"Sf21 Cell:昆虫卵巢细胞系
细胞形态:上皮细胞样
细胞生长:贴壁
细胞背景资料:详见相关文献介绍
S180细胞系相关产品:SK-N-BE(2)细胞、HT clone H9细胞、NCI-H1975细胞
Uhth-74细胞系相关产品:HOS (TE85, Clone F5)细胞、P30-OHK细胞、OSKM-1细胞
JIII细胞系相关产品:MDA-MB-468细胞、LS1034细胞、3D4/21细胞
MBT-2细胞系相关产品:HEY-A8细胞、HT-1376细胞、EC109细胞
细胞物种来源:人源或鼠源等其它物种来源
Sf21 Cell:昆虫卵巢细胞系
细胞传代时消化的问题:可以这样说,对于需要消化传代的细胞,每一次的消化都是对这个细胞存活与否,状态好与不好最至关重要的考验。很多同学都遇到过这个问题,自己养的细胞开始的几代长的还挺好的,可是穿过几代之后就发现自己的细胞,状态越来越差劲了。对于这个问题,可以非常肯定地说,你的消化环节出问题了。你每一次的消化都让细胞受到较大损伤了。所以,越长越差。在消化的过程中,你加入胰酶后,所有细胞都在被胰酶消化着,但是我们忽视了一个问题就是,细胞的生长状态是不一样的,每一个细胞的贴壁情况也是不一样的,有的贴壁牢固,有的贴壁没有那么牢固的,所以,让所有的细胞消化同样的时间对细胞是不公平的,他们受到了差别待遇当然会有脾气啊。我后来对消化的方法进行了改良。争取做到因材施教呵呵。我称之为“四步消化法”。(以难消化细胞为例);具体操作:1)首先不加胰酶,倒掉旧培养基加入少量新培养基洗1-2遍,(这是前奏,即为步,目的是将漂浮着的死细胞之类尽量洗掉。2)然后再加入少量新培养基直接吹打一遍,这一遍是把贴壁不牢固的细胞吹打下来。再用培养基洗一遍,两次所得悬液混合传入新瓶。即为第二步(你可以将这些传入新瓶培养,以与后面胰酶消化过的细胞对比观察看谁长的更好一点就知道该细胞对胰酶的敏感度了。)3)吸干净瓶内剩余液体,加入0.3ml左右的胰酶润洗一遍,吸掉弃之,再加入1ml左右的胰酶消化。消化的同时置于显微镜下观察,待细胞与细胞之间间隙明显的时候立即吸掉胰酶与干净子弹头里备用,加入新培养基开始吹打,吹打2-3遍后吸取悬液于试管或新瓶暂存。用2ml左右新培养基洗一遍与前面的混合。(你也可以传入新瓶培养,以与后面及前面的做对比。)这是第三步。4)然后把前面刚吸出来的胰酶重新加进去瓶里继续消化剩余的贴壁牢固的细胞。当然你也可以用新的胰酶,如果你们那比较富裕的话,呵呵。继续镜下观察,待剩余细胞间隙明显,细胞独立开来的时候,吸掉胰酶,加入新培养基吹打。悬液传入新瓶培养(根据实际情况你自己把握)。这是第四步。其实还可以有第五步,对于特别难消化的细胞和对胰酶特别敏感的细胞的话,你可以继续加第五步甚至第六步。为了细胞更好的状态,更漂亮的样子,没办法,你必须分多批多次消化,这样才能限度地将胰酶对细胞的损伤降到最低,保证细胞的状态能够。当然了,如果细胞是属于那种很容易消化的细胞,像RAW264.7,仅仅第二步就搞定了。就没必要第三步第四步了。这个是需要你在实验中能够自己用心去体会的。建议你接受一个新细胞时把各步消化的细胞分别培养起来做比较,去摸索好细胞对胰酶的要求。便于你后续实验的开展。将细胞消化分成这几步,除了是为了避免胰酶对细胞的损伤之外,还有一个更重要的作用就是,可以程度地把细胞吹打成单个单个的状态,不成片不连体。
细胞产品包装:复苏形式:T25培养瓶(一瓶)或冻存形式:1ml冻存管(两支)
细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。
