"NRK-52E Cell:正常大鼠肾细胞系
细胞形态:上皮细胞样
细胞生长:贴壁
细胞背景资料:详见相关文献介绍
COLO-829细胞系相关产品:A-10细胞、SW48细胞、CA 46细胞
MCF-7/ADR细胞系相关产品:CAL 62细胞、CRFK细胞、SCC9细胞
V79-GalK1细胞系相关产品:GM05372E细胞、NCIH322细胞、NCIH2196细胞
QBC-939细胞系相关产品:RC13细胞、TSUpr1细胞、P31/Fujioka细胞
细胞物种来源:人源或鼠源等其它物种来源
NRK-52E Cell:正常大鼠肾细胞系
因为细胞生长的时候肯定是要相互联系,大部分的细胞都是要成片生长的,尤其是对于贴壁细胞,单个细胞贴壁之后长着长着就长到一片去了。但是如果是成片的细胞抱团的话,传代后细胞是不能贴壁的,这样抱团的细胞就会死亡。所以,消化传代的时候一定要将细胞消化成单个单个的独立状态,这个啊是非常考究你的功夫的!细胞一旦脱落入悬液里你很难再将他吹打成单个,因为他没有受力点了。很难找到受力点让你对他吹打的力分散开细胞。所以必须要在细胞未脱落之前将其吹打开,受力点就是细胞贴壁的地方。这样你就必须要严格控制好消化的程度啊,这和大师做饭掌握好火候是一样的道理啊。既要消化到容易吹打下来,又不能太过,一吹就整片脱落,要单个单个地往下掉。所以我才要分批分次地加胰酶消化就是为了保证不同生长状态贴壁程度的细胞能够都维持在好的受力点分散开。这个是很重要的一点。尤其是对于某些细胞这一点就是他活去死的致命点。像Caco-2细胞就是如此。另外关于传代很重要一点就是一定不能等到细胞长满的时候才去消化传代。要在细胞长到70%左右的时候就要传代了,一旦发现细胞生长中已经有叠层生长的时候就要立即进行消化传代。不能再拖了。关于换液传代时候洗瓶的问题。对于用DMEM培养基培养的细胞,你在洗的时候如果是用无血清1640去洗细胞在随即后的几次中会比用DMEM洗的长的要好。同样,用1640培养的也有这个现象。如果不嫌麻烦的话,可以用PBS来洗,洗的效果和用无血清培养基洗的效果基本上是一样的,对于有些细胞会更胜一筹。洗的目的主要是洗去培养瓶里残留的血清,防止它对胰酶的影响。这样能够保证胰酶的消化能力优先,是很关键的一点。先补充这么多,还会后续更新。再补充一点:传代时PBS洗是很重要的一步,最近发现,用PBS就可以把细胞消化开来。加入PBS放置10-15分钟,有些需要更长的时间,等到细胞一个个分离开来的时候,就可以直接吹打下来,但是和胰酶消化一样,要控制好时间,不能时间太过了,要不然损伤细胞,细胞不容易成活,状态容易不好。这个方法对于某些细胞是很管用的。有些细胞用胰酶消化不容易消化成单个的时候,或者临时没有胰酶了,可以选用此方法。不过一定要试试,看是否适合你的细胞。
细胞产品包装:复苏形式:T25培养瓶(一瓶)或冻存形式:1ml冻存管(两支)
细胞传代方法:1:2传代
细胞常规培养传代流程(请严格遵照无菌操作):1)吸出原培养瓶中的培养基,PBS缓冲液润洗细胞两次,加2-3ml 0.25%胰酶进行消化细胞(注意把握消化时间,通常控制在1-2min);2)镜下观察消化情况,在细胞边缘缩小,贴壁松动时(不建议消化到细胞漂浮)去掉胰酶,加6-8ml完全培养基,轻轻吹打细胞层,尽量把细胞层吹落,吹散;3)取部分细胞悬液转移到新的培养皿/瓶中,添加适当的完全培养基,把细胞悬液打匀,于培养箱中培养;4)注意培养基PH值变化情况,定期换液(每周2-3次),待细胞密度达到80%以后重复1项操作或者冻存;特别注意:(如使用公共实验室或者初次接触细胞培养,建议添加双抗培养)1)收到细胞后请尽快更换为含15%血清的新鲜培养基,如因特殊情况需要继续使用原瓶,请在原瓶培养基中额外添加10%的血清,(原瓶培养基的继续使用时间最长不宜超过72小时);2)贴壁细胞收到当天切忌立刻消化,请将细胞换液后放置培养箱孵育到第二天再做消化传代,请优先选择直径6cm的培养皿进行传代培养;3)如签收时出现培养瓶壁破裂,漏液等情况请及时做好照片记录并联系实验室。
细胞来源说明:细胞主要来源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少数国外著名大学建系
