NCI-H446 Cell:人小细胞肺癌细胞系

"NCI-H446 Cell:人小细胞肺癌细胞系
细胞形态：上皮细胞样
细胞生长：贴壁
细胞背景资料：该细胞是１９８２年由CarneyD和GazdarAF等从一位小细胞肺癌患者的胸腔积液中建立的。细胞的原始形态并不具有小细胞肺癌特征。这个细胞株是小细胞肺癌的生化和形态学上的变种，表达神经元特有的烯醇酶和脑型肌酸激酶同工酶；左旋多巴脱羧酶、蚕素、抗利尿激素、催产素或胃泌激素释放肽未达到可检测水平。与正常细胞相比，该细胞c-mycDNA序列扩增约２０倍，RNA增加１５倍。最初传代培养基用含有５%FBS的RPMI１６４０，另外添加１０nM化可的松、０.００５mg/ml胰岛素、０.０１mg/ml转铁
UMNSAH/DF#1细胞系相关产品：SUM 149细胞、HELF细胞、IEC-18细胞
HuH-1细胞系相关产品：NIH:OVCAR-8细胞、DHL10细胞、NCI-H2291细胞
SK-HEP-1细胞系相关产品：SKM-1细胞、MC3T3-E1细胞、rRMECs细胞
ETCC-007细胞系相关产品：HEL-92-1-7细胞、UT-7细胞、HCC1187细胞
细胞物种来源：人源或鼠源等其它物种来源
NCI-H446 Cell:人小细胞肺癌细胞系
因为细胞生长的时候肯定是要相互联系，大部分的细胞都是要成片生长的，尤其是对于贴壁细胞，单个细胞贴壁之后长着长着就长到一片去了。但是如果是成片的细胞抱团的话，传代后细胞是不能贴壁的，这样抱团的细胞就会死亡。所以，消化传代的时候一定要将细胞消化成单个单个的独立状态，这个啊是非常考究你的功夫的！细胞一旦脱落入悬液里你很难再将他吹打成单个，因为他没有受力点了。很难找到受力点让你对他吹打的力分散开细胞。所以必须要在细胞未脱落之前将其吹打开，受力点就是细胞贴壁的地方。这样你就必须要严格控制好消化的程度啊，这和大师做饭掌握好火候是一样的道理啊。既要消化到容易吹打下来，又不能太过，一吹就整片脱落，要单个单个地往下掉。所以我才要分批分次地加胰酶消化就是为了保证不同生长状态贴壁程度的细胞能够都维持在好的受力点分散开。这个是很重要的一点。尤其是对于某些细胞这一点就是他活去死的致命点。像Caco-２细胞就是如此。另外关于传代很重要一点就是一定不能等到细胞长满的时候才去消化传代。要在细胞长到７０%左右的时候就要传代了，一旦发现细胞生长中已经有叠层生长的时候就要立即进行消化传代。不能再拖了。关于换液传代时候洗瓶的问题。对于用DMEM培养基培养的细胞，你在洗的时候如果是用无血清１６４０去洗细胞在随即后的几次中会比用DMEM洗的长的要好。同样，用１６４０培养的也有这个现象。如果不嫌麻烦的话，可以用PBS来洗，洗的效果和用无血清培养基洗的效果基本上是一样的，对于有些细胞会更胜一筹。洗的目的主要是洗去培养瓶里残留的血清，防止它对胰酶的影响。这样能够保证胰酶的消化能力优先，是很关键的一点。先补充这么多，还会后续更新。再补充一点：传代时PBS洗是很重要的一步，最近发现，用PBS就可以把细胞消化开来。加入PBS放置１０-１５分钟，有些需要更长的时间，等到细胞一个个分离开来的时候，就可以直接吹打下来，但是和胰酶消化一样，要控制好时间，不能时间太过了，要不然损伤细胞，细胞不容易成活，状态容易不好。这个方法对于某些细胞是很管用的。有些细胞用胰酶消化不容易消化成单个的时候，或者临时没有胰酶了，可以选用此方法。不过一定要试试，看是否适合你的细胞。
细胞产品包装：复苏形式：T２５培养瓶(一瓶)或冻存形式：１ml冻存管(两支)
细胞传代方法：１：２传代
