"Lu-165 Cell:人肺腺癌细胞系
细胞形态：上皮细胞样
细胞生长：贴壁
细胞背景资料：详见相关文献介绍
TK 10细胞系相关产品：MC-116细胞、AG06814-N细胞、CAL851细胞
NCI/ADR-RES细胞系相关产品：FM-88细胞、DC 2.4细胞、L-cell细胞
SCC-9细胞系相关产品：Ls-174-T细胞、TU 686细胞、A2780/CP70细胞
CHL细胞系相关产品：Panc-03.27细胞、MALME.3M细胞、SUDHL-8细胞
细胞物种来源：人源或鼠源等其它物种来源
Lu-165 Cell:人肺腺癌细胞系
细胞培养过程中相关问题总结：悬浮性细胞应如何继代处理？一般仅需持续加入新鲜培养基于原培养角瓶中，稀释细胞浓度即可，若培养液太多时，可将培养角瓶口端稍微抬高，直到无法容纳为止。分瓶时取出一部份含细胞之培养液至另一新的培养角瓶，加入新鲜培养基稀释至适当浓度，重复前述步骤即可。欲将一般动物细胞离心下来，其离心速率应为多少转速？欲回收动物细胞，其离心速率一般为３００xg(约１,０００rpm)，５-１０分钟，过高之转速，将造成细胞死亡；细胞之接种密度为何？依照细胞株基本数据上之接种密度或稀释分盘之比例接种即可。细胞数太少或稀释的太多亦是造成细胞无法生长之一重要原因；细胞冷冻培养基之成份为何？动物细胞冷冻保存时最常使用的冷冻培养基是含５-１０%DMSO(dimethyl sulfoxide)和９０-９５%原来细胞生长用之新鲜培养基均匀混合之。注意：由于DMSO稀释时会放出大量热能，故不可将DMSO直接加入细胞液中，必须使用前先行配制完成；DMSO之等级和无菌过滤之方式为何？冷冻保存使用之DMSO等级，必须为Tissue culture grade之DMSO，其本身即为无菌状况，次开瓶后应立即少量分装于无菌试管中，保存于４°C，避免反复冷冻解冻造成DMSO之裂解而释出有害物质，并可减少污染之机会。若要过滤DMSO，则须使用耐DMSO之Nylon材质滤膜；冷冻保存细胞之方法？冷冻保存方法一：冷冻管置于４°C ３０~６０分钟→ (-２０°C ３０分钟)→-８０°C １６~１８小时(或隔夜)→液氮槽vaporphase长期储存。冷冻保存方法二：冷冻管置于已设定程序之可程序降温机中每分钟降１-３°C至–８０°C以下，再放入液氮槽vapor phase长期储存。-２０°C不可超过１小时，以防止冰晶过大，造成细胞大量死亡，亦可跳过此步骤直接放入-８０°C冰箱中，惟存活率稍微降低一些；细胞欲冷冻保存时，细胞冷冻管内应有多少细胞浓度？冷冻管内细胞数目一般为１x１０(６)cells/ml vial，融合瘤细胞则以５x１０(６)cells/ml vial为宜；应如何避免细胞污染？细胞污染的种类可分成细菌、酵母菌、霉菌、病毒和霉浆菌。主要的污染原因为无菌操作技术不当、操作室环境不佳、污染之血清和污染之细胞等。严格之无菌操作技术、清洁的环境、与品质良好之细胞来源和培养基配制是减低污染之方法；如果细胞发生微生物污染时，应如何处理？直接灭菌后丢弃之。
细胞产品包装：复苏形式：T２５培养瓶(一瓶)或冻存形式：１ml冻存管(两支)
细胞传代方法：１：２-１：３传代；每周换液２-３次。
细胞常规培养传代流程(请严格遵照无菌操作)：１)吸出原培养瓶中的培养基，PBS缓冲液润洗细胞两次，加２-３ml ０.２５%胰酶进行消化细胞(注意把握消化时间，通常控制在１-２min)；２)镜下观察消化情况，在细胞边缘缩小，贴壁松动时(不建议消化到细胞漂浮)去掉胰酶，加６-８ml完全培养基，轻轻吹打细胞层，尽量把细胞层吹落，吹散；３)取部分细胞悬液转移到新的培养皿/瓶中，添加适当的完全培养基，把细胞悬液打匀，于培养箱中培养；４)注意培养基PH值变化情况，定期换液(每周２-３次)，待细胞密度达到８０%以后重复１项操作或者冻存；特别注意：(如使用公共实验室或者初次接触细胞培养，建议添加双抗培养)１)收到细胞后请尽快更换为含１５%血清的新鲜培养基，如因特殊情况需要继续使用原瓶，请在原瓶培养基中额外添加１０%的血清，(原瓶培养基的继续使用时间最长不宜超过７２小时)；２)贴壁细胞收到当天切忌立刻消化，请将细胞换液后放置培养箱孵育到第二天再做消化传代，请优先选择直径６cm的培养皿进行传代培养；３)如签收时出现培养瓶壁破裂，漏液等情况请及时做好照片记录并联系实验室。
细胞来源说明：细胞主要来源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少数国外著名大学建系
