"RenCa Cell:小鼠肾癌细胞系
细胞形态:上皮细胞样
细胞生长:贴壁
细胞背景资料:详见相关文献介绍
A 253细胞系相关产品:P31 FUJ细胞、HFLS-RA细胞、FOXNY细胞
HN-6细胞系相关产品:ANA-1细胞、MDA-MB 453细胞、OSA细胞
686LN-M4e细胞系相关产品:HSC-2细胞、Dx5细胞、786-O RCC细胞
CEF细胞系相关产品:Mesothelial cells transfected with pRSV-T 5A细胞、343 MG细胞、MALME 3M细胞
细胞物种来源:人源或鼠源等其它物种来源
RenCa Cell:小鼠肾癌细胞系
细胞消化过程总结:其实绝大部分细胞消化的时候是只要用胰酶润洗一遍即可,吸去胰酶后,残留的那些无法计算体积的附着在细胞表面的微量胰酶在37度一般不到2min足够消化细胞(绝大部分1min不到)。对于这些细胞原则上不要用胰酶孵育细胞,连续这样传代,对细胞伤害很大。简单的程序是PBS润洗吸去,胰酶润洗吸去,然后37度消化。2,什么算是消化好了呢?不是细胞全部成间隔分布很离散的单个圆形才算消化好了,一般你肉眼观察贴壁细胞层,只要能移动了,多半呈沙壮移动,其实已经可以了,很多人喜欢把细胞消化或者吹打成完全分离细胞,这是没有必要的。一般能移动了,说明细胞与培养基质材料的附着已经消失了,细胞之间的附着也已经消失了,细胞已经独立分布了(虽然没有呈现很广的离散分布)。这个时候应该停止消化,不要等到看到镜下所有细胞都分离得非常好,间隙很大,才停止。细胞就是完全成单个细胞悬液,之后在贴壁的过程中仍然会聚集,这个是贴壁培养的细胞,尤其是肿瘤细胞的一个特性,无论死活的细胞都是如此,你可以尝试,准备100%的单个细胞悬液,贴壁后观察细胞,仍然是几个几个细胞聚集在一起。一些悬浮培养细胞也是如此,容易聚集,不要去尝试过几个小时就拿出来吹打成单细胞悬液(不要笑,这个是初养悬浮细胞的人常犯的错误,以为悬浮培养就是一个一个分开)。细胞只要能从基质上脱离下来,这个时候即使是成片的(比如Calu-3细胞),吹打不超过20次后(一般10次即可),成小规模聚集(10个细胞左右),是正常的,不要试图再去延长消化时间,或者像有的同学那样吹打1h,等待单细胞悬液出现。比较难消化的细胞(润洗方法5min还不能消化),比如HCT15, LS411和KM12,这样的细胞一般需要用少量胰酶孵育,但也不需要很多,一般100mm dish,一次最多加入500ul,就足够了,一般我加300ul。即使这样难消化的细胞,一般不超过5min,即可见细胞成片移动,就应该停止消化。一些正常细胞也会有难消化的时候,比如tsDC细胞,但也只要用少量胰酶孵育,3min左右即可看到成片沙状移动。
细胞产品包装:复苏形式:T25培养瓶(一瓶)或冻存形式:1ml冻存管(两支)
细胞传代方法:1:2传代
常见细胞培养中一些问题总结:1)培养基中血清的比例多少合适?血清是细胞培养上一个极为重要的营养来源,所以血清的含量多少会对细胞的生长会产生极大的影响。血清的含量一般为5%-15%,不要低于5%或高过20%,因为含量过低会导致细胞营养不足,过高则会破坏渗透压平衡。一般建议血清含量为10%,可以适量加减;2)何时须更换培养基?视细胞生长密度而定,或遵照细胞株基本数据上的更换时间,按时更换培养基即可。还可以参照指示剂的颜色变化进行更换;3)购买的复苏细胞,为何会有脱落?因为运输的过程中不可避免的会有震荡,收到后可以离心收集;4)购买的细胞冷冻管经解冻后,为何会发生细胞数目太少之情形?研究人员在冷冻细胞之培养时出现细胞数目太少,大都是因为离心过程操作上的失误,造成细胞的物理性损伤,以及细胞流失。建议细胞解冻后不要立刻离心,应待细胞生长隔夜后再更换培养基即可;5)购买的细胞死亡或细胞存活率不佳可能原因?研究人员在细胞培养时出现存活率不佳,常见原因可归纳为:培养基使用错误或培养基品质不佳。血清使用错误或血清的品质不佳。解冻过程错误。冷冻细胞解冻后,加以洗涤细胞和离心。悬浮细胞误认为死细胞。培养温度使用错误。细胞置于–80°C太久;6)收到的冷冻管瓶身破裂,瓶盖有裂纹,或瓶盖脱落之原因?冷冻管瓶盖裂纹,或瓶身破裂,可能是因为操作者夹取冷冻管时用力不当,造成冷冻管裂损,建议使用止血钳小心夹取。另冷冻管瓶盖松动或松脱,乃因热胀冷缩之物理现象,冷冻管有可能因此而造成细胞污染,故冷冻管于放入和取出液氮桶时,均应立刻将冷冻管再一次扭紧。
细胞来源说明:细胞主要来源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少数国外著名大学建系
