"NCI-H125 Cell:人非小细胞肺癌细胞系
细胞形态:上皮细胞样
细胞生长:贴壁
细胞背景资料:腺鳞状肺癌;男性
COLO684细胞系相关产品:GP5d细胞、MDA134细胞、SNUC1细胞
MOLT4细胞系相关产品:HME-1细胞、VeroE6细胞、Medical University of Graz-Chordoma 1细胞
MC9细胞系相关产品:CCD1112Sk细胞、KYSE-180细胞、0V-1063细胞
HEK-293H细胞系相关产品:SGC7901/DDP细胞、H1650_CO细胞、10T1/2细胞
细胞物种来源:人源或鼠源等其它物种来源
NCI-H125 Cell:人非小细胞肺癌细胞系
细胞冻存基本方法:1.细胞:选对数生长期细胞,收集细胞24小时前换液一次。2.计数:按常规方法把细胞制成细胞悬液,计数,令细胞密度达5×10(6)/ml,离心去上清,吸入离心管中。3.冻存液:先用培养液9分+DMSO 1分(或甘油)配成10%的DMSO冻存液,按上法一滴滴加入离心管中,然后用吸管轻轻吹打令细胞重悬。4.分装:分装入无菌安剖中,每安剖加1.5毫升细胞悬液。5.封口:用塑料安剖时拧紧瓶口即可;如用火焰封闭安剖口后,仔细检查,定要封严,必要时可浸入蓝色液中观察,为安全起见,把安剖缝入纱布小袋中,以防液氮浸入后,融解时因受热发生爆炸伤人;纱袋一端系以线绳,末端扎有小牌,注明:细胞名称,冻存日期,以便日后查找。细胞株(系)的使用,为医学研究和测试工作带来了极大的方便。但细胞的传代是有限制的,长期连续传代的细胞,不仅消耗大量的人力和物力,而且细胞的生长与形态等会有一定退变或转化,因而细胞失去原有的遗传特性,有时还会由于细胞污染而造成传代中断,种子丢失。因此,在实际工作中常需冻存一定数量的细胞,以备替换使用。细胞冷冻与复苏是细胞培养 室的常规工作和通用技术。
细胞产品包装:复苏形式:T25培养瓶(一瓶)或冻存形式:1ml冻存管(两支)
细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。
培养细胞真的不难,最关键几点:1)所有的东西使用,如果你用的血清、培养皿、培养基、胰酶什么的都是进口的,真的很难相信你会把细胞养坏;2)动作要快,胰酶消化,换液什么,细胞暴露在空气中的时间越少越好。另外,要掌握好胰酶消化时间,所谓的细胞状态差,很多时候是传代的原因;3)有时间的话,需要细胞计数,传相应数目的细胞到培养皿中,可以大致清楚细胞的生长曲线,不会临时要处理,手足无措;4)要做什么心里要非常清楚,合理安排时间,传代细胞的实验穿插进行,可以节省很多时间,也不会耽误别人的实验;5)个人的实验器具自己收一套,不要和别人混用,最近换了什么新的东西稍微记一下,试剂一旦怀疑污染,马上丢;6)传代细胞不能进去太多人,避免相互干扰。每天对待细胞比孝敬爹妈还用心,那真是捧在手里怕碎了,含在嘴里怕化了,看在眼里怕丢了,培养细胞时有哪些经验教训可以分享呢?1)严格无菌操作,多喷喷酒精,要是对灭菌的东西不放心,自己包自己送自己烘干;2)不要和别人共用试剂耗材,自己准备一套;3)有可能的话在拿到新细胞的时候做好支原体衣原体检测;4)水浴锅很脏,生化培养箱要是得手动加湿的话盘里的水也会很脏,勤换(灭菌水加进去);5)晚上离开的时候给传代细胞照紫外,超净台是用完就开;6)是同一时间就你一个人在用传代细胞在养细胞。
细胞来源说明:细胞主要来源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少数国外著名大学建系
CBRH7919细胞系相关产品:CHP100细胞、MDA-PCa-2b细胞、BT 325细胞
aNK细胞系相关产品:OVCA8细胞、BNL 1ME A.7R.1细胞、NALM-6-M1细胞
Factor Dependent Cell-Paterson 1细胞系相关产品:HeLa S-3细胞、RPMI-8402细胞、G-Olig2细胞
CaEs17细胞系相关产品:X63Ag8-653细胞、SU-DHL-4细胞、B16/BL6细胞
HES [Human embryonic skin fibroblast]细胞系相关产品:QSG7701细胞、HOP62细胞、THPI细胞
细胞生长特性:贴壁
NCI-H125 Cell:人非小细胞肺癌细胞系
