THLE-3 Cell:人肝永生化细胞系

"THLE-3 Cell:人肝永生化细胞系
细胞形态：上皮细胞样
细胞生长：贴壁
细胞背景资料：详见相关文献介绍
J-774A.1细胞系相关产品：CEM-CCRF细胞、OCI-Ly 19细胞、PC12(高分化)细胞
RM-1细胞系相关产品：ChaGo K-1细胞、HOP-92细胞、159PT细胞
CCRF/CEM/0细胞系相关产品：H9c2(2-1)细胞、HCC-1419细胞、H661细胞
NL-20细胞系相关产品：RERF-LC-MS细胞、9L细胞、Hs832.Tc细胞
细胞物种来源：人源或鼠源等其它物种来源
THLE-3 Cell:人肝永生化细胞系
细胞消化过程总结：其实绝大部分细胞消化的时候是只要用胰酶润洗一遍即可，吸去胰酶后，残留的那些无法计算体积的附着在细胞表面的微量胰酶在３７度一般不到２min足够消化细胞（绝大部分１min不到）。对于这些细胞原则上不要用胰酶孵育细胞，连续这样传代，对细胞伤害很大。简单的程序是PBS润洗吸去，胰酶润洗吸去，然后３７度消化。２，什么算是消化好了呢？不是细胞全部成间隔分布很离散的单个圆形才算消化好了，一般你肉眼观察贴壁细胞层，只要能移动了，多半呈沙壮移动，其实已经可以了，很多人喜欢把细胞消化或者吹打成完全分离细胞，这是没有必要的。一般能移动了，说明细胞与培养基质材料的附着已经消失了，细胞之间的附着也已经消失了，细胞已经独立分布了（虽然没有呈现很广的离散分布）。这个时候应该停止消化，不要等到看到镜下所有细胞都分离得非常好，间隙很大，才停止。细胞就是完全成单个细胞悬液，之后在贴壁的过程中仍然会聚集，这个是贴壁培养的细胞，尤其是肿瘤细胞的一个特性，无论死活的细胞都是如此，你可以尝试，准备１００%的单个细胞悬液，贴壁后观察细胞，仍然是几个几个细胞聚集在一起。一些悬浮培养细胞也是如此，容易聚集，不要去尝试过几个小时就拿出来吹打成单细胞悬液（不要笑，这个是初养悬浮细胞的人常犯的错误，以为悬浮培养就是一个一个分开）。细胞只要能从基质上脱离下来，这个时候即使是成片的（比如Calu-３细胞），吹打不超过２０次后（一般１０次即可），成小规模聚集（１０个细胞左右），是正常的，不要试图再去延长消化时间，或者像有的同学那样吹打１h，等待单细胞悬液出现。比较难消化的细胞（润洗方法５min还不能消化），比如HCT１５, LS４１１和KM１２，这样的细胞一般需要用少量胰酶孵育，但也不需要很多，一般１００mm dish，一次最多加入５００ul，就足够了，一般我加３００ul。即使这样难消化的细胞，一般不超过５min，即可见细胞成片移动，就应该停止消化。一些正常细胞也会有难消化的时候，比如tsDC细胞，但也只要用少量胰酶孵育，３min左右即可看到成片沙状移动。
细胞产品包装：复苏形式：T２５培养瓶(一瓶)或冻存形式：１ml冻存管(两支)
细胞传代方法：消化３-５分钟。１：２。３天内可长满
常见细胞培养中一些问题总结：１)培养基中血清的比例多少合适？血清是细胞培养上一个极为重要的营养来源，所以血清的含量多少会对细胞的生长会产生极大的影响。血清的含量一般为５%-１５%，不要低于５%或高过２０%，因为含量过低会导致细胞营养不足，过高则会破坏渗透压平衡。一般建议血清含量为１０%，可以适量加减；２)何时须更换培养基？视细胞生长密度而定，或遵照细胞株基本数据上的更换时间，按时更换培养基即可。还可以参照指示剂的颜色变化进行更换；３)购买的复苏细胞，为何会有脱落？因为运输的过程中不可避免的会有震荡，收到后可以离心收集；４)购买的细胞冷冻管经解冻后，为何会发生细胞数目太少之情形？研究人员在冷冻细胞之培养时出现细胞数目太少，大都是因为离心过程操作上的失误，造成细胞的物理性损伤，以及细胞流失。建议细胞解冻后不要立刻离心，应待细胞生长隔夜后再更换培养基即可；５)购买的细胞死亡或细胞存活率不佳可能原因？研究人员在细胞培养时出现存活率不佳，常见原因可归纳为：培养基使用错误或培养基品质不佳。血清使用错误或血清的品质不佳。解冻过程错误。冷冻细胞解冻后，加以洗涤细胞和离心。悬浮细胞误认为死细胞。培养温度使用错误。细胞置于–８０°C太久；６)收到的冷冻管瓶身破裂，瓶盖有裂纹，或瓶盖脱落之原因？冷冻管瓶盖裂纹，或瓶身破裂，可能是因为操作者夹取冷冻管时用力不当，造成冷冻管裂损，建议使用止血钳小心夹取。另冷冻管瓶盖松动或松脱，乃因热胀冷缩之物理现象，冷冻管有可能因此而造成细胞污染，故冷冻管于放入和取出液氮桶时，均应立刻将冷冻管再一次扭紧。
细胞来源说明：细胞主要来源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少数国外著名大学建系
GM03571细胞系相关产品：Fetal Rhesus Kidney-4细胞、HCC-1395细胞、SU86.86细胞
