"FRhK-4:恒河猴胚肾传代细胞
细胞背景资料:胚胎;肾;自发永生;雌性
HHFK细胞系相关产品:HEMCSS细胞、MDA-MB-134细胞、Michigan Cancer Foundation-10A细胞
PCI:SG-231细胞系相关产品:SK-ES1细胞、Hs 27细胞、Hs 706.T细胞
细胞形态:上皮细胞样
细胞生长:贴壁
细胞常规培养传代流程(请严格遵照无菌操作):1)吸出原培养瓶中的培养基,PBS缓冲液润洗细胞两次,加2-3ml 0.25%胰酶进行消化细胞(注意把握消化时间,通常控制在1-2min);2)镜下观察消化情况,在细胞边缘缩小,贴壁松动时(不建议消化到细胞漂浮)去掉胰酶,加6-8ml完全培养基,轻轻吹打细胞层,尽量把细胞层吹落,吹散;3)取部分细胞悬液转移到新的培养皿/瓶中,添加适当的完全培养基,把细胞悬液打匀,于培养箱中培养;4)注意培养基PH值变化情况,定期换液(每周2-3次),待细胞密度达到80%以后重复1项操作或者冻存;特别注意:(如使用公共实验室或者初次接触细胞培养,建议添加双抗培养)1)收到细胞后请尽快更换为含15%血清的新鲜培养基,如因特殊情况需要继续使用原瓶,请在原瓶培养基中额外添加10%的血清,(原瓶培养基的继续使用时间最长不宜超过72小时);2)贴壁细胞收到当天切忌立刻消化,请将细胞换液后放置培养箱孵育到第二天再做消化传代,请优先选择直径6cm的培养皿进行传代培养;3)如签收时出现培养瓶壁破裂,漏液等情况请及时做好照片记录并联系实验室。
细胞物种来源:人源或鼠源等其它物种来源
FRhK-4:恒河猴胚肾传代细胞
细胞产品包装:复苏形式:T25培养瓶(一瓶)或冻存形式:1ml冻存管(两支)
EFM-19细胞系相关产品:SKMES细胞、RD-ES细胞、HT-115细胞
DCS细胞系相关产品:GM16136细胞、KMS-26细胞、DU_145细胞
CCD966SK细胞系相关产品:KYSE-150细胞、Hs821T细胞、YD38细胞
细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。
冻存和复苏的原则:慢冻快融》当细胞冷到零度以下,可以产生以下变化:细胞器脱水,细胞中可溶性物质浓度升高,并在细胞内形成冰晶。如果缓慢冷冻,可使细胞逐步脱水,细胞内不致产生大的冰晶;相反,结晶就大,大结晶会造成细胞膜、纲胞器的损伤和破裂。复苏过程应快融,目的是防止小冰晶形成大冰晶,即冰晶的重结晶。慢冻程序》1.标准程序:采用细胞冻存器》当温度在-25℃以上时,1~2℃/min;当温度达-25℃以下时,5~10℃/min;当温度达-100℃时,可迅速放入液氮中。2.简易程序:将冷冻管(管口要朝上)放入纱布袋内,纱布袋系以线绳,通过线绳将纱布袋固定于液氮罐罐口,按每分钟温度下降1~2℃的速度,在40min内降至液氮表面过夜,次晨投人液氮中。3.传统程序:冷冻管置于4℃10分钟→-20℃30分钟→-80℃16~18小时(或隔夜)→液氮槽长期储存。细胞冻存方法:1.预先配制冻存液》(1)8%DMSO+细胞生长液(92%血清)2.取对数生长期细胞,经胰酶消化后,加入适量冻存液,用吸管吹打制成细胞悬液(1×10(6)~5×10(6)细胞/ml)。3.加入1ml细胞于冻存管中,密封后标记冷冻细胞名称和冷冻日期。液氮长期保存。保存细胞的复苏方法:1.快速解冻》冻存细胞从液氮中取出后,立即放入37℃水浴中,轻轻摇动冷冻管,使其在1分钟内全部融化(不要超过3分钟)。2.解冻后的细胞可直接接种到含完全生长培养液的细胞培养瓶中直接进行培养,24小时后再用新鲜完全培养液替换旧培养液,以去除DMSO。3.如果细胞对冷冻保护剂特别敏感解冻后的细胞应先通过离心去除冷冻保护剂,然后再接种到含完全生长培养液的培养瓶中。
细胞来源说明:细胞主要来源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少数国外著名大学建系
FRhK-4:恒河猴胚肾传代细胞
细胞生长特性:贴壁
ROS1728细胞系相关产品:T_T_细胞、SW962细胞、SW 954细胞
HCT_116细胞系相关产品:RT4-D6P2T细胞、Hs-675-T细胞、WB F344细胞
D324细胞系相关产品:IMR32细胞、NCI-H211细胞、RMC-1细胞
P3 NS1 Ag4细胞系相关产品:Hs 706.T细胞、National Medical Center-Glioma 1细胞、RCC-10细胞