细胞复苏相关注意事项:1.取细胞的过程中注意带好防冻手套,护目镜。此项尤为重要,细胞冻存管可能漏入液氮,解冻时冻存管中的气温急剧上升,可导致爆炸。2.冻存液的问题:冻存液的配置已是常识,在这里不作详述,但二甲基亚砜(DMSO )对细胞不是完全无毒副作用,在常温下,二甲基亚砜对细胞的毒副作较大,因此,必须在1-2min内使冻存液完全融化。如果复苏温度太慢,会造成细胞的损伤,二甲基亚砜(DMSO)选择进口产品。3.离心前须加入少量培养液。细胞解冻后二甲基亚砜浓度较高,注意加入少量培养液可稀释其浓度,以减少对细胞的损伤。4.离心问题:目前主要有两种见解。一种是解冻后的细胞悬液直接吹打均匀后分装到培养瓶中进行培养,第二天换液。因为离心的目的是两个,去除DMSO,去除死细胞,这个是标准流程,但对一般人来说,把握不好离心转速和时间,转的不够活细胞沉底的少,细胞就全被扔掉了,转过了活细胞会受压过大,死亡。此外在操作过程中容易污染,所以不推荐。另一种说法为细胞悬液中含有二甲基亚砜(DMSO),DMSO对细胞有一定的毒副作用,所以须将离心后的液体前倒净,且一定倒干净。我在试验中按照常规的离心分装的方法进行复苏,结果无异常。5.细胞贴壁少的问题:教科书中说明冻存细胞解冻时1ml细胞液要加10ml-15ml培养液,而在我的试验中的经验总结为培养基越少细胞越容易贴附。6.复苏细胞分装的问题:试验中我的经验总结为复苏1管细胞一般可分装到1-2只培养瓶中,分装过多,细胞浓度过低,不利于细胞的贴壁。7.加培养基的量放入问题:这个量的多少的把握主要涉及到的问题DMSO的浓度,从如果你加培养基的太少,那么DMSO的浓度就会比较大,就会影响细胞生长,从以前的资料来看,DMSO的浓度在小于0.5%的时候对一般细胞没有什么影响,还有一个说法是1%。所以如果你的冻存液的浓度是10%DMSO的话那么加10ml以上的培养基就恰好稀释到了无害浓度。
细胞形态特性:详见细胞说明书
UMUC3细胞系相关产品:JJN3细胞、hTERT-RPE1细胞、Rat Lung-65细胞
P388细胞系相关产品:KG1细胞、H-378细胞、NH-6细胞
Hepa 1-6细胞系相关产品:H-2122细胞、UCH-1细胞、OCM1细胞
Bat lung细胞系相关产品:LTEP-sm细胞、SHI1细胞、H-187细胞
Strain KB细胞系相关产品:6-T CEM细胞、RPMI 8226细胞、H-1792细胞
NCI-H1048细胞系相关产品:TE 85.T细胞、CMT 167细胞、RAG细胞
MA 104细胞系相关产品:IHHA-1细胞、NCIH1876细胞、NCI-H1568细胞
NCI-H125 Cell:人非小细胞肺癌细胞系
IHH-4细胞系相关产品:PE CA PJ34细胞、CEM-C1细胞、L 132细胞
MDA MB 134VI细胞系相关产品:KYSE410细胞、DHL-4细胞、PK-136细胞
SW 900细胞系相关产品:H295R-S1细胞、H1563细胞、Tb1.Lu细胞
MDA-MB-330细胞系相关产品:U-226AR1细胞、SNU-216细胞、HLE B-3细胞
L-5178-Y细胞系相关产品:Clone 929细胞、MD Anderson-Metastatic Breast-330细胞、GM03569D细胞
Nthy ori 3.1细胞系相关产品:SKOV-3细胞、CAMA1细胞、RDES细胞
U2-OS细胞系相关产品:bEnd3细胞、SK-RC-52细胞、OAW-42细胞
NBL-2细胞系相关产品:NPC-039细胞、Farage Original Line细胞、EFM192B细胞
AD293细胞系相关产品:T-T细胞、MV4:11细胞、ID8/MOSEC细胞
Rca-B细胞系相关产品:GT39细胞、MDA-MB 231细胞、NCI-H1792细胞
KP-N-NS细胞系相关产品:CV 1细胞、NTERA-2cl.D1细胞、OVCAR420细胞
Panc2.03细胞系相关产品:AMJ2-C8细胞、U266BL细胞、C 6细胞
hADSCs细胞系相关产品:CLONE M3细胞、MESSA Dx5细胞、J82COT细胞
HCPEpiC细胞系相关产品:PT-67细胞、NCIH2172细胞、C2-C12细胞
HaCaT细胞系相关产品:HO-1-N-1细胞、Be Wo细胞、MGSMC细胞
M4e细胞系相关产品:GBCSD细胞、JeKo 1细胞、H676B细胞
OV 2008细胞系相关产品:FOXNY细胞、HFF-1细胞、NCI-H78细胞
