"LN-382 Cell:人脑胶质瘤细胞系
细胞形态：上皮细胞样
细胞生长：贴壁
细胞背景资料：胶质瘤；男性
Pfeiffer细胞系相关产品：L-Wnt-3A细胞、OCILY7细胞、MFHL-2细胞
H-1930细胞系相关产品：PaCa2细胞、HS-294-T细胞、253J-BV细胞
Human Hepatocyte Line 5细胞系相关产品：COLO206F细胞、NB.4细胞、Huh7.5细胞
LTEP a2细胞系相关产品：P3X63 AG 8.653细胞、870细胞、Malme-3 M细胞
细胞物种来源：人源或鼠源等其它物种来源
LN-382 Cell:人脑胶质瘤细胞系
细胞传代时消化的问题：可以这样说，对于需要消化传代的细胞，每一次的消化都是对这个细胞存活与否，状态好与不好最至关重要的考验。很多同学都遇到过这个问题，自己养的细胞开始的几代长的还挺好的，可是穿过几代之后就发现自己的细胞，状态越来越差劲了。对于这个问题，可以非常肯定地说，你的消化环节出问题了。你每一次的消化都让细胞受到较大损伤了。所以，越长越差。在消化的过程中，你加入胰酶后，所有细胞都在被胰酶消化着，但是我们忽视了一个问题就是，细胞的生长状态是不一样的，每一个细胞的贴壁情况也是不一样的，有的贴壁牢固，有的贴壁没有那么牢固的，所以，让所有的细胞消化同样的时间对细胞是不公平的，他们受到了差别待遇当然会有脾气啊。我后来对消化的方法进行了改良。争取做到因材施教呵呵。我称之为“四步消化法”。（以难消化细胞为例）；具体操作：１)首先不加胰酶，倒掉旧培养基加入少量新培养基洗１-２遍，（这是前奏，即为步，目的是将漂浮着的死细胞之类尽量洗掉。２)然后再加入少量新培养基直接吹打一遍，这一遍是把贴壁不牢固的细胞吹打下来。再用培养基洗一遍，两次所得悬液混合传入新瓶。即为第二步（你可以将这些传入新瓶培养，以与后面胰酶消化过的细胞对比观察看谁长的更好一点就知道该细胞对胰酶的敏感度了。）３)吸干净瓶内剩余液体，加入０.３ml左右的胰酶润洗一遍，吸掉弃之，再加入１ml左右的胰酶消化。消化的同时置于显微镜下观察，待细胞与细胞之间间隙明显的时候立即吸掉胰酶与干净子弹头里备用，加入新培养基开始吹打，吹打２-３遍后吸取悬液于试管或新瓶暂存。用２ml左右新培养基洗一遍与前面的混合。（你也可以传入新瓶培养，以与后面及前面的做对比。）这是第三步。４)然后把前面刚吸出来的胰酶重新加进去瓶里继续消化剩余的贴壁牢固的细胞。当然你也可以用新的胰酶，如果你们那比较富裕的话，呵呵。继续镜下观察，待剩余细胞间隙明显，细胞独立开来的时候，吸掉胰酶，加入新培养基吹打。悬液传入新瓶培养（根据实际情况你自己把握）。这是第四步。其实还可以有第五步，对于特别难消化的细胞和对胰酶特别敏感的细胞的话，你可以继续加第五步甚至第六步。为了细胞更好的状态，更漂亮的样子，没办法，你必须分多批多次消化，这样才能限度地将胰酶对细胞的损伤降到最低，保证细胞的状态能够。当然了，如果细胞是属于那种很容易消化的细胞，像RAW２６４.７，仅仅第二步就搞定了。就没必要第三步第四步了。这个是需要你在实验中能够自己用心去体会的。建议你接受一个新细胞时把各步消化的细胞分别培养起来做比较，去摸索好细胞对胰酶的要求。便于你后续实验的开展。将细胞消化分成这几步，除了是为了避免胰酶对细胞的损伤之外，还有一个更重要的作用就是，可以程度地把细胞吹打成单个单个的状态，不成片不连体。
细胞产品包装：复苏形式：T２５培养瓶(一瓶)或冻存形式：１ml冻存管(两支)
细胞传代方法：１：２-１：３传代；每周换液２-３次。
细胞常规培养传代流程(请严格遵照无菌操作)：１)吸出原培养瓶中的培养基，PBS缓冲液润洗细胞两次，加２-３ml ０.２５%胰酶进行消化细胞(注意把握消化时间，通常控制在１-２min)；２)镜下观察消化情况，在细胞边缘缩小，贴壁松动时(不建议消化到细胞漂浮)去掉胰酶，加６-８ml完全培养基，轻轻吹打细胞层，尽量把细胞层吹落，吹散；３)取部分细胞悬液转移到新的培养皿/瓶中，添加适当的完全培养基，把细胞悬液打匀，于培养箱中培养；４)注意培养基PH值变化情况，定期换液(每周２-３次)，待细胞密度达到８０%以后重复１项操作或者冻存；特别注意：(如使用公共实验室或者初次接触细胞培养，建议添加双抗培养)１)收到细胞后请尽快更换为含１５%血清的新鲜培养基，如因特殊情况需要继续使用原瓶，请在原瓶培养基中额外添加１０%的血清，(原瓶培养基的继续使用时间最长不宜超过７２小时)；２)贴壁细胞收到当天切忌立刻消化，请将细胞换液后放置培养箱孵育到第二天再做消化传代，请优先选择直径６cm的培养皿进行传代培养；３)如签收时出现培养瓶壁破裂，漏液等情况请及时做好照片记录并联系实验室。
