"BT-474 Cell:人乳腺导管瘤细胞系
细胞形态：上皮细胞样
细胞生长：贴壁
细胞背景资料：详见相关文献介绍
HOSEpiC细胞系相关产品：Toledo细胞、Hs-27细胞、P-36细胞
SNU620细胞系相关产品：NCI-H196细胞、NCI-H1838细胞、DU-145细胞
LY-R细胞系相关产品：EJ1细胞、A498细胞、Colon-26细胞
Central Adrenergic TH-expressing a细胞系相关产品：MPC-11细胞、H-128细胞、LAPC4细胞
细胞物种来源：人源或鼠源等其它物种来源
BT-474 Cell:人乳腺导管瘤细胞系
细胞消化过程总结：其实绝大部分细胞消化的时候是只要用胰酶润洗一遍即可，吸去胰酶后，残留的那些无法计算体积的附着在细胞表面的微量胰酶在３７度一般不到２min足够消化细胞（绝大部分１min不到）。对于这些细胞原则上不要用胰酶孵育细胞，连续这样传代，对细胞伤害很大。简单的程序是PBS润洗吸去，胰酶润洗吸去，然后３７度消化。２，什么算是消化好了呢？不是细胞全部成间隔分布很离散的单个圆形才算消化好了，一般你肉眼观察贴壁细胞层，只要能移动了，多半呈沙壮移动，其实已经可以了，很多人喜欢把细胞消化或者吹打成完全分离细胞，这是没有必要的。一般能移动了，说明细胞与培养基质材料的附着已经消失了，细胞之间的附着也已经消失了，细胞已经独立分布了（虽然没有呈现很广的离散分布）。这个时候应该停止消化，不要等到看到镜下所有细胞都分离得非常好，间隙很大，才停止。细胞就是完全成单个细胞悬液，之后在贴壁的过程中仍然会聚集，这个是贴壁培养的细胞，尤其是肿瘤细胞的一个特性，无论死活的细胞都是如此，你可以尝试，准备１００%的单个细胞悬液，贴壁后观察细胞，仍然是几个几个细胞聚集在一起。一些悬浮培养细胞也是如此，容易聚集，不要去尝试过几个小时就拿出来吹打成单细胞悬液（不要笑，这个是初养悬浮细胞的人常犯的错误，以为悬浮培养就是一个一个分开）。细胞只要能从基质上脱离下来，这个时候即使是成片的（比如Calu-３细胞），吹打不超过２０次后（一般１０次即可），成小规模聚集（１０个细胞左右），是正常的，不要试图再去延长消化时间，或者像有的同学那样吹打１h，等待单细胞悬液出现。比较难消化的细胞（润洗方法５min还不能消化），比如HCT１５, LS４１１和KM１２，这样的细胞一般需要用少量胰酶孵育，但也不需要很多，一般１００mm dish，一次最多加入５００ul，就足够了，一般我加３００ul。即使这样难消化的细胞，一般不超过５min，即可见细胞成片移动，就应该停止消化。一些正常细胞也会有难消化的时候，比如tsDC细胞，但也只要用少量胰酶孵育，３min左右即可看到成片沙状移动。
细胞产品包装：复苏形式：T２５培养瓶(一瓶)或冻存形式：１ml冻存管(两支)
细胞传代方法：１：２-１：３传代；每周换液２-３次。
细胞冻存的步骤：１)选择处于对数生长期的细胞，在冻存前一天换液。将多个培养瓶中的细胞培养液去掉，用０.２５% 胰蛋白酶消化。适时去掉胰蛋白酶，加入少量新培养液。用吸管吸取培养液反复吹打瓶壁上的细胞，使其成为均匀分散的细胞悬液。悬浮生产细胞则不要消化处理。然后将细胞收集于离心管中离心(１０００r/min，１０分钟)；２)去上清液，加入含２０%小牛血清的完全培养基，于４℃预冷１５分钟后，逐滴加入已无菌的DMSO或甘油，用吸管轻轻吹打使细胞均匀，细胞浓度为５×１０６～１×１０７/mL之间。(冻存培养液的配置是不是一定要用小牛血清呢？答案是不一定的，具体要看培养的细胞类型来选择；３)将分装上述细胞悬液于２ml冻存管中，每管０.２５ml。冻存管要将盖子盖紧，并标记好细胞名称和冻存日期，同时作好登记(日期、细胞种类及代次、冻存支数)；４)将装好细胞的冻存管放到冻存盒中，-８０℃冰箱过夜。；如果有程序降温器(放在-８０℃冰箱过夜，放入液氮罐);或者可以在４℃，２h;然后转到-２０℃，２h;-８０℃，２h;放入液氮罐；５)细胞冻存在液氮中可以长期保存，但为妥善起见，冻存半年后，取出一只冻存管细胞复苏培养，观察生长情况，然后再继续冻存。
细胞来源说明：细胞主要来源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少数国外著名大学建系
SNU869细胞系相关产品：Human Corneal Endothelial Cells-12细胞、MNNG/HOS细胞、A2780CP70细胞
Kit-225-K6细胞系相关产品：OVCA-420细胞、H4IIEC3细胞、ABE8.1/2细胞
Tsup-1细胞系相关产品：CCFSTTG1细胞、58F细胞、HCC-1954BL细胞
