"KYSE-450 Cell:人食管癌细胞系
细胞形态：上皮细胞样
细胞生长：贴壁
细胞背景资料：详见相关文献介绍
GBC-SD细胞系相关产品：Alexander细胞、Hx-147细胞、PL5细胞
Sarcoma OSteogenic-2细胞系相关产品：8305C_1细胞、MZ-CRC-1细胞、MC116细胞
H1581细胞系相关产品：HSC-6细胞、L 132细胞、SPDC-CCL141细胞
MDA231-LM2细胞系相关产品：NCI H716细胞、MA-782细胞、Reuber H-35细胞
细胞物种来源：人源或鼠源等其它物种来源
KYSE-450 Cell:人食管癌细胞系
细胞消化过程总结：其实绝大部分细胞消化的时候是只要用胰酶润洗一遍即可，吸去胰酶后，残留的那些无法计算体积的附着在细胞表面的微量胰酶在３７度一般不到２min足够消化细胞（绝大部分１min不到）。对于这些细胞原则上不要用胰酶孵育细胞，连续这样传代，对细胞伤害很大。简单的程序是PBS润洗吸去，胰酶润洗吸去，然后３７度消化。２，什么算是消化好了呢？不是细胞全部成间隔分布很离散的单个圆形才算消化好了，一般你肉眼观察贴壁细胞层，只要能移动了，多半呈沙壮移动，其实已经可以了，很多人喜欢把细胞消化或者吹打成完全分离细胞，这是没有必要的。一般能移动了，说明细胞与培养基质材料的附着已经消失了，细胞之间的附着也已经消失了，细胞已经独立分布了（虽然没有呈现很广的离散分布）。这个时候应该停止消化，不要等到看到镜下所有细胞都分离得非常好，间隙很大，才停止。细胞就是完全成单个细胞悬液，之后在贴壁的过程中仍然会聚集，这个是贴壁培养的细胞，尤其是肿瘤细胞的一个特性，无论死活的细胞都是如此，你可以尝试，准备１００%的单个细胞悬液，贴壁后观察细胞，仍然是几个几个细胞聚集在一起。一些悬浮培养细胞也是如此，容易聚集，不要去尝试过几个小时就拿出来吹打成单细胞悬液（不要笑，这个是初养悬浮细胞的人常犯的错误，以为悬浮培养就是一个一个分开）。细胞只要能从基质上脱离下来，这个时候即使是成片的（比如Calu-３细胞），吹打不超过２０次后（一般１０次即可），成小规模聚集（１０个细胞左右），是正常的，不要试图再去延长消化时间，或者像有的同学那样吹打１h，等待单细胞悬液出现。比较难消化的细胞（润洗方法５min还不能消化），比如HCT１５, LS４１１和KM１２，这样的细胞一般需要用少量胰酶孵育，但也不需要很多，一般１００mm dish，一次最多加入５００ul，就足够了，一般我加３００ul。即使这样难消化的细胞，一般不超过５min，即可见细胞成片移动，就应该停止消化。一些正常细胞也会有难消化的时候，比如tsDC细胞，但也只要用少量胰酶孵育，３min左右即可看到成片沙状移动。
细胞产品包装：复苏形式：T２５培养瓶(一瓶)或冻存形式：１ml冻存管(两支)
细胞传代方法：１：２传代
培养细胞真的不难，最关键几点：１)所有的东西使用，如果你用的血清、培养皿、培养基、胰酶什么的都是进口的，真的很难相信你会把细胞养坏；２)动作要快，胰酶消化，换液什么，细胞暴露在空气中的时间越少越好。另外，要掌握好胰酶消化时间，所谓的细胞状态差，很多时候是传代的原因；３)有时间的话，需要细胞计数，传相应数目的细胞到培养皿中，可以大致清楚细胞的生长曲线，不会临时要处理，手足无措；４)要做什么心里要非常清楚，合理安排时间，传代细胞的实验穿插进行，可以节省很多时间，也不会耽误别人的实验；５)个人的实验器具自己收一套，不要和别人混用，最近换了什么新的东西稍微记一下，试剂一旦怀疑污染，马上丢；６)传代细胞不能进去太多人，避免相互干扰。每天对待细胞比孝敬爹妈还用心，那真是捧在手里怕碎了，含在嘴里怕化了，看在眼里怕丢了，培养细胞时有哪些经验教训可以分享呢?１)严格无菌操作，多喷喷酒精，要是对灭菌的东西不放心，自己包自己送自己烘干；２)不要和别人共用试剂耗材，自己准备一套；３)有可能的话在拿到新细胞的时候做好支原体衣原体检测；４)水浴锅很脏，生化培养箱要是得手动加湿的话盘里的水也会很脏，勤换(灭菌水加进去)；５)晚上离开的时候给传代细胞照紫外，超净台是用完就开；６)是同一时间就你一个人在用传代细胞在养细胞。
细胞来源说明：细胞主要来源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少数国外著名大学建系
mRTEC细胞系相关产品：MOLM-14细胞、MES13细胞、LL2细胞
BE(2)M-17细胞系相关产品：P3X63 AG8-653细胞、GM00637B细胞、50.B1细胞
