"COS-1 Cell:SV40转化的非洲绿猴肾细胞系
细胞形态:上皮细胞样
细胞生长:贴壁
细胞背景资料:该细胞源自CV-1细胞株,经转染编码野生型T抗原、起始点缺陷突变的SV40得到;细胞中整合有SV40基因组完整早期区段的单个拷贝。该细胞表达T抗原,适用于需要SV40T抗原表达的载体的转染;保留SV40溶细胞性生长的特性;支持40℃时温度敏感性A209病毒的复制;支持早期区段缺失的SV40纯体的复制。因含有SV40的DNA序列,该细胞需要在2级生物安全柜中操作。
HCC-70细胞系相关产品:Swiss/3T3细胞、HBL100细胞、C8D1A细胞
RMG1细胞系相关产品:MFE-280细胞、NCI-H2110细胞、H82sclc细胞
CC-LP-I细胞系相关产品:MES-SA Dx5细胞、NCIH2052细胞、OVHM细胞
AtT 20细胞系相关产品:HN13细胞、A549/ATCC细胞、MCF7/WT细胞
细胞物种来源:人源或鼠源等其它物种来源
COS-1 Cell:SV40转化的非洲绿猴肾细胞系
细胞传代时消化的问题:可以这样说,对于需要消化传代的细胞,每一次的消化都是对这个细胞存活与否,状态好与不好最至关重要的考验。很多同学都遇到过这个问题,自己养的细胞开始的几代长的还挺好的,可是穿过几代之后就发现自己的细胞,状态越来越差劲了。对于这个问题,可以非常肯定地说,你的消化环节出问题了。你每一次的消化都让细胞受到较大损伤了。所以,越长越差。在消化的过程中,你加入胰酶后,所有细胞都在被胰酶消化着,但是我们忽视了一个问题就是,细胞的生长状态是不一样的,每一个细胞的贴壁情况也是不一样的,有的贴壁牢固,有的贴壁没有那么牢固的,所以,让所有的细胞消化同样的时间对细胞是不公平的,他们受到了差别待遇当然会有脾气啊。我后来对消化的方法进行了改良。争取做到因材施教呵呵。我称之为“四步消化法”。(以难消化细胞为例);具体操作:1)首先不加胰酶,倒掉旧培养基加入少量新培养基洗1-2遍,(这是前奏,即为步,目的是将漂浮着的死细胞之类尽量洗掉。2)然后再加入少量新培养基直接吹打一遍,这一遍是把贴壁不牢固的细胞吹打下来。再用培养基洗一遍,两次所得悬液混合传入新瓶。即为第二步(你可以将这些传入新瓶培养,以与后面胰酶消化过的细胞对比观察看谁长的更好一点就知道该细胞对胰酶的敏感度了。)3)吸干净瓶内剩余液体,加入0.3ml左右的胰酶润洗一遍,吸掉弃之,再加入1ml左右的胰酶消化。消化的同时置于显微镜下观察,待细胞与细胞之间间隙明显的时候立即吸掉胰酶与干净子弹头里备用,加入新培养基开始吹打,吹打2-3遍后吸取悬液于试管或新瓶暂存。用2ml左右新培养基洗一遍与前面的混合。(你也可以传入新瓶培养,以与后面及前面的做对比。)这是第三步。4)然后把前面刚吸出来的胰酶重新加进去瓶里继续消化剩余的贴壁牢固的细胞。当然你也可以用新的胰酶,如果你们那比较富裕的话,呵呵。继续镜下观察,待剩余细胞间隙明显,细胞独立开来的时候,吸掉胰酶,加入新培养基吹打。悬液传入新瓶培养(根据实际情况你自己把握)。这是第四步。其实还可以有第五步,对于特别难消化的细胞和对胰酶特别敏感的细胞的话,你可以继续加第五步甚至第六步。为了细胞更好的状态,更漂亮的样子,没办法,你必须分多批多次消化,这样才能限度地将胰酶对细胞的损伤降到最低,保证细胞的状态能够。当然了,如果细胞是属于那种很容易消化的细胞,像RAW264.7,仅仅第二步就搞定了。就没必要第三步第四步了。这个是需要你在实验中能够自己用心去体会的。建议你接受一个新细胞时把各步消化的细胞分别培养起来做比较,去摸索好细胞对胰酶的要求。便于你后续实验的开展。将细胞消化分成这几步,除了是为了避免胰酶对细胞的损伤之外,还有一个更重要的作用就是,可以程度地把细胞吹打成单个单个的状态,不成片不连体。
细胞产品包装:复苏形式:T25培养瓶(一瓶)或冻存形式:1ml冻存管(两支)
细胞传代方法:1:2传代
如何进行细胞复苏:1)从液氮容器中取出冻存管,直接浸入37℃温水中,并不时摇动令其尽快融化;2)从37℃水浴中取出冻存管,打开盖子,用吸管吸出细胞悬液,加到离心管并滴加10倍以上培养液,混匀;3)离心,1000rpm,5min;4)弃去上清液,加入含10%小牛血清培养液重悬细胞,计数,调整细胞密度,接种培养瓶,37℃培养箱静置培养;5)次日更换一次培养液,继续培养。【温馨提醒】1)从增殖期到形成致密的单层细胞以前的培养细胞都可以用于冻存,但为对数生长期细胞。在冻存前一天换一次培养液;2)将冻存管放入液氮容器或从中取出时,要做好防护工作(戴棉手套),以免冻伤;3)冻存和复苏用新配制的培养液。细胞复苏的时候,有些初次实验员将冻存管从液氮中取出后,放在室温下,经常发生冻存管爆炸,该怎么避免出现这种情况吗?其中在拧紧冻存管的时候是否有哪些细节要注意的?一般常用的方法是取出冻存管后在超净工作台中用酒精棉球擦试管口,再稍拧松盖子,再放37度水浴锅中摇溶,在将细胞转移到装有37度预热过的培养基的试管中,迅速离心,再用培养基洗一遍。
