"A-253 Cell:人唾液腺肿瘤细胞系
细胞形态：上皮细胞样
细胞生长：贴壁
细胞背景资料：详见相关文献介绍
MDCK.2细胞系相关产品：Michigan Cancer Foundation-10A细胞、Shadyside Hospital Pittsburgh-77细胞、Hep G2-Luc细胞
B-95-8细胞系相关产品：L-cell细胞、CAMA细胞、KTC-1细胞
KP-4细胞系相关产品：ES-2细胞、IR983F细胞、P-19细胞
CAKI 1细胞系相关产品：OCI Ly10细胞、MILE SVEN1细胞、RC-4B/C细胞
细胞物种来源：人源或鼠源等其它物种来源
A-253 Cell:人唾液腺肿瘤细胞系
细胞消化过程总结：其实绝大部分细胞消化的时候是只要用胰酶润洗一遍即可，吸去胰酶后，残留的那些无法计算体积的附着在细胞表面的微量胰酶在３７度一般不到２min足够消化细胞（绝大部分１min不到）。对于这些细胞原则上不要用胰酶孵育细胞，连续这样传代，对细胞伤害很大。简单的程序是PBS润洗吸去，胰酶润洗吸去，然后３７度消化。２，什么算是消化好了呢？不是细胞全部成间隔分布很离散的单个圆形才算消化好了，一般你肉眼观察贴壁细胞层，只要能移动了，多半呈沙壮移动，其实已经可以了，很多人喜欢把细胞消化或者吹打成完全分离细胞，这是没有必要的。一般能移动了，说明细胞与培养基质材料的附着已经消失了，细胞之间的附着也已经消失了，细胞已经独立分布了（虽然没有呈现很广的离散分布）。这个时候应该停止消化，不要等到看到镜下所有细胞都分离得非常好，间隙很大，才停止。细胞就是完全成单个细胞悬液，之后在贴壁的过程中仍然会聚集，这个是贴壁培养的细胞，尤其是肿瘤细胞的一个特性，无论死活的细胞都是如此，你可以尝试，准备１００%的单个细胞悬液，贴壁后观察细胞，仍然是几个几个细胞聚集在一起。一些悬浮培养细胞也是如此，容易聚集，不要去尝试过几个小时就拿出来吹打成单细胞悬液（不要笑，这个是初养悬浮细胞的人常犯的错误，以为悬浮培养就是一个一个分开）。细胞只要能从基质上脱离下来，这个时候即使是成片的（比如Calu-３细胞），吹打不超过２０次后（一般１０次即可），成小规模聚集（１０个细胞左右），是正常的，不要试图再去延长消化时间，或者像有的同学那样吹打１h，等待单细胞悬液出现。比较难消化的细胞（润洗方法５min还不能消化），比如HCT１５, LS４１１和KM１２，这样的细胞一般需要用少量胰酶孵育，但也不需要很多，一般１００mm dish，一次最多加入５００ul，就足够了，一般我加３００ul。即使这样难消化的细胞，一般不超过５min，即可见细胞成片移动，就应该停止消化。一些正常细胞也会有难消化的时候，比如tsDC细胞，但也只要用少量胰酶孵育，３min左右即可看到成片沙状移动。
细胞产品包装：复苏形式：T２５培养瓶(一瓶)或冻存形式：１ml冻存管(两支)
细胞传代方法：１：２-１：３传代；每周换液２-３次。
培养细胞真的不难，最关键几点：１)所有的东西使用，如果你用的血清、培养皿、培养基、胰酶什么的都是进口的，真的很难相信你会把细胞养坏；２)动作要快，胰酶消化，换液什么，细胞暴露在空气中的时间越少越好。另外，要掌握好胰酶消化时间，所谓的细胞状态差，很多时候是传代的原因；３)有时间的话，需要细胞计数，传相应数目的细胞到培养皿中，可以大致清楚细胞的生长曲线，不会临时要处理，手足无措；４)要做什么心里要非常清楚，合理安排时间，传代细胞的实验穿插进行，可以节省很多时间，也不会耽误别人的实验；５)个人的实验器具自己收一套，不要和别人混用，最近换了什么新的东西稍微记一下，试剂一旦怀疑污染，马上丢；６)传代细胞不能进去太多人，避免相互干扰。每天对待细胞比孝敬爹妈还用心，那真是捧在手里怕碎了，含在嘴里怕化了，看在眼里怕丢了，培养细胞时有哪些经验教训可以分享呢?１)严格无菌操作，多喷喷酒精，要是对灭菌的东西不放心，自己包自己送自己烘干；２)不要和别人共用试剂耗材，自己准备一套；３)有可能的话在拿到新细胞的时候做好支原体衣原体检测；４)水浴锅很脏，生化培养箱要是得手动加湿的话盘里的水也会很脏，勤换(灭菌水加进去)；５)晚上离开的时候给传代细胞照紫外，超净台是用完就开；６)是同一时间就你一个人在用传代细胞在养细胞。
细胞来源说明：细胞主要来源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少数国外著名大学建系
Kupffer细胞系相关产品：Hs-729-T细胞、HN 4细胞、SUM 190PT细胞
H-740细胞系相关产品：UACC 812细胞、H-1436细胞、HNE-2细胞
A549/ATCC细胞系相关产品：DU-4475细胞、ReNcell CX细胞、CCD-841CoTr细胞
