台不是储物箱,什么培养皿、各种规格的板子、枪头就不要堆在超净台!这样就会有许多紫外线顾不到的卫生死角。传代细胞其他的桌面,切忌东西堆积如山,不要将酒精棉球、标签纸、牛皮纸买来后全部堆在传代细胞!一不小心“飘”进你的细胞培养板里,细胞就会养的不好,啥时候死了都不知道!【培养箱太久没清洁】细胞污染了,并非直接扔了培养皿就不管了,首先你还得看看这个恒温培养箱里其他培养皿或孔板里的细胞是否污染,如果有而且好几个板子都有类似的污染块,那很可能是培养箱中的水或者空气污染了,得给培养箱做个大扫除,重新酒精消毒,照紫外;孵箱里的水,水没了要记得加,还得记得十天半个月的就用酒精擦擦托盘。【传代细胞人多口杂,难管理】在传代细胞这种卫生要求高,人多了,不确定因素多了,难以保证试验在无菌条件下操作。出入试验室,实验服当风衣穿,不扣纽扣,不戴,就容易造成细胞污染;超净台做实验时,喜欢说话聊着做试验,要是还不带口罩,里面就有很多细菌等着去攻击你的细胞呢!
细胞来源说明:细胞主要来源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少数国外著名大学建系
NRK clone 49F细胞系相关产品:H322T细胞、OVCA-420细胞、OE21细胞
MOLT-16细胞系相关产品:T-cell Acute Lymphoblastic Leukemia-1细胞、HT 144细胞、NCIH1437细胞
HCM细胞系相关产品:HEK-AD293细胞、AG 9细胞、WIL2-S细胞
Pa16C细胞系相关产品:F9细胞、Panc02-H0细胞、HO-8910 PM细胞
CMT-93细胞系相关产品:Bac1 2F5细胞、D341MD细胞、H1105细胞
细胞生长特性:贴壁或悬浮,详见细胞说明书部分
HLE Cell:人肝癌细胞系
贴壁细胞的消化方法介绍:1、胰酶。这是用得最多的。一般浓度在0.25-0.5%。作用时间根据细胞种类、作用温度等因素而变化很大,从几分钟到几十分钟不等。0.25%的胰酶作用于单层贴壁的细胞,在37度条件下,一般消化1-5分钟就足够了。终止是用血清。主要作用于细胞间。配制时不能用含、镁的平衡液,否则影响活性。保存于-20度。2、胶原酶。这种方法比较少,一般是用原代培养时,从组织消化下细胞。这种方法作用温和,对细胞损伤较小,但是,价格也较贵。中止同样是用血清。3、EDTA。用得也是非常多。一般浓度在0.02%左右。作用于细胞与间质,对细胞间也有一定作用。注意,它能显著影响pH值,而且在弱碱性条件下才易溶。因此,配制时应调节好酸碱度。它不能被终和。因此,消化下来的细胞要洗一遍。4、商品化的无酶消化液。个人的使用经常觉得对细胞的损伤比较大,但是分离成单细胞悬液的能力确实比较强。5、物理法。直接吹打或用细胞刮子将细胞刮下来。6、冷冻法。此方法仅能用于细胞传代时。无法使组织上的细胞脱落下来。本方法的原理,我想是因细胞冷冻后收缩,从而从培养瓶上脱落下来。优点是:对细胞损伤小,不需要中止或洗细胞,方便,不需要另外配制消化液。特别适用那些贴壁不是特别紧,又特别娇气的细胞。不足是细胞常成小片脱落。此种方法曾用于因用其它方法传代导致大量细胞死亡操作的间充质干细胞、DC细胞的培养,效果非常满意。具体过程是:1、用较多的4度的PBS 洗涤一遍细胞(以6孔板为例,加1.5ml/孔),2、再加0.5毫升4度的PBS,静置操作台上,很快细胞就小片脱落,3、轻轻吹打,细胞即完全脱落,4、按一定比例传代。
细胞形态特性:详见细胞说明书
U-138MG细胞系相关产品:NS-20Y细胞、PC-9S1细胞、HFTF细胞
NCI-H446细胞系相关产品:WM 451-Lu细胞、TALL1细胞、H-226细胞
C6661细胞系相关产品:MOLP-8细胞、THLE-3细胞、NS1细胞
ST 486细胞系相关产品:HCEC-B4G12细胞、KLN 205细胞、BMF细胞
HCC1937细胞系相关产品:JROECL 21细胞、SHSY-5Y细胞、DMS53细胞
T2 (174 x CEM.T2)细胞系相关产品:Bowes melanoma cells细胞、NCIH2347细胞、GP2d细胞
TFK-1细胞系相关产品:PNT1A细胞、MES-SA-Dx5细胞、MDA PCa 2b细胞
HLE Cell:人肝癌细胞系
OCI/AML5细胞系相关产品:ACC3细胞、Panc 8.13细胞、B16 F10细胞
HEL 92.1.7细胞系相关产品:MA104细胞、MSTO-211 H细胞、T-24细胞
EAHY-926细胞系相关产品:TCCPAN2细胞、RMS13细胞、RKOAS451细胞
Leukemia L1210细胞系相关产品:Normal Rat, August 3, 1983细胞、NCI.H226细胞、HCGC细胞
B4G12细胞系相关产品:MUM2B细胞、PCI:SG231细胞、Hs-578Bst细胞
RCC10RGB细胞系相关产品:PLA801-95C细胞、Michigan Cancer Foundation-10A细胞、MIO-M1细胞
PAEC细胞系相关产品:HCT-8/V细胞、293/EBNA-1细胞、2B4-L细胞
CBRH-7919细胞系相关产品:MH-S细胞、J774A.1细胞、BT20细胞
Leukemic 1210细胞系相关产品:NCI-H2108细胞、H-1693细胞、Co320细胞
Leukemic 1210细胞系相关产品:NCI-H2108细胞、H-1693细胞、Co320细胞
