HaCaT Cell:人永生化表皮细胞系

"HaCaT Cell:人永生化表皮细胞系
细胞形态：上皮细胞样
细胞生长：贴壁
细胞背景资料：该细胞源自一位６２岁患有黑色素瘤男性的病灶外围正常皮肤，角蛋白、角化细胞交联外膜蛋白、中间丝相关蛋白阳性。
JF305细胞系相关产品：HT115细胞、HT22细胞、HTh74细胞
MC3T3, E1 subgroup-4 clone细胞系相关产品：Ketr-3细胞、HAPI细胞、C-6细胞
L23/P细胞系相关产品：ETCC007细胞、Mink细胞、Primary Liver Carcinoma/Poliomyelitis Research Foundation/5细胞
NUGC-2细胞系相关产品：LNCaP C4-2细胞、HBE 135-E6/E7细胞、H1703细胞
细胞物种来源：人源或鼠源等其它物种来源
HaCaT Cell:人永生化表皮细胞系
如何把细胞养的形态更好更漂亮。１.不同的细胞，喜欢的环境是不一样的。这个不仅仅是说培养基的不同，还有就是细胞生长的空间密度问题。有一些细胞是数量多一点比较好生长，生长状态也比较好。这种一般是属于生长速度慢的细胞。譬如内皮细胞。而有一些是细胞是数量少一点细胞状态会生长的比较好，譬如巨噬细胞和某些肿瘤细胞。尤其是巨噬细胞，生长速度非常得快，贴壁速度很快，所以传代时就应该留很少量的细胞，这样细胞状态会比较好。并且巨噬细胞比较喜欢扎堆生长，而堆与堆之间是有空间的。如果长成相连在一起的一满片的时候，细胞形态基本上就会差了，老化的会比较多，对后期实验结果是不好的。所以在养细胞的时候应该摸索该细胞喜欢的生长空间密度问题。２.对于有些人总是会遇到养的细胞形态怎么都不好的问题。这个其实是有一个方法可以改善的。对于贴壁细胞，如果细胞形态不好，（或者细胞形态不清晰，表面似有异物等）可以在传代的时候进行如下操作：首先，倒掉旧的培养基，加入３ml新的培养基（有无血清的都可）洗涤一次，用滴管吸走，然后再加入３ml的培养基，进行预吹打，控制吹打力度，轻轻地大概沿着瓶底过一遍，然后吸走。这时侯再开始正式的消化、吹打。（巨噬细胞我们只吹打，不消化的）；其次，把吹打下来的细胞悬液加入到新的培养瓶内，培养瓶事先加入培养基，放入培养箱内培养，按时间点观察细胞贴壁情况。１０分钟观察一次，２０分钟，３０分钟观察一次。选择一个时间点，已经有部分细胞贴壁的情况下，重新置于洁净台，底面朝上迅速倒出其中的培养基，加入３ml新培养基再轻轻洗一次。然后加入完全培养基培养。后续观察细胞生长情况以及形态。我称之为“二传”。呵呵。如果一次效果还不理想，可重复多次。直到找到细胞完美形态。其中要注意，结合细胞喜欢的生长情况。喜欢多一点数量长得好的细胞你就等贴壁细胞比较多点的时候再传。反之亦然。３.关于培养瓶内加入培养基的量的问题。这个是要靠自己去摸索你所养的细胞的。并不是小的玻璃方瓶１２ml，大方瓶１４ml的。有些细胞反而是培养基少一点相反细胞形态会长得比较好。（可能也是竞争很大，有优胜劣汰吧。呵呵。）对于生长速度快的细胞，易生长的细胞加少一点培养基细胞形态会更好。但是要注意换液掌握。４.关于选择培养瓶的问题。个人发现生长速度快的细胞在玻璃瓶内生长的状态会比一次性相对好一些。而对于同一种细胞，在其生长旺盛快速的时期在玻璃瓶内的生长状态也比内好。这可能是因为比玻璃瓶更容易贴壁。生长速度快的细胞在这种相对“更安逸”的环境里反而长得状态不如玻璃瓶好。所以对于生长速度慢的细胞如果想要更漂亮的细胞状态，比玻璃瓶会好，对于生长速度慢的细胞，玻璃瓶则会更好。同样，对于同一种细胞，在其生长速度慢的时候，会好一点，比如刚刚复苏的时候，或者原代培养的时候。而在其生长旺盛的时候，玻璃瓶则相对会好一点。