B16 melanoma细胞系相关产品：As-PC1细胞、End1/E6E7细胞、H889细胞
HLEB3细胞系相关产品：McA-RH 7777细胞、2780CP细胞、NRK-52E细胞
H-650细胞系相关产品：LCLC103H细胞、ARO 81-1细胞、AtT 20细胞
HPAF-I细胞系相关产品：KM.12细胞、HC11 Mammary Epithelium细胞、Hs 832(C).T细胞
细胞生长特性：贴壁生长
THLE-3 Cell:人肝永生化细胞系
正确的细胞复苏需知事项：细胞冻存好了，接下来要注意什么问题呢？没错，就是记得到时间了，拿出来复苏。那么，细胞复苏的过程中又有哪些该注意的事项呢？细胞活力和形态检查的作用何在？活力检查——千万不要使用不健康的细胞，可能有污染(真菌、支原体等)，如果发现有污染毫不犹豫的丢弃!形态检查——检查细胞的固有形态和生长行为。冻存细胞：补充新的培养液——在您开始冻存细胞的前一天补充新的培养液。在细胞长至７０%单层时收获细胞，计数活细胞数，用冻存液调整细胞密度~５ x１０６ Cell s/ml (根据不同的细胞类型调整)；冻存液——用冻存液洗细胞并用冻存液重悬细胞，有不同类型的冻存液，根据细胞类型选择最合适的冻存液(常用的冻存液成分有)：５-１０% DMSO——注意确保DMSO不含有其他的毒性物质；５-１５%甘油；如果细胞在无血清培养基内生长，应在５０%条件培养基内(细胞在无血清培养基内生长２４小时)内冻存和复苏。在冻存管上标记好细胞类型，日期，冻存人等信息，并保证每冻存管不超过１.５ml。放入液氮罐之前记录冻存管的数量和位置。以最快的速度转移冻存管知液氮罐内，因此，此步骤使用干冰，或者把冻存管浸入装有液氮的小盒内。此外还要注意，在冻存管上没有足够的空间记录细胞的详细信息，做好记录是非常非常重要的！还有一个最重要的，一定要在异地的液氮罐内保存同样的一份细胞，以免其中的一个液氮罐出现问题！细胞正确的复苏方式和正确的冻存方式同样重要，熟记以下要点：当从液氮罐内取出细胞时，有可能会出现冻存管破裂的情况，使用保护面罩和防护服十分必要；其实，细胞复苏只是一个简单的实验，不过这其中却不可避免有一些需要注意的细节，不然，也不一定会尽如人意。例如说，人身健康方面：一定要记得做好防冻工作，戴上护目镜；尽量降低DMSO对细胞的损伤等等。
细胞形态特性：上皮样
U-373 MG细胞系相关产品：L-132细胞、Huh7.5.1细胞、GS9L细胞
NCI-SNU-761细胞系相关产品：293细胞、KM12细胞、SNU-182细胞
H-1688细胞系相关产品：MDA330细胞、LLC-PK-1细胞、Moorfields/Institute of Ophthalmology-Muller 1细胞
PL45细胞系相关产品：4T1细胞、NHDF细胞、Centre Antoine Lacassagne-12T细胞
SKRC20细胞系相关产品：C32 mel细胞、SV40-HCEC细胞、CCD-112CoN细胞
HR1K细胞系相关产品：JB6 Cl 30-7b细胞、TM-4细胞、IB-RS2细胞
H-2108细胞系相关产品：HEK;293细胞、KM932细胞、HS578细胞
THLE-3 Cell:人肝永生化细胞系
H-2170细胞系相关产品：WILL-2细胞、Y-79细胞、RN-c细胞
KBM7细胞系相关产品：C3A细胞、MDA-MB-231-luc细胞、HS-766-T细胞
NIH/3T3细胞系相关产品：MDAPC2B细胞、MDA-MB 468细胞、MX-1细胞
HEK-293-H细胞系相关产品：LK-2细胞、Reh细胞、SHG 44细胞
NBL-12细胞系相关产品：PT-K75细胞、GM-637细胞、WI 38细胞
Meat Animal Research Center-145细胞系相关产品：Hu-P-T3细胞、CWR22R细胞、CCD-841-CoN细胞
SO-Rb 50细胞系相关产品：293/EBNA细胞、H-1385细胞、RASMC细胞
LS411细胞系相关产品：H-2195细胞、NCI-H1668细胞、HCC1954细胞
UO31细胞系相关产品：MHH-CALL-2细胞、MV-4:11细胞、293 HEK细胞
HCGC细胞系相关产品：BC3H-1细胞、PG-BE1细胞、OCUM-1细胞
UMC11细胞系相关产品：U-373-MG细胞、KRC/Y细胞、NTERA-2 cl.D1细胞
PC3细胞系相关产品：MDCK-2细胞、NCI-H1770细胞、NUGC3细胞
NCI-HUT-292细胞系相关产品：NCIH2291细胞、H322T细胞、SUDHL4细胞
NCI-H211细胞系相关产品：H22细胞、JG细胞、P3 (Jiyoye)细胞
NCI-H2330细胞系相关产品：SW 403细胞、NCI-H820细胞、MFC细胞