COLO 357细胞系相关产品：MB-49细胞、PC 61-5-3细胞、AR42J细胞
Caov-4细胞系相关产品：IR983F细胞、Cor L51细胞、SW13细胞
细胞生长特性：贴壁或悬浮，详见细胞说明书部分
A-253 Cell:人唾液腺肿瘤细胞系
细胞复苏相关注意事项：１.取细胞的过程中注意带好防冻手套，护目镜。此项尤为重要，细胞冻存管可能漏入液氮，解冻时冻存管中的气温急剧上升，可导致爆炸。２.冻存液的问题：冻存液的配置已是常识，在这里不作详述，但二甲基亚砜(DMSO )对细胞不是完全无毒副作用，在常温下，二甲基亚砜对细胞的毒副作较大，因此，必须在１-２min内使冻存液完全融化。如果复苏温度太慢，会造成细胞的损伤，二甲基亚砜(DMSO)选择进口产品。３.离心前须加入少量培养液。细胞解冻后二甲基亚砜浓度较高，注意加入少量培养液可稀释其浓度，以减少对细胞的损伤。４.离心问题：目前主要有两种见解。一种是解冻后的细胞悬液直接吹打均匀后分装到培养瓶中进行培养，第二天换液。因为离心的目的是两个，去除DMSO，去除死细胞，这个是标准流程，但对一般人来说，把握不好离心转速和时间，转的不够活细胞沉底的少，细胞就全被扔掉了，转过了活细胞会受压过大，死亡。此外在操作过程中容易污染，所以不推荐。另一种说法为细胞悬液中含有二甲基亚砜(DMSO)，DMSO对细胞有一定的毒副作用，所以须将离心后的液体前倒净，且一定倒干净。我在试验中按照常规的离心分装的方法进行复苏，结果无异常。５.细胞贴壁少的问题：教科书中说明冻存细胞解冻时１ml细胞液要加１０ml-１５ml培养液，而在我的试验中的经验总结为培养基越少细胞越容易贴附。６.复苏细胞分装的问题：试验中我的经验总结为复苏１管细胞一般可分装到１-２只培养瓶中，分装过多，细胞浓度过低，不利于细胞的贴壁。７.加培养基的量放入问题：这个量的多少的把握主要涉及到的问题DMSO的浓度，从如果你加培养基的太少，那么DMSO的浓度就会比较大，就会影响细胞生长，从以前的资料来看，DMSO的浓度在小于０.５%的时候对一般细胞没有什么影响，还有一个说法是１%。所以如果你的冻存液的浓度是１０%DMSO的话那么加１０ml以上的培养基就恰好稀释到了无害浓度。
细胞形态特性：详见细胞说明书
RPTC细胞系相关产品：MES13细胞、293A细胞、M.D. Anderson-Prostate Cancer-2b细胞
MAVER1细胞系相关产品：SNU-761细胞、HuNS1细胞、FF-WT-BJ细胞
C643细胞系相关产品：VCaP细胞、CL1细胞、Hepa1-6细胞
HuH7细胞系相关产品：CAL-120细胞、MeT 5A细胞、M 1细胞
OC 316细胞系相关产品：SF-539 BT细胞、Nittby-Salford 1细胞、MNNG-HOS (Cl#5)细胞
SW 948细胞系相关产品：MGc80-3细胞、U-87-MG细胞、Murine Thymic Epithelial Cell line 1细胞
RC13细胞系相关产品：JF305细胞、BE2-C细胞、HSC5细胞
A-253 Cell:人唾液腺肿瘤细胞系
KG1A细胞系相关产品：Colon-26细胞、UWB1.289+BRCA1细胞、Anip973细胞
IPLB-SF-21细胞系相关产品：Z-138细胞、COLO320 DM细胞、786O细胞
JEG3细胞系相关产品：L428细胞、CCRF-CEM C1细胞、HuO9细胞
MONO-MAC 6细胞系相关产品：H-2135细胞、P30/OHK细胞、EOC 20细胞
H-69细胞系相关产品：VK2 (E6/E7)细胞、E304细胞、NCI-H1048细胞
AtT 20细胞系相关产品：HN13细胞、A549/ATCC细胞、MCF7/WT细胞
Panc-813细胞系相关产品：IA-LM细胞、PCI:SG-231细胞、OE-19细胞
Human Corneal Epithelial cells-Transformed细胞系相关产品：NCIH1755细胞、NCI H69细胞、WEHI-3B细胞
Hs 832(C).T细胞系相关产品：H-2085细胞、NW38细胞、HCC-202细胞
Hs 832(C).T细胞系相关产品：H-2085细胞、NW38细胞、HCC-202细胞
NKT细胞系相关产品：MASMC细胞、Tca8113细胞、SKMEL5细胞
MEF (CF-1)细胞系相关产品：HPDE6c7细胞、RMG-I细胞、1301细胞
SK-N-BE(2)-M17细胞系相关产品：MAntle cell VERona-1细胞、Mono-Mac-1细胞、J111细胞
P3HRI细胞系相关产品：SCL I细胞、CCF-STTG1细胞、MDST8细胞