细胞产品包装：复苏形式：T２５培养瓶(一瓶)或冻存形式：１ml冻存管(两支)
细胞传代方法：１：３—１：６传代，每周换液２—３次
细胞冻存的步骤：１)选择处于对数生长期的细胞，在冻存前一天换液。将多个培养瓶中的细胞培养液去掉，用０.２５% 胰蛋白酶消化。适时去掉胰蛋白酶，加入少量新培养液。用吸管吸取培养液反复吹打瓶壁上的细胞，使其成为均匀分散的细胞悬液。悬浮生产细胞则不要消化处理。然后将细胞收集于离心管中离心(１０００r/min，１０分钟)；２)去上清液，加入含２０%小牛血清的完全培养基，于４℃预冷１５分钟后，逐滴加入已无菌的DMSO或甘油，用吸管轻轻吹打使细胞均匀，细胞浓度为５×１０６～１×１０７/mL之间。(冻存培养液的配置是不是一定要用小牛血清呢？答案是不一定的，具体要看培养的细胞类型来选择；３)将分装上述细胞悬液于２ml冻存管中，每管０.２５ml。冻存管要将盖子盖紧，并标记好细胞名称和冻存日期，同时作好登记(日期、细胞种类及代次、冻存支数)；４)将装好细胞的冻存管放到冻存盒中，-８０℃冰箱过夜。；如果有程序降温器(放在-８０℃冰箱过夜，放入液氮罐);或者可以在４℃，２h;然后转到-２０℃，２h;-８０℃，２h;放入液氮罐；５)细胞冻存在液氮中可以长期保存，但为妥善起见，冻存半年后，取出一只冻存管细胞复苏培养，观察生长情况，然后再继续冻存。
细胞来源说明：细胞主要来源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少数国外著名大学建系
MLA-144细胞系相关产品：H-1963细胞、WEHI 231细胞、P3X63Ag8653细胞
TALL-104细胞系相关产品：Mino细胞、LTEP-sm 1细胞、HEK-293-EBNA细胞
MDA-MB-330细胞系相关产品：U-226AR1细胞、SNU-216细胞、HLE B-3细胞
L929细胞系相关产品：NCI-H1792细胞、HuCC-T1细胞、293 EBNA细胞
686LN-M4e细胞系相关产品：HSC-2细胞、Dx5细胞、786-O RCC细胞
细胞生长特性：贴壁生长
HaCaT Cell:人永生化表皮细胞系
细胞传代培养实验：体外培养的原代细胞或细胞株要在体外持续地培养就必须传代，以便获得稳定的细胞株或得到大量的同种细胞，并维持细胞种的延续。培养的细胞形成单层汇合以后，由于密度过大生存空间不足而引起营养枯竭，将培养的细胞分散，从容器中取出，以１:２或１:３以上的比率转移到另外的容器中进行培养，即为传代培养；细胞“一代”指从细胞接种到分离再培养的一段期间，与细胞世代或倍增不同。在一代中，细胞培增３～６次。细胞传代后，一般经过三个阶段：游离期、指数增生期和停止期。常用细胞分裂指数表示细胞增殖的旺盛程度，即细胞群的分裂相数/１００个细胞。一般细胞分裂指数介于０.２％～０.５％，肿瘤细胞可达３～５％；细胞接种２～３天分裂增殖旺盛，是活力时期，称指数增生期(对数生长期)，适宜进行各种试验。实验步骤：１.将长成的培养细胞从二氧化碳培养箱中取出，在超净工作台中倒掉瓶内的培养液，加入少许消化液。(以液面盖住细胞为宜)，静置５～１０分钟。２.在倒置镜下观察被消化的细胞，如果细胞变圆，相互之间不再连接成片，这时应立即在超净台中将消化液倒掉，加入３～５ml新鲜培养液，吹打，制成细胞悬液。３.将细胞悬液吸出２ml左右，加到另一个培养瓶中并向每个瓶中分别加３ml左右培养液，盖好瓶塞，送回二氧化碳培养箱中，继续进行培养。一般情况，传代后的细胞在２小时左右就能附着在培养瓶壁上，２～４天就可在瓶内形成单层，需要再次进行传代。