MH-22a细胞系相关产品：High-5细胞、NCI-H2286细胞、P3-NS1/1Ag 4.1细胞
MDA-435细胞系相关产品：GA-10 (Clone 4)细胞、SK-RC-20细胞、F-36P细胞
H-660细胞系相关产品：P3X63细胞、WM266mel细胞、Y3-Ag123细胞
COV504细胞系相关产品：H341细胞、Rh30细胞、Hs 27细胞
V 79-4细胞系相关产品：FHs 74 Int细胞、K 562细胞、AU-565细胞
FHCRC-11细胞系相关产品：Metastatic Variant-522细胞、SupT1细胞、NCI-H2227细胞
MDA-MB-134-VI细胞系相关产品：MDA-MB436细胞、TGW-nu细胞、RAOEC细胞
SUM 190细胞系相关产品：SV-HUC-1细胞、SH-SY5Y Parental细胞、HPAF-II/CD18细胞
MCF-7/ADR-RES细胞系相关产品：PT67细胞、B16-F0细胞、MDAMB-231细胞
LLCPK1细胞系相关产品：SK-NMC细胞、B-CPAP细胞、HBEpiC细胞
HET1A细胞系相关产品：COR-L279细胞、Mv 1 Lu细胞、HAVSMC细胞
EPC细胞系相关产品：M059J细胞、SPCA1细胞、HCC1419细胞
NCI-SNU-C2B细胞系相关产品：X63-Ag8细胞、SUM 52细胞、GL261细胞
Line 697细胞系相关产品：HUT 226细胞、L-cells细胞、HeLa-S3细胞
HEC-1-B细胞系相关产品：QBC939细胞、BrCL15细胞、KP-4细胞
Laboratory of Allergic Diseases 2细胞系相关产品：SU-DHL-1细胞、Hep 3B2_1-7细胞、GM-215细胞
MODE-K细胞系相关产品：RC-4B细胞、GM03190A细胞、H-69细胞
KM12 SM细胞系相关产品：Madin Darby Bovine Kidney细胞、SCH细胞、GAK细胞
Michigan Cancer Foundation-12F细胞系相关产品：HBL 100细胞、HRCEC细胞、WM-2664细胞
NRK clone 52E细胞系相关产品：PBL细胞、ARO81细胞、NIH:OVCAR-5细胞
SK-MES-1细胞系相关产品：NEC细胞、SU-86-86细胞、Simpson细胞
LS-174细胞系相关产品：OLN-93细胞、NCI-H1703细胞、HCC-2279细胞
HRA-19细胞系相关产品：NCI-H441细胞、aTC1-6细胞、HL 60细胞
SMMC-7721细胞系相关产品：CCD841CoN细胞、NCIH1651细胞、L Wnt-3A细胞
HCS-2/8细胞系相关产品：293 c18细胞、PVEC细胞、GM03570细胞
SCC 15细胞系相关产品：VeroC1008细胞、NCI-H522细胞、MV4-11细胞
HR-8348细胞系相关产品：MV(4;11)细胞、NCI-H441细胞、PLC/PRF5细胞
RMS 1598细胞系相关产品：PC 61.5.3细胞、JJN-3细胞、NCIH1693细胞
THLE-3 Cell:人肝永生化细胞系
hs 68细胞系相关产品：MSB1细胞、MOLP-2细胞、RBL2H3细胞
MDA-MB-134细胞系相关产品：OVCA432细胞、Tu212细胞、624-mel细胞
Y3.AG.1.2.3细胞系相关产品：Rat Fetal Lung-6细胞、MES-SA/Dx5细胞、TALL 1细胞
Hce8693细胞系相关产品：UPCI-SCC-154细胞、ME-1 [Human leukemia]细胞、CMT-167细胞
H-II-E-C3细胞系相关产品：beta-TC6细胞、MDCK-2细胞、NE1细胞
3-LL细胞系相关产品：CCD 966 SK细胞、SRS-82细胞、SW-954细胞
Hi5细胞系相关产品：JC细胞、SKCO1细胞、CEMx721.174.T2细胞
HDSMC细胞系相关产品：LTEPsm细胞、MHH-CALL-2细胞、Kit 225-K6细胞
Hela-mock细胞系相关产品：LS-123细胞、HCV 29细胞、Hs 578.Bst细胞
HA细胞系相关产品：HOS/MNNG细胞、UCW 100细胞、SCC VII细胞
H1975细胞系相关产品：GM0637细胞、Spodoptera frugiperda clone 9细胞、Human Epidermoid carcinoma #2细胞
Normal Rat Kidney-52E细胞系相关产品：U-138-MG细胞、SK-NMC细胞、UO-31细胞
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