HCMEC(BL12-H)细胞系相关产品:OVCAR10细胞、NCI-H1404细胞、AMO-1细胞
DR2R 1610细胞系相关产品:GNM细胞、DLD 1细胞、Panc2_03细胞
WEHI-3细胞系相关产品:BERH-2细胞、PC-12细胞、SKGT4细胞
Neuro-2a细胞系相关产品:HBSMC细胞、IOSE80细胞、Madin Darby Bovine Kidney细胞
Ramos细胞系相关产品:CAL51细胞、PC-9细胞、C32 mel细胞
细胞生长特性:贴壁生长
NRK-52E Cell:正常大鼠肾细胞系
贴壁细胞消化传代时通常采用两种方法:一、加入胰酶等细胞脱落后,再加培养基中止胰酶作用,离心传代;二、加入胰酶后,镜下观察待细胞始脱落时,弃胰酶,加培养液分瓶。但前者太麻烦,而后者有可能对细胞施加胰酶选择,因为总是贴壁不牢的细胞先脱落,对肿瘤细胞来说,这部分细胞有可能是恶性程度较高的细胞亚群。一种简单的消化传代方法。加入PBS洗去血清或加入胰酶先中和血清的作用(30s),弃之,再加入适量胰酶作用10s-40s(根据细胞消化的难易程度),弃之,这样依赖残余的胰酶就可将细胞消化单细胞。对于较难消化的细胞,可以用2%利多卡因消化5-8分钟,然后再弃去,加培养基吹打也可以,对细胞的影响不大。不用PBS也不用Hanks洗,只要把旧培养液吸的干净一点,直接加酶消化应该不会有什么问题。弃培养液后,用0.04%的EDTA冲洗一次,再用1/4v的0.04%的EDTA室温孵育5min,弃取大部分EDTA,加入与剩余EDTA等量的胰酶(预热)总体积1/10v。消化到有细胞脱落。不过有人说EDTA对细胞不好,有证据吗?培养的BASMC:倒掉旧培养液加入少量胰酶冲一下,倒掉再加入0.125-0.25%胰酶约6-10滴或1ml(25ml bottle)消化再加入适量新培养基中和,并分瓶这种方法简单、省事;效果很好并且不损失细胞!
细胞形态特性:上皮细胞样
SNK-6细胞系相关产品:Turbot Embryonic Cell line细胞、HepaRG细胞、HL1细胞
MES-SA细胞系相关产品:MCF-12A细胞、SUNE 1细胞、6-10B细胞
CNE1-LUC细胞系相关产品:TE3A细胞、C643细胞、H-889细胞
SY5Y细胞系相关产品:DBTRG-05MG细胞、BHT-101细胞、TE11细胞
H441细胞系相关产品:HHL5细胞、H748细胞、MNNG/HOS Clone F-5细胞
SW1088细胞系相关产品:P3X63NS1细胞、SUDHL-2细胞、SW-1573细胞
IA-LM细胞系相关产品:CCD-19Lu细胞、H2009细胞、H-220细胞
NRK-52E Cell:正常大鼠肾细胞系
H-1693细胞系相关产品:3 LL细胞、Hs 274细胞、IHH4细胞
WEHI-164细胞系相关产品:HSC 3细胞、3T3(A31)细胞、PC-3M-1E8细胞
MDA435细胞系相关产品:NUGC-3细胞、MFE280细胞、JEG3细胞
U-251MG细胞系相关产品:SW1116细胞、EC-GI-10细胞、P 3 HR 1细胞
KG-1a细胞系相关产品:HVSMC细胞、ROS17/28细胞、QG-56细胞
BT 549细胞系相关产品:DU4475细胞、HS-729细胞、Mouse podocyte细胞
rHSC-99细胞系相关产品:624细胞、Onda 11细胞、Panc327细胞
QGY7701细胞系相关产品:U343细胞、CX1细胞、AM细胞
TE 671细胞系相关产品:SCC15细胞、RT4细胞、SACCLM细胞
TE 671细胞系相关产品:SCC15细胞、RT4细胞、SACCLM细胞
TE11细胞系相关产品:Lung cancer-1/squamous细胞、OUMS-27细胞、U2OS细胞
hUC-MSC细胞系相关产品:NCIH378细胞、CHO-ori细胞、MXI细胞
HuT102细胞系相关产品:PLA-801D细胞、RPMI-8226细胞、NCl-H157细胞
NPC-TW-039细胞系相关产品:MDAMB231细胞、OV433细胞、LWnt3A细胞
V79-4细胞系相关产品:LAN5细胞、Tissue Culture-1细胞、HPAFII细胞
PASMCS细胞系相关产品:138MG细胞、P3 88 D1细胞、DLD1细胞
