"NCI-H250 Cell:人小细胞肺癌细胞系
细胞形态：上皮细胞样
细胞生长：贴壁
细胞背景资料：小细胞肺癌；男性
GDM-1细胞系相关产品：MCF7-GFP细胞、B16 melanoma F10细胞、UWB1289细胞
SW1353细胞系相关产品：GP293细胞、L5178Y细胞、CAL-51细胞
CoCL3细胞系相关产品：H1355细胞、H2228细胞、T-ALL1细胞
NPC-TW01细胞系相关产品：Pfeiffer细胞、H1770细胞、C57/B6-L细胞
细胞物种来源：人源或鼠源等其它物种来源
NCI-H250 Cell:人小细胞肺癌细胞系
细胞冻存基本方法：１．细胞：选对数生长期细胞，收集细胞２４小时前换液一次。２．计数：按常规方法把细胞制成细胞悬液，计数，令细胞密度达５×１０(６)/ml，离心去上清，吸入离心管中。３．冻存液：先用培养液９分＋DMSO １分（或甘油）配成１０％的DMSO冻存液，按上法一滴滴加入离心管中，然后用吸管轻轻吹打令细胞重悬。４．分装：分装入无菌安剖中，每安剖加１.５毫升细胞悬液。５．封口：用塑料安剖时拧紧瓶口即可；如用火焰封闭安剖口后，仔细检查，定要封严，必要时可浸入蓝色液中观察，为安全起见，把安剖缝入纱布小袋中，以防液氮浸入后，融解时因受热发生爆炸伤人；纱袋一端系以线绳，末端扎有小牌，注明：细胞名称，冻存日期，以便日后查找。细胞株(系)的使用，为医学研究和测试工作带来了极大的方便。但细胞的传代是有限制的，长期连续传代的细胞，不仅消耗大量的人力和物力，而且细胞的生长与形态等会有一定退变或转化，因而细胞失去原有的遗传特性，有时还会由于细胞污染而造成传代中断，种子丢失。因此，在实际工作中常需冻存一定数量的细胞，以备替换使用。细胞冷冻与复苏是细胞培养 室的常规工作和通用技术。
细胞产品包装：复苏形式：T２５培养瓶(一瓶)或冻存形式：１ml冻存管(两支)
细胞传代方法：１：２-１：３传代；每周换液２-３次。
培养细胞真的不难，最关键几点：１)所有的东西使用，如果你用的血清、培养皿、培养基、胰酶什么的都是进口的，真的很难相信你会把细胞养坏；２)动作要快，胰酶消化，换液什么，细胞暴露在空气中的时间越少越好。另外，要掌握好胰酶消化时间，所谓的细胞状态差，很多时候是传代的原因；３)有时间的话，需要细胞计数，传相应数目的细胞到培养皿中，可以大致清楚细胞的生长曲线，不会临时要处理，手足无措；４)要做什么心里要非常清楚，合理安排时间，传代细胞的实验穿插进行，可以节省很多时间，也不会耽误别人的实验；５)个人的实验器具自己收一套，不要和别人混用，最近换了什么新的东西稍微记一下，试剂一旦怀疑污染，马上丢；６)传代细胞不能进去太多人，避免相互干扰。每天对待细胞比孝敬爹妈还用心，那真是捧在手里怕碎了，含在嘴里怕化了，看在眼里怕丢了，培养细胞时有哪些经验教训可以分享呢?１)严格无菌操作，多喷喷酒精，要是对灭菌的东西不放心，自己包自己送自己烘干；２)不要和别人共用试剂耗材，自己准备一套；３)有可能的话在拿到新细胞的时候做好支原体衣原体检测；４)水浴锅很脏，生化培养箱要是得手动加湿的话盘里的水也会很脏，勤换(灭菌水加进去)；５)晚上离开的时候给传代细胞照紫外，超净台是用完就开；６)是同一时间就你一个人在用传代细胞在养细胞。
细胞来源说明：细胞主要来源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少数国外著名大学建系
HFL-I细胞系相关产品：Tregs细胞、HT1376细胞、H-295细胞
AMJ2C8细胞系相关产品：Capan 2细胞、BE2C细胞、X63-Ag 8.6.5.3细胞
G292细胞系相关产品：Nb 2细胞、HS940细胞、Lymph Node Carcinoma of the prostate细胞
RPE-1细胞系相关产品：Human Hepatocyte Line 5细胞、H-1793细胞、HFLS细胞
BEAS2B细胞系相关产品：JOSK-M细胞、MCA 38细胞、WM-239-A细胞
细胞生长特性：半贴壁
NCI-H250 Cell:人小细胞肺癌细胞系
