JB6 [Mouse] Cell:小鼠表皮细胞系

"JB6 [Mouse] Cell:小鼠表皮细胞系
细胞形态：上皮细胞样
细胞生长：贴壁
细胞背景资料：表皮；自发永生；BALB/c
H-2110细胞系相关产品：RCC 786-O细胞、Hs-729-T细胞、WC00079细胞
SCCVII细胞系相关产品：U-373MG ATCC细胞、Vx-2细胞、SiHa细胞
TGHAVSMC细胞系相关产品：HCC70细胞、Hs839.T细胞、Raji细胞
BALL1细胞系相关产品：Wien 133细胞、HEH2细胞、UCLA-SO-M21细胞
细胞物种来源：人源或鼠源等其它物种来源
JB6 [Mouse] Cell:小鼠表皮细胞系
因为细胞生长的时候肯定是要相互联系，大部分的细胞都是要成片生长的，尤其是对于贴壁细胞，单个细胞贴壁之后长着长着就长到一片去了。但是如果是成片的细胞抱团的话，传代后细胞是不能贴壁的，这样抱团的细胞就会死亡。所以，消化传代的时候一定要将细胞消化成单个单个的独立状态，这个啊是非常考究你的功夫的！细胞一旦脱落入悬液里你很难再将他吹打成单个，因为他没有受力点了。很难找到受力点让你对他吹打的力分散开细胞。所以必须要在细胞未脱落之前将其吹打开，受力点就是细胞贴壁的地方。这样你就必须要严格控制好消化的程度啊，这和大师做饭掌握好火候是一样的道理啊。既要消化到容易吹打下来，又不能太过，一吹就整片脱落，要单个单个地往下掉。所以我才要分批分次地加胰酶消化就是为了保证不同生长状态贴壁程度的细胞能够都维持在好的受力点分散开。这个是很重要的一点。尤其是对于某些细胞这一点就是他活去死的致命点。像Caco-２细胞就是如此。另外关于传代很重要一点就是一定不能等到细胞长满的时候才去消化传代。要在细胞长到７０%左右的时候就要传代了，一旦发现细胞生长中已经有叠层生长的时候就要立即进行消化传代。不能再拖了。关于换液传代时候洗瓶的问题。对于用DMEM培养基培养的细胞，你在洗的时候如果是用无血清１６４０去洗细胞在随即后的几次中会比用DMEM洗的长的要好。同样，用１６４０培养的也有这个现象。如果不嫌麻烦的话，可以用PBS来洗，洗的效果和用无血清培养基洗的效果基本上是一样的，对于有些细胞会更胜一筹。洗的目的主要是洗去培养瓶里残留的血清，防止它对胰酶的影响。这样能够保证胰酶的消化能力优先，是很关键的一点。先补充这么多，还会后续更新。再补充一点：传代时PBS洗是很重要的一步，最近发现，用PBS就可以把细胞消化开来。加入PBS放置１０-１５分钟，有些需要更长的时间，等到细胞一个个分离开来的时候，就可以直接吹打下来，但是和胰酶消化一样，要控制好时间，不能时间太过了，要不然损伤细胞，细胞不容易成活，状态容易不好。这个方法对于某些细胞是很管用的。有些细胞用胰酶消化不容易消化成单个的时候，或者临时没有胰酶了，可以选用此方法。不过一定要试试，看是否适合你的细胞。
细胞产品包装：复苏形式：T２５培养瓶(一瓶)或冻存形式：１ml冻存管(两支)
细胞传代方法：１：２-１：３传代；每周换液２-３次。
细胞常规培养传代流程(请严格遵照无菌操作)：１)吸出原培养瓶中的培养基，PBS缓冲液润洗细胞两次，加２-３ml ０.２５%胰酶进行消化细胞(注意把握消化时间，通常控制在１-２min)；２)镜下观察消化情况，在细胞边缘缩小，贴壁松动时(不建议消化到细胞漂浮)去掉胰酶，加６-８ml完全培养基，轻轻吹打细胞层，尽量把细胞层吹落，吹散；３)取部分细胞悬液转移到新的培养皿/瓶中，添加适当的完全培养基，把细胞悬液打匀，于培养箱中培养；４)注意培养基PH值变化情况，定期换液(每周２-３次)，待细胞密度达到８０%以后重复１项操作或者冻存；特别注意：(如使用公共实验室或者初次接触细胞培养，建议添加双抗培养)１)收到细胞后请尽快更换为含１５%血清的新鲜培养基，如因特殊情况需要继续使用原瓶，请在原瓶培养基中额外添加１０%的血清，(原瓶培养基的继续使用时间最长不宜超过７２小时)；２)贴壁细胞收到当天切忌立刻消化，请将细胞换液后放置培养箱孵育到第二天再做消化传代，请优先选择直径６cm的培养皿进行传代培养；３)如签收时出现培养瓶壁破裂，漏液等情况请及时做好照片记录并联系实验室。
细胞来源说明：细胞主要来源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少数国外著名大学建系
EOC20细胞系相关产品：COV-434细胞、AgC11x3A细胞、Madin-Darby Canine Kidney细胞