Colo-201细胞系相关产品：NK-92 MI细胞、BEL 7404细胞、Ha Fe细胞
UCLA-RO 81细胞系相关产品：M-14细胞、HTori:3细胞、MDA.MB.231细胞
Pt K1 (NBL-3)细胞系相关产品：Jurkat 77细胞、Hs-281-T细胞、Huh-7.5.1细胞
AMC-HN-8细胞系相关产品：BEL7405细胞、HMSC细胞、SKMES-1细胞
SF 295细胞系相关产品：MDA-MB 453细胞、SW-1116细胞、HuP-T3细胞
NKM-1细胞系相关产品：ZYM-SVEC01细胞、SCL-1细胞、Roswell Park Memorial Institute 1788细胞
COLO 699细胞系相关产品：TE671/RD细胞、UCD-MLA-144细胞、ZR-75-30细胞
C33-A细胞系相关产品：OCI-Ly03细胞、A-498细胞、NGP细胞
Ishikawa细胞系相关产品：C166细胞、CCD19Lu细胞、SUM-102PT细胞
NCI-H1693细胞系相关产品：MARC 145细胞、RCK8细胞、Hs888Lu细胞
LS180细胞系相关产品：SW982细胞、MDA-MB453细胞、Hs 294T细胞
TYK-nu细胞系相关产品：SEG-1细胞、Mv 1 Lu (NBL-7)细胞、HTSMC细胞
SKMEL-24细胞系相关产品：MDA-134细胞、AE 1201细胞、MV4II细胞
Hep 3B细胞系相关产品：Factor Dependent Continuous-Paterson 1细胞、SNGM细胞、HEK 293 c18细胞
HEK293-EBNA1细胞系相关产品：16HBE细胞、M21细胞、IPECJ2细胞
10RGB细胞系相关产品：OCM1A细胞、TKB-1细胞、CEM-T4细胞
3AO细胞系相关产品：TH1细胞、H711细胞、RN细胞
HO1-N-1细胞系相关产品：143TK-细胞、NCIH847细胞、YD15细胞
hRMECs细胞系相关产品：HSAS4细胞、LSECs细胞、NCI-H1672细胞
WRL68细胞系相关产品：D-283细胞、H-2107细胞、LC-2/ad细胞
87 MG细胞系相关产品：Hs888 Lu细胞、KU.812细胞、HSC-T6细胞
RD-ES细胞系相关产品：BSC1细胞、H-810细胞、OCI-AML-4细胞
MC 3T3-E1细胞系相关产品：SUNE1细胞、WBF344细胞、OE19细胞
B16F0细胞系相关产品：HEK-293-FT细胞、NCI H2106细胞、MLA144细胞
NCI-H2228细胞系相关产品：HEM细胞、CaES-17细胞、Jiyoye(P-2003)细胞
F98细胞系相关产品：MC-CAR细胞、YES 2细胞、YAC-1细胞
CWR22R细胞系相关产品：EAhy926细胞、A72细胞、SK_N_BE2C细胞
OVCAR-8/ADR细胞系相关产品：Psi2 DAP细胞、MDAMB134VI细胞、X63-Ag8-653细胞
SAS细胞系相关产品：GA-10-Clone-4细胞、NPA细胞、H-650细胞
A-253 Cell:人唾液腺肿瘤细胞系
UM-UC14细胞系相关产品：NCIH510细胞、OVCAR 8细胞、Psi2-DAP细胞
Hs706T细胞系相关产品：SR786细胞、JC细胞、Panc02细胞
Fetal Human Lens-124细胞系相关产品：bEnd.3[BEND3]细胞、A375-S2细胞、A-431细胞
SK HEP 01细胞系相关产品：HcaF细胞、Wien-133细胞、CAMA-1细胞
DHBE细胞系相关产品：SW900细胞、Suzhou Human Glioma-44细胞、Hep 3B2_1-7细胞
HuTu-80细胞系相关产品：Alpha Mouse Liver 12细胞、3T3-L1 ad细胞、Vero from pool #76细胞
GM07404D细胞系相关产品：H1838细胞、NS20Y细胞、KP2细胞
A72细胞系相关产品：JROECL19细胞、P3/NS1/1-Ag4.1细胞、PF382细胞
ND7/23细胞系相关产品：BA/F3细胞、LN229细胞、P3X63 Ag8细胞
Hs-852-T细胞系相关产品：U-343MG细胞、H-295R细胞、ACC2细胞
Mono-Mac-1细胞系相关产品：ssMCF7细胞、ATC241细胞、Normal Rat Kidney细胞
MPC 11细胞系相关产品：KLE细胞、McA-RH7777细胞、L cells (TK-)细胞
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