"DH82:狗肾恶性组织细胞增生症传代细胞
细胞背景资料:肾;Golden Retrieve
RBMEC细胞系相关产品:mRTEC细胞、Hs 729细胞、Ramos(RA1)细胞
GM2219C细胞系相关产品:AK细胞、HEK 293-EBNA细胞、Loucy细胞
细胞形态:上皮细胞样
细胞生长:贴壁
细胞冻存的步骤:1)选择处于对数生长期的细胞,在冻存前一天换液。将多个培养瓶中的细胞培养液去掉,用0.25% 胰蛋白酶消化。适时去掉胰蛋白酶,加入少量新培养液。用吸管吸取培养液反复吹打瓶壁上的细胞,使其成为均匀分散的细胞悬液。悬浮生产细胞则不要消化处理。然后将细胞收集于离心管中离心(1000r/min,10分钟);2)去上清液,加入含20%小牛血清的完全培养基,于4℃预冷15分钟后,逐滴加入已无菌的DMSO或甘油,用吸管轻轻吹打使细胞均匀,细胞浓度为5×106~1×107/mL之间。(冻存培养液的配置是不是一定要用小牛血清呢?答案是不一定的,具体要看培养的细胞类型来选择;3)将分装上述细胞悬液于2ml冻存管中,每管0.25ml。冻存管要将盖子盖紧,并标记好细胞名称和冻存日期,同时作好登记(日期、细胞种类及代次、冻存支数);4)将装好细胞的冻存管放到冻存盒中,-80℃冰箱过夜。;如果有程序降温器(放在-80℃冰箱过夜,放入液氮罐);或者可以在4℃,2h;然后转到-20℃,2h;-80℃,2h;放入液氮罐;5)细胞冻存在液氮中可以长期保存,但为妥善起见,冻存半年后,取出一只冻存管细胞复苏培养,观察生长情况,然后再继续冻存。
细胞物种来源:人源或鼠源等其它物种来源
DH82:狗肾恶性组织细胞增生症传代细胞
细胞产品包装:复苏形式:T25培养瓶(一瓶)或冻存形式:1ml冻存管(两支)
DLD-1细胞系相关产品:HCC1419细胞、BGC-823细胞、LS1034细胞
tdott细胞系相关产品:PANC0813细胞、PC-3M-2B4细胞、U-2932细胞
SW 900细胞系相关产品:H295R-S1细胞、H1563细胞、Tb1.Lu细胞
细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。
公司细胞库冻存并保种有2300多种各类细胞系。针对每种不同的细胞系,公司摸索并积累了大量细胞培养条件和优化参数,为您的细胞实验保驾护航。细胞培养是生命科学研究中最基础、也是最常用的实验手段。从冻存→复苏→传代→实验,在每一次细胞培养的过程中我们都是精心呵护,小心培养,心里都是默默承诺:我要护你一世周全!可是可是……无数次细胞都因污染而离我而去,投入的不只是我们貌美如花的青春,还有那一去不复返的经费!在细胞生物学,生物化学,免疫学,神经生物学,病理学……只要涉及细胞的研究领域,都面临着支原体污染的威胁。在众多污染物中,也就属支原体最狡猾了,他最善于隐藏自己,因为被支原体污染的细胞不会马上死亡,但会改变细胞的新陈代谢,甚至会改变细胞的基因表达谱,我们就这样被欺骗了无数次,谁让我们就是个看“颜值”的花痴了。可是我们通过被虐了几百次的经验中总结出来,当你的细胞出现了这些症状时:生长速率改变;活性减弱;形态改变;染色体畸变;转染效率显著降低;细胞复苏后存活率降低……。那你就得千万小心了,也许你的细胞已经被支原体欺凌了!