PNT1/A细胞系相关产品:HCC-1599细胞、Hs729T细胞、NRK-49F细胞
Be Wo细胞系相关产品:MDAMB330细胞、LNCaP C4-2B细胞、IMR-32细胞
HCEpiC细胞系相关产品:C2BBe1细胞、Meat Animal Research Center-145细胞、RFL-6细胞
MADB 106细胞系相关产品:HCT FET细胞、KMS18细胞、KMS18细胞
HCC-1599细胞系相关产品:B/C3T3细胞、HBEpiC细胞、Human ErythroLeukemia细胞
细胞生长特性:贴壁生长
RenCa Cell:小鼠肾癌细胞系
正确的细胞复苏需知事项:细胞冻存好了,接下来要注意什么问题呢?没错,就是记得到时间了,拿出来复苏。那么,细胞复苏的过程中又有哪些该注意的事项呢?细胞活力和形态检查的作用何在?活力检查——千万不要使用不健康的细胞,可能有污染(真菌、支原体等),如果发现有污染毫不犹豫的丢弃!形态检查——检查细胞的固有形态和生长行为。冻存细胞:补充新的培养液——在您开始冻存细胞的前一天补充新的培养液。在细胞长至70%单层时收获细胞,计数活细胞数,用冻存液调整细胞密度~5 x106 Cell s/ml (根据不同的细胞类型调整);冻存液——用冻存液洗细胞并用冻存液重悬细胞,有不同类型的冻存液,根据细胞类型选择最合适的冻存液(常用的冻存液成分有):5-10% DMSO——注意确保DMSO不含有其他的毒性物质;5-15%甘油;如果细胞在无血清培养基内生长,应在50%条件培养基内(细胞在无血清培养基内生长24小时)内冻存和复苏。在冻存管上标记好细胞类型,日期,冻存人等信息,并保证每冻存管不超过1.5ml。放入液氮罐之前记录冻存管的数量和位置。以最快的速度转移冻存管知液氮罐内,因此,此步骤使用干冰,或者把冻存管浸入装有液氮的小盒内。此外还要注意,在冻存管上没有足够的空间记录细胞的详细信息,做好记录是非常非常重要的!还有一个最重要的,一定要在异地的液氮罐内保存同样的一份细胞,以免其中的一个液氮罐出现问题!细胞正确的复苏方式和正确的冻存方式同样重要,熟记以下要点:当从液氮罐内取出细胞时,有可能会出现冻存管破裂的情况,使用保护面罩和防护服十分必要;其实,细胞复苏只是一个简单的实验,不过这其中却不可避免有一些需要注意的细节,不然,也不一定会尽如人意。例如说,人身健康方面:一定要记得做好防冻工作,戴上护目镜;尽量降低DMSO对细胞的损伤等等。
细胞形态特性:上皮细胞样
AU-565细胞系相关产品:LCLC-103H细胞、Clone 166细胞、Panc04.03细胞
J.E6-1细胞系相关产品:JROECL 33细胞、SU86_86细胞、18G3.cl 1细胞
MUS-M1细胞系相关产品:KE-37细胞、PCI-4M细胞、BNCL2细胞
Strain L-929细胞系相关产品:LED-WiDr细胞、H1915细胞、MT-4细胞
HT 1080.T细胞系相关产品:SK-Hep1细胞、HANK细胞、HFL细胞
H-1435细胞系相关产品:YD15细胞、H-2135细胞、OCI/AML2细胞
HuP-T4细胞系相关产品:LAN-6细胞、OCI/AML-2细胞、EL4细胞
RenCa Cell:小鼠肾癌细胞系
LS1034细胞系相关产品:NRK-52E细胞、NCL-H548细胞、SK-N-F1细胞
Jiyoye (P-2003)细胞系相关产品:H-1299细胞、COS1细胞、HMCB细胞
LAPC-4细胞系相关产品:MESSA Dx5细胞、COR-L51细胞、B95.8细胞
L-929细胞系相关产品:SN12PM6细胞、HANK-1细胞、Hs.27细胞
H1385细胞系相关产品:MM.1S细胞、MD Anderson-Metastatic Breast-175-VIII细胞、HeLa229细胞
Chang liver细胞系相关产品:COS-7细胞、IB-RS2细胞、L-6TG细胞
A875细胞系相关产品:SNU182细胞、U2932细胞、H820细胞
AG06814-M细胞系相关产品:J774 A.1细胞、SNU-761细胞、Walker/LLC-WRC256细胞
GM07404细胞系相关产品:639-V细胞、Pa017C细胞、OCI/AML-5细胞
GM07404细胞系相关产品:639-V细胞、Pa017C细胞、OCI/AML-5细胞
MEL-526细胞系相关产品:Tj-905细胞、HEK 293-H细胞、WILL2细胞
32D:cl3细胞系相关产品:Farage OL细胞、LS174细胞、HepG2/C3A细胞