细胞形态特性：上皮细胞样
K7M2细胞系相关产品：GM03569D细胞、Pro-Lec1.3C细胞、NCI-H1092细胞
MCAEC细胞系相关产品：GM15452细胞、293T细胞、McA-RH 7777细胞
SCCVII细胞系相关产品：U-373MG ATCC细胞、Vx-2细胞、SiHa细胞
LC-1细胞系相关产品：NCI-H1836细胞、JB6 clone 30, subclone 7b细胞、CO115细胞
CMT64细胞系相关产品：LN382细胞、Ramos(RA1)细胞、LMH细胞
HPMC细胞系相关产品：FF-WT-BJ细胞、HEL-92_1_7细胞、RFL6细胞
HCC78细胞系相关产品：SK-N-SH细胞、SK-MEL2细胞、SW-837细胞
HaCaT Cell:人永生化表皮细胞系
OUMS27细胞系相关产品：Tu-177细胞、SK-GT-2细胞、Panc_02_03细胞
SHP-77细胞系相关产品：NG108-15细胞、COLO-679细胞、Hs-27细胞
HCT-15细胞系相关产品：HEK293E细胞、J-82细胞、U373 MG细胞
BrCL18细胞系相关产品：MUTZ3细胞、SKMEL-2细胞、VK-2/E6E7细胞
COLO 320HSR细胞系相关产品：A 72细胞、OV90细胞、HHL-5细胞
HPAF-2细胞系相关产品：L Wnt-3A细胞、NCI-H2107细胞、HMC3细胞
P3/NS1/1-Ag4.1细胞系相关产品：H2444细胞、IR 983F细胞、LC1细胞
KU812-F细胞系相关产品：639V细胞、B35细胞、Pro-5 Lec1.3c细胞
X63Ag8-653细胞系相关产品：HCMEC(BL12-H)细胞、HCCLM3细胞、GNM细胞
X63Ag8-653细胞系相关产品：HCMEC(BL12-H)细胞、HCCLM3细胞、GNM细胞
HN6细胞系相关产品：HPB-ALL细胞、NOZ细胞、MOPC细胞
H-35 Reuber细胞系相关产品：COLO 394细胞、SHSY5Y细胞、HCC1569细胞
CC-LP-1细胞系相关产品：HCC-2279细胞、TE-11细胞、HEC1B细胞
SUDHL-4细胞系相关产品：NCI H345细胞、NW-MEL-38细胞、H-676B细胞
DU-4475细胞系相关产品：HCC1359细胞、CCD 841 CoTr细胞、HSKMC细胞
T-T细胞系相关产品：CWR22-Rv1细胞、32D clone3细胞、SBC-5细胞
NCIH1563细胞系相关产品：GM03570E细胞、COLO-738细胞、TOV112D细胞
DHL4细胞系相关产品：IALM细胞、CALU 1细胞、GDM1细胞
IGR-OV1细胞系相关产品：H1734细胞、EMT6细胞、MFD-1细胞
ETCC-007细胞系相关产品：HEL-92-1-7细胞、UT-7细胞、HCC1187细胞
NCI-H1688细胞系相关产品：MOLT3细胞、P 3 HR 1细胞、CCD 1112SK细胞
NCIH1092细胞系相关产品：RCC-JF细胞、D283细胞、SK-OV-433细胞
NCI-H1666细胞系相关产品：Mouse Bladder Tumor line-2细胞、MDA-MB-435 S细胞、GM02131细胞
