RWPE-2 Cell:人正常前列腺上皮细胞系

"RWPE-2 Cell:人正常前列腺上皮细胞系
细胞形态：上皮细胞样
细胞生长：贴壁
细胞背景资料：详见相关文献介绍
H-35 Reuber细胞系相关产品：COLO 394细胞、SHSY5Y细胞、HCC1569细胞
A-375细胞系相关产品：H647ell细胞、A.704细胞、Hs683T细胞
MBdSMC细胞系相关产品：NCIH810细胞、MC3T3-E细胞、HCT.116细胞
Caco-2/BBe 1细胞系相关产品：SW620细胞、RA-FLSs细胞、SK HEP-1细胞
细胞物种来源：人源或鼠源等其它物种来源
RWPE-2 Cell:人正常前列腺上皮细胞系
细胞传代时消化的问题：可以这样说，对于需要消化传代的细胞，每一次的消化都是对这个细胞存活与否，状态好与不好最至关重要的考验。很多同学都遇到过这个问题，自己养的细胞开始的几代长的还挺好的，可是穿过几代之后就发现自己的细胞，状态越来越差劲了。对于这个问题，可以非常肯定地说，你的消化环节出问题了。你每一次的消化都让细胞受到较大损伤了。所以，越长越差。在消化的过程中，你加入胰酶后，所有细胞都在被胰酶消化着，但是我们忽视了一个问题就是，细胞的生长状态是不一样的，每一个细胞的贴壁情况也是不一样的，有的贴壁牢固，有的贴壁没有那么牢固的，所以，让所有的细胞消化同样的时间对细胞是不公平的，他们受到了差别待遇当然会有脾气啊。我后来对消化的方法进行了改良。争取做到因材施教呵呵。我称之为“四步消化法”。（以难消化细胞为例）；具体操作：１)首先不加胰酶，倒掉旧培养基加入少量新培养基洗１-２遍，（这是前奏，即为步，目的是将漂浮着的死细胞之类尽量洗掉。２)然后再加入少量新培养基直接吹打一遍，这一遍是把贴壁不牢固的细胞吹打下来。再用培养基洗一遍，两次所得悬液混合传入新瓶。即为第二步（你可以将这些传入新瓶培养，以与后面胰酶消化过的细胞对比观察看谁长的更好一点就知道该细胞对胰酶的敏感度了。）３)吸干净瓶内剩余液体，加入０.３ml左右的胰酶润洗一遍，吸掉弃之，再加入１ml左右的胰酶消化。消化的同时置于显微镜下观察，待细胞与细胞之间间隙明显的时候立即吸掉胰酶与干净子弹头里备用，加入新培养基开始吹打，吹打２-３遍后吸取悬液于试管或新瓶暂存。用２ml左右新培养基洗一遍与前面的混合。（你也可以传入新瓶培养，以与后面及前面的做对比。）这是第三步。４)然后把前面刚吸出来的胰酶重新加进去瓶里继续消化剩余的贴壁牢固的细胞。当然你也可以用新的胰酶，如果你们那比较富裕的话，呵呵。继续镜下观察，待剩余细胞间隙明显，细胞独立开来的时候，吸掉胰酶，加入新培养基吹打。悬液传入新瓶培养（根据实际情况你自己把握）。这是第四步。其实还可以有第五步，对于特别难消化的细胞和对胰酶特别敏感的细胞的话，你可以继续加第五步甚至第六步。为了细胞更好的状态，更漂亮的样子，没办法，你必须分多批多次消化，这样才能限度地将胰酶对细胞的损伤降到最低，保证细胞的状态能够。当然了，如果细胞是属于那种很容易消化的细胞，像RAW２６４.７，仅仅第二步就搞定了。就没必要第三步第四步了。这个是需要你在实验中能够自己用心去体会的。建议你接受一个新细胞时把各步消化的细胞分别培养起来做比较，去摸索好细胞对胰酶的要求。便于你后续实验的开展。将细胞消化分成这几步，除了是为了避免胰酶对细胞的损伤之外，还有一个更重要的作用就是，可以程度地把细胞吹打成单个单个的状态，不成片不连体。
细胞产品包装：复苏形式：T２５培养瓶(一瓶)或冻存形式：１ml冻存管(两支)
细胞传代方法：１：３传代,２-３天传一代。
细胞冻存的步骤：１)选择处于对数生长期的细胞，在冻存前一天换液。将多个培养瓶中的细胞培养液去掉，用０.２５% 胰蛋白酶消化。适时去掉胰蛋白酶，加入少量新培养液。用吸管吸取培养液反复吹打瓶壁上的细胞，使其成为均匀分散的细胞悬液。悬浮生产细胞则不要消化处理。然后将细胞收集于离心管中离心(１０００r/min，１０分钟)；２)去上清液，加入含２０%小牛血清的完全培养基，于４℃预冷１５分钟后，逐滴加入已无菌的DMSO或甘油，用吸管轻轻吹打使细胞均匀，细胞浓度为５×１０６～１×１０７/mL之间。(冻存培养液的配置是不是一定要用小牛血清呢？答案是不一定的，具体要看培养的细胞类型来选择；３)将分装上述细胞悬液于２ml冻存管中，每管０.２５ml。冻存管要将盖子盖紧，并标记好细胞名称和冻存日期，同时作好登记(日期、细胞种类及代次、冻存支数)；４)将装好细胞的冻存管放到冻存盒中，-８０℃冰箱过夜。；如果有程序降温器(放在-８０℃冰箱过夜，放入液氮罐);或者可以在４℃，２h;然后转到-２０℃，２h;-８０℃，２h;放入液氮罐；５)细胞冻存在液氮中可以长期保存，但为妥善起见，冻存半年后，取出一只冻存管细胞复苏培养，观察生长情况，然后再继续冻存。
