"SW1463 Cell:人结肠腺癌细胞系
细胞形态:上皮细胞样
细胞生长:贴壁
细胞背景资料:详见相关文献介绍
H2330细胞系相关产品:MeT-5A细胞、OEC19细胞、hTERTHME1细胞
MRCV细胞系相关产品:NCI-H524细胞、BEP2D细胞、D-283细胞
P-388D1细胞系相关产品:OV1063细胞、L-Wnt3A细胞、Neuro 2a细胞
KM12SM细胞系相关产品:OV90细胞、16-HBEo细胞、SW 948细胞
细胞物种来源:人源或鼠源等其它物种来源
SW1463 Cell:人结肠腺癌细胞系
细胞消化过程总结:其实绝大部分细胞消化的时候是只要用胰酶润洗一遍即可,吸去胰酶后,残留的那些无法计算体积的附着在细胞表面的微量胰酶在37度一般不到2min足够消化细胞(绝大部分1min不到)。对于这些细胞原则上不要用胰酶孵育细胞,连续这样传代,对细胞伤害很大。简单的程序是PBS润洗吸去,胰酶润洗吸去,然后37度消化。2,什么算是消化好了呢?不是细胞全部成间隔分布很离散的单个圆形才算消化好了,一般你肉眼观察贴壁细胞层,只要能移动了,多半呈沙壮移动,其实已经可以了,很多人喜欢把细胞消化或者吹打成完全分离细胞,这是没有必要的。一般能移动了,说明细胞与培养基质材料的附着已经消失了,细胞之间的附着也已经消失了,细胞已经独立分布了(虽然没有呈现很广的离散分布)。这个时候应该停止消化,不要等到看到镜下所有细胞都分离得非常好,间隙很大,才停止。细胞就是完全成单个细胞悬液,之后在贴壁的过程中仍然会聚集,这个是贴壁培养的细胞,尤其是肿瘤细胞的一个特性,无论死活的细胞都是如此,你可以尝试,准备100%的单个细胞悬液,贴壁后观察细胞,仍然是几个几个细胞聚集在一起。一些悬浮培养细胞也是如此,容易聚集,不要去尝试过几个小时就拿出来吹打成单细胞悬液(不要笑,这个是初养悬浮细胞的人常犯的错误,以为悬浮培养就是一个一个分开)。细胞只要能从基质上脱离下来,这个时候即使是成片的(比如Calu-3细胞),吹打不超过20次后(一般10次即可),成小规模聚集(10个细胞左右),是正常的,不要试图再去延长消化时间,或者像有的同学那样吹打1h,等待单细胞悬液出现。比较难消化的细胞(润洗方法5min还不能消化),比如HCT15, LS411和KM12,这样的细胞一般需要用少量胰酶孵育,但也不需要很多,一般100mm dish,一次最多加入500ul,就足够了,一般我加300ul。即使这样难消化的细胞,一般不超过5min,即可见细胞成片移动,就应该停止消化。一些正常细胞也会有难消化的时候,比如tsDC细胞,但也只要用少量胰酶孵育,3min左右即可看到成片沙状移动。
细胞产品包装:复苏形式:T25培养瓶(一瓶)或冻存形式:1ml冻存管(两支)
细胞传代方法:1:3—1:8传代,每周换液1-2次
细胞培养实验中常见问题总结:1)一般客户拿到细胞后,应该注意什么?客户收到细胞后先不开盖,放在培养箱静置若干小时后(看细胞密度而定)在倒置显微镜下观察细胞生长情况,并对细胞进行不同倍数拍照(建议受收细胞后观察培养基的颜色和是否有漏液情况,显微镜下拍细胞100X,200X各一张),排除细胞本身污染的情况;收到细胞未开封,出现污染状况我们负责免费发送一株细胞。收到细胞时如无异常情况,请在显微镜下观察细胞密度,如为贴壁细胞,未超过80%汇合度时,将培养瓶中培养液吸出,留下10ml培养液继续培养;超过80%汇合度时,请按细胞培养条件传代培养。如为悬浮细胞,吸出培养液、1000转/分钟离心2分钟,吸出上清,管底细胞用新鲜培养基悬浮细胞后移回培养瓶。细胞消化液建议使用PBS配制,慎用Hanks液配制;2)快递细胞多久能到,是寄冻存的细胞还是复苏好的细胞?我们采用快递发货,一般外地2--3天,寄细胞前请确认当地温度,如果气温低于4度的,则采用邮寄冻存细胞;3)可否使用与原先培养条件不同之培养基?不能。每一细胞株均有其特定使用且已适应之细胞培养基,若骤然使用和原先提供之培养条件不同之培养基,细胞大都无法立即适应,造成细胞无法存活;4)可否使用与原先培养条件不同之血清种类?不能。血清是细胞培养上一个极为重要的营养来源,所以血清的种类和品质对于细胞的生长会产生极大的影响。来自不同物种的血清,在一些物质或分子的量或内容物上都有所不同,血清使用错误常会造成细胞无法存活。
细胞来源说明:细胞主要来源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少数国外著名大学建系
H4IIEC3细胞系相关产品:Virginia Mason Research Center-Lung Cancer D细胞、MM1-S细胞、HCC2108细胞
