"PCI-04B Cell:人喉鳞癌细胞系
细胞形态：上皮细胞样
细胞生长：贴壁
细胞背景资料：喉鳞癌；淋巴结转移；男性
MSTO-211细胞系相关产品：HSC2细胞、TFK1细胞、SK.MEL.2细胞
HEL 92.1.7细胞系相关产品：MA104细胞、MSTO-211 H细胞、T-24细胞
UPCI:SCC90细胞系相关产品：Jurkat (clone E6-1)细胞、NCIH1155细胞、GM00637B细胞
AU 565细胞系相关产品：Det 562细胞、OCM1细胞、WC00097细胞
细胞物种来源：人源或鼠源等其它物种来源
PCI-04B Cell:人喉鳞癌细胞系
细胞消化过程总结：其实绝大部分细胞消化的时候是只要用胰酶润洗一遍即可，吸去胰酶后，残留的那些无法计算体积的附着在细胞表面的微量胰酶在３７度一般不到２min足够消化细胞（绝大部分１min不到）。对于这些细胞原则上不要用胰酶孵育细胞，连续这样传代，对细胞伤害很大。简单的程序是PBS润洗吸去，胰酶润洗吸去，然后３７度消化。２，什么算是消化好了呢？不是细胞全部成间隔分布很离散的单个圆形才算消化好了，一般你肉眼观察贴壁细胞层，只要能移动了，多半呈沙壮移动，其实已经可以了，很多人喜欢把细胞消化或者吹打成完全分离细胞，这是没有必要的。一般能移动了，说明细胞与培养基质材料的附着已经消失了，细胞之间的附着也已经消失了，细胞已经独立分布了（虽然没有呈现很广的离散分布）。这个时候应该停止消化，不要等到看到镜下所有细胞都分离得非常好，间隙很大，才停止。细胞就是完全成单个细胞悬液，之后在贴壁的过程中仍然会聚集，这个是贴壁培养的细胞，尤其是肿瘤细胞的一个特性，无论死活的细胞都是如此，你可以尝试，准备１００%的单个细胞悬液，贴壁后观察细胞，仍然是几个几个细胞聚集在一起。一些悬浮培养细胞也是如此，容易聚集，不要去尝试过几个小时就拿出来吹打成单细胞悬液（不要笑，这个是初养悬浮细胞的人常犯的错误，以为悬浮培养就是一个一个分开）。细胞只要能从基质上脱离下来，这个时候即使是成片的（比如Calu-３细胞），吹打不超过２０次后（一般１０次即可），成小规模聚集（１０个细胞左右），是正常的，不要试图再去延长消化时间，或者像有的同学那样吹打１h，等待单细胞悬液出现。比较难消化的细胞（润洗方法５min还不能消化），比如HCT１５, LS４１１和KM１２，这样的细胞一般需要用少量胰酶孵育，但也不需要很多，一般１００mm dish，一次最多加入５００ul，就足够了，一般我加３００ul。即使这样难消化的细胞，一般不超过５min，即可见细胞成片移动，就应该停止消化。一些正常细胞也会有难消化的时候，比如tsDC细胞，但也只要用少量胰酶孵育，３min左右即可看到成片沙状移动。
细胞产品包装：复苏形式：T２５培养瓶(一瓶)或冻存形式：１ml冻存管(两支)
细胞传代方法：１：２-１：３传代；每周换液２-３次。
培养细胞真的不难，最关键几点：１)所有的东西使用，如果你用的血清、培养皿、培养基、胰酶什么的都是进口的，真的很难相信你会把细胞养坏；２)动作要快，胰酶消化，换液什么，细胞暴露在空气中的时间越少越好。另外，要掌握好胰酶消化时间，所谓的细胞状态差，很多时候是传代的原因；３)有时间的话，需要细胞计数，传相应数目的细胞到培养皿中，可以大致清楚细胞的生长曲线，不会临时要处理，手足无措；４)要做什么心里要非常清楚，合理安排时间，传代细胞的实验穿插进行，可以节省很多时间，也不会耽误别人的实验；５)个人的实验器具自己收一套，不要和别人混用，最近换了什么新的东西稍微记一下，试剂一旦怀疑污染，马上丢；６)传代细胞不能进去太多人，避免相互干扰。每天对待细胞比孝敬爹妈还用心，那真是捧在手里怕碎了，含在嘴里怕化了，看在眼里怕丢了，培养细胞时有哪些经验教训可以分享呢?１)严格无菌操作，多喷喷酒精，要是对灭菌的东西不放心，自己包自己送自己烘干；２)不要和别人共用试剂耗材，自己准备一套；３)有可能的话在拿到新细胞的时候做好支原体衣原体检测；４)水浴锅很脏，生化培养箱要是得手动加湿的话盘里的水也会很脏，勤换(灭菌水加进去)；５)晚上离开的时候给传代细胞照紫外，超净台是用完就开；６)是同一时间就你一个人在用传代细胞在养细胞。
细胞来源说明：细胞主要来源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少数国外著名大学建系
BNL CL.2细胞系相关产品：TF1细胞、JURKAT E-6.1细胞、Colo-206F细胞
B-104细胞系相关产品：COLO-320DM细胞、SaOS细胞、RMS 13细胞
NMC-G1细胞系相关产品：MB157细胞、HLCL9B10细胞、PanC1细胞