细胞复苏相关注意事项：１.取细胞的过程中注意带好防冻手套，护目镜。此项尤为重要，细胞冻存管可能漏入液氮，解冻时冻存管中的气温急剧上升，可导致爆炸。２.冻存液的问题：冻存液的配置已是常识，在这里不作详述，但二甲基亚砜(DMSO )对细胞不是完全无毒副作用，在常温下，二甲基亚砜对细胞的毒副作较大，因此，必须在１-２min内使冻存液完全融化。如果复苏温度太慢，会造成细胞的损伤，二甲基亚砜(DMSO)选择进口产品。３.离心前须加入少量培养液。细胞解冻后二甲基亚砜浓度较高，注意加入少量培养液可稀释其浓度，以减少对细胞的损伤。４.离心问题：目前主要有两种见解。一种是解冻后的细胞悬液直接吹打均匀后分装到培养瓶中进行培养，第二天换液。因为离心的目的是两个，去除DMSO，去除死细胞，这个是标准流程，但对一般人来说，把握不好离心转速和时间，转的不够活细胞沉底的少，细胞就全被扔掉了，转过了活细胞会受压过大，死亡。此外在操作过程中容易污染，所以不推荐。另一种说法为细胞悬液中含有二甲基亚砜(DMSO)，DMSO对细胞有一定的毒副作用，所以须将离心后的液体前倒净，且一定倒干净。我在试验中按照常规的离心分装的方法进行复苏，结果无异常。５.细胞贴壁少的问题：教科书中说明冻存细胞解冻时１ml细胞液要加１０ml-１５ml培养液，而在我的试验中的经验总结为培养基越少细胞越容易贴附。６.复苏细胞分装的问题：试验中我的经验总结为复苏１管细胞一般可分装到１-２只培养瓶中，分装过多，细胞浓度过低，不利于细胞的贴壁。７.加培养基的量放入问题：这个量的多少的把握主要涉及到的问题DMSO的浓度，从如果你加培养基的太少，那么DMSO的浓度就会比较大，就会影响细胞生长，从以前的资料来看，DMSO的浓度在小于０.５%的时候对一般细胞没有什么影响，还有一个说法是１%。所以如果你的冻存液的浓度是１０%DMSO的话那么加１０ml以上的培养基就恰好稀释到了无害浓度。
细胞形态特性：详见细胞说明书
P3HR-1细胞系相关产品：CA-OV-3细胞、REC 1细胞、KMS11细胞
EJ-1细胞系相关产品：Functional Liver Cell-7细胞、FHCRC subclone 11细胞、Cor L88细胞
293F细胞系相关产品：NCIH1876细胞、T_T_细胞、MV4;11细胞
GA10细胞系相关产品：H-322细胞、HCT116/L细胞、TK+/- (clone 3.7.2C)细胞
JCA1细胞系相关产品：NCI-Hut 125细胞、Sp2/O细胞、H-64细胞
SK RC 52细胞系相关产品：RCC-10细胞、NCI-BL2141细胞、H-322细胞
NRK细胞系相关产品：DC2.4细胞、Sp2/O-Ag14细胞、NCTC-3960细胞
NCI-H250 Cell:人小细胞肺癌细胞系
NPC-TW-039细胞系相关产品：MDAMB231细胞、OV433细胞、LWnt3A细胞
GLC-15细胞系相关产品：LLCMK2细胞、INS-1E细胞、He-La细胞
Balb/c 3T3细胞系相关产品：ACCM细胞、NRK细胞、TOV-21G细胞
BNL CL2细胞系相关产品：BT 20细胞、MDA2B细胞、Hs-600-T细胞
HPF细胞系相关产品：2B4-L细胞、SVHUC细胞、Hepatoma-22细胞
LTEP-sm细胞系相关产品：NCI-H146细胞、293/EBNA细胞、HFL-I细胞
HEEpiC细胞系相关产品：Stanford University-Diffuse Histiocytic Lymphoma-6细胞、BE(2)-C细胞、JCA1细胞
ARO81细胞系相关产品：SN12C细胞、Y3-Ag1,2,3细胞、Baby Hamster Kidney from litter No. 21细胞
OVCAR 8细胞系相关产品：CCRF-CEM/S细胞、Ball 1细胞、JIMT细胞
OVCAR 8细胞系相关产品：CCRF-CEM/S细胞、Ball 1细胞、JIMT细胞
H498细胞系相关产品：MES-23.5细胞、NCI-H676细胞、Mel-MeWo细胞
HCC-1187细胞系相关产品：High 5细胞、Wistar Institute-38细胞、OCI-Ly8细胞
SK-N-BE细胞系相关产品：ROS 17/2.8细胞、CCD841CoN细胞、KYSE-410细胞
EOC20细胞系相关产品：COV-434细胞、AgC11x3A细胞、Madin-Darby Canine Kidney细胞
Hs 604.T细胞系相关产品：H2073细胞、L(TK-)细胞、U266-B1细胞
RMS13细胞系相关产品：WM115-mel细胞、P3 NS1 Ag4细胞、SP2细胞
HEC-1A细胞系相关产品：Oka-C1细胞、SK Col 1细胞、OEC33细胞