造成实验室细胞污染常见情况总结:细胞培养中最常见污染的是细菌、真菌和支原体污染。细胞一旦污染,大多数较难处理。那么,哪些情况我们不注意的话就会造成细胞污染呢?我们根据常见细胞培养实验分析总结下。【违规操作】1)为节省时间,有人已经用超净台四个多小时,不开紫外灭菌30min,酒精擦拭后直接开始试验;2)器材或者溶液很久没用,未检测是否污染而直接使用;离心管多次使用,枪头为了方便交叉使用;3)超净台不点酒精灯;点了酒精灯放在右上角,而你在左下角做试验;4)不带手套,徒手操作;5)细胞培养间配备枪式移液器、手术器械、离心机、冰箱等专用仪器设备以及专用的实验服和拖鞋,未定期消毒。专用物品被带出传代细胞使用。培养细胞过程中使用的所有实验用具,如移液管、一次性枪头、一次性塑料离心管、冻存管等未按要求灭菌使用(通常需121°C高压灭菌20分钟后37%烤干备用)。超净台和桌面,东西太多太乱:超净台不是储物箱,什么培养皿、各种规格的板子、枪头就不要堆在超净台!这样就会有许多紫外线顾不到的卫生死角。传代细胞其他的桌面,切忌东西堆积如山,不要将酒精棉球、标签纸、牛皮纸买来后全部堆在传代细胞!一不小心“飘”进你的细胞培养板里,细胞就会养的不好,啥时候死了都不知道!【培养箱太久没清洁】细胞污染了,并非直接扔了培养皿就不管了,首先你还得看看这个恒温培养箱里其他培养皿或孔板里的细胞是否污染,如果有而且好几个板子都有类似的污染块,那很可能是培养箱中的水或者空气污染了,得给培养箱做个大扫除,重新酒精消毒,照紫外;孵箱里的水,水没了要记得加,还得记得十天半个月的就用酒精擦擦托盘。【传代细胞人多口杂,难管理】在传代细胞这种卫生要求高,人多了,不确定因素多了,难以保证试验在无菌条件下操作。出入试验室,实验服当风衣穿,不扣纽扣,不戴,就容易造成细胞污染;超净台做实验时,喜欢说话聊着做试验,要是还不带口罩,里面就有很多细菌等着去攻击你的细胞呢!
细胞来源说明:细胞主要来源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少数国外著名大学建系
M-14细胞系相关产品:SW626细胞、NIH 3T6细胞、BNL-CL.2细胞
KS-1 [Human glioblastoma]细胞系相关产品:BEL 7405细胞、BC-021细胞、TE-7细胞
NTERA2-cloneD1细胞系相关产品:GL-261细胞、MB49细胞、SUNE 1细胞
Y3.AG.1.2.3细胞系相关产品:Rat Fetal Lung-6细胞、MES-SA/Dx5细胞、TALL 1细胞
HCC2279细胞系相关产品:HuCC-T1细胞、NCIH446细胞、LIM-1215细胞
细胞生长特性:贴壁或悬浮,详见细胞说明书部分
Sf21 Cell:昆虫卵巢细胞系
贴壁细胞的消化方法介绍:1、胰酶。这是用得最多的。一般浓度在0.25-0.5%。作用时间根据细胞种类、作用温度等因素而变化很大,从几分钟到几十分钟不等。0.25%的胰酶作用于单层贴壁的细胞,在37度条件下,一般消化1-5分钟就足够了。终止是用血清。主要作用于细胞间。配制时不能用含、镁的平衡液,否则影响活性。保存于-20度。2、胶原酶。这种方法比较少,一般是用原代培养时,从组织消化下细胞。这种方法作用温和,对细胞损伤较小,但是,价格也较贵。中止同样是用血清。3、EDTA。用得也是非常多。一般浓度在0.02%左右。作用于细胞与间质,对细胞间也有一定作用。注意,它能显著影响pH值,而且在弱碱性条件下才易溶。因此,配制时应调节好酸碱度。它不能被终和。因此,消化下来的细胞要洗一遍。4、商品化的无酶消化液。个人的使用经常觉得对细胞的损伤比较大,但是分离成单细胞悬液的能力确实比较强。5、物理法。直接吹打或用细胞刮子将细胞刮下来。6、冷冻法。此方法仅能用于细胞传代时。无法使组织上的细胞脱落下来。本方法的原理,我想是因细胞冷冻后收缩,从而从培养瓶上脱落下来。优点是:对细胞损伤小,不需要中止或洗细胞,方便,不需要另外配制消化液。特别适用那些贴壁不是特别紧,又特别娇气的细胞。不足是细胞常成小片脱落。此种方法曾用于因用其它方法传代导致大量细胞死亡操作的间充质干细胞、DC细胞的培养,效果非常满意。具体过程是:1、用较多的4度的PBS 洗涤一遍细胞(以6孔板为例,加1.5ml/孔),2、再加0.5毫升4度的PBS,静置操作台上,很快细胞就小片脱落,3、轻轻吹打,细胞即完全脱落,4、按一定比例传代。