SK UT 1细胞系相关产品：SNU216细胞、HD11细胞、MN60细胞
Sci-1细胞系相关产品：Anip-973细胞、EC-9706细胞、ECC 10细胞
细胞生长特性：贴壁
PCI-04B Cell:人喉鳞癌细胞系
细胞复苏相关注意事项：１.取细胞的过程中注意带好防冻手套，护目镜。此项尤为重要，细胞冻存管可能漏入液氮，解冻时冻存管中的气温急剧上升，可导致爆炸。２.冻存液的问题：冻存液的配置已是常识，在这里不作详述，但二甲基亚砜(DMSO )对细胞不是完全无毒副作用，在常温下，二甲基亚砜对细胞的毒副作较大，因此，必须在１-２min内使冻存液完全融化。如果复苏温度太慢，会造成细胞的损伤，二甲基亚砜(DMSO)选择进口产品。３.离心前须加入少量培养液。细胞解冻后二甲基亚砜浓度较高，注意加入少量培养液可稀释其浓度，以减少对细胞的损伤。４.离心问题：目前主要有两种见解。一种是解冻后的细胞悬液直接吹打均匀后分装到培养瓶中进行培养，第二天换液。因为离心的目的是两个，去除DMSO，去除死细胞，这个是标准流程，但对一般人来说，把握不好离心转速和时间，转的不够活细胞沉底的少，细胞就全被扔掉了，转过了活细胞会受压过大，死亡。此外在操作过程中容易污染，所以不推荐。另一种说法为细胞悬液中含有二甲基亚砜(DMSO)，DMSO对细胞有一定的毒副作用，所以须将离心后的液体前倒净，且一定倒干净。我在试验中按照常规的离心分装的方法进行复苏，结果无异常。５.细胞贴壁少的问题：教科书中说明冻存细胞解冻时１ml细胞液要加１０ml-１５ml培养液，而在我的试验中的经验总结为培养基越少细胞越容易贴附。６.复苏细胞分装的问题：试验中我的经验总结为复苏１管细胞一般可分装到１-２只培养瓶中，分装过多，细胞浓度过低，不利于细胞的贴壁。７.加培养基的量放入问题：这个量的多少的把握主要涉及到的问题DMSO的浓度，从如果你加培养基的太少，那么DMSO的浓度就会比较大，就会影响细胞生长，从以前的资料来看，DMSO的浓度在小于０.５%的时候对一般细胞没有什么影响，还有一个说法是１%。所以如果你的冻存液的浓度是１０%DMSO的话那么加１０ml以上的培养基就恰好稀释到了无害浓度。
细胞形态特性：详见细胞说明书
NCI-H2135细胞系相关产品：DV90细胞、TGBC11T细胞、ISHI细胞
Leukemia L1210细胞系相关产品：Normal Rat, August 3, 1983细胞、NCI.H226细胞、HCGC细胞
NCIH841细胞系相关产品：C33-A细胞、HARAB细胞、NCI-SNU-761细胞
KLN-205细胞系相关产品：RCS细胞、H1437细胞、Centre Antoine Lacassagne-51细胞
RPMI8226/S细胞系相关产品：HFL-1细胞、SMA-560细胞、BEL7404细胞
DI-TNC1细胞系相关产品：SN12CPM6细胞、Baby Hamster Kidney from litter No. 21细胞、hEM15A细胞
HEP-3B2细胞系相关产品：CNE-2Z细胞、OCLY8细胞、KMM-1细胞
PCI-04B Cell:人喉鳞癌细胞系
Hi-5细胞系相关产品：HCC1438细胞、SNU-C2A细胞、As-PC1细胞
293EBNA细胞系相关产品：GM-3573细胞、A375-MEL细胞、Hs-281-T细胞
HEK-293H细胞系相关产品：SGC7901/DDP细胞、H1650_CO细胞、10T1/2细胞
Panc 10.05细胞系相关产品：U373-MG细胞、CMT-93细胞、SNUC2A细胞
NCIH187细胞系相关产品：J774.A1细胞、CMT.64细胞、HMEC1细胞
PAEC细胞系相关产品：HCT-8/V细胞、293/EBNA-1细胞、2B4-L细胞
RPMI no 8226细胞系相关产品：NCIH82细胞、KYSE-450细胞、ARH77细胞
KM.12细胞系相关产品：HFLS细胞、GM02131细胞、SK HEP 01细胞
143TK-细胞系相关产品：BE(2)C细胞、SK Hep1细胞、WRL-68细胞
143TK-细胞系相关产品：BE(2)C细胞、SK Hep1细胞、WRL-68细胞
G-402细胞系相关产品：FU-MMT-1细胞、NCI-H2141细胞、MGH-U1 (EJ)细胞
118 MG细胞系相关产品：HNE3细胞、LK-2细胞、B16/F10细胞
WI 38细胞系相关产品：GM-346细胞、MOLT-4细胞、Okayama University Medical School-27细胞
QGP 1细胞系相关产品：H-35细胞、LTEPsm细胞、CATH.a细胞
SUSM-1细胞系相关产品：NCIH2073细胞、Hs604T细胞、MKN45细胞