NCI-H510细胞系相关产品：NCI-H1755细胞、BE(2)M17细胞、BI-Mel细胞
HCC70细胞系相关产品：NCIH1819细胞、KHYG-1细胞、MCF-10 Attached细胞
Bronchial Epithelium transformed with Ad12-SV40 2B细胞系相关产品：QBC(939)细胞、JB 6细胞、HIT T15细胞
D-283细胞系相关产品：NP69细胞、NCIH2023细胞、Vero-E6细胞
细胞生长特性：贴壁
JB6 [Mouse] Cell:小鼠表皮细胞系
贴壁细胞消化传代时通常采用两种方法：一、加入胰酶等细胞脱落后，再加培养基中止胰酶作用，离心传代；二、加入胰酶后，镜下观察待细胞始脱落时，弃胰酶，加培养液分瓶。但前者太麻烦，而后者有可能对细胞施加胰酶选择，因为总是贴壁不牢的细胞先脱落，对肿瘤细胞来说，这部分细胞有可能是恶性程度较高的细胞亚群。一种简单的消化传代方法。加入PBS洗去血清或加入胰酶先中和血清的作用(３０s)，弃之，再加入适量胰酶作用１０s-４０s(根据细胞消化的难易程度)，弃之，这样依赖残余的胰酶就可将细胞消化单细胞。对于较难消化的细胞，可以用２%利多卡因消化５-８分钟，然后再弃去，加培养基吹打也可以，对细胞的影响不大。不用PBS也不用Hanks洗，只要把旧培养液吸的干净一点，直接加酶消化应该不会有什么问题。弃培养液后，用０.０４%的EDTA冲洗一次，再用１/４v的０.０４%的EDTA室温孵育５min，弃取大部分EDTA，加入与剩余EDTA等量的胰酶(预热)总体积１/１０v。消化到有细胞脱落。不过有人说EDTA对细胞不好，有证据吗？培养的BASMC：倒掉旧培养液加入少量胰酶冲一下，倒掉再加入０.１２５-０.２５%胰酶约６-１０滴或１ml(２５ml bottle)消化再加入适量新培养基中和，并分瓶这种方法简单、省事；效果很好并且不损失细胞！
细胞形态特性：详见细胞说明书
OCI-LY-18细胞系相关产品：ROS17/2.8细胞、MCA38细胞、HCC-9724细胞
KLN-205细胞系相关产品：RCS细胞、H1437细胞、Centre Antoine Lacassagne-51细胞
HMEL细胞系相关产品：Strain V细胞、HEK 293A细胞、H1184细胞
Baby Hamster Kidney-21细胞系相关产品：UMC-11细胞、SW527细胞、HCC4006细胞
GM05862细胞系相关产品：H-1404细胞、Hs695T细胞、OVCA-433细胞
Nb2a细胞系相关产品：CEM clone 7细胞、PIGI细胞、Kato-III细胞
KATO 3细胞系相关产品：WTRL1细胞、L929细胞、HCC1438细胞
JB6 [Mouse] Cell:小鼠表皮细胞系
RenCa细胞系相关产品：NIE 115细胞、SVOG细胞、MT-2细胞
H548细胞系相关产品：Jurkat, Clone E6-1细胞、CCD18Co细胞、TSCCa细胞
KY-270细胞系相关产品：B78细胞、H1688细胞、COV362细胞
MLO-Y4细胞系相关产品：HELF细胞、Hs 832(C).T细胞、Jiyoye (P-2003)细胞
D562细胞系相关产品：MIA-PaCa-2细胞、HFT8810细胞、SHSY5Y细胞
H524细胞系相关产品：MN-60细胞、H1781细胞、GM3569细胞
Okayama University Medical School-27细胞系相关产品：EHEB细胞、HT 1080.T细胞、2008细胞
SV-HUC-1细胞系相关产品：Neuro 2a细胞、NCI-UMC-11细胞、NCI-SNU-475细胞
GOS-3细胞系相关产品：SW-837细胞、8305C_1细胞、OV-90细胞
Doubling time: ~50 hours (ATCC).细胞系相关产品：OV1/P细胞、HFL细胞、RBSMC细胞
HEC1B细胞系相关产品：PTK 2细胞、MIMVEC细胞、OE-21细胞
OS-732细胞系相关产品：6T-CEM细胞、H-EMC-SS细胞、M-1细胞
Y-79细胞系相关产品：MBT2细胞、DITNC1细胞、CX-1细胞
Hepatoma-22细胞系相关产品：NCI.H522细胞、Colo320细胞、B-104细胞
GM3190细胞系相关产品：RS4-11细胞、C17.2细胞、Hep 3B2.1-7细胞