因为细胞生长的时候肯定是要相互联系,大部分的细胞都是要成片生长的,尤其是对于贴壁细胞,单个细胞贴壁之后长着长着就长到一片去了。但是如果是成片的细胞抱团的话,传代后细胞是不能贴壁的,这样抱团的细胞就会死亡。所以,消化传代的时候一定要将细胞消化成单个单个的独立状态,这个啊是非常考究你的功夫的!细胞一旦脱落入悬液里你很难再将他吹打成单个,因为他没有受力点了。很难找到受力点让你对他吹打的力分散开细胞。所以必须要在细胞未脱落之前将其吹打开,受力点就是细胞贴壁的地方。这样你就必须要严格控制好消化的程度啊,这和大师做饭掌握好火候是一样的道理啊。既要消化到容易吹打下来,又不能太过,一吹就整片脱落,要单个单个地往下掉。所以我才要分批分次地加胰酶消化就是为了保证不同生长状态贴壁程度的细胞能够都维持在好的受力点分散开。这个是很重要的一点。尤其是对于某些细胞这一点就是他活去死的致命点。像Caco-2细胞就是如此。另外关于传代很重要一点就是一定不能等到细胞长满的时候才去消化传代。要在细胞长到70%左右的时候就要传代了,一旦发现细胞生长中已经有叠层生长的时候就要立即进行消化传代。不能再拖了。关于换液传代时候洗瓶的问题。对于用DMEM培养基培养的细胞,你在洗的时候如果是用无血清1640去洗细胞在随即后的几次中会比用DMEM洗的长的要好。同样,用1640培养的也有这个现象。如果不嫌麻烦的话,可以用PBS来洗,洗的效果和用无血清培养基洗的效果基本上是一样的,对于有些细胞会更胜一筹。洗的目的主要是洗去培养瓶里残留的血清,防止它对胰酶的影响。这样能够保证胰酶的消化能力优先,是很关键的一点。先补充这么多,还会后续更新。再补充一点:传代时PBS洗是很重要的一步,最近发现,用PBS就可以把细胞消化开来。加入PBS放置10-15分钟,有些需要更长的时间,等到细胞一个个分离开来的时候,就可以直接吹打下来,但是和胰酶消化一样,要控制好时间,不能时间太过了,要不然损伤细胞,细胞不容易成活,状态容易不好。这个方法对于某些细胞是很管用的。有些细胞用胰酶消化不容易消化成单个的时候,或者临时没有胰酶了,可以选用此方法。不过一定要试试,看是否适合你的细胞。
SW13细胞系相关产品:NCIH1436细胞、WERI-Rb1细胞、hTERT-HME-1细胞
H1568细胞系相关产品:MSTO-211细胞、NCIH1694细胞、H-676细胞
Hs578Bst细胞系相关产品:RCC10 RGB细胞、A427细胞、EFM192C细胞
LM3细胞系相关产品:HCC1500细胞、UCLA-SO-M14细胞、H-35细胞
alpha TC1-6细胞系相关产品:Namalva细胞、H-1688细胞、NCIH2228细胞
HMC-1细胞系相关产品:ML-2细胞、NCI-H711细胞、H35 Reuber细胞
HCC15细胞系相关产品:FRO81-2细胞、YD-38细胞、MOLT.4细胞
L132细胞系相关产品:SW 579细胞、UCLA SO M14细胞、SK-LMS-1细胞
CESS细胞系相关产品:EFM-19细胞、B16 melanoma细胞、CaSki细胞
NCI-H1688细胞系相关产品:MOLT3细胞、P 3 HR 1细胞、CCD 1112SK细胞
LI7细胞系相关产品:BxPC-3细胞、3T3 J2细胞、T173细胞
Hs27细胞系相关产品:K299细胞、OS-732细胞、HCC-44细胞
HGBEC细胞系相关产品:BEAS-2B细胞、MGH-U1 (EJ)细胞、LNCaP C4-2B细胞
OVCAR.4细胞系相关产品:CCRF/CEM细胞、BeWo细胞、MDCC MSB1细胞
FTC-133细胞系相关产品:SNU-C1细胞、SNU-251细胞、NSC34细胞
SBC-3细胞系相关产品:HCC4006细胞、NCIH716细胞、RM-1细胞
SBC-3细胞系相关产品:HCC4006细胞、NCIH716细胞、RM-1细胞
McA-RH8994细胞系相关产品:LAN1细胞、PL-45细胞、Mel624细胞
BEL-7405细胞系相关产品:H-1793细胞、OSKM-1细胞、Kit225/K6细胞
MDCC-MSB1细胞系相关产品:GA10细胞、CHO Lec1细胞、KE-37细胞
NCI-BL2141细胞系相关产品:UO31细胞、H3255_DA细胞、HO8910/PM细胞
HPB/ALL细胞系相关产品:SP-2/0-AG14细胞、H-1299细胞、HGBEC细胞
TE-4细胞系相关产品:GOS-3细胞、Hs 675.T细胞、SNT-8细胞
MV-3细胞系相关产品:H1672细胞、Caco-2/BBe细胞、TGBC-11-TKB细胞
D324 Med细胞系相关产品:HFL细胞、FHCRC-11细胞、PANC0504细胞