HT-1197细胞系相关产品:766T细胞、GA-10 (Clone 4)细胞、HCT-8/V细胞
HS-729细胞系相关产品:Murine Long bone Osteocyte-Y4细胞、SKNMC细胞、RPMI 6666细胞
OPM2细胞系相关产品:KP-N-YN细胞、SKRC 39细胞、RSC-364细胞
ROS-17/2.8细胞系相关产品:MDA2B细胞、COLO 824细胞、GM03570E细胞
H-676B细胞系相关产品:MHCCLM3细胞、MN-9D细胞、NT2-D1细胞
B-CPAP细胞系相关产品:MuM-2C细胞、SW 527细胞、KYSE 30细胞
KBM-7细胞系相关产品:KY-50细胞、GS-9L细胞、SK-N-MC细胞
Lu-165细胞系相关产品:HEY A8细胞、HuO9细胞、HCC 70细胞
BTT739细胞系相关产品:U-937细胞、H1869细胞、My-La 2059细胞
Hs 832(C).T细胞系相关产品:H-2085细胞、NW38细胞、HCC-202细胞
TOV21G细胞系相关产品:Ontario Cancer Institute-Acute Myeloid Leukemia-4细胞、PANC-1细胞、SNU398细胞
Leukemia 1210细胞系相关产品:293T细胞、CL 1-0细胞、U-2OS细胞
LIPF155C细胞系相关产品:DMS-114细胞、MonoMac6细胞、Mv 1 Lu (NBL-7)细胞
Hs840_T细胞系相关产品:LIXC002细胞、578T细胞、EoL-1 cell细胞
BJ1细胞系相关产品:MD Anderson-Metastatic Breast-330细胞、T241细胞、NCI-H510A细胞
WIL2 S细胞系相关产品:OSKM-1细胞、SW-1222细胞、HCC-2218细胞
SF295细胞系相关产品:H-2081细胞、Lu-165细胞、PK136细胞
Panc10.05细胞系相关产品:MUGCHOR1细胞、MLE-12细胞、Japanese Tissue Culture-28细胞
Molm14细胞系相关产品:CAL78细胞、HCE-2 [50.B1]细胞、HS 445T细胞
OVCAR 420细胞系相关产品:Panc 02.03细胞、GM01232细胞、Hs675T细胞
RC-K8细胞系相关产品:HEK293-FT细胞、Molm 14细胞、KLN205细胞
HCC-1143细胞系相关产品:University of Michigan-Urothelial Carcinoma-3细胞、VMCUB-1细胞、M-07e细胞
RFL6细胞系相关产品:HT-1197细胞、CAKI.1细胞、COLO 738细胞
NCIH740细胞系相关产品:95C细胞、NCI-H3255细胞、CCC-HHM-2细胞
675T细胞系相关产品:L-428细胞、VM-CUB-I细胞、FRTL 5细胞
RMG-1细胞系相关产品:V79-GalK1细胞、LOU-NH-91细胞、OSC-19细胞
HCC95细胞系相关产品:RN-c细胞、Neuro-2a细胞、SV-HUC细胞
DHL10细胞系相关产品:H1793细胞、TB-1 Lu细胞、32D CL3细胞
3LL细胞系相关产品:HT-22细胞、PA-TU S细胞、SH-SY5Y Parental细胞
VMRCRCZ细胞系相关产品:BE(2)-C细胞、SL1细胞、NU-GC-3细胞
H-250细胞系相关产品:H520细胞、Functional Liver Cell-7细胞、OUMS-27细胞
U-87 MG细胞系相关产品:LAC细胞、L-6TG细胞、ST 486细胞
SW 1990细胞系相关产品:MLE12细胞、NB19细胞、R2C细胞
HLE Cell:人肝癌细胞系
IEC18细胞系相关产品:MB231细胞、SU-DHL1细胞、QBC-939细胞
H1385细胞系相关产品:MM.1S细胞、MD Anderson-Metastatic Breast-175-VIII细胞、HeLa229细胞
NCI522细胞系相关产品:MDA-kb2细胞、Epithelioma Papulosum Cyprini细胞、OCI-LY-19细胞
TK-10细胞系相关产品:Panc 03.27细胞、FLC-7细胞、Hep2细胞
L6565细胞系相关产品:GM00637F细胞、MB157细胞、DU145细胞
Tb1Lu细胞系相关产品:J-774细胞、SUM-52细胞、BE(2)C细胞
A375-SM细胞系相关产品:RT4-D6-P2T细胞、HepG2细胞、NCI-H165细胞
SNK-6细胞系相关产品:Turbot Embryonic Cell line细胞、HepaRG细胞、HL1细胞
MES23.5细胞系相关产品:NCI-SNU-1040细胞、L Wnt-3A细胞、SN12CPM6细胞
COLO-320-HSR细胞系相关产品:OVCA 433细胞、TERT-RPE1细胞、RPTEC/TERT1细胞
Stanford University-Diffuse Histiocytic Lymphoma-2细胞系相关产品:Hep-3B细胞、KM12 SM细胞、HEK293E细胞
P388细胞系相关产品:KG1细胞、Biopsy xenograft of Pancreatic Carcinoma line-3细胞、LLC-WRC 256细胞
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