"Hca-F cell line小鼠肝癌细胞系
细胞背景资料：肝癌
细胞消化过程总结：其实绝大部分细胞消化的时候是只要用胰酶润洗一遍即可，吸去胰酶后，残留的那些无法计算体积的附着在细胞表面的微量胰酶在３７度一般不到２min足够消化细胞（绝大部分１min不到）。对于这些细胞原则上不要用胰酶孵育细胞，连续这样传代，对细胞伤害很大。简单的程序是PBS润洗吸去，胰酶润洗吸去，然后３７度消化。２，什么算是消化好了呢？不是细胞全部成间隔分布很离散的单个圆形才算消化好了，一般你肉眼观察贴壁细胞层，只要能移动了，多半呈沙壮移动，其实已经可以了，很多人喜欢把细胞消化或者吹打成完全分离细胞，这是没有必要的。一般能移动了，说明细胞与培养基质材料的附着已经消失了，细胞之间的附着也已经消失了，细胞已经独立分布了（虽然没有呈现很广的离散分布）。这个时候应该停止消化，不要等到看到镜下所有细胞都分离得非常好，间隙很大，才停止。细胞就是完全成单个细胞悬液，之后在贴壁的过程中仍然会聚集，这个是贴壁培养的细胞，尤其是肿瘤细胞的一个特性，无论死活的细胞都是如此，你可以尝试，准备１００%的单个细胞悬液，贴壁后观察细胞，仍然是几个几个细胞聚集在一起。一些悬浮培养细胞也是如此，容易聚集，不要去尝试过几个小时就拿出来吹打成单细胞悬液（不要笑，这个是初养悬浮细胞的人常犯的错误，以为悬浮培养就是一个一个分开）。细胞只要能从基质上脱离下来，这个时候即使是成片的（比如Calu-３细胞），吹打不超过２０次后（一般１０次即可），成小规模聚集（１０个细胞左右），是正常的，不要试图再去延长消化时间，或者像有的同学那样吹打１h，等待单细胞悬液出现。比较难消化的细胞（润洗方法５min还不能消化），比如HCT１５, LS４１１和KM１２，这样的细胞一般需要用少量胰酶孵育，但也不需要很多，一般１００mm dish，一次最多加入５００ul，就足够了，一般我加３００ul。即使这样难消化的细胞，一般不超过５min，即可见细胞成片移动，就应该停止消化。一些正常细胞也会有难消化的时候，比如tsDC细胞，但也只要用少量胰酶孵育，３min左右即可看到成片沙状移动。
细胞形态：上皮细胞样
细胞生长：贴壁
细胞物种来源：人源或鼠源等其它物种来源
Hca-F cell line小鼠肝癌细胞系
常见细胞培养中一些问题总结：１)培养基中血清的比例多少合适？血清是细胞培养上一个极为重要的营养来源，所以血清的含量多少会对细胞的生长会产生极大的影响。血清的含量一般为５%-１５%，不要低于５%或高过２０%，因为含量过低会导致细胞营养不足，过高则会破坏渗透压平衡。一般建议血清含量为１０%，可以适量加减；２)何时须更换培养基？视细胞生长密度而定，或遵照细胞株基本数据上的更换时间，按时更换培养基即可。还可以参照指示剂的颜色变化进行更换；３)购买的复苏细胞，为何会有脱落？因为运输的过程中不可避免的会有震荡，收到后可以离心收集；４)购买的细胞冷冻管经解冻后，为何会发生细胞数目太少之情形？研究人员在冷冻细胞之培养时出现细胞数目太少，大都是因为离心过程操作上的失误，造成细胞的物理性损伤，以及细胞流失。建议细胞解冻后不要立刻离心，应待细胞生长隔夜后再更换培养基即可；５)购买的细胞死亡或细胞存活率不佳可能原因？研究人员在细胞培养时出现存活率不佳，常见原因可归纳为：培养基使用错误或培养基品质不佳。血清使用错误或血清的品质不佳。解冻过程错误。冷冻细胞解冻后，加以洗涤细胞和离心。悬浮细胞误认为死细胞。培养温度使用错误。细胞置于–８０°C太久；６)收到的冷冻管瓶身破裂，瓶盖有裂纹，或瓶盖脱落之原因？冷冻管瓶盖裂纹，或瓶身破裂，可能是因为操作者夹取冷冻管时用力不当，造成冷冻管裂损，建议使用止血钳小心夹取。另冷冻管瓶盖松动或松脱，乃因热胀冷缩之物理现象，冷冻管有可能因此而造成细胞污染，故冷冻管于放入和取出液氮桶时，均应立刻将冷冻管再一次扭紧。
细胞产品包装：复苏形式：T２５培养瓶(一瓶)或冻存形式：１ml冻存管(两支)
细胞传代方法：１：２-１：３传代；每周换液２-３次。
细胞来源说明：细胞主要来源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少数国外著名大学建系
细胞生长特性：贴壁
