"Pt K2 Cell:袋鼠肾细胞系
细胞形态:上皮细胞样
细胞生长:贴壁
细胞背景资料:详见相关文献介绍
C4 I细胞系相关产品:Alexander cells细胞、CWR-22rv1细胞、CC-LP-I细胞
M059J细胞系相关产品:Reuber-H-35 hepatoma细胞、RPE D407细胞、CFSC-8B细胞
NCI-H292细胞系相关产品:FC33细胞、GM04671细胞、Eca-109细胞
P3 (Jiyoye)细胞系相关产品:hMSC-BM细胞、CCD-1095Sk细胞、B-95-8细胞
细胞物种来源:人源或鼠源等其它物种来源
Pt K2 Cell:袋鼠肾细胞系
细胞消化过程总结:其实绝大部分细胞消化的时候是只要用胰酶润洗一遍即可,吸去胰酶后,残留的那些无法计算体积的附着在细胞表面的微量胰酶在37度一般不到2min足够消化细胞(绝大部分1min不到)。对于这些细胞原则上不要用胰酶孵育细胞,连续这样传代,对细胞伤害很大。简单的程序是PBS润洗吸去,胰酶润洗吸去,然后37度消化。2,什么算是消化好了呢?不是细胞全部成间隔分布很离散的单个圆形才算消化好了,一般你肉眼观察贴壁细胞层,只要能移动了,多半呈沙壮移动,其实已经可以了,很多人喜欢把细胞消化或者吹打成完全分离细胞,这是没有必要的。一般能移动了,说明细胞与培养基质材料的附着已经消失了,细胞之间的附着也已经消失了,细胞已经独立分布了(虽然没有呈现很广的离散分布)。这个时候应该停止消化,不要等到看到镜下所有细胞都分离得非常好,间隙很大,才停止。细胞就是完全成单个细胞悬液,之后在贴壁的过程中仍然会聚集,这个是贴壁培养的细胞,尤其是肿瘤细胞的一个特性,无论死活的细胞都是如此,你可以尝试,准备100%的单个细胞悬液,贴壁后观察细胞,仍然是几个几个细胞聚集在一起。一些悬浮培养细胞也是如此,容易聚集,不要去尝试过几个小时就拿出来吹打成单细胞悬液(不要笑,这个是初养悬浮细胞的人常犯的错误,以为悬浮培养就是一个一个分开)。细胞只要能从基质上脱离下来,这个时候即使是成片的(比如Calu-3细胞),吹打不超过20次后(一般10次即可),成小规模聚集(10个细胞左右),是正常的,不要试图再去延长消化时间,或者像有的同学那样吹打1h,等待单细胞悬液出现。比较难消化的细胞(润洗方法5min还不能消化),比如HCT15, LS411和KM12,这样的细胞一般需要用少量胰酶孵育,但也不需要很多,一般100mm dish,一次最多加入500ul,就足够了,一般我加300ul。即使这样难消化的细胞,一般不超过5min,即可见细胞成片移动,就应该停止消化。一些正常细胞也会有难消化的时候,比如tsDC细胞,但也只要用少量胰酶孵育,3min左右即可看到成片沙状移动。
细胞产品包装:复苏形式:T25培养瓶(一瓶)或冻存形式:1ml冻存管(两支)
细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。
常见细胞培养中一些问题总结:1)培养基中血清的比例多少合适?血清是细胞培养上一个极为重要的营养来源,所以血清的含量多少会对细胞的生长会产生极大的影响。血清的含量一般为5%-15%,不要低于5%或高过20%,因为含量过低会导致细胞营养不足,过高则会破坏渗透压平衡。一般建议血清含量为10%,可以适量加减;2)何时须更换培养基?视细胞生长密度而定,或遵照细胞株基本数据上的更换时间,按时更换培养基即可。还可以参照指示剂的颜色变化进行更换;3)购买的复苏细胞,为何会有脱落?因为运输的过程中不可避免的会有震荡,收到后可以离心收集;4)购买的细胞冷冻管经解冻后,为何会发生细胞数目太少之情形?研究人员在冷冻细胞之培养时出现细胞数目太少,大都是因为离心过程操作上的失误,造成细胞的物理性损伤,以及细胞流失。建议细胞解冻后不要立刻离心,应待细胞生长隔夜后再更换培养基即可;5)购买的细胞死亡或细胞存活率不佳可能原因?研究人员在细胞培养时出现存活率不佳,常见原因可归纳为:培养基使用错误或培养基品质不佳。血清使用错误或血清的品质不佳。解冻过程错误。冷冻细胞解冻后,加以洗涤细胞和离心。悬浮细胞误认为死细胞。培养温度使用错误。细胞置于–80°C太久;6)收到的冷冻管瓶身破裂,瓶盖有裂纹,或瓶盖脱落之原因?冷冻管瓶盖裂纹,或瓶身破裂,可能是因为操作者夹取冷冻管时用力不当,造成冷冻管裂损,建议使用止血钳小心夹取。另冷冻管瓶盖松动或松脱,乃因热胀冷缩之物理现象,冷冻管有可能因此而造成细胞污染,故冷冻管于放入和取出液氮桶时,均应立刻将冷冻管再一次扭紧。
细胞来源说明:细胞主要来源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少数国外著名大学建系
MAntle cell VERona-1细胞系相关产品:CORL88细胞、PASMCS细胞、Tu686细胞
