"253J Cell:人膀胱癌细胞系
细胞形态:上皮细胞样
细胞生长:贴壁
细胞背景资料:膀胱癌;淋巴结转移;男性
NCIH226细胞系相关产品:H-524细胞、LTPA细胞、COLO320DM细胞
LA795细胞系相关产品:Vero from pool #76细胞、HLF-a细胞、OVCAR-5细胞
COLO824细胞系相关产品:U87MG细胞、G422细胞、H146细胞
EFM-19细胞系相关产品:SKMES细胞、RD-ES细胞、HT-115细胞
细胞物种来源:人源或鼠源等其它物种来源
253J Cell:人膀胱癌细胞系
细胞冻存基本方法:1.细胞:选对数生长期细胞,收集细胞24小时前换液一次。2.计数:按常规方法把细胞制成细胞悬液,计数,令细胞密度达5×10(6)/ml,离心去上清,吸入离心管中。3.冻存液:先用培养液9分+DMSO 1分(或甘油)配成10%的DMSO冻存液,按上法一滴滴加入离心管中,然后用吸管轻轻吹打令细胞重悬。4.分装:分装入无菌安剖中,每安剖加1.5毫升细胞悬液。5.封口:用塑料安剖时拧紧瓶口即可;如用火焰封闭安剖口后,仔细检查,定要封严,必要时可浸入蓝色液中观察,为安全起见,把安剖缝入纱布小袋中,以防液氮浸入后,融解时因受热发生爆炸伤人;纱袋一端系以线绳,末端扎有小牌,注明:细胞名称,冻存日期,以便日后查找。细胞株(系)的使用,为医学研究和测试工作带来了极大的方便。但细胞的传代是有限制的,长期连续传代的细胞,不仅消耗大量的人力和物力,而且细胞的生长与形态等会有一定退变或转化,因而细胞失去原有的遗传特性,有时还会由于细胞污染而造成传代中断,种子丢失。因此,在实际工作中常需冻存一定数量的细胞,以备替换使用。细胞冷冻与复苏是细胞培养 室的常规工作和通用技术。
细胞产品包装:复苏形式:T25培养瓶(一瓶)或冻存形式:1ml冻存管(两支)
细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。
细胞培养实验中常见问题总结:1)一般客户拿到细胞后,应该注意什么?客户收到细胞后先不开盖,放在培养箱静置若干小时后(看细胞密度而定)在倒置显微镜下观察细胞生长情况,并对细胞进行不同倍数拍照(建议受收细胞后观察培养基的颜色和是否有漏液情况,显微镜下拍细胞100X,200X各一张),排除细胞本身污染的情况;收到细胞未开封,出现污染状况我们负责免费发送一株细胞。收到细胞时如无异常情况,请在显微镜下观察细胞密度,如为贴壁细胞,未超过80%汇合度时,将培养瓶中培养液吸出,留下10ml培养液继续培养;超过80%汇合度时,请按细胞培养条件传代培养。如为悬浮细胞,吸出培养液、1000转/分钟离心2分钟,吸出上清,管底细胞用新鲜培养基悬浮细胞后移回培养瓶。细胞消化液建议使用PBS配制,慎用Hanks液配制;2)快递细胞多久能到,是寄冻存的细胞还是复苏好的细胞?我们采用快递发货,一般外地2--3天,寄细胞前请确认当地温度,如果气温低于4度的,则采用邮寄冻存细胞;3)可否使用与原先培养条件不同之培养基?不能。每一细胞株均有其特定使用且已适应之细胞培养基,若骤然使用和原先提供之培养条件不同之培养基,细胞大都无法立即适应,造成细胞无法存活;4)可否使用与原先培养条件不同之血清种类?不能。血清是细胞培养上一个极为重要的营养来源,所以血清的种类和品质对于细胞的生长会产生极大的影响。来自不同物种的血清,在一些物质或分子的量或内容物上都有所不同,血清使用错误常会造成细胞无法存活。
细胞来源说明:细胞主要来源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少数国外著名大学建系
SKG3A细胞系相关产品:IOSE29细胞、B-3细胞、SW-48细胞
KCL22S细胞系相关产品:Stanford University-Diffuse Histiocytic Lymphoma-10细胞、SHG-44细胞、SK UT 1细胞
I90细胞系相关产品:MES 13细胞、SW1463细胞、INS-1细胞
RPMI-8226S细胞系相关产品:RCSMC细胞、C32 mel细胞、HT115细胞
HCFB(HCF)细胞系相关产品:WEHI-231细胞、MG63细胞、OVCAR 420细胞
细胞生长特性:贴壁
253J Cell:人膀胱癌细胞系