正确的细胞复苏需知事项：细胞冻存好了，接下来要注意什么问题呢？没错，就是记得到时间了，拿出来复苏。那么，细胞复苏的过程中又有哪些该注意的事项呢？细胞活力和形态检查的作用何在？活力检查——千万不要使用不健康的细胞，可能有污染(真菌、支原体等)，如果发现有污染毫不犹豫的丢弃!形态检查——检查细胞的固有形态和生长行为。冻存细胞：补充新的培养液——在您开始冻存细胞的前一天补充新的培养液。在细胞长至７０%单层时收获细胞，计数活细胞数，用冻存液调整细胞密度~５ x１０６ Cell s/ml (根据不同的细胞类型调整)；冻存液——用冻存液洗细胞并用冻存液重悬细胞，有不同类型的冻存液，根据细胞类型选择最合适的冻存液(常用的冻存液成分有)：５-１０% DMSO——注意确保DMSO不含有其他的毒性物质；５-１５%甘油；如果细胞在无血清培养基内生长，应在５０%条件培养基内(细胞在无血清培养基内生长２４小时)内冻存和复苏。在冻存管上标记好细胞类型，日期，冻存人等信息，并保证每冻存管不超过１.５ml。放入液氮罐之前记录冻存管的数量和位置。以最快的速度转移冻存管知液氮罐内，因此，此步骤使用干冰，或者把冻存管浸入装有液氮的小盒内。此外还要注意，在冻存管上没有足够的空间记录细胞的详细信息，做好记录是非常非常重要的！还有一个最重要的，一定要在异地的液氮罐内保存同样的一份细胞，以免其中的一个液氮罐出现问题！细胞正确的复苏方式和正确的冻存方式同样重要，熟记以下要点：当从液氮罐内取出细胞时，有可能会出现冻存管破裂的情况，使用保护面罩和防护服十分必要；其实，细胞复苏只是一个简单的实验，不过这其中却不可避免有一些需要注意的细节，不然，也不一定会尽如人意。例如说，人身健康方面：一定要记得做好防冻工作，戴上护目镜；尽量降低DMSO对细胞的损伤等等。
Hca-F cell line小鼠肝癌细胞系
细胞形态特性：详见细胞说明书
H69/P细胞系相关产品：Mo 59J细胞、SNU-1040细胞、HFT-8810细胞
OV-2008细胞系相关产品：IPAM-WT细胞、MHCCLM3细胞、R1610细胞
PANC 1005细胞系相关产品：BEP2D细胞、Psi-2-DAP细胞、JVM-3细胞
hEM15A细胞系相关产品：NCI-H2591细胞、U-251_MG细胞、M-14细胞
SCC-25细胞系相关产品：ZR75-1细胞、HUT 28细胞、RPMI #1846细胞
786O细胞系相关产品：OCI-Ly 1细胞、NCI/ADR-RES细胞、NCI-H441-4细胞
RPMI no. 8226细胞系相关产品：BHT-101细胞、G292细胞、Rat Basophilic Leukemia-1细胞
SKMEL-24细胞系相关产品：MDA-134细胞、AE 1201细胞、MV4II细胞
Medical Research Council cell strain-5细胞系相关产品：SupT1细胞、G 292 Clone A 141B1细胞、IR983F细胞
NIH-3T3细胞系相关产品：TM-4细胞、CAL-85-1细胞、HA1800细胞
HRA-19细胞系相关产品：NCI-H441细胞、aTC1-6细胞、HL 60细胞
U118-MG细胞系相关产品：SV-HUC细胞、brain-derived Endothelial cells.3细胞、GH 3细胞
MD Anderson-Metastatic Breast-436细胞系相关产品：GLRK 13细胞、EJ1细胞、HTR-8/SVneo细胞
Hca-F cell line小鼠肝癌细胞系
NCI-HUT-292细胞系相关产品：NCIH2291细胞、H322T细胞、SUDHL4细胞
HCC-78细胞系相关产品：H358细胞、RPMC细胞、L-Wnt-3A细胞
Nthy ori 3.1细胞系相关产品：SKOV-3细胞、CAMA1细胞、RDES细胞
Nthy ori 3.1细胞系相关产品：SKOV-3细胞、CAMA1细胞、RDES细胞
CCD19-Lu细胞系相关产品：UCD-MLA-144细胞、NG 108-15细胞、AAV-293细胞
BIC1细胞系相关产品：NCI-H1048细胞、TR 146细胞、AHH-1细胞
NCI-H820细胞系相关产品：P31/FUJ细胞、Caco 2细胞、HHUA细胞
HCC 94细胞系相关产品：624mel细胞、SK-MEL 28细胞、hTERT RPE-1细胞
SNU-C1细胞系相关产品：NGP细胞、GLAG-66细胞、Ly7细胞
MOLT16细胞系相关产品：J774A1细胞、NCIH292细胞、NeHepLxHT细胞
NCIH510细胞系相关产品：N-9细胞、HCT GEO细胞、SNU-886细胞
