VX-680 (Aurora Kinase抑制剂)

化学名

N-[4-[4-(4-methylpiperazin-1-yl)-6-[(5-methyl-1H-pyrazol-3-yl)amino]pyrimidin-2-yl]sulfanylphenyl]cyclopropanecarboxamide

简称

VX-680

别名

Tozasertib, MK-0457, VE 465, VE-465, VX-680, VX680

中文名

陶扎色替

化学式

C₂₃H₂₈N₈OS

分子量

464.59

CAS号

639089-54-6

纯度

98%

溶剂/溶解度

Water<1mg/ml; DMSO93mg/ml; Ethanol<1mg/ml

溶液配制

5mg加入1.08ml DMSO，或者每4.65mg加入1ml DMSO，配制成10mM溶液。SC6551-10mM用DMSO配制。

产品描述

VX-680 (Tozasertib, MK-0457)是一种pan-Aurora抑制剂，对Aurora A作用最强，无细胞试验中Kiapp为0.6nM，而对Aurora B/Aurora C的作用较弱，对Aurora A选择性比其他55种激酶高100倍。Phase 2。

信号通路

Cell Cycle; Epigenetics

靶点

Aurora A

Aurora C

Aurora B

FLT3

Bcr-Abl

IC50

0.6nM(Ki app)

4.6nM(Ki app)

18nM(Ki app)

30nM(Ki)

30nM(Ki)

体外研究

虽然VX-680具有多激酶特性，VX-680却诱导相似的细胞毒性，IC50约为300nM，在G2/M期、核内复制期及转染ABL或FLT-3激酶的BaF3细胞凋亡时，显示一个Aurora B类似的抑制表现型。VX-680抑制CAL-62细胞增殖，这种作用存在时间依赖性。用VX-680处理14天，明显降低群体的数量和大小，处理8305C下降达到70%，处理CAL-62、8505C和BHT-101下降达到90%。用VX-680处理不同ATC细胞，抑制细胞增殖，IC50为25到150nM，这种作用存在时间和剂量依赖性。在软琼脂中，VX-680明显削弱不同细胞系形成群落的能力。caspase-3的活性分析显示VX-680诱导不同细胞凋亡。VX-680处理CAL-62细胞12小时，形成DNA含量≥4N细胞累积物。微速摄影分析显示VX-680处理的CAL-62细胞离开细胞中期。VX-680可以抑制组蛋白H3的磷酸化作用。VX-680作用于携带T315I突变的BCR-Abl的病人样本，具有明显抑制活性。

体内研究

VX-680作用于人类Aml(HL-60)移植瘤模型明显降低肿瘤尺寸。VX-680按75mg/kg剂量给药实验鼠，每天腹腔注射两次，持续13天，与对照组相比，平均肿瘤体积下降达98%。肿瘤体积比实验之前初始体积小很多。按12.5mg/kg剂量每天给药两次，肿瘤生长也明显降低，这种作用存在剂量依赖性。VX-680耐受性很好，只有在使用高剂量时可以观察到实验动物体重稍微降低。通过比较cisplatin，按5.4mg/kg剂量给药，每四天腹腔注射一次，一共进行三次，抑制肿瘤生长只达9%。VX-680作用于胰脏和结肠移植瘤，也引起肿瘤衰退。VX-680静脉注射给药携带HCT116肿瘤的实验鼠，显示很强的抗癌活性。使用高剂量VX-680(每小时2mg/kg)处理，明显提高效果，比实验钱的初始肿瘤平均尺寸下降56%。

临床实验

N/A

特征

N/A

酶活性检测实验

方法

丙酮酸激酶/乳酸脱氢酶催化NADH的氧化，伴随着ATP的消耗，观察340nM处吸光值的降低。反应包括100mM Tris(pH为8)，10mM MgCl₂，2.2mM ATP，1mM磷酸烯醇丙酮酸，0.6mg/ml NADH，75ml丙酮酸激酶，105ml乳酸脱氢酶和0.5mM基底肽(序列为EAIYAAPFAKKK)。加入足够的激酶开始反应，反应的激酶浓度达到30nM，用微量滴定板分光光度计在30℃进行30分钟，观察吸收率的降低。通过加入3.75μl溶于100% DMSO的VX-680或单独DMSO，获得抑制常数。按如下公式计算Ki值，Ki=IC50/(1+[S]/Kd)，[S]=[ATP]=2.2mM，Kd=70μM。假定作用于野生型和H396P Abl激酶域的Kd(ATP)为70μM，计算以上各值。

细胞实验

细胞系

CAL-62细胞

浓度

5-500nM

处理时间

4天

方法

对照组CAL-62细胞培养在二甲亚砜和DMSO中，实验组加入500nM VX-680，处理1到5天。加入不同浓度(5到500nM)Aurora抑制剂处理不同ATC细胞4天，用来测定VX-680作用于细胞增殖的剂量依赖性。细胞在温育结束前加30mM BrdU标记，脉冲2小时。通过比色免疫分析使用细胞增殖ELISA试剂盒分析BrdU的合并率。通过比较VX-680处理的细胞和对照组细胞得到结果。

动物实验

动物模型

右侧腋窝处皮下注射107 HL-60白血病细胞的雌性无胸腺NCr-nu鼠

配制

50mM含50% PEG300的磷酸buffer

剂量

50mg/kg，75mg/kg

给药方式

腹腔注射

产品编号

产品名称

包装

KL6551-10mM

VX-680 (Aurora Kinase抑制剂)

10mM×0.2ml

KL6551-5mg

VX-680 (Aurora Kinase抑制剂)

5mg

KL6551-25mg

VX-680 (Aurora Kinase抑制剂)

25mg

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说明书

1份