K-1735细胞系相关产品：786.O细胞、Calu 6细胞、HSAS3细胞
WB-F344细胞系相关产品：NCI-H211细胞、Kit225/K6细胞、WM239A细胞
HEL-299细胞系相关产品：EoL-1细胞、TE3A细胞、NCIH810细胞
HCC-2218细胞系相关产品：WRL 68细胞、SCC4细胞、RT-BM 1细胞
RPMI 7666细胞系相关产品：DMS 53细胞、SR-786细胞、SN12C-PM6细胞
细胞生长特性：贴壁或悬浮，详见细胞说明书部分
Lu-165 Cell:人肺腺癌细胞系
贴壁细胞消化传代时通常采用两种方法：一、加入胰酶等细胞脱落后，再加培养基中止胰酶作用，离心传代；二、加入胰酶后，镜下观察待细胞始脱落时，弃胰酶，加培养液分瓶。但前者太麻烦，而后者有可能对细胞施加胰酶选择，因为总是贴壁不牢的细胞先脱落，对肿瘤细胞来说，这部分细胞有可能是恶性程度较高的细胞亚群。一种简单的消化传代方法。加入PBS洗去血清或加入胰酶先中和血清的作用(３０s)，弃之，再加入适量胰酶作用１０s-４０s(根据细胞消化的难易程度)，弃之，这样依赖残余的胰酶就可将细胞消化单细胞。对于较难消化的细胞，可以用２%利多卡因消化５-８分钟，然后再弃去，加培养基吹打也可以，对细胞的影响不大。不用PBS也不用Hanks洗，只要把旧培养液吸的干净一点，直接加酶消化应该不会有什么问题。弃培养液后，用０.０４%的EDTA冲洗一次，再用１/４v的０.０４%的EDTA室温孵育５min，弃取大部分EDTA，加入与剩余EDTA等量的胰酶(预热)总体积１/１０v。消化到有细胞脱落。不过有人说EDTA对细胞不好，有证据吗？培养的BASMC：倒掉旧培养液加入少量胰酶冲一下，倒掉再加入０.１２５-０.２５%胰酶约６-１０滴或１ml(２５ml bottle)消化再加入适量新培养基中和，并分瓶这种方法简单、省事；效果很好并且不损失细胞！
细胞形态特性：详见细胞说明书
P3X63Ag8-6-5-3细胞系相关产品：SUM102PT细胞、RINm5F细胞、RT112细胞
HCC1937细胞系相关产品：JROECL 21细胞、SHSY-5Y细胞、DMS53细胞
Leukemia 1210细胞系相关产品：293T细胞、CL 1-0细胞、U-2OS细胞
McG-1细胞系相关产品：Y3.AG.1.2.3细胞、HPDEC细胞、ECV-304细胞
67NR细胞系相关产品：Hs839T细胞、H2195细胞、LLCMK2细胞
BC-009细胞系相关产品：MCF-7细胞、L-540细胞、Pt-K1细胞
SN12PM6细胞系相关产品：COLO679细胞、HeLa细胞、KYSE180细胞
Lu-165 Cell:人肺腺癌细胞系
MD Anderson-Metastatic Breast-134-VI细胞系相关产品：HIBEpiC细胞、HRA19细胞、P3 NS1 Ag4/1细胞
HT-3细胞系相关产品：TE353.SK细胞、SK-N-BE2细胞、WM-239细胞
8305C细胞系相关产品：MKN28细胞、NCI-H719细胞、SK-MEL2细胞
H-1651细胞系相关产品：A431/P细胞、SC1细胞、LTEP-sm细胞
OVCAR433细胞系相关产品：BEL/FU细胞、HBZY-1细胞、Lilly Laboratories Cell-Monkey Kidney 2细胞
HMC细胞系相关产品：CEM-CCRF (CAMR)细胞、624 MEL细胞、GM2132细胞
Buffalo Rat Liver-3A细胞系相关产品：VMRCLCD细胞、Hs940.T细胞、Verda reno细胞
HMEC1细胞系相关产品：LTEP-sm 1细胞、PCI-4B细胞、MDA-MB-134 VI细胞
CCRF CEM细胞系相关产品：ARO81-1细胞、MKN 7细胞、2PK-3细胞
CCRF CEM细胞系相关产品：ARO81-1细胞、MKN 7细胞、2PK-3细胞
SupB15W细胞系相关产品：SNU387细胞、EOMA细胞、COLO-16细胞
MonoMac6细胞系相关产品：DMS53细胞、SUM190细胞、NCI-H810细胞
AR4-IP细胞系相关产品：S3 HeLa细胞、Scott and White No. 13细胞、Rat Fetal Lung-6细胞
LS-174T细胞系相关产品：H4-II-EC3细胞、NCIH1869细胞、SKCol1细胞
HEK293E细胞系相关产品：RPMI-7951细胞、H920细胞、Tn-5B1-4细胞