为什么培养的细胞要及时传代？体外培养的细胞大多具有生长接触抑制的特性，也就是说当一个细胞被其他细胞包围的时候，它就会停止生长，及时传代后，细胞的生长得以继续。培养细胞生长减慢的原因在哪些?其解决办法有哪些？可能的原因有：更换了不同的培养液或血清；培养液中一些细胞生长必需成分如谷眈肢或生长因子等耗尽或缺乏或己被破坏；培养物中有少量细菌或真菌污染；试剂保存不当；比较新培养液与原培养液成分，比较新血清与旧血清等，找出其它可能的原因。解决办法：增加起始培养细胞浓度；让细胞逐渐适应新培养液；换入新鲜配制培养液；补加谷酷肢或生长因子等；用无抗生素培养液培养，如发现污染，去弃培养物，或用抗生素除菌；血清需保存在５℃到２０℃; 培养液需在２-８℃避光保存;含血清完全培养液在２-８℃保存，并在２周内用完;分离培养物，检测支原体。冷冻管应如何解冻？取出冷冻管后，须立即放入３７℃水槽中快速解冻，轻摇冷冻管使其在１-２分钟内大部分融化，特别注意，需残留一小块冰块，就可拿到超净工作台操作细胞，用７５%酒精消毒冻存管，用新鲜培养基将细胞转移至培养瓶。另外冷冻管由液氮桶中取出解冻时，必须注意安全，预防冷冻管爆裂。
细胞来源说明：细胞主要来源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少数国外著名大学建系
NCIH1623细胞系相关产品：MRC5细胞、PLA801-95D细胞、HRA19细胞
H-647细胞系相关产品：Kit225/K6细胞、P3X63 AG 8.653细胞、NRK49F细胞
MDA-MB-468-RED细胞系相关产品：GM346细胞、Medical Research Council cell strain-5细胞、Me Wo细胞
HCC-1171细胞系相关产品：MCF-10A细胞、LNCaP.FGC细胞、FDC-P1细胞
HAPI细胞系相关产品：ARO细胞、H1944细胞、NCIH2227细胞
细胞生长特性：贴壁/悬浮生长，混合
NCI-H446 Cell:人小细胞肺癌细胞系
细胞冻存复苏材料与方法步骤：常用的细胞冷冻贮存器为液氮贮存器，规格有３５L和５０L两种。使用时要注意以下几点：(１)一般两周需充液氮一次，至少一个月充氮一次。液氮温度达-１９６℃，使用时注意勿让液氮溅到皮肤上，以免引起冻伤。(２)液氮容器为双层结构，中间为真空层，瓶口有双层焊接处，应防止焊接部裂开。(３)在装入液氮时，要注意缓慢小心，并用厚纸卷筒或特制漏斗作引导，使液氮直达瓶底，如有专用液氮灌注装置则更好。若为初次使用，加液氮时更要缓慢，以免温度骤降而使容器损坏。细胞冻存时常备的材料有：０.２５%胰蛋白酶，含１０%～２０%的血清培养液，DMSO(分析纯)或无色新鲜甘油(１２１°C蒸气高压消毒)，２mL安瓿(或专用细胞冻存管)、吸管、离心管、喷灯、纱布袋(或冻存管架)等。主要操作步骤为：(１)选择处于对数生长期的细胞，在冻存前一天换液。将多个培养瓶中的细胞培养 液去掉，用０.２５%胰蛋白酶消化。适时去掉胰蛋白酶，加入少量新培养液。用吸管吸取培养液反复吹打瓶壁上的细胞，使其成为均匀分散的细胞悬液。悬浮生产细胞则不要消化处理。然后将细胞收集于离心管中离心(１０００r/min，１０分钟)。(２)去上清液，加入含２０%小牛血清的完全培养基，于４℃预冷１５分钟后，逐滴加入已无菌的DMSO或甘油，用吸管轻轻吹打使细胞均匀，细胞浓度为３×１０６～１×１０７/mL之间。(３)将上述细胞分装于安瓿或专用冷冻塑料管中，安瓿装１～１.５mL在火焰喷灯上封口，封口处要完全封闭，圆滑无勾。冷冻管要将盖子盖紧，并标记好细胞名称和冻存日期，同时作好登记(日期、细胞种类及代次、冻存支数)。(４)将装好细胞的安瓿或冻存管装入沙布袋内;置于液氮容器颈口处存放过夜，次日转入液氮中。采用控制降温速度的方法也可采用下列步骤：先将安瓿置入４℃冰箱中２～３小时，再移至冰箱冷冻室内３～４小时，再吊入液氮容器颈气态部分存放２小时，最后沉入液氮中。细胞冻存在液氮中可以长期保存，但为妥善起见，冻存半年后，取出一只安瓿细胞复苏培养，观察生长情况，然后再继续冻存。