细胞来源说明：细胞主要来源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少数国外著名大学建系
U-87MG细胞系相关产品：D341Med细胞、B16/BL6细胞、TT细胞
HepaRG细胞系相关产品：Sp2/O细胞、HRVEC细胞、HEMCSS细胞
UMNSAH/DF-1细胞系相关产品：NCM-460细胞、NCIH1666细胞、H-1993细胞
Centre Antoine Lacassagne-51细胞系相关产品：LWnt-3A细胞、HT 1197.T细胞、SRA01/04细胞
SUDHL-5细胞系相关产品：MX-1细胞、NCI-H929细胞、SKml2细胞
细胞生长特性：贴壁
LN-382 Cell:人脑胶质瘤细胞系
贴壁细胞消化传代时通常采用两种方法：一、加入胰酶等细胞脱落后，再加培养基中止胰酶作用，离心传代；二、加入胰酶后，镜下观察待细胞始脱落时，弃胰酶，加培养液分瓶。但前者太麻烦，而后者有可能对细胞施加胰酶选择，因为总是贴壁不牢的细胞先脱落，对肿瘤细胞来说，这部分细胞有可能是恶性程度较高的细胞亚群。一种简单的消化传代方法。加入PBS洗去血清或加入胰酶先中和血清的作用(３０s)，弃之，再加入适量胰酶作用１０s-４０s(根据细胞消化的难易程度)，弃之，这样依赖残余的胰酶就可将细胞消化单细胞。对于较难消化的细胞，可以用２%利多卡因消化５-８分钟，然后再弃去，加培养基吹打也可以，对细胞的影响不大。不用PBS也不用Hanks洗，只要把旧培养液吸的干净一点，直接加酶消化应该不会有什么问题。弃培养液后，用０.０４%的EDTA冲洗一次，再用１/４v的０.０４%的EDTA室温孵育５min，弃取大部分EDTA，加入与剩余EDTA等量的胰酶(预热)总体积１/１０v。消化到有细胞脱落。不过有人说EDTA对细胞不好，有证据吗？培养的BASMC：倒掉旧培养液加入少量胰酶冲一下，倒掉再加入０.１２５-０.２５%胰酶约６-１０滴或１ml(２５ml bottle)消化再加入适量新培养基中和，并分瓶这种方法简单、省事；效果很好并且不损失细胞！
细胞形态特性：详见细胞说明书
Hs-578Bst细胞系相关产品：MN 60细胞、P3-Jiyoye细胞、UMR-106细胞
Jurkat-FHCRC细胞系相关产品：SNK-1细胞、SKLMS1细胞、H-508细胞
H220细胞系相关产品：H-676细胞、L cells细胞、EL 4细胞
HL-1细胞系相关产品：HK-2 [Human kidney]细胞、H1792细胞、OCI-Ly7细胞
NPA87-1细胞系相关产品：SUM 52PE细胞、Y3细胞、HT 1376细胞
OCI-Ly 1细胞系相关产品：TE8细胞、RGCs细胞、A549 ATCC细胞
HC11 Mammary Epithelium细胞系相关产品：F98细胞、H-1734细胞、4T1.2细胞
LN-382 Cell:人脑胶质瘤细胞系
BV-2细胞系相关产品：SKG IIIa细胞、INS1-E细胞、Mo7e细胞
LS 123细胞系相关产品：LS1034细胞、GRSL细胞、YTMLC-90细胞
OCI-Ly 1细胞系相关产品：TE8细胞、RGCs细胞、A549 ATCC细胞
Hs870T细胞系相关产品：JG细胞、NCI-H748细胞、SK-MEL-1细胞
LP-1细胞系相关产品：KYSE520细胞、Colon26细胞、HIBEC细胞
Hs 729T细胞系相关产品：MDA175细胞、3T3-F442A细胞、SW1463细胞
JF305细胞系相关产品：HT115细胞、HT22细胞、HTh74细胞
A375mel细胞系相关产品：SKLMS-1细胞、SGC-7901细胞、JHH2细胞
TM-3细胞系相关产品：LS174细胞、3T3-A31细胞、746T细胞
HOC细胞系相关产品：H-2073细胞、293S细胞、H1648细胞
MBdSMC细胞系相关产品：NCIH810细胞、MC3T3-E细胞、HCT.116细胞
C22细胞系相关产品：OVCAR 420细胞、Ca759细胞、NCIH1417细胞
LS-123细胞系相关产品：Hs 739.T细胞、HEK293-F细胞、H2330细胞
NFHIOSE-80细胞系相关产品：Renal Proximal Tubule Epithelial Cells/TERT-immortalized 1细胞、RBL2H3细胞、COLO394细胞