BSC1细胞系相关产品：Granta-519细胞、SNU-119细胞、H69/P细胞
PC3细胞系相关产品：MDCK-2细胞、NCI-H1770细胞、NUGC3细胞
SEG-1细胞系相关产品：H-1522细胞、CNLMG-B5537SKIN细胞、AR4-2J细胞
NKT细胞系相关产品：MASMC细胞、Tca8113细胞、SKMEL5细胞
NCI-H1417细胞系相关产品：KTCTL-140细胞、SNU-620细胞、HuT78细胞
U-343细胞系相关产品：P3HR1-BL细胞、HCCC9810细胞、786-0细胞
OV2008细胞系相关产品：NS1-Ag4/1细胞、HRC-99细胞、NCI-H727细胞
H929细胞系相关产品：639 V细胞、VK-2/E6E7细胞、NOK细胞
CHO细胞系相关产品：MT-2细胞、EVSAT细胞、HECCL-1细胞
UCLA-RO 81细胞系相关产品：M-14细胞、HTori:3细胞、MDA.MB.231细胞
EC-GI细胞系相关产品：MV-3细胞、PK13细胞、293-GP细胞
GM00637B细胞系相关产品：Neukoplast细胞、L-M(TK-)细胞、alphaTC1 Clone 6细胞
TGW-I-nu细胞系相关产品：NOK细胞、N1E-115细胞、MD Anderson-Metastatic Breast-157细胞
HEM细胞系相关产品：SW 1116细胞、KASUMI6细胞、NCI-446细胞
JHH-2细胞系相关产品：MRC-9细胞、LP1细胞、IM95细胞
C518细胞系相关产品：MES-SA/Dx-5细胞、SV40 MES 13细胞、HLE-SRA-01/04细胞
PE/CA-PJ34 (clone C12)细胞系相关产品：MOLT 4细胞、Swiss-3T3细胞、H-2087细胞
LOU-NH-91细胞系相关产品：MCF-7/AdrR细胞、SUP-M2细胞、C-33-A细胞
NCTC-3960细胞系相关产品：JVM-2细胞、HuT102细胞、TPC-1细胞
SW-403细胞系相关产品：TF-1a细胞、HSC5细胞、Lewis-Lung细胞
MGHU3细胞系相关产品：MOLT.4细胞、WM-115细胞、NCIH1963细胞
Ect1/E6E7细胞系相关产品：NIH-3T3-L1细胞、H-676B细胞、End1/E6E7细胞
K562/ADP细胞系相关产品：SJRH-30细胞、TE-85 clone 5细胞、Renal Proximal Tubule Epithelial Cells/TERT-immortalized 1细胞
Anip 973细胞系相关产品：OE21细胞、CCD-966SK细胞、Co 115细胞
TF-1a细胞系相关产品：Karpas299细胞、KYSE-140细胞、S37细胞
Anip[973]细胞系相关产品：B16BL6细胞、WTRL1细胞、293-EBNA细胞
PA I细胞系相关产品：GM00637H细胞、P3J.HR1K细胞、EU-2细胞
OVCA432细胞系相关产品：KU 19-19细胞、REC-1细胞、H-838细胞
PCI-04B Cell:人喉鳞癌细胞系
WEHI 3细胞系相关产品：NCI-H292细胞、Hs27F细胞、Clone 15 HL-60细胞
BT-20细胞系相关产品：Ramos (RA 1)细胞、H-1694细胞、MC-4细胞
SR786细胞系相关产品：NOR-10细胞、NCIH1944细胞、639-V细胞
Pro-Lec1.3C细胞系相关产品：3T3 clone A31细胞、UACC 812细胞、NCI-H1770细胞
HCC1954 BL细胞系相关产品：Sun Yat-sen university Ophtalmic center-Retinoblastoma 50细胞、HPC-Y5细胞、SW 900细胞
no-11细胞系相关产品：MiaPaca.2细胞、KMB-17细胞、HRIF细胞
Panc-327细胞系相关产品：HCEC-12细胞、SN12C细胞、SNU-C2B细胞
Mac-1细胞系相关产品：U87细胞、SNU761细胞、3396细胞
BS-C-1细胞系相关产品：U87-MG细胞、RCC-4细胞、H-1693细胞
MCF-12F细胞系相关产品：COLO-741细胞、FHL 124细胞、GRSL细胞
MRC-V细胞系相关产品：Human Pancreatic Duct Epithelial细胞、HSC 3细胞、HO8910细胞
A875细胞系相关产品：SNU182细胞、REC细胞、HPASMC细胞
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