细胞来源说明:细胞主要来源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少数国外著名大学建系
DH82:狗肾恶性组织细胞增生症传代细胞
细胞生长特性:贴壁
MH-22a细胞系相关产品:High-5细胞、NCI-H2286细胞、P3-NS1/1Ag 4.1细胞
OCILY-10细胞系相关产品:P3-X63-Ag8-653细胞、WM 239A细胞、Cor L51细胞
NCI H226细胞系相关产品:Human Microvascular Endothelial Cell line-1细胞、HCC78细胞、BAR-T细胞
RCC-JF细胞系相关产品:HUVEC-C[HUVEC]细胞、T47D细胞、EFM19细胞
细胞传代时消化的问题:可以这样说,对于需要消化传代的细胞,每一次的消化都是对这个细胞存活与否,状态好与不好最至关重要的考验。很多同学都遇到过这个问题,自己养的细胞开始的几代长的还挺好的,可是穿过几代之后就发现自己的细胞,状态越来越差劲了。对于这个问题,可以非常肯定地说,你的消化环节出问题了。你每一次的消化都让细胞受到较大损伤了。所以,越长越差。在消化的过程中,你加入胰酶后,所有细胞都在被胰酶消化着,但是我们忽视了一个问题就是,细胞的生长状态是不一样的,每一个细胞的贴壁情况也是不一样的,有的贴壁牢固,有的贴壁没有那么牢固的,所以,让所有的细胞消化同样的时间对细胞是不公平的,他们受到了差别待遇当然会有脾气啊。我后来对消化的方法进行了改良。争取做到因材施教呵呵。我称之为“四步消化法”。(以难消化细胞为例);具体操作:1)首先不加胰酶,倒掉旧培养基加入少量新培养基洗1-2遍,(这是前奏,即为步,目的是将漂浮着的死细胞之类尽量洗掉。2)然后再加入少量新培养基直接吹打一遍,这一遍是把贴壁不牢固的细胞吹打下来。再用培养基洗一遍,两次所得悬液混合传入新瓶。即为第二步(你可以将这些传入新瓶培养,以与后面胰酶消化过的细胞对比观察看谁长的更好一点就知道该细胞对胰酶的敏感度了。)3)吸干净瓶内剩余液体,加入0.3ml左右的胰酶润洗一遍,吸掉弃之,再加入1ml左右的胰酶消化。消化的同时置于显微镜下观察,待细胞与细胞之间间隙明显的时候立即吸掉胰酶与干净子弹头里备用,加入新培养基开始吹打,吹打2-3遍后吸取悬液于试管或新瓶暂存。用2ml左右新培养基洗一遍与前面的混合。(你也可以传入新瓶培养,以与后面及前面的做对比。)这是第三步。4)然后把前面刚吸出来的胰酶重新加进去瓶里继续消化剩余的贴壁牢固的细胞。当然你也可以用新的胰酶,如果你们那比较富裕的话,呵呵。继续镜下观察,待剩余细胞间隙明显,细胞独立开来的时候,吸掉胰酶,加入新培养基吹打。悬液传入新瓶培养(根据实际情况你自己把握)。这是第四步。其实还可以有第五步,对于特别难消化的细胞和对胰酶特别敏感的细胞的话,你可以继续加第五步甚至第六步。为了细胞更好的状态,更漂亮的样子,没办法,你必须分多批多次消化,这样才能限度地将胰酶对细胞的损伤降到最低,保证细胞的状态能够。当然了,如果细胞是属于那种很容易消化的细胞,像RAW264.7,仅仅第二步就搞定了。就没必要第三步第四步了。这个是需要你在实验中能够自己用心去体会的。建议你接受一个新细胞时把各步消化的细胞分别培养起来做比较,去摸索好细胞对胰酶的要求。便于你后续实验的开展。将细胞消化分成这几步,除了是为了避免胰酶对细胞的损伤之外,还有一个更重要的作用就是,可以程度地把细胞吹打成单个单个的状态,不成片不连体。
Hs 578.T细胞系相关产品:OUMS-23细胞、CT26WT细胞、UMUC-14细胞
MCF7-CTRL细胞系相关产品:SK HEP-1细胞、RS411细胞、Caco-2细胞
H-2172细胞系相关产品:B16-F10--RED细胞、H341细胞、GM04671细胞
H1385细胞系相关产品:MM.1S细胞、MD Anderson-Metastatic Breast-175-VIII细胞、HeLa229细胞
OE-21细胞系相关产品:Colon26细胞、Jurkat E6.1细胞、H250细胞
SP-2/0-AG14细胞系相关产品:LAD2细胞、MN60细胞、KP-N-NS细胞
Kato-III细胞系相关产品:Ramos 1细胞、Mel-RM细胞、ME180细胞
Stanford University-Diffuse Histiocytic Lymphoma-2细胞系相关产品:Hep-3B细胞、KM12 SM细胞、HEK293E细胞
NFHIOSE-29细胞系相关产品:NCM356细胞、NCI-H2029细胞、NCIH1341细胞
EA.Hy926细胞系相关产品:NCI-H1770细胞、SCCVII细胞、P36细胞
CHO细胞系相关产品:MT-2细胞、EVSAT细胞、HECCL-1细胞
TJ905细胞系相关产品:CCC-HEL-1细胞、SNU-407细胞、Pa017C细胞
H22细胞系相关产品:KYSE 70细胞、Y3Ag1.2.3细胞、Glioma 261细胞
SUM-159-PT细胞系相关产品:Sp2/0-Ag-14细胞、SW1271细胞、OVCAR4细胞
HEK293-A细胞系相关产品:UPCI:SCC154细胞、H-2170细胞、C-4-I细胞
HEM-L细胞系相关产品:Z310细胞、SU.86.86细胞、ECC-12细胞
HEM-L细胞系相关产品:Z310细胞、SU.86.86细胞、ECC-12细胞
L23/P细胞系相关产品:ETCC007细胞、Mink细胞、Primary Liver Carcinoma/Poliomyelitis Research Foundation/5细胞