NCI-H1563细胞系相关产品:HO-8910PM细胞、U87MG细胞、FHCRC-11细胞
L-363细胞系相关产品:H2342细胞、MCF-7细胞、SK ES 01细胞
OCI Ly1细胞系相关产品:NCIH1437细胞、P3X63 Ag8.653细胞、SUDHL-2细胞
769-P细胞系相关产品:143B细胞、MA 104细胞、RBE细胞
NCI.H226细胞系相关产品:HEC1-B细胞、5-8F细胞、NCI H508细胞
CMT167细胞系相关产品:NS1/1-Ag4.1细胞、LIM-1215细胞、MC/CAR细胞
OVCAR 433细胞系相关产品:COLO394细胞、SMMC7721细胞、RPMI 8226细胞
LOU-NH91细胞系相关产品:CAL-33细胞、MDA-MB-468细胞、RINm-5F细胞
HNSC细胞系相关产品:HCASMC细胞、MDAMB435S细胞、HEL细胞
SJ-Rh 30细胞系相关产品:LLC PK1细胞、H716细胞、RKN细胞
SW1463细胞系相关产品:H69细胞、SF539细胞、TE1细胞
H774细胞系相关产品:IAR 20细胞、C28/I2细胞、Functional Liver Cell-7细胞
HPMC细胞系相关产品:FF-WT-BJ细胞、HEL-92_1_7细胞、RFL6细胞
KS-1 [Human glioblastoma]细胞系相关产品:BEL 7405细胞、BC-021细胞、TE-7细胞
LAN-5细胞系相关产品:GA-10细胞、HCC941122细胞、HEM-L细胞
LN-18细胞系相关产品:SLK细胞、RH30SJ细胞、WM 266-4细胞
NSH细胞系相关产品:THC-8307细胞、LA-N-6细胞、HEK 293 EBNA细胞
McARH7777细胞系相关产品:NCIADR.RES细胞、MRCV细胞、MASMC细胞
TMD8细胞系相关产品:UMNSAH/DF-1细胞、H-1915细胞、SNU387细胞
KP4细胞系相关产品:NS653细胞、F9细胞、VP229细胞
Pt K2细胞系相关产品:Mouse podocyte细胞、MHCC 97-H细胞、KM12细胞
6-10B细胞系相关产品:SK-ChA-1细胞、OVCA8细胞、SU-86-86细胞
624mel细胞系相关产品:COLO206细胞、K-562细胞、HUT-28细胞
HBL100细胞系相关产品:PLB985细胞、Mel RM细胞、SU-DHL-10细胞
253JB-V细胞系相关产品:OV2008细胞、HSC-6细胞、NCI-HUT-520细胞
SR786细胞系相关产品:NOR-10细胞、NCIH1944细胞、639-V细胞
Panc8.13细胞系相关产品:GM04680细胞、Nb2a细胞、NCIH660细胞
bEnd3细胞系相关产品:OCI-LY-7细胞、T 98 G细胞、HEL9217细胞
bEnd3细胞系相关产品:OCI-LY-7细胞、T 98 G细胞、HEL9217细胞
CHL1细胞系相关产品:MBMEC细胞、NCI-H220细胞、MDA157细胞
PaTu8988s细胞系相关产品:Hs863T细胞、HCEC-B4G12细胞、HPBALL细胞
RenCa Cell:小鼠肾癌细胞系
H1650细胞系相关产品:H2171细胞、PLB-985细胞、HCCLM6细胞
MDA-MB-157细胞系相关产品:A 172细胞、KGN细胞、LOUNH91细胞
MGH-U1细胞系相关产品:OCI-AML2细胞、IM-9细胞、GM02219C细胞
SUM 52PE细胞系相关产品:OKa-C-1细胞、HT 1376细胞、NCI-H2198细胞
SHEP1细胞系相关产品:SKRC-39细胞、Panc-08.13细胞、Hs940T细胞
SHSY5Y细胞系相关产品:H1666细胞、MEF细胞、FL-83B细胞
NCI-H650细胞系相关产品:SK 1细胞、COLO394细胞、Hs 600.T细胞
Earle's L cells细胞系相关产品:MGECs细胞、NCI-SNU-620细胞、JHH7细胞
Monomac-1细胞系相关产品:H2228细胞、Panc 10.05细胞、SUM190细胞
MC3T3-E细胞系相关产品:SK-RC-42细胞、LNCaP细胞、FLC7细胞
ST-2细胞系相关产品:SW 756细胞、HEK-293-H细胞、JOSK-M细胞
YES-2细胞系相关产品:NCI-H889细胞、RC-4B/C细胞、HEK 293FT细胞
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