DR2R1610细胞系相关产品：253J细胞、50.B1细胞、Tregs细胞
L-6TG细胞系相关产品：P-2003细胞、A875细胞、GS-9L细胞
细胞生长特性：贴壁或悬浮，详见细胞说明书部分
BT-474 Cell:人乳腺导管瘤细胞系
细胞传代培养实验：体外培养的原代细胞或细胞株要在体外持续地培养就必须传代，以便获得稳定的细胞株或得到大量的同种细胞，并维持细胞种的延续。培养的细胞形成单层汇合以后，由于密度过大生存空间不足而引起营养枯竭，将培养的细胞分散，从容器中取出，以１:２或１:３以上的比率转移到另外的容器中进行培养，即为传代培养；细胞“一代”指从细胞接种到分离再培养的一段期间，与细胞世代或倍增不同。在一代中，细胞培增３～６次。细胞传代后，一般经过三个阶段：游离期、指数增生期和停止期。常用细胞分裂指数表示细胞增殖的旺盛程度，即细胞群的分裂相数/１００个细胞。一般细胞分裂指数介于０.２％～０.５％，肿瘤细胞可达３～５％；细胞接种２～３天分裂增殖旺盛，是活力时期，称指数增生期(对数生长期)，适宜进行各种试验。实验步骤：１.将长成的培养细胞从二氧化碳培养箱中取出，在超净工作台中倒掉瓶内的培养液，加入少许消化液。(以液面盖住细胞为宜)，静置５～１０分钟。２.在倒置镜下观察被消化的细胞，如果细胞变圆，相互之间不再连接成片，这时应立即在超净台中将消化液倒掉，加入３～５ml新鲜培养液，吹打，制成细胞悬液。３.将细胞悬液吸出２ml左右，加到另一个培养瓶中并向每个瓶中分别加３ml左右培养液，盖好瓶塞，送回二氧化碳培养箱中，继续进行培养。一般情况，传代后的细胞在２小时左右就能附着在培养瓶壁上，２～４天就可在瓶内形成单层，需要再次进行传代。
细胞形态特性：详见细胞说明书
Kit225 K6细胞系相关产品：2780细胞、PA12细胞、NCI-H508细胞
NCIH1385细胞系相关产品：P 815细胞、NCI H345细胞、Kobe university Oral Squamous Cell culture-2细胞
COV434细胞系相关产品：SRS-82细胞、NWA细胞、FL83B细胞
Human Corneal Endothelial Cells-12细胞系相关产品：SGC-7901/DDP细胞、BAEC细胞、UPCI-SCC-154细胞
SKG-IIIa细胞系相关产品：IOSE80细胞、BC-019细胞、H-2196细胞
C-4 I细胞系相关产品：Wills Eye Research Institute-Retinoblastoma-1细胞、THP-1(ATCC)细胞、CCRF/CEM细胞
DMS-53细胞系相关产品：HPDEC细胞、Hs 695.T细胞、HL-7702细胞
BT-474 Cell:人乳腺导管瘤细胞系
MC57G细胞系相关产品：HTR8svn细胞、MIA Paca2细胞、HT144细胞
GT38细胞系相关产品：TOG细胞、CoCL3细胞、Mv 1 Lu细胞
OVCA433_Bast细胞系相关产品：AE 1201细胞、Bat lung细胞、T1-73细胞
BALB/3T3 clone A31细胞系相关产品：CHO-ori细胞、RC-2细胞、LS-174细胞
190PT细胞系相关产品：Hs 888.T细胞、OCM1A细胞、Calu 3细胞
C4-I细胞系相关产品：BpRc1细胞、D-341 Med细胞、Hs 888.Lu细胞
BRL-3A细胞系相关产品：Calu-6细胞、Hi5细胞、KM.12细胞
SCC90细胞系相关产品：COLO.205细胞、U-373MG ATCC细胞、W256细胞
HPAEC细胞系相关产品：Vero细胞、FBHE细胞、SK-SH-SY5Y细胞
HPAEC细胞系相关产品：Vero细胞、FBHE细胞、SK-SH-SY5Y细胞
Panc5.04细胞系相关产品：Hs281T细胞、H2342细胞、TOV21细胞
PK (15)细胞系相关产品：GM07404D细胞、Hs-578T细胞、NCIH2286细胞
SK-NEP-1细胞系相关产品：SCL II细胞、Dunn LM8细胞、COLO-829细胞
MCA38细胞系相关产品：U-hth74细胞、DMS 273细胞、P3/NSI/1-AG4-1细胞
HLE-SRA-01/04细胞系相关产品：Panc2.03细胞、CEMC7细胞、NTera 2细胞
L- cell细胞系相关产品：UMR 106细胞、32D CL3细胞、SK MEL-28细胞
HEK293EBNA细胞系相关产品：OACP4 C细胞、NCIH2110细胞、3AA细胞
NCIH647细胞系相关产品：Kit 225-K6细胞、Tca-83细胞、CX1细胞