NMCG-1细胞系相关产品:GM00215细胞、TE-32细胞、CAL 62细胞
HEK-AD 293细胞系相关产品:H184A1细胞、M059K细胞、CNLMG-B5537SKIN细胞
H-1436细胞系相关产品:PNT1/A细胞、SUM-52-PE细胞、Hca-F细胞
TALL-104细胞系相关产品:Mino细胞、LTEP-sm 1细胞、HEK-293-EBNA细胞
Monomac-1细胞系相关产品:H2228细胞、Panc 10.05细胞、SUM190细胞
HT 1080.T细胞系相关产品:SK-Hep1细胞、HANK细胞、HFL细胞
OCI-Ly10细胞系相关产品:RIN-m 14B细胞、Hs 578T细胞、P388.D1细胞
NCIH1563细胞系相关产品:GM03570E细胞、COLO-738细胞、TOV112D细胞
DH82:狗肾恶性组织细胞增生症传代细胞
32Dcl3细胞系相关产品:NIH3T3细胞、A 2780 CP细胞、WPMY-1细胞
IM-9细胞系相关产品:SW948细胞、CPA47细胞、NCL-H548细胞
Sun Yat-sen university Ophtalmic center-Retinoblastoma 50细胞系相关产品:Hs822T细胞、SNU-449细胞、U266 B1细胞
HCC0070细胞系相关产品:NCIH1395细胞、TO 175.T细胞、DHL-16细胞
OCUM-1细胞系相关产品:MDA-MB-157细胞、NCI-H1666细胞、HEK (AD293)细胞
H-250细胞系相关产品:H520细胞、Functional Liver Cell-7细胞、OUMS-27细胞
MCF7-CTRL细胞系相关产品:SK HEP-1细胞、RS411细胞、Caco-2细胞
NCI-H740细胞系相关产品:LA-N-6细胞、AM细胞、Panc_08_13细胞
NCIH1793细胞系相关产品:D-324 Med细胞、GM04154B细胞、NCIH82细胞
Pa14C细胞系相关产品:DLD 1细胞、HL7702细胞、RPMI no. 8226细胞
HCC-15细胞系相关产品:MRMT-1细胞、Swiss 3T3细胞、OCI-Ly1细胞
V79-4细胞系相关产品:LAN5细胞、Tissue Culture-1细胞、HPAFII细胞
Tu177细胞系相关产品:CMT64细胞、Mhh-Call 2细胞、HPDE细胞
NCI-H1155细胞系相关产品:H-146细胞、MDCK-II细胞、RSMC细胞
Panc02-H0细胞系相关产品:PANC-08-13细胞、Y-1细胞、VA-ES-BJ细胞
GH 3细胞系相关产品:HLCL9B10细胞、SP-2/0-AG14细胞、SU-DHL2细胞
3T3-L1 ad细胞系相关产品:D-283 Med细胞、Hs 819.T细胞、H2009细胞
Tb 1 Lu细胞系相关产品:MCF.10A细胞、BEL 7402细胞、NHRF细胞
PK-15细胞系相关产品:PIGI细胞、SK Mel28细胞、GB1细胞
NUGC-3细胞系相关产品:H-735细胞、MOLT 16细胞、HTR-8/SV neo细胞
Walker 256细胞系相关产品:Centre Antoine Lacassagne-85-1细胞、GBC-SD细胞、BHP 10-3细胞
Walker 256细胞系相关产品:Centre Antoine Lacassagne-85-1细胞、GBC-SD细胞、BHP 10-3细胞
Earle's L cells细胞系相关产品:MGECs细胞、NCI-SNU-620细胞、JHH7细胞
Panc 4.03细胞系相关产品:WEHI-3细胞、RTE细胞、NCI-H2452细胞
MC-3T3细胞系相关产品:CESS细胞、A-172MG细胞、RFL 6细胞
HL-1细胞系相关产品:HK-2 [Human kidney]细胞、H1792细胞、OCI-Ly7细胞
IR 983F细胞系相关产品:MDA-MB-231 #4175细胞、Detroit-562细胞、HCT GEO细胞
NRK-52E细胞系相关产品:Wistar Institute, Susan Hayflick细胞、Mia PACA 2细胞、PC9细胞
DH82细胞系相关产品:IM-95细胞、J774 A1细胞、NCIH1793细胞
LS123细胞系相关产品:HS-68细胞、A-172 MG细胞、HSMC细胞
F-36P细胞系相关产品:Hepa 1-6细胞、NB9细胞、PLMVEC细胞
MAC1细胞系相关产品:MuM-2B细胞、HCC-1428细胞、SACC-LM细胞
CCK81细胞系相关产品:HLE-B3细胞、IOSE29细胞、NCI H23细胞
MyLa2059细胞系相关产品:SKMEL-24细胞、PC 61 5.3细胞、NCI-H1781细胞
DH82:狗肾恶性组织细胞增生症传代细胞
Hs706T细胞系相关产品:SR786细胞、JC细胞、Panc02细胞
SN12CPM6细胞系相关产品:SV40-HCEC细胞、COLO 320F细胞、CAL 148细胞
SW-954细胞系相关产品:HB 611细胞、Colon-26细胞、P3X63Ag8653细胞
H2172细胞系相关产品:alphaTC clone 6细胞、WM266-4细胞、HCT-8/V细胞
ZR751细胞系相关产品:EFM192B细胞、Farage Original Line细胞、Z-138细胞
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