DU4475细胞系相关产品:LNCaP细胞、MT-4细胞、KTC1细胞
NR8383细胞系相关产品:HAPI细胞、WM 451-Lu细胞、HEK293细胞
AC16 [Human hybrid]细胞系相关产品:SU86.86细胞、L2细胞、L23/P细胞
Panc-10.05细胞系相关产品:OVCA432_Bast细胞、GP2-293细胞、Rat1细胞
HuH6细胞系相关产品:Mel526细胞、LC1细胞、Wistar Institute, Susan Hayflick细胞
JTC-39细胞系相关产品:H460细胞、OS-RC-2细胞、MOLT-4细胞
VMCUB-1细胞系相关产品:Huh 7.5.1细胞、NB1RGB细胞、NOR10细胞
BMF细胞系相关产品:TK10细胞、SW 1990细胞、N9细胞
BEL-7405细胞系相关产品:H-1793细胞、OSKM-1细胞、Kit225/K6细胞
KTC-1细胞系相关产品:RPMI 8226细胞、UMC11细胞、A 375细胞
H766T细胞系相关产品:Hs27细胞、EAHY-926细胞、Y3Ag1.2.3细胞
ACC3细胞系相关产品:SU.86细胞、Detroit562细胞、OC-316细胞
SK-MEL-2-LUC细胞系相关产品:VE细胞、CORL105细胞、B16-F10细胞
SCL1细胞系相关产品:NCTC clone 1469细胞、HTR-8细胞、RWPE1细胞
MLM细胞系相关产品:NCI-H1581细胞、NPA-87细胞、GM03320D细胞
B16/F0细胞系相关产品:P3/ag细胞、SW-839细胞、ATN1细胞
NCIH250细胞系相关产品:NCIH322细胞、8305-C细胞、SNU-761细胞
NCI-H1581细胞系相关产品:ROS1728细胞、NCI-SNU-C2A细胞、GBC-SD细胞
KHYG1细胞系相关产品:no-11细胞、Michigan Cancer Foundation-12A细胞、P30OHK细胞
SUM-190PT细胞系相关产品:SK-N-F1细胞、Calu-1细胞、CWR22-R1细胞
CCC-ESF-1细胞系相关产品:H1781细胞、Namalwa细胞、MB231细胞
Kit225-K6细胞系相关产品:NCI-H358细胞、Okayama University Medical School-27细胞、HeLa.S3细胞
NRK52E细胞系相关产品:HCC-1500细胞、SK-MEL-2细胞、SKNEP1细胞
H-1836细胞系相关产品:Colo699细胞、BJ [Human fibroblast]细胞、SK-N-AS细胞
HS852.T细胞系相关产品:HEL-299细胞、NCIH1915细胞、Fetal Rhesus Kidney-4细胞
CBRH-7919细胞系相关产品:MH-S细胞、J774A.1细胞、BT20细胞
NCI-H125 Cell:人非小细胞肺癌细胞系
LNT-229细胞系相关产品:H1435细胞、MAVER-1细胞、C-33A细胞
COLO-357细胞系相关产品:SNU449细胞、S91细胞、MM1.S细胞
alphaTC clone 6细胞系相关产品:L细胞、PK(15)细胞、Hs 683.T细胞
MC3T3-L1细胞系相关产品:C-Li-7细胞、BV2细胞、MES-SA-Dx5细胞
NU-GC-4细胞系相关产品:TK-1细胞、Ramos G6.C10细胞、BERH-2细胞
C4 I细胞系相关产品:Alexander cells细胞、CWR-22rv1细胞、CC-LP-I细胞
HS 445T细胞系相关产品:MDA.MB.435细胞、PK15细胞、L-cells细胞
E0771细胞系相关产品:Human Corneal Epithelial cells-Transformed细胞、BC-3-H-I细胞、kms 11细胞
BT-483细胞系相关产品:C8161细胞、JROECL33细胞、U-87-MG细胞
NTera2/D1细胞系相关产品:PK13细胞、LOUNH91细胞、HEK293A细胞
RDES细胞系相关产品:RC-4B/C细胞、CD 18细胞、BT 549细胞
P116细胞系相关产品:MH-22a细胞、Be Wo细胞、H125细胞
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