细胞复苏后贴壁细胞较少的问题分析:总结1:复苏过程没有问题,是否是从液氮拿出直接放入温水,还有培养箱,二氧化碳浓度,培养基、PH值等环节。要么加高浓度FBS 15-20%,看看能否帮助贴壁,当然也需要考虑血清问题,还有确信拿来的细胞没问题。总结2:首先应该怀疑冻存,实际上复苏出问题的可能非常小,因为操作简单,而且死板。1、你冻存的时候是不是消化的时间过长,这是一般人所注意不到的,即使书上也不讲这个问题,太长的消化时间会让细胞复苏时失去贴壁能力,表现为先贴后死,原因是在你复苏的时候细胞已进入凋亡程序,不可逆转的死亡。2、你的冻存液好不好,是什么,甘油还是DMSO,质量非常重要,否则也会死亡。3、你的冻存液的量加的是不是太多,ATCC推荐是不超过7%,大于5%,太多也不好。4、你在冻存的时候是不是把DMSO混均匀,这个有一些影响,但不算太大。5、你的冻存是否按部就班,就是所温度梯度是不是把握严格,很多人容易忘却这个事情,因为这个东西流程长。6、如果你细胞污染,你是否能很快看到,我比我的导师能早一天看到污染。从这个角度讲建议去除离心这步。7、你的细胞在冻存前是否过密。还有,不赞成孵箱污染这个概念的,所有在一个孵箱里的细胞都污染一个细菌的话,这个细菌是源于孵箱的,但这不代表孵箱污染,因为孵箱无论你如何处理都有大量的细菌,问题在操作。每次污染的原因都要尽可能的找,以后就不犯同样的问题,这个很重要,不能靠猜,否则你就有可能细胞养绝最后换课题,这个见得太多了,别不当会事。
细胞形态特性:详见细胞说明书
REC细胞系相关产品:JROECL21细胞、SUD6细胞、C4-2B细胞
FDCP1细胞系相关产品:RT4P细胞、CCRF/CEM细胞、COR-L23细胞
MDA-MB-435细胞系相关产品:NCI-H28细胞、3T3 L1细胞、HEK 293FT细胞
ssMCF-7细胞系相关产品:NCI-SNU-C1细胞、NCI.H522细胞、AZ 521细胞
BNL 1ME A.7R.1细胞系相关产品:HCC2218细胞、SW 1573细胞、COLO 684细胞
GM07404A细胞系相关产品:SNU407细胞、HTori-3细胞、CTLL(2)细胞
H1755细胞系相关产品:Panc_04_03细胞、ME180细胞、MDAPCa-2b细胞
253J Cell:人膀胱癌细胞系
DMS-153细胞系相关产品:H2052_MM细胞、OV 2008细胞、BJAB细胞
HNE1细胞系相关产品:RINm5F细胞、TE-14细胞、AX-Mel细胞
H1693细胞系相关产品:PC-14细胞、QGY7703细胞、NE1-E6E7细胞
RPMI #1846细胞系相关产品:KE37细胞、HSC4细胞、HS578T细胞
MA-c细胞系相关产品:H69/P细胞、UMUC-3细胞、Alexander cells细胞
SKNEP1细胞系相关产品:PG-LH7细胞、BV173细胞、HT3细胞
WERI Rb-1细胞系相关产品:LY细胞、SW1116细胞、U-343 MG细胞
NBLS细胞系相关产品:CEF细胞、RT-BM 1细胞、RK 13细胞
ARPE-19细胞系相关产品:CoCL3细胞、TMK-1细胞、MDA 1386细胞
ARPE-19细胞系相关产品:CoCL3细胞、TMK-1细胞、MDA 1386细胞
HCM细胞系相关产品:HEK-AD293细胞、AG 9细胞、WIL2-S细胞
87 MG细胞系相关产品:Hs888 Lu细胞、KU.812细胞、HSC-T6细胞
U118MG细胞系相关产品:NCI-H2141细胞、TCCSUP细胞、SNU-878细胞
RIN Cl-5F细胞系相关产品:SNB19细胞、HCC9204细胞、GM15452细胞
CMT-167细胞系相关产品:SCLC21H细胞、Hs-578-T细胞、SU8686细胞
LLC1细胞系相关产品:JHH-7细胞、MDA-MB435细胞、JROECL33细胞
HOP 62细胞系相关产品:SNU886细胞、NCI-SNU-16细胞、H-1105细胞
50.B1细胞系相关产品:TOV21G细胞、WIL2 S细胞、SW579细胞
MDA330细胞系相关产品:Pt K2细胞、PG [Human lung carcinoma]细胞、ROS-17/2.8细胞
AZ 521细胞系相关产品:A72细胞、H1651细胞、U-343-MG细胞