SKNAS细胞系相关产品：SNK-6细胞、Super Tube细胞、NIH:OVCAR4细胞
SW 626细胞系相关产品：LC-1/sq细胞、HK-2 [Human kidney]细胞、159 PT细胞
UO.31细胞系相关产品：MDA-MB-134 VI细胞、GB-1细胞、NBL-1细胞
PL-5细胞系相关产品：CCRF-CEM细胞、UACC-893细胞、NTera2 cl.D1细胞
SW 1783细胞系相关产品：BEL7404细胞、P-388细胞、LTPA细胞
A-375.S2细胞系相关产品：LN-229细胞、H35细胞、HCT 15细胞
hA549细胞系相关产品：MOLT16细胞、OVCA420细胞、Hs863T细胞
PLA 802细胞系相关产品：MCF-7ADR细胞、Fukuoka University-Malignant mixed Mullerian Tumor-1细胞、MGH-UI细胞
Ej138细胞系相关产品：Hi5细胞、MB-49细胞、G422细胞
GM03671C细胞系相关产品：JTC-28细胞、MCF7ADR细胞、U-118 MG细胞
Highly Aggressively Proliferating Immortalized细胞系相关产品：THP 1细胞、IGR-OV1细胞、BHK-21细胞
FBHE细胞系相关产品：NCI-H1781细胞、A2780/CP细胞、MHCC97L细胞
D-283细胞系相关产品：NP69细胞、NCIH2023细胞、Vero-E6细胞
CCD18Co细胞系相关产品：HLE B-3细胞、NCI-H1385细胞、HBL 100细胞
H-157细胞系相关产品：U266 B1细胞、NCI-H1876细胞、Panc10.05细胞
HFE-145细胞系相关产品：VSMC细胞、H1876细胞、T 84细胞
Molm14细胞系相关产品：CAL78细胞、HCE-2 [50.B1]细胞、HS 445T细胞
IMR 32细胞系相关产品：RenCa细胞、MDA-MB-134 VI细胞、H1048细胞
MV-3细胞系相关产品：H1672细胞、Caco-2/BBe细胞、TGBC-11-TKB细胞
NCIH2066细胞系相关产品：CAL-62细胞、hTERT-HME-1细胞、SUDHL10细胞
Intestinal Epithelioid Cell line No. 18细胞系相关产品：Hx-147细胞、H510A细胞、NIH:OVCAR3细胞
Reuber H35细胞系相关产品：TC-1[JHU-1]细胞、M-1 myeloid leukemia细胞、JM细胞
NCI-H3255细胞系相关产品：CATH-a细胞、C8166-CD4细胞、H-196细胞
BNL-CL.2细胞系相关产品：NW-MEL-38细胞、HSF细胞、P31-FUJ细胞
SW-1783细胞系相关产品：FRhK4细胞、CHOK1细胞、U14细胞
WERI-Rb-1细胞系相关产品：HDLM-2细胞、RT112细胞、UM-UC-1细胞
NCI-H250 Cell:人小细胞肺癌细胞系
DMS79细胞系相关产品：RBL-1细胞、SK MES 1细胞、BGC-823细胞
NCI-H1975细胞系相关产品：LS-174细胞、H-889细胞、Jurkat-E6细胞
Panc3_27细胞系相关产品：PG13细胞、Hs 746.T细胞、SVG p12细胞
C33-A细胞系相关产品：OCI-Ly03细胞、A-498细胞、NGP细胞
Karpas-422细胞系相关产品：Colon 38细胞、T.T细胞、Caco-2/ATCC细胞
Human podocyte细胞系相关产品：L(TK-)细胞、ECC12细胞、Daoy细胞
VMM39细胞系相关产品：A498细胞、SK-ML2细胞、KCL22细胞
NCI-H1373细胞系相关产品：HLMVEC细胞、Colon 38细胞、RIN Cl-5F细胞
NCI-H358细胞系相关产品：OCI Ly3细胞、3T3F442A细胞、WPMY1细胞
MC3T3-L1细胞系相关产品：C-Li-7细胞、BV2细胞、MES-SA-Dx5细胞
HT 1080.T细胞系相关产品：SK-Hep1细胞、HANK细胞、HFL细胞
JVM2细胞系相关产品：YES-2细胞、H2198细胞、SK-MES细胞
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