Ra No. 1细胞系相关产品：Hs 852.T细胞、Li-7细胞、TCC-SUP细胞
RSC-96细胞系相关产品：SKRC-52细胞、769-P细胞、SUM 52PE细胞
H-146细胞系相关产品：HCC-1359细胞、H64细胞、KALS1细胞
Sp2/0-Ag14细胞系相关产品：SUDHL5细胞、OCI-Ly 8细胞、CEMO-1细胞
SNU-878细胞系相关产品：HR8348细胞、OCI-Ly 1细胞、NCI-SNU-878细胞
SW48细胞系相关产品：NCI-H2452细胞、LAN5细胞、RS4:11细胞
Clone 15 HL-60细胞系相关产品：Hs-578Bst细胞、CW-2细胞、KU-19-19细胞
SN-12C细胞系相关产品：BRL 3A细胞、KM.12细胞、MCF7细胞
MN 60细胞系相关产品：NCI-H719细胞、639-V细胞、MZCRC1细胞
NB.4细胞系相关产品：FHL 124细胞、OV-90细胞、FDCP1细胞
HPBALL细胞系相关产品：HBL100细胞、FDCP1细胞、3T3-F442A细胞
GA-10-Clone-4细胞系相关产品：MGH-U3细胞、NCIH2135细胞、SKLMS-1细胞
TYK-nu细胞系相关产品：SEG-1细胞、Mv 1 Lu (NBL-7)细胞、HTSMC细胞
HOP 92细胞系相关产品：WiDr/S细胞、624mel细胞、DI-TNC1细胞
HL7702细胞系相关产品：HPAFII细胞、MCAEC细胞、H-1373细胞
SNU-119细胞系相关产品：HL7702细胞、IBRS2细胞、PaCa2细胞
Human Pancreatic Duct Epithelial细胞系相关产品：293H细胞、MDA415细胞、HPAC细胞
NCIH2172细胞系相关产品：MCA-205细胞、KY-50细胞、HBMEC细胞
H82sclc细胞系相关产品：Y 1细胞、SCC-4细胞、Pro-5WgaRI3C细胞
MC26细胞系相关产品：Hs-274-T细胞、TW 01细胞、HC-11细胞
HaCaT Cell:人永生化表皮细胞系
SW-900细胞系相关产品：HD11细胞、Hs68细胞、AMO1细胞
HEK-AD293细胞系相关产品：KASUMI1细胞、ROS1728细胞、LA-N-5细胞
HONE1细胞系相关产品：T2 (174 x CEM.T2)细胞、TR-146细胞、Rin-M-5F细胞
MKN-1细胞系相关产品：SNB-19细胞、SUM-159-PT细胞、HDLM-2细胞
OCI/AML-4细胞系相关产品：IGR.OV1细胞、PTK 2细胞、COLO 16细胞
EOL1细胞系相关产品：H-2126细胞、NCI-SNU-475细胞、CMT.64细胞
SF-126细胞系相关产品：HGSMC细胞、OCIAML2细胞、Lu-99A细胞
HES [Human embryonic skin fibroblast]细胞系相关产品：QSG7701细胞、HOP62细胞、THPI细胞
B16 melanoma F10细胞系相关产品：NCIH69细胞、OKT3细胞、EFO-27细胞
CLONE M3细胞系相关产品：P3-X63-Ag 8.653细胞、A3细胞、HPAF-II细胞
MFM-223细胞系相关产品：SKLU-1细胞、KM12-SM细胞、P3X63Ag8-6-5-3细胞
bEnd3细胞系相关产品：OCI-LY-7细胞、H1792细胞、Hs729细胞
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