LS-180细胞系相关产品：COLO678细胞、ABC1细胞、K1735细胞
SUP T1细胞系相关产品：BT-325细胞、MT-2细胞、SKNF1细胞
VMCUB-1细胞系相关产品：Huh 7.5.1细胞、NB1RGB细胞、NOR10细胞
NCIH1623细胞系相关产品：MRC5细胞、PLA801-95D细胞、HRA19细胞
TM-3细胞系相关产品：LS174细胞、3T3-A31细胞、746T细胞
Walker256-TC细胞系相关产品：WM239细胞、SW-954细胞、HN4细胞
Walker256-TC细胞系相关产品：WM239细胞、SW-954细胞、HN4细胞
PC3M-1E8细胞系相关产品：CEMx721.174.T2细胞、MC3T3-E1 Subclone 4细胞、Hs839.T细胞
C-32细胞系相关产品：EST81细胞、Cloudman M3细胞、UK Pan-1细胞
MHH-CALL2细胞系相关产品：D-283MED细胞、W133细胞、BE(2)-C细胞
GM00215细胞系相关产品：OS-RC-2细胞、NCIH524细胞、OCI AML2细胞
P3-Jiyoye细胞系相关产品：M-NFS-60细胞、SHZ-88细胞、SK-RC-39细胞
C6细胞系相关产品：NCIH1975细胞、GNM细胞、MUTZ-3细胞
LNCaP.FGC细胞系相关产品：NB-19细胞、B10BR细胞、SW-1417细胞
LOUNH91细胞系相关产品：CCD-112 CoN细胞、HSC-T6细胞、Vx-2细胞
SW1088细胞系相关产品：P3X63NS1细胞、SUDHL-2细胞、SW-1573细胞
HCe-8693细胞系相关产品：MOLM-16细胞、UACC893细胞、OCIAML5细胞
HBE 135-E6E7细胞系相关产品：SaOS细胞、HPAEpiC细胞、Clone 929细胞
IALM细胞系相关产品：DMS273细胞、COS7细胞、C28/I2细胞
NEC细胞系相关产品：U14细胞、H1355细胞、Clone M-3细胞
HCC2108细胞系相关产品：BNCL2细胞、MXI细胞、SW1783细胞
T_T_细胞系相关产品：BN-CL2细胞、NCIH82细胞、LP1细胞
697细胞系相关产品：NUGC3细胞、CCD 841 CoN细胞、NCI-H841细胞
OVCAR 4细胞系相关产品：TSCC1细胞、HIEC细胞、NPA-87细胞
Moorfields/Institute of Ophthalmology-Muller 1细胞系相关产品：PC 12细胞、NCI-H810细胞、Hs 578.T细胞
Moorfields/Institute of Ophthalmology-Muller 1细胞系相关产品：PC 12细胞、NCI-H810细胞、Hs 578.T细胞
SW-839细胞系相关产品：OCILY19细胞、H-87细胞、Hi5细胞
H-2052细胞系相关产品：SUM149-PT细胞、SCL II细胞、Hs 863.T细胞
JB6 [Mouse] Cell:小鼠表皮细胞系
H1915细胞系相关产品：MNNG/HOS细胞、AD293细胞、SCC 25细胞
C4-2细胞系相关产品：BC-024细胞、NCI-H1693细胞、MDAMB453细胞
Ketr3细胞系相关产品：HRA19细胞、VE细胞、RPMI7666细胞
Rat Skin 1细胞系相关产品：UCLA SO M21细胞、B16BL-6细胞、CAL39细胞
SCC4细胞系相关产品：COLO 201细胞、SMA 560细胞、Pt K2细胞
Tn5 B1-4细胞系相关产品：CORL51细胞、UCLA-RO 81细胞、B-3细胞
253J-Bladder-V细胞系相关产品：LA 4细胞、KMST-6细胞、PAI细胞
MGC803细胞系相关产品：A2780-CP细胞、SK-GT-4细胞、CEM细胞
SKRC-42细胞系相关产品：H-1618细胞、Ra No. 1细胞、NK-92MI细胞
MES-SA/Dx-5细胞系相关产品：RS1细胞、HEK 293T/17细胞、HSCT6细胞
PC-9S1细胞系相关产品：TK 10细胞、MDA-MB436细胞、RMG-I细胞
Mel RM细胞系相关产品：MFC细胞、RS(4;11)细胞、H647ell细胞
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