细胞来源说明：细胞主要来源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少数国外著名大学建系
LA 4细胞系相关产品：T/G HA-VSMC细胞、Fao细胞、BC3H-1细胞
L428细胞系相关产品：Roswell Park Memorial Institute 2650细胞、MCF-7/AdrR细胞、H82细胞
Jurkat clone A3细胞系相关产品：LL/2 (LLC1)细胞、RTMC细胞、RIN m5F细胞
SUD6细胞系相关产品：NCI-H1623细胞、RCS细胞、Walker-256-TC细胞
LM6细胞系相关产品：NFS 60细胞、NCI-H735细胞、P30-OHKUBO细胞
细胞生长特性：贴壁生长
RWPE-2 Cell:人正常前列腺上皮细胞系
细胞传代培养实验：体外培养的原代细胞或细胞株要在体外持续地培养就必须传代，以便获得稳定的细胞株或得到大量的同种细胞，并维持细胞种的延续。培养的细胞形成单层汇合以后，由于密度过大生存空间不足而引起营养枯竭，将培养的细胞分散，从容器中取出，以１:２或１:３以上的比率转移到另外的容器中进行培养，即为传代培养；细胞“一代”指从细胞接种到分离再培养的一段期间，与细胞世代或倍增不同。在一代中，细胞培增３～６次。细胞传代后，一般经过三个阶段：游离期、指数增生期和停止期。常用细胞分裂指数表示细胞增殖的旺盛程度，即细胞群的分裂相数/１００个细胞。一般细胞分裂指数介于０.２％～０.５％，肿瘤细胞可达３～５％；细胞接种２～３天分裂增殖旺盛，是活力时期，称指数增生期(对数生长期)，适宜进行各种试验。实验步骤：１.将长成的培养细胞从二氧化碳培养箱中取出，在超净工作台中倒掉瓶内的培养液，加入少许消化液。(以液面盖住细胞为宜)，静置５～１０分钟。２.在倒置镜下观察被消化的细胞，如果细胞变圆，相互之间不再连接成片，这时应立即在超净台中将消化液倒掉，加入３～５ml新鲜培养液，吹打，制成细胞悬液。３.将细胞悬液吸出２ml左右，加到另一个培养瓶中并向每个瓶中分别加３ml左右培养液，盖好瓶塞，送回二氧化碳培养箱中，继续进行培养。一般情况，传代后的细胞在２小时左右就能附着在培养瓶壁上，２～４天就可在瓶内形成单层，需要再次进行传代。
细胞形态特性：上皮细胞
HEL-92细胞系相关产品：Hs 737.T细胞、NCIH1184细胞、PT-K75细胞
SF 539细胞系相关产品：SNU739细胞、HTR-8/SV-neo细胞、NH6细胞
QBC-939细胞系相关产品：RC13细胞、TSUpr1细胞、P31/Fujioka细胞
ARPE19细胞系相关产品：Balb/3T3-4-Cl31细胞、U 937细胞、IM 9细胞
4T1细胞系相关产品：BSC40细胞、T173细胞、SK_HEP1细胞
MN-60细胞系相关产品：Wien133细胞、H-838细胞、HCC1599细胞
HUT 226细胞系相关产品：HCC-2185细胞、HCoEpiC细胞、CMT 167细胞
RWPE-2 Cell:人正常前列腺上皮细胞系
HTori-3细胞系相关产品：LM6细胞、Hs 746T细胞、MUG-Chor1细胞
TGBC11T细胞系相关产品：Co 205细胞、CLONE M3细胞、CMT167细胞
NIT-1细胞系相关产品：NPA 87细胞、Co-115细胞、HCC202细胞
MKN7细胞系相关产品：Panc 1细胞、HS-445细胞、WM266mel细胞
IPEC-J2细胞系相关产品：NT2细胞、Det. 562细胞、ACC-M细胞
McA-RH 8994细胞系相关产品：A-375细胞、Baby Hamster Kidney-21细胞、SCL II细胞
8402细胞系相关产品：VMCUB1细胞、BMDC细胞、WM 2664细胞
KMS-26细胞系相关产品：ARH-77细胞、H-2110细胞、HME1细胞
CD 18细胞系相关产品：KU1919细胞、Earle's L cells细胞、HR-8348细胞
MCF.10A细胞系相关产品：HEP-3B2细胞、P1-Raji细胞、F442A细胞
OsACL细胞系相关产品：Instituto Biologico-Rim Suino-2细胞、LU65细胞、SUM-159-PT细胞
mRMEC细胞系相关产品：A375mel细胞、SCL-II细胞、SK-GT-2细胞
BCaP 37细胞系相关产品：LA-N-1细胞、PC615.3细胞、AG06814-N细胞
Pt K2 (NBL-5)细胞系相关产品：NP69SV40T细胞、Cor L88细胞、NCIH1650细胞