Calu6细胞系相关产品:Ra #1细胞、RPMI8402细胞、HEK-A细胞
SBC-5细胞系相关产品:SACC-LM细胞、Soleus clone 8细胞、253J-Bladder-V细胞
MT-2J细胞系相关产品:SKNAS细胞、FUOV1细胞、293/EBNA细胞
Human Corneal Endothelial Cells-12细胞系相关产品:SGC-7901/DDP细胞、BAEC细胞、UPCI-SCC-154细胞
H-2135细胞系相关产品:ROS17/28细胞、SKRC20细胞、Epstein-Barr-1细胞
SNU-878细胞系相关产品:HR8348细胞、OCI-Ly 1细胞、NCI-SNU-878细胞
Tn-5B1-4细胞系相关产品:OSC-19细胞、MNNG-HOS细胞、HL-60 Clone 15细胞
A-20细胞系相关产品:EFM192A细胞、NPA 87细胞、SN4741细胞
C12细胞系相关产品:DLM8细胞、TE13细胞、RPMI-8226细胞
TW 01细胞系相关产品:A20细胞、ECC-1细胞、SC细胞
HNEpC细胞系相关产品:Jurkat-77细胞、M-NFS-60细胞、C4-I细胞
MUTZ3细胞系相关产品:Vero-76细胞、HCC202细胞、HUCCT1细胞
RF/6A细胞系相关产品:HT-29/CX-1细胞、RGM1细胞、LU65细胞
NK62a细胞系相关产品:OV-1063细胞、ZYM-SVEC01细胞、PG-LH7细胞
HCC-1428细胞系相关产品:BNL-CL.2细胞、HFL1细胞、130-T细胞
L5178YR细胞系相关产品:D10细胞、L M (TK-)细胞、NCIH748细胞
HEK293细胞系相关产品:U-343-MG细胞、HIMEC细胞、Murine Carcinoma-38细胞
EJ1细胞系相关产品:SUDHL2细胞、OVCA 433细胞、SW-1463细胞
H-1694细胞系相关产品:HEL 92.1.7细胞、526-mel细胞、SKMEL-2细胞
GC-2细胞系相关产品:OVCAR 4细胞、C57/B6-L细胞、TSCC1细胞
WBF344细胞系相关产品:HCC1428细胞、TF-1细胞、WRL 68细胞
HF-91细胞系相关产品:TE-7细胞、10T1/2细胞、Ramos-RA1细胞
CHO-K1细胞系相关产品:V 79细胞、MCF 7细胞、NCI-HUT-69细胞
JB6 [Mouse]细胞系相关产品:NRK49F细胞、CL1-5细胞、ST-2细胞
Hs294T细胞系相关产品:MDAPCa-2b细胞、DanG细胞、J-82细胞
HLCL9B10细胞系相关产品:HCC1599细胞、8402细胞、BSC40细胞
NCIH524细胞系相关产品:SDBMSC细胞、MDA-415细胞、Kit225细胞
NRK-52E Cell:正常大鼠肾细胞系
HRA19细胞系相关产品:UMNSAH-DF1细胞、SW-1463细胞、IGROV1细胞
SW 900细胞系相关产品:H295R-S1细胞、H1563细胞、Tb1.Lu细胞
C8166-CD4细胞系相关产品:KRCY细胞、CAL 27细胞、SMMC 7721细胞
CTV-1细胞系相关产品:P3/NS1/Ag4-1细胞、T-98G细胞、FLS细胞
BLO 11细胞系相关产品:COR-L105细胞、HEK-2细胞、MKN28细胞
HCC2108细胞系相关产品:BNCL2细胞、MXI细胞、SW1783细胞
MC/9细胞系相关产品:A7r5细胞、H-1355细胞、CMEC/D3细胞
Hs27细胞系相关产品:K299细胞、OS-732细胞、HCC-44细胞
SkMel31细胞系相关产品:CWR22R-V1细胞、LS-174细胞、32D:cl3细胞
BNL.1ME A.7R.1细胞系相关产品:NCI-H740细胞、NCI-SNU-C1细胞、3T3-Swiss albino细胞
UM-UC-14细胞系相关产品:CF-1 MEF细胞、GL261细胞、ZYM-DIEC02细胞
NTERA-2/D1细胞系相关产品:RM-1细胞、B4G12细胞、TE6细胞
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