细胞形态特性：上皮样
SBC-3细胞系相关产品：HCC4006细胞、NCIH716细胞、RM-1细胞
H-716细胞系相关产品：CHL-IU细胞、KYSE140细胞、MGH-U3细胞
SKNBE-2细胞系相关产品：Laboratory of Allergic Diseases 2细胞、IMCD3细胞、SCL I细胞
FL83B细胞系相关产品：H847细胞、SW 837细胞、WM266-4细胞
H-522细胞系相关产品：HEK-293-F细胞、HTR8/SVneo细胞、H-1703细胞
WM 239A细胞系相关产品：WEHI 164 TC细胞、NCI-H1672细胞、JHH-2细胞
KTA-7细胞系相关产品：Y3-Ag 1.2.3细胞、Colon-38细胞、HOS细胞
NCI-H446 Cell:人小细胞肺癌细胞系
TMD-8细胞系相关产品：293-FT细胞、SKNBE-2细胞、CEM-0细胞
U-CH1细胞系相关产品：CAL33细胞、Rin-M-5F细胞、CT26WT细胞
FUOV1细胞系相关产品：COLO320 DM细胞、MonoMac 6细胞、MNNGHOS细胞
NCC-IT细胞系相关产品：NCI-H2198细胞、MGHU1细胞、SUP-T1细胞
SK_N_FI细胞系相关产品：UMUC1细胞、SUDHL4细胞、HMC-1细胞
NCIH2023细胞系相关产品：CHP 100细胞、COLO 206细胞、Glioma-261细胞
HAPI细胞系相关产品：ARO细胞、H1944细胞、NCIH2227细胞
UCLA-SO-M14细胞系相关产品：C22细胞、NCIH1563细胞、MLE 12细胞
NIH-3T3细胞系相关产品：TM-4细胞、CAL-85-1细胞、HA1800细胞
Vx2细胞系相关产品：697细胞、NCIH2196细胞、Psi-2 DAP细胞
Acanthosis Nigricans 3rd attempt-CArcinoma细胞系相关产品：U251细胞、SNU1040细胞、MLFC细胞
U-251细胞系相关产品：Hs 606细胞、293E细胞、CT26-clone 25细胞
PC-3M-1E8细胞系相关产品：OVCAR-4细胞、ARH 77细胞、QBI-293A细胞
CFSC-8B细胞系相关产品：L-6 myoblast细胞、HCAEC细胞、M20 [Human melanoma]细胞
FL62891细胞系相关产品：PCI-SG231细胞、SNU-601细胞、SNU-668细胞
4175细胞系相关产品：OVCAR433细胞、MDCK II细胞、Human Melanoma Cell Bowes细胞
GP5d细胞系相关产品：SKES-1细胞、OCI-AML2细胞、Vero细胞
ST486细胞系相关产品：GalK1细胞、BNCL-2细胞、CHP100细胞
FDC-P1细胞系相关产品：CMT-93细胞、NCTC clone 929细胞、COLO 829细胞
A 72细胞系相关产品：AC29细胞、SW-579细胞、UPCISCC154细胞
CCRF CEM细胞系相关产品：ARO81-1细胞、MKN 7细胞、2PK-3细胞
NCI-H128细胞系相关产品：UO.31细胞、YTMLC-90细胞、GM03573A细胞