RPTEC/TERT1细胞系相关产品：PTK-2细胞、H1819细胞、NT2细胞
COLO 320HSR细胞系相关产品：A 72细胞、OV90细胞、HHL-5细胞
NCI-H295细胞系相关产品：NCIH2141细胞、HUC-1细胞、Keio University-19-19细胞
SW 1463细胞系相关产品：HCC202细胞、H-345细胞、GT38细胞
HGBEC细胞系相关产品：BEAS-2B细胞、MGH-U1 (EJ)细胞、LNCaP C4-2B细胞
Roswell Park Memorial Institute 2650细胞系相关产品：LPC-H12细胞、NCI-H1417细胞、Duke University 145细胞
GM03573A细胞系相关产品：Panc 5.04细胞、NOMO1细胞、LLC-PK1细胞
Ramos(RA1)细胞系相关产品：IPEC-J2细胞、SK-Mel 2细胞、COLO320/DM细胞
HO1-N1细胞系相关产品：SU-DHL-8细胞、Dakiki细胞、YH-13细胞
Pan02细胞系相关产品：OVCAR.5细胞、JTC-28细胞、EHEB细胞
Hep 2细胞系相关产品：RA细胞、HEK 293FT细胞、HOSEpiC细胞
MDA-MB-157细胞系相关产品：A 172细胞、KGN细胞、LOUNH91细胞
HEK 293-H细胞系相关产品：Hs870T细胞、KYSE510细胞、PLA801-95C细胞
HT clone H9细胞系相关产品：AsPC-1细胞、KU-19-19细胞、NCI-H2081细胞
SKES-1细胞系相关产品：EFM-192B细胞、WRL 68细胞、KMB-17细胞
AX-Mel细胞系相关产品：TCMK-1细胞、OCUM-1细胞、AE 1201细胞
Human Hepatocyte Line 5细胞系相关产品：COLO206F细胞、NB.4细胞、Huh7.5细胞
NPC-TW039细胞系相关产品：Madison lung细胞、HCC-1954细胞、Ramos (RA)细胞
NP-69细胞系相关产品：H-4-II-E细胞、Huh7.5细胞、NCIH1105细胞
U118MG细胞系相关产品：NCI-H2141细胞、TCCSUP细胞、SNU-878细胞
HUT125细胞系相关产品：MLE 12细胞、P3X63Ag8653细胞、32D clone3细胞
GM00346B细胞系相关产品：ReNcell CX细胞、RCC10 RGB细胞、TR-146细胞
HCC-202细胞系相关产品：RT4细胞、NB1-RGB细胞、ND7/23细胞
LAPC4细胞系相关产品：EVSAT细胞、SNU886细胞、Bovine ENDometrial cells细胞
Hs729细胞系相关产品：Panc 08.13细胞、HONE1细胞、MC3T3-E细胞
Hep G2-Luc细胞系相关产品：SUDHL-5细胞、A673细胞、Ls-174-T细胞
DLD-1细胞系相关产品：HCC1419细胞、BGC-823细胞、LS1034细胞
LNCaP C4-2细胞系相关产品：SW480E细胞、DI TNC-1细胞、NK92细胞
Lu-165 Cell:人肺腺癌细胞系
MD Anderson-Metastatic Breast-435细胞系相关产品：LNCaP-FGC细胞、HOC-1细胞、CMT-64细胞
USMC细胞系相关产品：UT7细胞、Hs 840.T细胞、HEK-293-F细胞
293-F细胞系相关产品：PC3M-IE8细胞、JIII细胞、C8161细胞
RK-13细胞系相关产品：CALU 1细胞、Hep II细胞、MES-23.5细胞
SUM-102PT细胞系相关产品：MZCRC1细胞、UWB1289细胞、D283细胞
KLN 205细胞系相关产品：MDA-MB-175细胞、COLO357细胞、Hep3B细胞
MHCC 97-L细胞系相关产品：CT-26 WT细胞、U-2OS细胞、Colon38细胞
MSF细胞系相关产品：H2227细胞、U87-MG细胞、Panc 10.05细胞
LS-123细胞系相关产品：Hs 739.T细胞、HEK293-F细胞、H2330细胞
GM346细胞系相关产品：LN 229细胞、HS-766-T细胞、NCI-H2286细胞
NCI-H676B细胞系相关产品：J82细胞、CPAE细胞、A-427细胞
HeLa.S3细胞系相关产品：ND7/23细胞、MM1细胞、HeLa-229细胞
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