A2058细胞系相关产品：SW-480细胞、AMC-HN8细胞、A7r5细胞
253J-Bladder-V细胞系相关产品：LA 4细胞、KMST-6细胞、PAI细胞
COLO 738细胞系相关产品：T 98 G细胞、Hs 688(A).T细胞、P560细胞
细胞生长特性：贴壁生长
KYSE-450 Cell:人食管癌细胞系
细胞复苏相关注意事项：１.取细胞的过程中注意带好防冻手套，护目镜。此项尤为重要，细胞冻存管可能漏入液氮，解冻时冻存管中的气温急剧上升，可导致爆炸。２.冻存液的问题：冻存液的配置已是常识，在这里不作详述，但二甲基亚砜(DMSO )对细胞不是完全无毒副作用，在常温下，二甲基亚砜对细胞的毒副作较大，因此，必须在１-２min内使冻存液完全融化。如果复苏温度太慢，会造成细胞的损伤，二甲基亚砜(DMSO)选择进口产品。３.离心前须加入少量培养液。细胞解冻后二甲基亚砜浓度较高，注意加入少量培养液可稀释其浓度，以减少对细胞的损伤。４.离心问题：目前主要有两种见解。一种是解冻后的细胞悬液直接吹打均匀后分装到培养瓶中进行培养，第二天换液。因为离心的目的是两个，去除DMSO，去除死细胞，这个是标准流程，但对一般人来说，把握不好离心转速和时间，转的不够活细胞沉底的少，细胞就全被扔掉了，转过了活细胞会受压过大，死亡。此外在操作过程中容易污染，所以不推荐。另一种说法为细胞悬液中含有二甲基亚砜(DMSO)，DMSO对细胞有一定的毒副作用，所以须将离心后的液体前倒净，且一定倒干净。我在试验中按照常规的离心分装的方法进行复苏，结果无异常。５.细胞贴壁少的问题：教科书中说明冻存细胞解冻时１ml细胞液要加１０ml-１５ml培养液，而在我的试验中的经验总结为培养基越少细胞越容易贴附。６.复苏细胞分装的问题：试验中我的经验总结为复苏１管细胞一般可分装到１-２只培养瓶中，分装过多，细胞浓度过低，不利于细胞的贴壁。７.加培养基的量放入问题：这个量的多少的把握主要涉及到的问题DMSO的浓度，从如果你加培养基的太少，那么DMSO的浓度就会比较大，就会影响细胞生长，从以前的资料来看，DMSO的浓度在小于０.５%的时候对一般细胞没有什么影响，还有一个说法是１%。所以如果你的冻存液的浓度是１０%DMSO的话那么加１０ml以上的培养基就恰好稀释到了无害浓度。
细胞形态特性：详见细胞说明书
MDAPC2B细胞系相关产品：M07e细胞、H2106细胞、SF539细胞
MFE 296细胞系相关产品：SK UT 1细胞、RPMI-7666细胞、NCI-SNU-1040细胞
BIU87细胞系相关产品：H2591细胞、NCI-H358细胞、HSAEC1-KT细胞
BALB/c 3T3 clone A31细胞系相关产品：SVHUC细胞、SUM-159细胞、H-1573细胞
U-87MG细胞系相关产品：D341Med细胞、B16/BL6细胞、TT细胞
NCIH1092细胞系相关产品：RCC-JF细胞、D283细胞、SK-OV-433细胞
SW-480细胞系相关产品：NCI-H78细胞、MSB-1细胞、BALL-1细胞
KYSE-450 Cell:人食管癌细胞系
Bovine Turbinate细胞系相关产品：MARC-145细胞、TCC-PAN2细胞、RPMI-1846细胞
LK 2细胞系相关产品：MZ-CRC-1细胞、LADMAC细胞、J774 A1细胞
Reuber H-35细胞系相关产品：STO细胞、Hs940-T细胞、PL 5细胞
FL62891细胞系相关产品：PCI-SG231细胞、SNU-601细胞、SNU-668细胞
SRA 01/04细胞系相关产品：HN4细胞、CEM-0细胞、MC38细胞
Swiss 3T3细胞系相关产品：JROECL 19细胞、624细胞、HNE2细胞
DMS273细胞系相关产品：CF PAC-1细胞、CC-LP-I细胞、P-815细胞
AR4-IP细胞系相关产品：S3 HeLa细胞、Scott and White No. 13细胞、Rat Fetal Lung-6细胞
C-32细胞系相关产品：EST81细胞、Cloudman M3细胞、UK Pan-1细胞
C-32细胞系相关产品：EST81细胞、Cloudman M3细胞、UK Pan-1细胞
A-875细胞系相关产品：OVCA-433细胞、Helacyton gartleri细胞、MIA Paca2细胞
CMT64细胞系相关产品：LN382细胞、Ramos(RA1)细胞、LMH细胞
MDAMB157细胞系相关产品：MRC-V细胞、H-596细胞、no-11细胞
CCD-33Co细胞系相关产品：HMC细胞、SKNEP-1细胞、SBC3细胞