UM-RC-2细胞系相关产品:PNEC30细胞、B95.8细胞、Hs832T细胞
FRhK-4:恒河猴胚肾传代细胞
MV4:11细胞系相关产品:P30OHK细胞、K1细胞、BXPC3细胞
MDCK II细胞系相关产品:SC1细胞、G-292细胞、130 T细胞
BALB 3T3 clone A31细胞系相关产品:MG-63细胞、PL45细胞、TM-3细胞
P-388细胞系相关产品:ACC-3细胞、SKNBE2细胞、HLF细胞
IPLB-Sf21-AE细胞系相关产品:SNU1细胞、H-1648细胞、MT-2J细胞
HET-1A细胞系相关产品:GM3190细胞、Caco2-BBE细胞、LX-2细胞
HPB-ALL细胞系相关产品:Eca 109细胞、H3396细胞、PCI-4.2细胞
Li-7细胞系相关产品:NCTC clone 929细胞、Balb/3T3-4-Cl31细胞、VM-CUB-I细胞
PK (15)细胞系相关产品:GM07404D细胞、Hs-578T细胞、NCIH2286细胞
Hs 600.T细胞系相关产品:B 95.8细胞、SuDHL 1细胞、H1963细胞
LLC-PK(1)细胞系相关产品:Murine Leydig Tumor Cell line-1细胞、mRTEC细胞、HLMVEC细胞
PTK 2细胞系相关产品:COLO 699细胞、NS1-Ag4/1细胞、hCMEC/D3细胞
BL1339细胞系相关产品:L363细胞、OVISE细胞、H-358细胞
Stanford University-Diffuse Histiocytic Lymphoma-5细胞系相关产品:MeWo细胞、HCC-9724细胞、H-520细胞
CC-LP-I细胞系相关产品:MES-SA Dx5细胞、NCIH2052细胞、OVHM细胞
JJN-3细胞系相关产品:HOC1细胞、CW2细胞、UMUC14细胞
H747细胞系相关产品:SUD-4细胞、MDA MB 231细胞、SUM-52PE细胞
KLM-1细胞系相关产品:RPE1细胞、KALS1细胞、MEL细胞
G402细胞系相关产品:MOLP2细胞、TE353.SK细胞、PANC403细胞
Hs819T细胞系相关产品:HS-766-T细胞、U2OS细胞、INS1-E细胞
RS411细胞系相关产品:NT2-D1细胞、LAN-5细胞、HEK293-FT细胞
A549/DDP细胞系相关产品:NCI-H2029细胞、SW 948细胞、COLO320 DM细胞
MESSA/Dx5细胞系相关产品:KM12-SM细胞、HLEC-B3细胞、MEG01细胞
SHP77细胞系相关产品:HS-683细胞、PFSK细胞、TE-10细胞
U-373-MG细胞系相关产品:MC 3T3-E1细胞、WSU-DLCL-2细胞、PANC0327细胞
T-cell Acute Lymphoblastic Leukemia-1细胞系相关产品:Hs 766细胞、H-676细胞、RPVSMC细胞
SK-RC-20细胞系相关产品:CT 26细胞、L 1210细胞、TE 32.T细胞
SHI1细胞系相关产品:RAG细胞、U266 Bl细胞、LIM1215细胞
PC-3M细胞系相关产品:Murine Lung Epithelial-12细胞、NCIH128细胞、8226/S细胞
HMC3细胞系相关产品:LC-1Sq细胞、CG-4细胞、HConEpic细胞
MB 157细胞系相关产品:UPCI:SCC090细胞、Z-138细胞、Hepatoma 22细胞
Anip-973细胞系相关产品:D 407细胞、HR-8348细胞、RKOE6细胞
HPAF II细胞系相关产品:MD Anderson-Metastatic Breast-134-VI细胞、Caki-1细胞、NUGC2细胞
H1341细胞系相关产品:T47D:A细胞、TE354.T细胞、H-1666细胞
FRhK-4:恒河猴胚肾传代细胞
C8166细胞系相关产品:T 84细胞、Pa17C细胞、L-929细胞
ARO81细胞系相关产品:SN12C细胞、SR-786细胞、SK-ChA1细胞
H2196细胞系相关产品:LA-N-6(OAN)细胞、ROS1728细胞、SW 1783细胞
Hs-578Bst细胞系相关产品:MN 60细胞、JTC-39细胞、MLA-144细胞
OVCAR8细胞系相关产品:NTera 2细胞、SUM 102细胞、NCTC 1469细胞
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