NCI-522细胞系相关产品：SR细胞、He La细胞、TE14细胞
OCILY7细胞系相关产品：SNU-520细胞、PT-67细胞、Hs839T细胞
GM02219D细胞系相关产品：RMa-bm细胞、WSU-DLCL2细胞、HFT8810细胞
201T细胞系相关产品：Fetal Bovine Heart Endothelial细胞、KALS-1细胞、MDBK (NBL-1)细胞
GC-1 spg细胞系相关产品：NCI-H3255细胞、CHL-CL-11细胞、NMC-G1细胞
Sarcoma OSteogenic-2细胞系相关产品：8305C_1细胞、MZ-CRC-1细胞、MC116细胞
GM-346细胞系相关产品：OVHM细胞、KM H-2细胞、NBLS细胞
MT4细胞系相关产品：B6Tert-1细胞、XWLC-05细胞、MRC-5细胞
Capan 1细胞系相关产品：CAOV3细胞、BHP 10-3细胞、NCI-SNU-5细胞
HCoEpiC细胞系相关产品：P36细胞、C8D1A细胞、HONE-1细胞
H-2170细胞系相关产品：WILL-2细胞、Y-79细胞、RN-c细胞
SKRC-20细胞系相关产品：NCI-H2342细胞、JOSK-M细胞、SUM 52细胞
QGP1细胞系相关产品：NCI-H220细胞、MT-2J细胞、LS-180细胞
MCA38细胞系相关产品：U-hth74细胞、DMS 273细胞、P3/NSI/1-AG4-1细胞
IHH4细胞系相关产品：NCTC929细胞、NCI-H1836细胞、VP267细胞
SKRC-42细胞系相关产品：H-1618细胞、Ra No. 1细胞、NK-92MI细胞
LAPC-4细胞系相关产品：MESSA Dx5细胞、COR-L51细胞、B95.8细胞
H82sclc细胞系相关产品：Y 1细胞、SCC-4细胞、Pro-5WgaRI3C细胞
C17.2细胞系相关产品：U 138 MG细胞、Eca109细胞、U266S细胞
H-1792细胞系相关产品：Detroit 562细胞、NTERA-2 clone D1细胞、HuPT3细胞
TW 01细胞系相关产品：A20细胞、ECC-1细胞、SC细胞
NCI-H446 Cell:人小细胞肺癌细胞系
HCA-7细胞系相关产品：VP267细胞、Hep G2-Luc细胞、PBL细胞
SCC-9细胞系相关产品：Ls-174-T细胞、TU 686细胞、A2780/CP70细胞
HL-60 clone15细胞系相关产品：MLOY4细胞、Tn-5B1-4细胞、NIH-OVCAR-3细胞
GS-9L细胞系相关产品：BC-028细胞、Neukoplast细胞、OAW42细胞
University of Michigan-Renal Carcinoma-2细胞系相关产品：HT 1376.T细胞、OVCAR 433细胞、PANC 1005细胞
BetaTC6细胞系相关产品：NIH-OVCAR-3细胞、Hs895.T细胞、A-172细胞
DHL6细胞系相关产品：KASUMI6细胞、C22细胞、LM(TK-)细胞
TK.10细胞系相关产品：HeLa/DDP细胞、ECV-304细胞、TOV112细胞
KYSE-410细胞系相关产品：TE1细胞、SKMEL-1细胞、BTT739细胞
Vero E-6细胞系相关产品：OCI-AML4细胞、T84细胞、Walker/LLC-WRC 256细胞
J82细胞系相关产品：Y1细胞、SW-480细胞、CAKI 1细胞
FHs74 Int细胞系相关产品：HRC-99细胞、Caco-2细胞、UCLA NPA-87-1细胞
"