SACC-LM细胞系相关产品:HIEC6细胞、HCC-1187细胞、Tu-177细胞
KRCY细胞系相关产品:MDCK-II细胞、Ly18细胞、MDA231-LM2细胞
526 mel细胞系相关产品:RTE细胞、293-EBNA细胞、Biologics Standards-Cercopithecus-1细胞
28SC细胞系相关产品:CCC-ESF-1细胞、HEC1A细胞、COLO201细胞
细胞生长特性:贴壁生长
SW1463 Cell:人结肠腺癌细胞系
细胞复苏后贴壁细胞较少的问题分析:总结1:复苏过程没有问题,是否是从液氮拿出直接放入温水,还有培养箱,二氧化碳浓度,培养基、PH值等环节。要么加高浓度FBS 15-20%,看看能否帮助贴壁,当然也需要考虑血清问题,还有确信拿来的细胞没问题。总结2:首先应该怀疑冻存,实际上复苏出问题的可能非常小,因为操作简单,而且死板。1、你冻存的时候是不是消化的时间过长,这是一般人所注意不到的,即使书上也不讲这个问题,太长的消化时间会让细胞复苏时失去贴壁能力,表现为先贴后死,原因是在你复苏的时候细胞已进入凋亡程序,不可逆转的死亡。2、你的冻存液好不好,是什么,甘油还是DMSO,质量非常重要,否则也会死亡。3、你的冻存液的量加的是不是太多,ATCC推荐是不超过7%,大于5%,太多也不好。4、你在冻存的时候是不是把DMSO混均匀,这个有一些影响,但不算太大。5、你的冻存是否按部就班,就是所温度梯度是不是把握严格,很多人容易忘却这个事情,因为这个东西流程长。6、如果你细胞污染,你是否能很快看到,我比我的导师能早一天看到污染。从这个角度讲建议去除离心这步。7、你的细胞在冻存前是否过密。还有,不赞成孵箱污染这个概念的,所有在一个孵箱里的细胞都污染一个细菌的话,这个细菌是源于孵箱的,但这不代表孵箱污染,因为孵箱无论你如何处理都有大量的细菌,问题在操作。每次污染的原因都要尽可能的找,以后就不犯同样的问题,这个很重要,不能靠猜,否则你就有可能细胞养绝最后换课题,这个见得太多了,别不当会事。
细胞形态特性:上皮细胞
UMR-106细胞系相关产品:NK 10a细胞、T8细胞、HOS-TE85细胞
H2347细胞系相关产品:ChaGo-K1细胞、P388细胞、Centre Antoine Lacassagne-148细胞
P3/X63/Ag8细胞系相关产品:NCI-H1666细胞、HFSF细胞、CAL-62细胞
Vero-76细胞系相关产品:Jurkat Clone E6-1细胞、KMS26细胞、NCIH1694细胞
HTR8svn细胞系相关产品:HCC-9204细胞、Panc3_27细胞、HT-144细胞
SUDHL-1细胞系相关产品:NCI-SNU-119细胞、JIMT-1细胞、COS1细胞
MM134细胞系相关产品:H526细胞、SKOV-433细胞、KFB细胞
SW1463 Cell:人结肠腺癌细胞系
WEHI 164细胞系相关产品:HFLS-OA细胞、H-250细胞、Neuro-2a细胞
OLN93细胞系相关产品:Medical Research Council cell strain-5细胞、Panc 02.03细胞、SCC 15细胞
MS1细胞系相关产品:H1522细胞、MS-751细胞、YES-2细胞
LADMAC细胞系相关产品:TO175T细胞、MRC 5细胞、FHCRC subclone 11细胞
U-118 MG细胞系相关产品:DH82细胞、NTHY-ORI3.1细胞、Ontario Cancer Institute-Acute Myeloid Leukemia-3细胞
BHT-101细胞系相关产品:MSTO211H细胞、DV-90细胞、JeKo 1细胞
CAL-12T细胞系相关产品:BEL-7404细胞、RF/6A细胞、NCI-HUT-292细胞
Duke University 4475细胞系相关产品:SUM-190PT细胞、EM3细胞、CMT64细胞
LN382细胞系相关产品:526mel细胞、PL5细胞、GC1-SPG细胞
LN382细胞系相关产品:526mel细胞、PL5细胞、GC1-SPG细胞
P30-OHKUBO细胞系相关产品:BALB/3T3 (clone A31)细胞、SW13细胞、Renal Carcinoma细胞
KMST-6细胞系相关产品:DF-1细胞、TK+/- (clone 3.7.2C)细胞、NCIH441细胞
IM9细胞系相关产品:Chang Cells细胞、W256细胞、FTC133细胞
Mono Mac 6细胞系相关产品:CCD-841CoN细胞、Walker-Ca.256细胞、Hs 578Bst细胞