细胞来源说明:细胞主要来源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少数国外著名大学建系
ROS 17/2.8细胞系相关产品:HLFa细胞、293 Ad5细胞、UMNSAH-DF 1细胞
GM02131细胞系相关产品:NCTC-3960细胞、Rat Fetal Lung-6细胞、LICR-HN6细胞
SNU-520细胞系相关产品:H-1648细胞、H-460细胞、TE-3A细胞
MHCC 97-L细胞系相关产品:CT-26 WT细胞、U-2OS细胞、Colon38细胞
NCI-H748细胞系相关产品:ARH 77细胞、Embryonic Bovine Tracheal cells细胞、COR-L26细胞
细胞生长特性:贴壁生长
COS-1 Cell:SV40转化的非洲绿猴肾细胞系
细胞培养无菌操作步骤和注意事项:1.打开无菌工作台及净化室的紫外灯,消毒半小时以上。2.进入净化室前先关闭紫外灯,打开超净台风机,等待30min以上,以排尽臭氧。3.穿好隔离衣,戴好口罩,帽子。4.风淋2分钟。5.0.1%水泡手,擦干。6.点燃酒精灯;超净台内应避免放入过多的物品;使用的吸管,滴管,试管,培养瓶等均事先灭菌。7.打开各类瓶盖前先过火,以固定灰尘;打开的瓶口、试管口过火焰,镊子使用前应经火焰烧灼。8.水平式风机的超净台,应使瓶口斜置,应尽量避免瓶口敞开直立。9.同一根吸管或滴管不应连续用于几个不同的细胞系;吸取培养基的吸管应离开培养瓶或试管口0.5cm,避免伸入培养瓶口或试管口;以防止细胞系的互相混杂污染。10.漏在培养瓶上或台上的液体,立即用酒精棉球擦净。11.操作完毕后恢复工作台面。
细胞形态特性:成纤维细胞样
NCIH2052细胞系相关产品:G361mel细胞、A10细胞、Radiation Effects Research Foundation-Lung Cancer-MS细胞
LICR-LON-HN6-R细胞系相关产品:751细胞、VM-CUB-1细胞、IGR.OV1细胞
DMS-114细胞系相关产品:MDAMB-231细胞、253J细胞、293AD细胞
RIN m5F细胞系相关产品:H-2141细胞、ROS-17/2.8细胞、SF 295细胞
hSCC-25细胞系相关产品:SF 295细胞、K1735细胞、HDF-a细胞
RKOAS451细胞系相关产品:T2(174 x CEM.T2)细胞、H-2141细胞、H-820细胞
HET-1A细胞系相关产品:GM3190细胞、Caco2-BBE细胞、LX-2细胞
COS-1 Cell:SV40转化的非洲绿猴肾细胞系
H522细胞系相关产品:HUASMC细胞、JHH-2细胞、Daudi细胞
NCI-SNU-878细胞系相关产品:VERO C 1008细胞、CCRF-CEM C7细胞、COR L279细胞
WB-F344细胞系相关产品:NCI-H211细胞、Kit225/K6细胞、WM239A细胞
LCMS细胞系相关产品:KRC-Y细胞、Tj-905细胞、CT-26细胞
TE354.T细胞系相关产品:S.B.细胞、HCC44细胞、RS1细胞
NS1-Ag 4/1细胞系相关产品:Meat Animal Research Center-145细胞、AMO-1细胞、ESC细胞
ECC 12细胞系相关产品:GC-2细胞、J774细胞、3T3 J2细胞
F-36P细胞系相关产品:Hepa 1-6细胞、NB9细胞、PLMVEC细胞
H19-7细胞系相关产品:GM07404细胞、OCI AML2细胞、SCL-II细胞
SKMEL1细胞系相关产品:HL-60 Clone 15细胞、HCC1954BL细胞、CHO-Lec1细胞
HUVEC-C[HUVEC]细胞系相关产品:N1S1细胞、M-07e细胞、Virginia Mason Research Center-Lung Cancer D细胞
HTh74细胞系相关产品:NCI-H1568细胞、KG1A细胞、KY-50细胞
KFB细胞系相关产品:YAC-1细胞、KYSE0030细胞、TK-10细胞