细胞形态特性:详见细胞说明书
SN12CPM6细胞系相关产品:SV40-HCEC细胞、COLO 320HSR细胞、Hs-274-T细胞
H-510A细胞系相关产品:HUT28细胞、Line 207细胞、McCoy细胞
BEL7404细胞系相关产品:Detroit562细胞、LNCaP FGC细胞、SACC83细胞
TH1细胞系相关产品:A9(Hamprecht)细胞、Large Cell Lung Cancer-103H细胞、SC1细胞
Hs 737.T细胞系相关产品:293 F细胞、BT细胞、Merwin Plasma Cell tumor-11细胞
ABC-1细胞系相关产品:NCIH1869细胞、L 363细胞、NCIH1930细胞
EFM192A细胞系相关产品:X63-Ag8-653细胞、HSC(Human Schwann)细胞、SU-DHL-8细胞
Sf21 Cell:昆虫卵巢细胞系
TE12细胞系相关产品:UMNSAH/DF#1细胞、Rat podocyte细胞、OCI-Ly 1细胞
NPC-TW 01细胞系相关产品:SK-OV-3细胞、V79-4细胞、BLO11细胞
FK81细胞系相关产品:TK-10细胞、DMS53细胞、A375SM细胞
NCIH1688细胞系相关产品:NCI-H23细胞、AGS细胞、786-0WT细胞
PA317细胞系相关产品:R 2 C细胞、Panc04.03细胞、H3396细胞
SNK6细胞系相关产品:BJA-B1细胞、H69C细胞、CCC-HPF-1细胞
Centre Antoine Lacassagne-39细胞系相关产品:Mv 1 Lu (NBL-7)细胞、High 5细胞、CD 18细胞
SK-HEP-1细胞系相关产品:SKM-1细胞、MC3T3-E1细胞、rRMECs细胞
Z310细胞系相关产品:NCI660细胞、NCI-H2122细胞、TE354.T细胞
Z310细胞系相关产品:NCI660细胞、NCI-H2122细胞、TE354.T细胞
SK-MEL-5细胞系相关产品:H28细胞、Mel624细胞、NCI-SNU-C1细胞
COLO 829细胞系相关产品:F81细胞、Swiss3T3细胞、SK-UT-1细胞
H2347细胞系相关产品:ChaGo-K1细胞、P388细胞、Centre Antoine Lacassagne-148细胞
Murine Thymic Epithelial Cell line 1细胞系相关产品:T-84细胞、Lilly Laboratories Cell-Porcine Kidney 1细胞、PA I细胞
A375SM细胞系相关产品:PBMC细胞、MKN-7细胞、SLMT1细胞
Rabbit Kidney 13细胞系相关产品:NCIH1650细胞、A2780CP70细胞、SK-N-BE2C细胞
H-661细胞系相关产品:PCI-4M细胞、MKN7细胞、HCC1359细胞
OCI-Ly7细胞系相关产品:NRK 49F细胞、HFT 8810细胞、PC-2 [Human pancreatic carcinoma]细胞
NMC-G1细胞系相关产品:MB157细胞、HLCL9B10细胞、PanC1细胞
HT-29细胞系相关产品:HS578细胞、HBL-1 [Human diffuse large B-cell lymphoma]细胞、HcerEpic细胞
3T3 L1细胞系相关产品:NL20SV细胞、IEC6细胞、NALM 6细胞
HHL-5细胞系相关产品:PL 5细胞、NCI-H1963细胞、LAD2细胞
H1648细胞系相关产品:HFSF细胞、Wills Eye Research Institute-Retinoblastoma-1细胞、HBE细胞
Biopsy xenograft of Pancreatic Carcinoma line-3细胞系相关产品:FU-97细胞、OCM-1细胞、WM-451Lu细胞