293-FT细胞系相关产品:P3-NS1/1Ag 4.1细胞、H-2066细胞、LADMAC细胞
GM00637B细胞系相关产品:Neukoplast细胞、L-M(TK-)细胞、alphaTC1 Clone 6细胞
OV 2008细胞系相关产品:FOXNY细胞、HFF-1细胞、NCI-H78细胞
IA-LM细胞系相关产品:CCD-19Lu细胞、H2009细胞、H-220细胞
FU-MMT-1细胞系相关产品:KG-1a细胞、H-522细胞、SK-Mel 2细胞
SK Col 1细胞系相关产品:KOSC-2细胞、NCIH2228细胞、NCI H929细胞
NCIH2081细胞系相关产品:74Int细胞、HPAFII细胞、Homo sapiens No. 578, breast cells细胞
TKB1细胞系相关产品:Anip[973]细胞、GM05862细胞、NCI-H1694细胞
TSCC1细胞系相关产品:SW-756细胞、M4e细胞、HuP-T4细胞
ME-1 [Human leukemia]细胞系相关产品:Murine Thymic Epithelial Cell line 1细胞、U373MG细胞、NCIH2591细胞
ChaGo K-1细胞系相关产品:UCH1细胞、HIT clone T15细胞、KYSE 510细胞
MDA-MB-330细胞系相关产品:U-226AR1细胞、SNU-216细胞、HLE B-3细胞
Ca759细胞系相关产品:130T细胞、C3H10T1/2CL8细胞、OAC-P4C细胞
786.O细胞系相关产品:NCIH2347细胞、Caov-3细胞、NCIH1838细胞
SJSA1细胞系相关产品:L2细胞、CL34细胞、SHG44细胞
OCIAML2细胞系相关产品:DF1细胞、Hk-2细胞、GM00637I细胞
BALB/3T3 cl. A31细胞系相关产品:RCK-8细胞、HEK 293-F细胞、CTV-1细胞
H2108细胞系相关产品:MES-13细胞、H-2405细胞、NCIH69细胞
GC-2spd(ts)细胞系相关产品:Lilly Laboratories Cell-Monkey Kidney 2细胞、TMD8细胞、SKNBE-1细胞
MDA MB231细胞系相关产品:GS-9L细胞、T-ALL1细胞、KMST-6细胞
Murine Thymic Epithelial Cell line 1细胞系相关产品:T-84细胞、Lilly Laboratories Cell-Porcine Kidney 1细胞、PA I细胞
C28/I2细胞系相关产品:CHO/dhFr-细胞、Hos TE-85细胞、526 mel细胞
Hs 766细胞系相关产品:SUM52PE细胞、A172细胞、HF-91细胞
253J Cell:人膀胱癌细胞系
NCIH1781细胞系相关产品:Jijoye细胞、NRK52E细胞、Sarcoma OSteogenic-2细胞
NCI-H2126细胞系相关产品:NCIH1651细胞、BNL-HCC细胞、H-441细胞
UMR106细胞系相关产品:TGW-nu细胞、Panc203细胞、Mouse INsulinoma 6细胞
A204细胞系相关产品:HuT 102细胞、KY-270细胞、TK10细胞
KP-N-NS细胞系相关产品:CV 1细胞、NTERA-2cl.D1细胞、OVCAR420细胞
U-266 AR1细胞系相关产品:DI TNC1细胞、SU86.86细胞、H1819细胞
SF763细胞系相关产品:H510A细胞、MONO-MAC 6细胞、PBMC细胞
Laboratory of Allergic Diseases 2细胞系相关产品:SU-DHL-1细胞、Hep 3B2_1-7细胞、GM-215细胞
DHBE细胞系相关产品:SW900细胞、Suzhou Human Glioma-44细胞、Hep 3B2_1-7细胞
MB468细胞系相关产品:Pt-K2细胞、BT325细胞、HEK-293A细胞
H-748细胞系相关产品:Mel624细胞、MARC 145细胞、SK-RC 39细胞
MDCK细胞系相关产品:SK-BR-3细胞、FHL124细胞、OVCA420细胞
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