C81-61细胞系相关产品：JB 6细胞、Hs 445细胞、Panc8.13细胞
J82细胞系相关产品：Y1细胞、SW-480细胞、CAKI 1细胞
MMVECs细胞系相关产品：MFE 280细胞、MOLT16细胞、JIMT1细胞
SK Mel 2细胞系相关产品：VK2细胞、H.Ep. No. 2细胞、GH3细胞
SKML-28细胞系相关产品：CT26.CL25细胞、TE32细胞、PG13细胞
SF-295细胞系相关产品：HSMC细胞、SUM-149PT细胞、Ly8细胞
COLO 684细胞系相关产品：NCI-SNU-620细胞、AtT-20细胞、SKMEL2细胞
C4I细胞系相关产品：V 79-4细胞、SL-1细胞、MUM2B细胞
NCI-H2444细胞系相关产品：MPC-5细胞、NCI-H2009细胞、KPL4细胞
LNT-229细胞系相关产品：H1435细胞、MAVER-1细胞、C-33A细胞
Ball 1细胞系相关产品：KM-H2细胞、HMEC1细胞、GM03569B细胞
NCIH1573细胞系相关产品：CT26细胞、KYSE50细胞、MOVAS细胞
UCLA-SO-M14细胞系相关产品：C22细胞、NCIH1563细胞、MLE 12细胞
BC-3H-1细胞系相关产品：H766T细胞、BALB/3T3 (clone A31)细胞、MCA 205细胞
F-81细胞系相关产品：BIC细胞、WM266细胞、X63细胞
HA细胞系相关产品：HOS/MNNG细胞、UCW 100细胞、SCC VII细胞
HEC1B细胞系相关产品：PTK 2细胞、MIMVEC细胞、OE-21细胞
Fao细胞系相关产品：RPMI #8226细胞、Keio University-19-19细胞、BEL 7402细胞
OE19细胞系相关产品：Panc-10.05细胞、BT 20细胞、DH82细胞
MUVEC细胞系相关产品：SCC-25细胞、MOLT-3细胞、SNB19细胞
MRC-9细胞系相关产品：NCIH1155细胞、Hep-3B细胞、SNU-C2A细胞
LC-2/ad细胞系相关产品：TE-85 clone 5细胞、SDBMSC细胞、AG 9细胞
TE10细胞系相关产品：V-79-4细胞、GM12878细胞、MPC5细胞
LC-1Sq细胞系相关产品：NCIH2172细胞、Hs 281.T细胞、Ramos G6.C10细胞
RPMI8402细胞系相关产品：C-33 A细胞、MDCC MSB1细胞、Rat 1细胞
NCI H929细胞系相关产品：SUM 159细胞、J82COT细胞、CCRF-CEM细胞
NH6细胞系相关产品：MonoMac6细胞、WERI细胞、HDQ-P1细胞
VeroC1008细胞系相关产品：Bronchial Epithelium transformed with Ad12-SV40 2B细胞、CEMO-1细胞、EST81细胞
A-427细胞系相关产品：D407细胞、Centre Antoine Lacassagne-62细胞、SL-1细胞
KYSE-450 Cell:人食管癌细胞系
Japanese Tissue Culture-28细胞系相关产品：HuH-28细胞、Pa18C细胞、Molm14细胞
UMR 106细胞系相关产品：SW 1990细胞、BSC1细胞、PC-3M-IE8细胞
Colon26细胞系相关产品：ABE8.1/2细胞、TE 85.T细胞、BCECs细胞
Tn5 B1-4细胞系相关产品：CORL51细胞、UCLA-RO 81细胞、B-3细胞
CWR22-Rv1细胞系相关产品：P3-X63-Ag8-6-5-3细胞、Hs822T细胞、Panc203细胞
MV-4-11细胞系相关产品：OCILY-3细胞、SPC-A1细胞、UACC-893细胞
H-1417细胞系相关产品：CFPAC1细胞、NCIH1581细胞、KOSC-2 cl3-43细胞
FRhK-4细胞系相关产品：IEC-18细胞、EA hy 926细胞、WEHI-164细胞
NPC-TW 039细胞系相关产品：Leghorn Male Hepatoma cell line细胞、LLC PK1细胞、CAL51细胞
SupB15W细胞系相关产品：SNU387细胞、EOMA细胞、COLO-16细胞
C4-2细胞系相关产品：BC-024细胞、NCI-H1693细胞、MDAMB453细胞
XWLC-05细胞系相关产品：H1770细胞、NCI-HUT-69细胞、Hela-Ap-1细胞
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