SCL-II细胞系相关产品:C41细胞、LL/2(LLc1)细胞、CCFSTTG1细胞
H-1838细胞系相关产品:SVG p12细胞、H1734细胞、WM-239A细胞
CCC-HPF-1细胞系相关产品:rHSC-99细胞、COLO-205细胞、U138-MG细胞
MESSA-DX5细胞系相关产品:GLC-15细胞、PLA801D细胞、OCI-AML2细胞
细胞生长特性:贴壁或悬浮,详见细胞说明书部分
Pt K2 Cell:袋鼠肾细胞系
正确的细胞复苏需知事项:细胞冻存好了,接下来要注意什么问题呢?没错,就是记得到时间了,拿出来复苏。那么,细胞复苏的过程中又有哪些该注意的事项呢?细胞活力和形态检查的作用何在?活力检查——千万不要使用不健康的细胞,可能有污染(真菌、支原体等),如果发现有污染毫不犹豫的丢弃!形态检查——检查细胞的固有形态和生长行为。冻存细胞:补充新的培养液——在您开始冻存细胞的前一天补充新的培养液。在细胞长至70%单层时收获细胞,计数活细胞数,用冻存液调整细胞密度~5 x106 Cell s/ml (根据不同的细胞类型调整);冻存液——用冻存液洗细胞并用冻存液重悬细胞,有不同类型的冻存液,根据细胞类型选择最合适的冻存液(常用的冻存液成分有):5-10% DMSO——注意确保DMSO不含有其他的毒性物质;5-15%甘油;如果细胞在无血清培养基内生长,应在50%条件培养基内(细胞在无血清培养基内生长24小时)内冻存和复苏。在冻存管上标记好细胞类型,日期,冻存人等信息,并保证每冻存管不超过1.5ml。放入液氮罐之前记录冻存管的数量和位置。以最快的速度转移冻存管知液氮罐内,因此,此步骤使用干冰,或者把冻存管浸入装有液氮的小盒内。此外还要注意,在冻存管上没有足够的空间记录细胞的详细信息,做好记录是非常非常重要的!还有一个最重要的,一定要在异地的液氮罐内保存同样的一份细胞,以免其中的一个液氮罐出现问题!细胞正确的复苏方式和正确的冻存方式同样重要,熟记以下要点:当从液氮罐内取出细胞时,有可能会出现冻存管破裂的情况,使用保护面罩和防护服十分必要;其实,细胞复苏只是一个简单的实验,不过这其中却不可避免有一些需要注意的细节,不然,也不一定会尽如人意。例如说,人身健康方面:一定要记得做好防冻工作,戴上护目镜;尽量降低DMSO对细胞的损伤等等。
细胞形态特性:详见细胞说明书
P3X63-Ag8.653细胞系相关产品:8226/S细胞、PC14细胞、OV3121细胞
HEK293-FT细胞系相关产品:SVEC 4-10细胞、LM2-4175细胞、PL12细胞
EVSAT细胞系相关产品:MB49细胞、HCC0044细胞、PVEC细胞
QG56细胞系相关产品:EVSA/T细胞、U-343MG细胞、Neuro2a细胞
NCI-H292细胞系相关产品:FC33细胞、GM04671细胞、Eca-109细胞
HPAC细胞系相关产品:JVM-3细胞、H2198细胞、YES2细胞
AR4-IP细胞系相关产品:S3 HeLa细胞、Scott and White No. 13细胞、Rat Fetal Lung-6细胞
Pt K2 Cell:袋鼠肾细胞系
H-510A细胞系相关产品:HUT28细胞、Line 207细胞、McCoy细胞
MDA361细胞系相关产品:HCC0038细胞、RCC 786-O细胞、QG56细胞
GM01232E细胞系相关产品:P3.times.63 Ag8.653细胞、CATH.a细胞、RS 4;11细胞
Lewis Lung细胞系相关产品:WEHI231细胞、UMNSAH/DF#1细胞、LIXC-002细胞
SK-ML2细胞系相关产品:COR L279细胞、Sp2/0-Ag14细胞、J 111细胞
HLEpiC细胞系相关产品:Tca8113细胞、AAV293细胞、DHL5细胞
Virginia Mason Research Center-Lung Cancer D细胞系相关产品:H211细胞、CLL-CII细胞、bEnd.3[BEND3]细胞
KE 37细胞系相关产品:SU-DHL-4细胞、NCI-H747细胞、KP-N-RT细胞
DHL-16细胞系相关产品:MyLa2059细胞、NS1-Ag4细胞、ARO81-1细胞
HG2855细胞系相关产品:P116细胞、H-735细胞、MLE-12细胞
Hs840T细胞系相关产品:BTI-Tn5B14细胞、NCI H548细胞、HT-55细胞
OVCAR-432细胞系相关产品:SK-N-BE细胞、SKMEL24细胞、Human Embryonic Kidney 293细胞
NCIH740细胞系相关产品:95C细胞、NCI-H3255细胞、CCC-HHM-2细胞
LNT-229细胞系相关产品:H1435细胞、MAVER-1细胞、C-33A细胞