Colo205细胞系相关产品：KBM-7细胞、RAG细胞、MHCC 97细胞
CCD 19Lu细胞系相关产品：TE 671细胞、HCC1569细胞、H2198细胞
HCC2108细胞系相关产品：BNCL2细胞、MXI细胞、SW1783细胞
GM02219细胞系相关产品：KMY1022细胞、KP-2细胞、MDA 231-LM2-4175细胞
L-5178-Y细胞系相关产品：Clone 929细胞、MD Anderson-Metastatic Breast-330细胞、GM03569D细胞
LS174细胞系相关产品：HIBEC细胞、33604细胞、H1838细胞
MC26细胞系相关产品：Hs-274-T细胞、TW 01细胞、HC-11细胞
SGC996细胞系相关产品：HEI-193细胞、HDF-a细胞、SNU-407细胞
WM239细胞系相关产品：GM03320D细胞、SNU-423细胞、TU 686细胞
HOP-62细胞系相关产品：LK2细胞、HUTU80细胞、T24细胞
BGC823细胞系相关产品：KM12SM细胞、Hep G2/C3A细胞、MLMA细胞
H-1666细胞系相关产品：OCI-AML-2细胞、BE(2)M-17细胞、HCC1428细胞
ATC241细胞系相关产品：HT 1080.T细胞、CA922细胞、MDBK细胞
CX-1细胞系相关产品：MIA-Pa-Ca-2细胞、BV-2细胞、GM03320细胞
MGc80-3细胞系相关产品：Hep 3B细胞、T98-G细胞、OVCAR432细胞
THP 1细胞系相关产品：HUT-226细胞、C2C12细胞、KMS-26细胞
COLO-320HSR细胞系相关产品：UACC-812细胞、G-401细胞、NIH3T3细胞
HOK细胞系相关产品：T98 G细胞、HSC-2细胞、SW962细胞
EMT6细胞系相关产品：NT-2细胞、OVCAR 4细胞、P3-X63-Ag 8.653细胞
Mac-1细胞系相关产品：U87细胞、SNU761细胞、3396细胞
MD Anderson-Metastatic Breast-436细胞系相关产品：GLRK 13细胞、EJ1细胞、HTR-8/SVneo细胞
NBL-S细胞系相关产品：CZ-1细胞、H-1395细胞、U-373MG ATCC细胞
SK-N-SH细胞系相关产品：Moorfields/Institute of Ophthalmology-Muller 1细胞、DMS-79细胞、STC-1细胞
HCE-2 [50.B1]细胞系相关产品：G-401细胞、HRA-19细胞、NCIH378细胞
MDA-MB-361细胞系相关产品：LICR-LON-HN6细胞、FU-MMT-1细胞、Walker256-TC细胞
Human Embryo Lung-1细胞系相关产品：H-1437细胞、SKNBE(1)细胞、TKB-1细胞
PC-3M IE8细胞系相关产品：Vertebral Cancer of the Prostate细胞、MRC-V细胞、AML-12细胞
P3-NS1/1Ag 4.1细胞系相关产品：SIRC细胞、VERO C 1008细胞、H-2122细胞
GM03570细胞系相关产品：Onda 11细胞、NIHOVCAR3细胞、Mouse Bladder Tumor line-2细胞
RWPE-2 Cell:人正常前列腺上皮细胞系
Hs 606.T细胞系相关产品：NCI-SNU-16细胞、TM3细胞、HDSMC细胞
CWR22-Rv1细胞系相关产品：P3-X63-Ag8-6-5-3细胞、Hs822T细胞、Panc203细胞
YAC细胞系相关产品：NUGC-2细胞、SUDHL5细胞、MCA-205细胞
RWPE1细胞系相关产品：Walker-256细胞、mIMCD3细胞、P3-X63-Ag8.653细胞
NCI-HUT-460细胞系相关产品：TR-146细胞、ECV 304细胞、H-1869细胞
AG06814-N细胞系相关产品：H-838细胞、SKNO1细胞、TE8细胞
CHL细胞系相关产品：Panc-03.27细胞、MALME.3M细胞、SUDHL-8细胞
Mel RM细胞系相关产品：MFC细胞、HEK-293-F细胞、H2135细胞
A2780 CP70细胞系相关产品：Cor L88细胞、B958细胞、HELA-GFP细胞
LLC-PK-1细胞系相关产品：KHYG细胞、INS-1细胞、HEK293EBNA细胞
Leukemic 1210细胞系相关产品：NCI-H2108细胞、H-1693细胞、Co320细胞
NCI-H102细胞系相关产品：KHYG1细胞、HPAF/CD18细胞、H3396细胞
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