NCI-H1568细胞系相关产品:MC26细胞、H2030细胞、D-283 Med细胞
CCRF CEM细胞系相关产品:ARO81-1细胞、MKN 7细胞、2PK-3细胞
CMT.64细胞系相关产品:Mv.1.Lu细胞、NCI-H2135细胞、Mel-RM细胞
578T细胞系相关产品:ME1细胞、MES 23.5细胞、HT 29细胞
H358细胞系相关产品:P3/NS1/1-Ag4.1细胞、NK-92 transfected with MFG-hIL2细胞、ACC-2细胞
Hs-274-T细胞系相关产品:GI-1细胞、HeLa S-3细胞、Pfeiffer细胞
U343细胞系相关产品:HEK AD293细胞、FO [Mouse myeloma]细胞、SKNBE(2)细胞
MADB106细胞系相关产品:JEG3细胞、SUM159PT细胞、Hs604T细胞
Lieming Xu-2细胞系相关产品:HSC细胞、H810细胞、U251n细胞
GLC-15细胞系相关产品:LLCMK2细胞、INS-1E细胞、He-La细胞
RN-c细胞系相关产品:BSC-1细胞、X63细胞、NTERA-2细胞
H1703细胞系相关产品:DAKIKI Clone 1细胞、MDA1386细胞、CACO2细胞
BCECs细胞系相关产品:PANC403细胞、MCF-7/ADR-RES细胞、MDA-MB 468细胞
A 375细胞系相关产品:Hs 746T细胞、MCF-7/ADR细胞、451Lu细胞
H660细胞系相关产品:TE5细胞、MC3T3-E1(C4)细胞、UPCI-SCC-90细胞
RASMCs细胞系相关产品:U2932细胞、JIMT1细胞、SKNBE2C细胞
COLO201细胞系相关产品:Duke University 4475细胞、BC-PAP细胞、Karpas422细胞
HSC6细胞系相关产品:HOP 92细胞、Dami细胞、SNU620细胞
CEMC7细胞系相关产品:HPDLF细胞、Jijoye细胞、H.Ep. #2细胞
WC00079细胞系相关产品:A549ATCC细胞、MKN74细胞、D 407细胞
Loucy细胞系相关产品:Hep G2/C3A细胞、Mc Ardle 7777细胞、Hs294T细胞
TE-11细胞系相关产品:HuPT4细胞、COV434细胞、RPMI6666细胞
NCI-H774细胞系相关产品:UMUC14细胞、BE2_C细胞、CCC-HEL-1细胞
DU145细胞系相关产品:RKN细胞、Mc Coy细胞、1.1B4细胞
HS 1.Tes细胞系相关产品:MCFs细胞、NCI-747细胞、NCI-H-69细胞
IEC6细胞系相关产品:HEK 293-EBNA细胞、COR-L23细胞、ME-180细胞
MUTZ3细胞系相关产品:Vero-76细胞、HCC202细胞、HUCCT1细胞
H4-II-E-C3细胞系相关产品:Mel-624细胞、CESS细胞、THEECs细胞
UPCISCC154细胞系相关产品:FTC133细胞、SK-N-BE(1)n细胞、138 MG细胞
H1792细胞系相关产品:IM9细胞、Caco-2BBe细胞、MRC-V细胞
COS-1 Cell:SV40转化的非洲绿猴肾细胞系
ABC1细胞系相关产品:Hs-852-T细胞、Sci-1细胞、R1800[RA]细胞
L363细胞系相关产品:alpha-TC1-6细胞、H1568细胞、S180细胞
SKES1细胞系相关产品:Madison 109细胞、Hs819.T细胞、HONE1细胞
JB6 Cl 30-7b细胞系相关产品:T-ALL-1细胞、Jurkat-77细胞、NCI-H2030细胞
COLO 680N细胞系相关产品:SVG(P12)细胞、J45.01细胞、5637细胞
HUVEC细胞系相关产品:QG-56细胞、HCC0078细胞、CL1-5细胞
CAL851细胞系相关产品:CPA 47细胞、SNU216细胞、hTERT-RPE-1细胞
MM1细胞系相关产品:MV 4;11细胞、Tregs细胞、NIH-3T3细胞
P31-FUJ细胞系相关产品:801-D细胞、HCT 15细胞、SL-29细胞
SuDHL 5细胞系相关产品:Hs 578.Bst细胞、LS-411细胞、ChaGo K-1细胞
SU8686细胞系相关产品:BRL3A细胞、PANC-28细胞、LuCL4细胞
BT 549细胞系相关产品:DU4475细胞、A-72细胞、OCI-Ly3细胞
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