Capan1细胞系相关产品：SK-RC-20细胞、UWB1-289细胞、HRMC细胞
H-2452细胞系相关产品：S-16细胞、hOMF细胞、BCaP 37细胞
RDES细胞系相关产品：RC-4B/C细胞、CD 18细胞、BT 549细胞
AML12细胞系相关产品：MC-3T3-E1细胞、PIG3细胞、Panc-08.13细胞
THP-1(ATCC)细胞系相关产品：J.E6-1细胞、BLO-11细胞、Vero 76细胞
MB157细胞系相关产品：SNU-1细胞、18G3.cl 1细胞、SK-ChA-1细胞
RPMI 7951细胞系相关产品：X63.Ag8.653细胞、BEAS 2B细胞、SU-DHL-4细胞
Calu6细胞系相关产品：Ra #1细胞、RPMI8402细胞、HEK-A细胞
KYSE-270细胞系相关产品：MCA 38细胞、NCI-H2108细胞、GM02132C细胞
AE1201细胞系相关产品：COLO 357细胞、WM-266-mel细胞、MM1S细胞
DR2R1610细胞系相关产品：253J细胞、50.B1细胞、Tregs细胞
L-M(TK-)细胞系相关产品：GB-1细胞、BALB/3T3细胞、KMM1细胞
FHL 124细胞系相关产品：38C13细胞、L-M[TK-]细胞、FRO 81-2细胞
SGC996细胞系相关产品：HEI-193细胞、HDF-a细胞、SNU-407细胞
H1869细胞系相关产品：PA12细胞、SW900细胞、H283细胞
COLO357细胞系相关产品：NCI-H810细胞、WM-239-A细胞、Anip-973细胞
SKRC 39细胞系相关产品：JM1细胞、HOCF细胞、NCI H69细胞
COLO-1细胞系相关产品：Hs 766T细胞、OACP4 C细胞、Hs-675-T细胞
SK-MEL-28细胞系相关产品：HSF细胞、AQ-Mel细胞、4-1st细胞
H660细胞系相关产品：TE5细胞、MC3T3-E1(C4)细胞、UPCI-SCC-90细胞
NCTC929细胞系相关产品：OAW-42细胞、GM07404细胞、SK-N-BE(1)n细胞
MiaPaca.2细胞系相关产品：MGHU1细胞、L-428细胞、MDA-MB-330细胞
MV4-11细胞系相关产品：EBTr (NBL-4)细胞、AC16 [Human hybrid]细胞、SKLU01细胞
H9c2 (2-1)细胞系相关产品：HT clone H9细胞、SKRC-52细胞、LIPF155C细胞
Panc 08.13细胞系相关产品：AZ 521细胞、HKF细胞、HSAS1细胞
HT144mel细胞系相关产品：MDAMB435细胞、HPAF细胞、CHL1细胞
F56 [Human neoplasm]细胞系相关产品：CL-11细胞、PANC-02-03细胞、TE-85 clone 5细胞
NCI-H1819细胞系相关产品：NCIH2110细胞、KYSE 510细胞、CNE1细胞
TYK-nu细胞系相关产品：SEG-1细胞、Mv 1 Lu (NBL-7)细胞、HTSMC细胞
LN-382 Cell:人脑胶质瘤细胞系
MCF 7B细胞系相关产品：J-111细胞、CCD 1112SK细胞、Hep 2细胞
MSB-1细胞系相关产品：WEHI3细胞、MC57细胞、NBL-5细胞
RL细胞系相关产品：SCC90细胞、NCIH596细胞、C22细胞
K1细胞系相关产品：McCoy B细胞、PLA-802细胞、PNEC30细胞
U373 MG细胞系相关产品：D-341细胞、NUGC-4细胞、H-1395细胞
Hs695T细胞系相关产品：Rat Basophilic Leukemia-1细胞、COLO320/DM细胞、SUPM2细胞
NUGC3细胞系相关产品：VMRC-RCZ细胞、SU-DHL6细胞、16-HBEo细胞
PC 61细胞系相关产品：CCF-STTG1细胞、Huh-7细胞、H-524细胞
CAOV4细胞系相关产品：G-292, clone A141B1细胞、Hs 766细胞、Panc08.13细胞
WEHI 231细胞系相关产品：Tn 5B1-4细胞、H1793细胞、H647细胞
RCC4细胞系相关产品：KM933细胞、NCI-SNU-423细胞、HEK 293-F细胞
MESSA-DX5细胞系相关产品：GLC-15细胞、PC-3M细胞、Mono Mac 1细胞
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