SUDHL5细胞系相关产品:T98-G细胞、NEC-8细胞、KP 4细胞
Hs 746T细胞系相关产品:APRE-19细胞、KHYG1细胞、EnCa1细胞
SK-NEP-1细胞系相关产品:SCL II细胞、Dunn LM8细胞、COLO-829细胞
H2342细胞系相关产品:HGE细胞、3AA细胞、MC 3T3-E1细胞
L132细胞系相关产品:SW 579细胞、UCLA SO M14细胞、SK-LMS-1细胞
Institute for Medical Research-32细胞系相关产品:MDA-415细胞、HCC1187细胞、COLO357细胞
EU-3细胞系相关产品:PANC0203细胞、Vero 76细胞、DHL-5细胞
NCI-H2195细胞系相关产品:Menschliche Und Tierische Zellkulture-3细胞、HEK 293 EBNA细胞、VMCUB1细胞
HCC1395细胞系相关产品:COLO-829细胞、3T6细胞、Human Fetal Thymocyte-8810细胞
K7M2细胞系相关产品:GM03569D细胞、Pro-Lec1.3C细胞、NCI-H1092细胞
LN 229细胞系相关产品:RBMVEC细胞、SUM 52PE细胞、COLO-679细胞
SKNMC细胞系相关产品:KU812-F细胞、BC-028细胞、CAL 39细胞
NB-4细胞系相关产品:NCI-HUT-125细胞、HCC-1438细胞、HT clone H9细胞
H-524细胞系相关产品:SRA01/04细胞、FC33细胞、Rat Glomerular Endothelial细胞
CX-1细胞系相关产品:MIA-Pa-Ca-2细胞、BV-2细胞、GM03320细胞
SW780细胞系相关产品:TOV-21G细胞、EB3 [Human Burkitt lymphoma]细胞、Vero E6细胞
Case 3细胞系相关产品:NCIH2106细胞、BGC823细胞、H1666细胞
MLA-144细胞系相关产品:H-1963细胞、WEHI 231细胞、P3X63Ag8653细胞
Experimental Mammary Tumour-6细胞系相关产品:TE 354.T细胞、bEND.3细胞、QGY7703细胞
Sf21 Cell:昆虫卵巢细胞系
CAL78细胞系相关产品:MFE-296细胞、Hs 737.T细胞、OEC19细胞
95D细胞系相关产品:OCUM-1细胞、C4-2细胞、NTHY-ORI3.1细胞
Jurkat 77细胞系相关产品:QBI-293A细胞、M.D. Anderson-Prostate Cancer-2b细胞、Kupffer细胞
OV 1063细胞系相关产品:Pt K2 (NBL-5)细胞、B6Tert-1细胞、RL细胞
WEHI-3细胞系相关产品:BERH-2细胞、PC-12细胞、SKGT4细胞
HEL-92.1.7细胞系相关产品:H-35 Reuber细胞、SW620细胞、H-1836细胞
CWR22-Rv1细胞系相关产品:P3-X63-Ag8-6-5-3细胞、Hs822T细胞、Panc203细胞
Kobe university Oral Squamous Cell culture-2细胞系相关产品:SHEE细胞、NCI-H660细胞、NS-1-Ag4-1细胞
SNU638细胞系相关产品:NIH:OVCAR3细胞、SP2-0-Ag14细胞、AD293细胞
U-2OS细胞系相关产品:RT 112细胞、OLN93细胞、NS653细胞
MCF10-A细胞系相关产品:ME-1 [Human leukemia]细胞、SNU387细胞、SNU251细胞
Panc08.13细胞系相关产品:PC-3M-1E8细胞、Pt K1细胞、T1-73细胞
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