OVCAR10细胞系相关产品:U 937细胞、LS-180细胞、SAOS 2细胞
RS4:11细胞系相关产品:PC-3/M细胞、Ramos (RA 1)细胞、COLO-394细胞
Human Intestinal Epithelial Cell-6细胞系相关产品:QGY7701细胞、CNE-2细胞、PK (15)细胞
GM03573细胞系相关产品:L5178Y TK+/-3.7.2c细胞、GM03320细胞、H-2141细胞
OCI-Ly 7细胞系相关产品:H220细胞、253J-BV细胞、Tsup-1细胞
HT 144细胞系相关产品:CNE1-LUC细胞、UMC-11细胞、PC-9细胞
P3-x63-Ag8 653细胞系相关产品:H23细胞、NCIH2126细胞、MV3细胞
BE(2)-C细胞系相关产品:NCI-H209细胞、MESSA/Dx5细胞、COLO679细胞
MAVER细胞系相关产品:HuH 6细胞、FL-83B细胞、P3.NS-1/1.Ag4.1细胞
HCA7细胞系相关产品:CAKI1细胞、H128细胞、Hs-606-T细胞
HSC-1细胞系相关产品:293 H细胞、HOP 62细胞、WI-38细胞
MGH-U1细胞系相关产品:OCI-AML2细胞、IM-9细胞、GM02219C细胞
NW38细胞系相关产品:H1648细胞、MDA MB 361细胞、NTERA2-D1细胞
CAMA细胞系相关产品:CAL 51细胞、TSU-Pr1细胞、H929细胞
P19细胞系相关产品:KYSE140细胞、LN-18细胞、L 363细胞
SU86-86细胞系相关产品:H-4细胞、S3 HeLa细胞、UPCI:SCC090细胞
MD Anderson-Metastatic Breast-468细胞系相关产品:YH-13细胞、SLK细胞、NCIH1869细胞
PFSK-1细胞系相关产品:GT38细胞、Tu-212细胞、Roswell Park Memorial Institute 8402细胞
HCO细胞系相关产品:SNU368细胞、Wien 133细胞、SJSA-1细胞
P3 NS1 Ag4/1细胞系相关产品:OLN93细胞、Panc 2.03细胞、H-740细胞
NUGC-4细胞系相关产品:WSU-DLCL-2细胞、CF-1 MEF细胞、Be-Wo细胞
NCI-SNU-16细胞系相关产品:IHH细胞、NTERA-2细胞、T98细胞
H1105细胞系相关产品:CHP 126细胞、SW579细胞、D-324MED细胞
EFM192A细胞系相关产品:X63-Ag8-653细胞、HSC(Human Schwann)细胞、SU-DHL-8细胞
NCI H716细胞系相关产品:OCI-Ly10细胞、NW-38细胞、SW 1990细胞
RMS 1598细胞系相关产品:PC 61.5.3细胞、JJN-3细胞、NCIH1693细胞
Z138细胞系相关产品:NCI-H520细胞、HeLa 229细胞、KATOIII细胞
H-2452细胞系相关产品:S-16细胞、hOMF细胞、BCaP 37细胞
Pan02细胞系相关产品:OVCAR.5细胞、JTC-28细胞、EHEB细胞
Pt K2 Cell:袋鼠肾细胞系
SW-780细胞系相关产品:U-251 MG细胞、Kasumi 1细胞、ID8细胞
HT-144细胞系相关产品:RMC-1细胞、SU-DH-L5细胞、Line 522细胞
ADR-RES细胞系相关产品:SG231细胞、B-16细胞、Hs600T细胞
Melan-a细胞系相关产品:HCC15细胞、HNE1细胞、HPAF-2细胞
CAL78细胞系相关产品:MFE-296细胞、Hs 737.T细胞、OEC19细胞
mIMCD-3细胞系相关产品:NIH:OVCAR4细胞、BJA-B细胞、H1882细胞
MDA MB 175 VII细胞系相关产品:Ontario Cancer Institute-Acute Myeloid Leukemia-5细胞、H-1623细胞、TO 175.T细胞
GA-10 (Clone 4)细胞系相关产品:JM细胞、CEM细胞、KMY1022细胞
HuH6细胞系相关产品:Mel526细胞、LC1细胞、Wistar Institute, Susan Hayflick细胞
MNNG细胞系相关产品:I90细胞、Clone 929细胞、SW 839细胞
Lilly Laboratories Cell-Porcine Kidney 1细胞系相关产品:LIM 1215细胞、HMC-1细胞、HuH28细胞
LM8细胞系相关产品:ECV 304细胞、Hs888T细胞、NR8383.1细胞
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