RBL 1细胞系相关产品:DMS79细胞、NIH-OVCAR-3细胞、HeLa S-3细胞
MT2细胞系相关产品:HS-294-T细胞、BIU87细胞、DMS273细胞
NCI-H2286细胞系相关产品:SBC-5细胞、OVCAR.4细胞、NTera2/D1细胞
TR146细胞系相关产品:NK-92 transfected with MFG-hIL2细胞、T98 G细胞、TF-1细胞
HPAF-II细胞系相关产品:Reh细胞、DMS114细胞、A375-SM细胞
SUM-190细胞系相关产品:NCI-H1355细胞、FL62891细胞、Oka-C1细胞
NUGC-4细胞系相关产品:WSU-DLCL-2细胞、CF-1 MEF细胞、Be-Wo细胞
LIM 1215细胞系相关产品:U-87细胞、DF1细胞、H1573细胞
U87-MG细胞系相关产品:NCI-H1385细胞、C3H10T1-2细胞、C33-A细胞
MIHA细胞系相关产品:HCS-2/8细胞、NPC-039细胞、PaTu8988s细胞
L-363细胞系相关产品:H2342细胞、MCF-7细胞、SK ES 01细胞
Y3.AG.1.2.3细胞系相关产品:Rat Fetal Lung-6细胞、MES-SA/Dx5细胞、TALL 1细胞
CCD-18Co细胞系相关产品:TW 01细胞、NCI-157细胞、A2780 CP70细胞
LTEP-sm细胞系相关产品:NCI-H146细胞、293/EBNA细胞、HFL-I细胞
TE-3A细胞系相关产品:COLO 741细胞、GM06141B细胞、SuperTube细胞
AN3-CA细胞系相关产品:UCLA-SO-M20细胞、GM16136细胞、SNK-1细胞
3T3-F442A细胞系相关产品:rRTEC细胞、SK-LU-1细胞、Panc 05.04细胞
GT38细胞系相关产品:TOG细胞、CoCL3细胞、Mv 1 Lu细胞
WiDrTC细胞系相关产品:SNU-251细胞、H-1954细胞、CHO-K1细胞
NCI-H2029细胞系相关产品:Ku812细胞、P30 OHK细胞、SK-NEP-1细胞
T47-D细胞系相关产品:L 1210细胞、EFM-19细胞、CAL 33细胞
SK-ES细胞系相关产品:LK 2细胞、Emory University-3细胞、U-138 MG细胞
SHP-77细胞系相关产品:NG108-15细胞、COLO-679细胞、Hs-27细胞
L6565细胞系相关产品:GM00637F细胞、MB157细胞、DU145细胞
NCI-SNU-C1细胞系相关产品:SH-SY5Y细胞、HeLa S3细胞、PC-9/GR细胞
16-HBE14o细胞系相关产品:SN12-PM6细胞、HEC1-B细胞、P-388D1细胞
BAR-T细胞系相关产品:HEK-293F细胞、H22-H8D8细胞、CWR-22rv1细胞
C8D1A细胞系相关产品:NCIH1930细胞、HELA-GFP细胞、Dunn LM8细胞
Ca Ski细胞系相关产品:Tb 1 Lu (NBL-12)细胞、University of Michigan-Urothelial Carcinoma-14细胞、D-407细胞
SW1463 Cell:人结肠腺癌细胞系
NCL-H548细胞系相关产品:MOLM13细胞、HH [Human lymphoma]细胞、BEAS 2B细胞
BC-019细胞系相关产品:OVCAR 8细胞、VMRC-RCZ细胞、Jurkat细胞
UMUC3细胞系相关产品:JJN3细胞、hTERT-RPE1细胞、Rat Lung-65细胞
SK-N-BE(1)细胞系相关产品:AZ-521细胞、NOR-10细胞、RAMOS2G64C10细胞
HNE3细胞系相关产品:GM04678细胞、KYSE-410细胞、LM-TK-细胞
SW-1088细胞系相关产品:CEMO-1细胞、C17细胞、PL45细胞
H-1792细胞系相关产品:Detroit 562细胞、NTERA-2 clone D1细胞、HuPT3细胞
NCI-H838细胞系相关产品:hTERT-RPE-1细胞、R1610细胞、Okayama University Medical School-23细胞
RPMI #1846细胞系相关产品:KE37细胞、HSC4细胞、HS578T细胞
SHIN-3细胞系相关产品:Ball 1细胞、N2a细胞、HTR8细胞
ARO 81-1细胞系相关产品:FHCRC-11细胞、MV-3细胞、CNE-2Z细胞
NCIH2342细胞系相关产品:RTMC细胞、D407 RPE细胞、GT38细胞
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