"SK-NEP-1 Cell:人肾母细胞瘤细胞系
细胞形态：上皮细胞样
细胞生长：贴壁
细胞背景资料：超微结构有少许微绒毛，连接复合物，形态完整的高尔基体，内质网多为光滑型，脂滴，没有病毒棵粒。
HEK293FT细胞系相关产品：U-87-MG细胞、251MG细胞、B16F10细胞
Clone Y1细胞系相关产品：COR-L23/P细胞、RPE1-hTERT细胞、H1876细胞
H3255_DA细胞系相关产品：HCS2/8细胞、KPL-4细胞、OCI Ly3细胞
TE-11细胞系相关产品：HuPT4细胞、COV434细胞、RPMI6666细胞
细胞物种来源：人源或鼠源等其它物种来源
SK-NEP-1 Cell:人肾母细胞瘤细胞系
细胞消化过程总结：其实绝大部分细胞消化的时候是只要用胰酶润洗一遍即可，吸去胰酶后，残留的那些无法计算体积的附着在细胞表面的微量胰酶在３７度一般不到２min足够消化细胞（绝大部分１min不到）。对于这些细胞原则上不要用胰酶孵育细胞，连续这样传代，对细胞伤害很大。简单的程序是PBS润洗吸去，胰酶润洗吸去，然后３７度消化。２，什么算是消化好了呢？不是细胞全部成间隔分布很离散的单个圆形才算消化好了，一般你肉眼观察贴壁细胞层，只要能移动了，多半呈沙壮移动，其实已经可以了，很多人喜欢把细胞消化或者吹打成完全分离细胞，这是没有必要的。一般能移动了，说明细胞与培养基质材料的附着已经消失了，细胞之间的附着也已经消失了，细胞已经独立分布了（虽然没有呈现很广的离散分布）。这个时候应该停止消化，不要等到看到镜下所有细胞都分离得非常好，间隙很大，才停止。细胞就是完全成单个细胞悬液，之后在贴壁的过程中仍然会聚集，这个是贴壁培养的细胞，尤其是肿瘤细胞的一个特性，无论死活的细胞都是如此，你可以尝试，准备１００%的单个细胞悬液，贴壁后观察细胞，仍然是几个几个细胞聚集在一起。一些悬浮培养细胞也是如此，容易聚集，不要去尝试过几个小时就拿出来吹打成单细胞悬液（不要笑，这个是初养悬浮细胞的人常犯的错误，以为悬浮培养就是一个一个分开）。细胞只要能从基质上脱离下来，这个时候即使是成片的（比如Calu-３细胞），吹打不超过２０次后（一般１０次即可），成小规模聚集（１０个细胞左右），是正常的，不要试图再去延长消化时间，或者像有的同学那样吹打１h，等待单细胞悬液出现。比较难消化的细胞（润洗方法５min还不能消化），比如HCT１５, LS４１１和KM１２，这样的细胞一般需要用少量胰酶孵育，但也不需要很多，一般１００mm dish，一次最多加入５００ul，就足够了，一般我加３００ul。即使这样难消化的细胞，一般不超过５min，即可见细胞成片移动，就应该停止消化。一些正常细胞也会有难消化的时候，比如tsDC细胞，但也只要用少量胰酶孵育，３min左右即可看到成片沙状移动。
细胞产品包装：复苏形式：T２５培养瓶(一瓶)或冻存形式：１ml冻存管(两支)
细胞传代方法：１：２传代。３天内可长满。
培养细胞真的不难，最关键几点：１)所有的东西使用，如果你用的血清、培养皿、培养基、胰酶什么的都是进口的，真的很难相信你会把细胞养坏；２)动作要快，胰酶消化，换液什么，细胞暴露在空气中的时间越少越好。另外，要掌握好胰酶消化时间，所谓的细胞状态差，很多时候是传代的原因；３)有时间的话，需要细胞计数，传相应数目的细胞到培养皿中，可以大致清楚细胞的生长曲线，不会临时要处理，手足无措；４)要做什么心里要非常清楚，合理安排时间，传代细胞的实验穿插进行，可以节省很多时间，也不会耽误别人的实验；５)个人的实验器具自己收一套，不要和别人混用，最近换了什么新的东西稍微记一下，试剂一旦怀疑污染，马上丢；６)传代细胞不能进去太多人，避免相互干扰。每天对待细胞比孝敬爹妈还用心，那真是捧在手里怕碎了，含在嘴里怕化了，看在眼里怕丢了，培养细胞时有哪些经验教训可以分享呢?１)严格无菌操作，多喷喷酒精，要是对灭菌的东西不放心，自己包自己送自己烘干；２)不要和别人共用试剂耗材，自己准备一套；３)有可能的话在拿到新细胞的时候做好支原体衣原体检测；４)水浴锅很脏，生化培养箱要是得手动加湿的话盘里的水也会很脏，勤换(灭菌水加进去)；５)晚上离开的时候给传代细胞照紫外，超净台是用完就开；６)是同一时间就你一个人在用传代细胞在养细胞。
细胞来源说明：细胞主要来源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少数国外著名大学建系
SMA-560细胞系相关产品：MD Anderson-Metastatic Breast-361细胞、801-D细胞、Tu-686细胞
HOPC细胞系相关产品：UACC-893细胞、Normal Rat Kidney细胞、H209细胞
SKLU1细胞系相关产品：BTI-Tn-5B1-4细胞、H2085细胞、CNE2细胞