RBSMC细胞系相关产品：LNCaP-C4-2细胞、MDA MB231细胞、HFT 8810细胞
MD Anderson-Metastatic Breast-453细胞系相关产品：Gingival carcinoma Neck Metastasis细胞、Okayama University Medical School-23细胞、FHL124细胞
NT2/D1细胞系相关产品：H-2170细胞、KYSE0410细胞、Y79细胞
T47-D细胞系相关产品：L 1210细胞、EFM-19细胞、CAL 33细胞
HCT15细胞系相关产品：P-3J细胞、HuT 102细胞、OVCAR 8细胞
IB-RS2细胞系相关产品：SW-1417细胞、MKN-45细胞、OUMS-23细胞
KLN-205细胞系相关产品：RCS细胞、H1437细胞、Centre Antoine Lacassagne-51细胞
MDA231-LM2-4175细胞系相关产品：CSQT-2细胞、Leukemia L1210细胞、HCT-FET细胞
Lewis Lung Cancer细胞系相关产品：Embryonic Bovine Tracheal cells细胞、HEL-1细胞、Caki-1细胞
IM9细胞系相关产品：Chang Cells细胞、W256细胞、FTC133细胞
Mevo细胞系相关产品：Sci-1细胞、BxPC-3细胞、MDA2B细胞
SUM 149PT细胞系相关产品：3-LL细胞、SHEE细胞、PE CA PJ34细胞
FC33细胞系相关产品：MonoMac1细胞、HEK-A细胞、AM38细胞
SVHUC细胞系相关产品：H-2052细胞、Factor Dependent Cell-Paterson 1细胞、NCI-H716细胞
ZR751细胞系相关产品：PK (15)细胞、DI TNC1细胞、CHP-212细胞
PT-67细胞系相关产品：Sp 2/0-Ag 14细胞、C666-1细胞、NCI-SNU-620细胞
SW-900细胞系相关产品：HD11细胞、Hs68细胞、AMO1细胞
ChaGo-K1细胞系相关产品：U-118 MG细胞、MDA-330细胞、alpha TC1.6细胞
CL-11细胞系相关产品：University of Michigan-Urothelial Carcinoma-1细胞、MGH-U3 (RN)细胞、RC13细胞
H-1793细胞系相关产品：ECC-10细胞、Swiss 3T6细胞、SCC-25细胞
SKNO1细胞系相关产品：MDA-MB-175VII细胞、HCC-1937细胞、CT26细胞
McARH7777细胞系相关产品：NCIADR.RES细胞、MRCV细胞、MASMC细胞
HMCB细胞系相关产品：Madin-Darby Bovine Kidney细胞、MDCKII-WT细胞、NPC-TW 01细胞
ECC 12细胞系相关产品：GC-2细胞、J774细胞、3T3 J2细胞
MLE 12细胞系相关产品：MLA144细胞、MDA MB 453细胞、GM03569细胞
BT-474 Cell:人乳腺导管瘤细胞系
HuTu-80细胞系相关产品：Alpha Mouse Liver 12细胞、3T3-L1 ad细胞、Vero from pool #76细胞
SJ-Rh 30细胞系相关产品：LLC PK1细胞、H716细胞、RKN细胞
NS1-Ag4/1细胞系相关产品：MHH-CALL2细胞、MDA-MB-175细胞、BHK细胞
HCEC细胞系相关产品：HARAB细胞、VSC4.1细胞、B104 [Rat neuroblastoma]细胞
B958细胞系相关产品：J774A.1细胞、C4-2 Bone metastatic细胞、NCI-H2195细胞
HEK/EBNA细胞系相关产品：K 562细胞、HT3细胞、NCI-H1693细胞
NCIH1581细胞系相关产品：H-125细胞、EB-2细胞、Soleus clone 8细胞
3T3-Swiss细胞系相关产品：SK Mel 24细胞、LIPF155C细胞、DMS-79细胞
MD Anderson-Metastatic Breast-468细胞系相关产品：YH-13细胞、SLK细胞、NCIH1869细胞
Hs940T细胞系相关产品：A549/ATCC细胞、OCI AML5细胞、SGC-996细胞
SW-954细胞系相关产品：HB 611细胞、KG1细胞、PC 12细胞
3AA细胞系相关产品：Centre Antoine Lacassagne-12T细胞、NHDF细胞、NCI-H345细胞
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