BXPC3细胞系相关产品：ARPE-19细胞、Roswell Park Memorial Institute 6666细胞、H-7721细胞
LICR-HN6细胞系相关产品：NK10a细胞、MD Anderson-Metastatic Breast-468细胞、T-ALL 1细胞
Tohoku Hospital Pediatrics-1细胞系相关产品：NCIH2107细胞、NCI-H1581细胞、NFS-60细胞
JHH2细胞系相关产品：DMS 153细胞、KCL22细胞、675T细胞
NCI-SNU-5细胞系相关产品：HRMC细胞、RIN-14B细胞、THC-8307细胞
MA-104细胞系相关产品：Rin-M-5F细胞、RT4-D6P2T细胞、UMR106细胞
UPCI:SCC90细胞系相关产品：Jurkat (clone E6-1)细胞、NCIH1155细胞、GM00637B细胞
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P3HRI细胞系相关产品：SCL I细胞、CCF-STTG1细胞、MDST8细胞
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QG-56细胞系相关产品：SY5Y细胞、Tu-686细胞、SB细胞
BEL 7404细胞系相关产品：Colo205细胞、JiyoyeP-2003细胞、HIMEC细胞
H2591细胞系相关产品：Hep G2-Luc细胞、SKOV-3细胞、CEMC7细胞
NMCG-1细胞系相关产品：GM00215细胞、TE-32细胞、CAL 62细胞
CHO细胞系相关产品：MT-2细胞、EVSAT细胞、HECCL-1细胞
INS1细胞系相关产品：OVCAR-8细胞、L5178Y TK+/- (clone 3.7.2C)细胞、MRCV细胞
MDA-MB415细胞系相关产品：VMCUB-1细胞、CAL 85-1细胞、Y-1细胞
LICCF细胞系相关产品：Emory University-3细胞、DB细胞、EJ1细胞
WEHI3B细胞系相关产品：OS-732细胞、HepG2/C3A细胞、Madison细胞
TE-85 clone 5细胞系相关产品：TE6细胞、MRC-5细胞、FT-293细胞
CV 1细胞系相关产品：hADSCs细胞、BALL-1细胞、Z310细胞
Ku812F细胞系相关产品：159PT细胞、GC-2细胞、CD-18细胞
EB-1细胞系相关产品：SUP-M2细胞、CTLA4 Ig-24细胞、SUD6细胞
P3-NS1/1-Ag4-1细胞系相关产品：NHLF细胞、NCI-H524细胞、Caco 2细胞
NCI-H2347细胞系相关产品：KATO III细胞、32D/cl3细胞、KAT-5细胞
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HConEpic细胞系相关产品：Vero 76 clone E-6细胞、KP-N-RT细胞、NCIH929细胞
Panc-813细胞系相关产品：IA-LM细胞、PCI:SG-231细胞、OE-19细胞
OUMS-27细胞系相关产品：KYSE270细胞、H774细胞、B-cell Acute Lymphoblastic Leukemia-1细胞
HuT78细胞系相关产品：P3J HR1-K细胞、MHCC 97细胞、TALL-1 [Human adult T-ALL]细胞
Hca-F cell line小鼠肝癌细胞系
MGH-U3 (RN)细胞系相关产品：P3X63Ag8细胞、MCF-10 Attached细胞、BV-173细胞
Virginia Mason Research Center-Lung Cancer D细胞系相关产品：H211细胞、CLL-CII细胞、bEnd.3[BEND3]细胞
OSRC2细胞系相关产品：GL261细胞、Hep 3B2.1-7细胞、CA-OV-3细胞
H-727细胞系相关产品：293A细胞、U251细胞、PK-13细胞
KCL22细胞系相关产品：GC9811-P细胞、Mo7e细胞、NCI-H1105细胞
HPB/ALL细胞系相关产品：SP-2/0-AG14细胞、95D细胞、MDA-MB468细胞
PANC 1005细胞系相关产品：BEP2D细胞、TCCPAN2细胞、CCC-HEL-1细胞
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