OCIAML4细胞系相关产品：NG10815细胞、A2780/Taxol细胞、3T3 clone A31细胞
RIN14B细胞系相关产品：CFSC-8B细胞、SCC-15细胞、LC-1-sq细胞
细胞生长特性：半贴壁生长
SK-NEP-1 Cell:人肾母细胞瘤细胞系
细胞复苏相关注意事项：１.取细胞的过程中注意带好防冻手套，护目镜。此项尤为重要，细胞冻存管可能漏入液氮，解冻时冻存管中的气温急剧上升，可导致爆炸。２.冻存液的问题：冻存液的配置已是常识，在这里不作详述，但二甲基亚砜(DMSO )对细胞不是完全无毒副作用，在常温下，二甲基亚砜对细胞的毒副作较大，因此，必须在１-２min内使冻存液完全融化。如果复苏温度太慢，会造成细胞的损伤，二甲基亚砜(DMSO)选择进口产品。３.离心前须加入少量培养液。细胞解冻后二甲基亚砜浓度较高，注意加入少量培养液可稀释其浓度，以减少对细胞的损伤。４.离心问题：目前主要有两种见解。一种是解冻后的细胞悬液直接吹打均匀后分装到培养瓶中进行培养，第二天换液。因为离心的目的是两个，去除DMSO，去除死细胞，这个是标准流程，但对一般人来说，把握不好离心转速和时间，转的不够活细胞沉底的少，细胞就全被扔掉了，转过了活细胞会受压过大，死亡。此外在操作过程中容易污染，所以不推荐。另一种说法为细胞悬液中含有二甲基亚砜(DMSO)，DMSO对细胞有一定的毒副作用，所以须将离心后的液体前倒净，且一定倒干净。我在试验中按照常规的离心分装的方法进行复苏，结果无异常。５.细胞贴壁少的问题：教科书中说明冻存细胞解冻时１ml细胞液要加１０ml-１５ml培养液，而在我的试验中的经验总结为培养基越少细胞越容易贴附。６.复苏细胞分装的问题：试验中我的经验总结为复苏１管细胞一般可分装到１-２只培养瓶中，分装过多，细胞浓度过低，不利于细胞的贴壁。７.加培养基的量放入问题：这个量的多少的把握主要涉及到的问题DMSO的浓度，从如果你加培养基的太少，那么DMSO的浓度就会比较大，就会影响细胞生长，从以前的资料来看，DMSO的浓度在小于０.５%的时候对一般细胞没有什么影响，还有一个说法是１%。所以如果你的冻存液的浓度是１０%DMSO的话那么加１０ml以上的培养基就恰好稀释到了无害浓度。
细胞形态特性：上皮细胞
MCF-10A细胞系相关产品：NALM6细胞、Human Embryo Kidney-2细胞、MCF7-CTRL细胞
LSECs细胞系相关产品：NCI-H295细胞、QGY7701细胞、DHL10细胞
FHCRC-11细胞系相关产品：Metastatic Variant-522细胞、SupT1细胞、NCI-H2227细胞
BRL3A细胞系相关产品：WEHI-164细胞、NTera-2D1细胞、COLO-205细胞
SK UT 1细胞系相关产品：SNU216细胞、HD11细胞、MN60细胞
University of Michigan-Urothelial Carcinoma-14细胞系相关产品：Fortner's melanotic melanoma #3细胞、3T3-442A细胞、HCCC9810细胞
HSC/mHSC细胞系相关产品：Human Embryonic Kidney 293细胞、Danio rerio Gill细胞、hESC细胞
SK-NEP-1 Cell:人肾母细胞瘤细胞系
CHL-11细胞系相关产品：U373 MG细胞、Chang Cells细胞、HC11 Mammary Epithelium细胞
SW1116细胞系相关产品：KYSE0520细胞、HT-1197细胞、NCI-H719细胞
SUP-M2细胞系相关产品：SW1271细胞、D283MED细胞、Baby Hamster Kidney-21细胞
IHC-ST1细胞系相关产品：Be-Wo细胞、H-3255细胞、HPC-Y5细胞
LS-180细胞系相关产品：COLO678细胞、ABC1细胞、K1735细胞
E.G7-OVA细胞系相关产品：EOC20细胞、CAKI 1细胞、AD-293细胞
ARO 81-1细胞系相关产品：FHCRC-11细胞、MV-3细胞、CNE-2Z细胞
SNU-119细胞系相关产品：HL7702细胞、IBRS2细胞、PaCa2细胞
CMT64细胞系相关产品：LN382细胞、Ramos(RA1)细胞、LMH细胞
CMT64细胞系相关产品：LN382细胞、Ramos(RA1)细胞、LMH细胞
H211细胞系相关产品：UCLA-SO-M21细胞、HCa/16A3-F细胞、HGE细胞
SHEP1细胞系相关产品：SKRC-39细胞、Panc-08.13细胞、Hs940T细胞
NCIH2106细胞系相关产品：GM03190细胞、RCF细胞、MN 60细胞
P3-X63-Ag8-6-5-3细胞系相关产品：JJN-3细胞、CT26细胞、HEK293-EBNA1细胞
Ramos 2G6.4C10细胞系相关产品：NSI/1-Ag4-1细胞、Hx147细胞、no.11细胞
CHO-Lec1细胞系相关产品：H1963细胞、H4-II-EC3细胞、A2780CP细胞
NS1细胞系相关产品：H-889细胞、OVCAR-5细胞、AN3细胞
MCF12A细胞系相关产品：EST50细胞、NCI-SNU-C2B细胞、GC-2细胞
MEG01细胞系相关产品：OVCAR4细胞、Hs706T细胞、Murine Long bone Osteocyte-Y4细胞
CCC-HSF-1细胞系相关产品：McArdle RH-7777细胞、UMNSAH-DF-1细胞、2780细胞
RMG1细胞系相关产品：MFE-280细胞、NCI-H2110细胞、H82sclc细胞
CAKI 2细胞系相关产品：RPMI-6666细胞、BNL 1MEA.7R.1细胞、CHL/IU细胞
NCI-HUT-520细胞系相关产品：P3J HR-1细胞、RS(4;11)细胞、MF2059细胞
NCIH647细胞系相关产品：Kit 225-K6细胞、Tca-83细胞、CX1细胞
NCIH1688细胞系相关产品：NCI-H23细胞、AGS细胞、786-0WT细胞
REC-1细胞系相关产品：NCI-H-82细胞、MDA-MB 361细胞、SY5Y细胞
SNU-5细胞系相关产品：SKLU01细胞、HCT_116细胞、KYSE-50细胞
U138细胞系相关产品：EJ-1细胞、SW-1353细胞、EC-9706细胞
ECV细胞系相关产品：S91细胞、NCIH522细胞、H1954细胞
Mel-624细胞系相关产品：CCK81细胞、OCI-Ly8细胞、KYSE-30细胞
H847细胞系相关产品：FRO细胞、Huh 7.5.1细胞、PE/CA-PJ34 (clone C12)细胞
NCIH508细胞系相关产品：UACC893细胞、SUM-52PE细胞、Evsa T细胞
HS-766T细胞系相关产品：SW-1353细胞、NCI-H2085细胞、C32r细胞
SL-29细胞系相关产品：MB39细胞、LED-WiDr细胞、E0771细胞
OCILY19细胞系相关产品：hFOB 1.19细胞、NCIH2029细胞、Walker-256细胞
LC1sq细胞系相关产品：Fukuoka University-Malignant mixed Mullerian Tumor-1细胞、RPMI-8226S细胞、RenCa细胞
H2030细胞系相关产品：Molm14细胞、CALU1细胞、L 1210细胞
MPP 89细胞系相关产品：KY180细胞、Sp 2/0-Ag 14细胞、INS1细胞
NCIN87细胞系相关产品：H1876细胞、NCIH841细胞、NCI-H2405细胞
MDA468细胞系相关产品：QSG-7701细胞、FHs74Int细胞、HFSF细胞
MDA468细胞系相关产品：QSG-7701细胞、FHs74Int细胞、HFSF细胞
PC-3/M细胞系相关产品：184A1细胞、NCM356细胞、H1155细胞
UMR-106细胞系相关产品：NK 10a细胞、T8细胞、HOS-TE85细胞
SK-NEP-1 Cell:人肾母细胞瘤细胞系
RH-30细胞系相关产品：IAR-20细胞、SK-N-BE2C细胞、CMT 93细胞
COLO 829细胞系相关产品：F81细胞、Swiss3T3细胞、SK-UT-1细胞
NU-GC-3细胞系相关产品：MGC803细胞、ACCM细胞、MC 116细胞
MGH-U1细胞系相关产品：OCI-AML2细胞、IM-9细胞、GM02219C细胞
B16-F1细胞系相关产品：Huh7.5.1细胞、PAN 02细胞、143B TK-细胞
C4I细胞系相关产品：V 79-4细胞、SL-1细胞、MUM2B细胞
VE细胞系相关产品：GC-2spd(ts)细胞、LM3细胞、EA.Hy926细胞
HOPC细胞系相关产品：UACC-893细胞、Normal Rat Kidney细胞、H209细胞
NCIH2126细胞系相关产品：GM05862细胞、H1954细胞、HS-766T细胞
UMC11细胞系相关产品：U-373-MG细胞、KRC/Y细胞、NTERA-2 cl.D1细胞
SW620细胞系相关产品：Granta 519细胞、MD Anderson-Metastatic Breast-436细胞、Vero-76细胞
H-841细胞系相关产品：SUM 102PT细胞、Plaepi 34细胞、HCA-7细胞
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